Name: Chirurgisch varkensmodel van chronische myocardischemie behandeld door met exosomen beladen collageenpleister en off-pump coronaire bypasstransplantaat (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-09-15T13:40:00.000+00:00
Duration: 5 min 25 s
Description: Leer een chirurgisch varkensmodel van chronische myocardischemie met exosoombeladen collageenpleister tijdens off-pump CABG. Deze methode toont verbetering van hartfunctie en mitochon-driale restauratie.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Dit werk werd ondersteund door de VA Merit Review #I01 BX000760 (RFK) uit de Verenigde Staten (VS) Department of Veterans Affairs BLR&D en U.S. Department of Veterans Affairs grant #I01 BX004146 (TAB). We zijn ook dankbaar voor de steun van het Lillehei Heart Institute van de Universiteit van Minnesota. De inhoud van dit werk vertegenwoordigt niet de standpunten van het Amerikaanse ministerie van Veteranenzaken van de regering van de Verenigde Staten.

De Institutional Animal Care and Use Committees (IACUC) van het Minneapolis VA Medical Center en de Universiteit van Minnesota hebben alle dierstudies goedgekeurd. De huidige richtlijnen van de National Institutes of Health (NIH) voor het gebruik en de verzorging van proefdieren werden gevolgd.
1. Isolatie van mesenchymale stamcellen en bereiding en karakterisering van exosomen
<ol><li>Isolatie van beenmerg-afgeleide mesenchymale stamcellen (MSC's)<ol><li>Verkrijg 30-50 ml steriel beenmerg uit het borstbeen of scheenbeen van een 20 weken oud vrouwelijk Yorkshire-Landras-varken. Om dit te doen, brengt u een 25 mm 15G interossale naald in het borstbeen of scheenbeen en zuigt u het monster in een spuit van 60 ml met 10 ml heparine. OPMERKING: Voor meer details over de afname van beenmerg verwijzen wij u naar Pittenger et al. en Hocum-Stone et al.12,16.</li>
		<li>In het kort, haal het beenmergmonster gedurende 30 minuten door een Vacutainer sondeerbuis met heparine bij 1800 x g.</li>
		<li>Verwijder de buffy coat met de mononucleaire cellen en was met Hank's uitgebalanceerde zoutoplossing. Mononucleaire pelletcellen door centrifugeren en resuspenderen in groeimedium (10% foetaal runderserum [FBS]).</li>
		<li>Breng de mononucleaire cellen over naar celkweekkolven voor aanhangende groei. Isoleer de MSC's van de mononucleaire fractie door hun aanhangende aard.</li>
		<li>Was alle niet-MSC's binnen 24 uur en laat een monolaag MSC's achter in de weefselkweekkolf. Bevestig het MSC-fenotype door middel van flowcytometrie, waarbij negativiteit wordt gegarandeerd voor CD45, een hematopoëtische marker, en positiviteit voor CD90 en CD105, markers van MSC's.</li>
	</ol></li>
	<li>Bereiding en karakterisering van exosomen uit mesenchymale stamcellen van varkens<ol><li>Zaad 1 x 104 H9C2 cardiomyocyten bij ratten en kweek in 1x DMEM+ 10% FBS en 1x Pen/streptokokken. Zaad 2 x 104 varkens MSC's in geavanceerde DMEM + 5% FBS en 1x Pen/streptokokken.</li>
		<li>Zodra beide cellijnen voor ten minste 80% samenvloeien, verander je de media in exosoomverarmde H9C2- en MSC-media.</li>
		<li>Stel H9C2-cardiomyocyten bloot aan milde hypoxie (1% O2 gedurende 24 uur). Verwijder de kolven na 24 uur uit de hypoxie en pipetteer de H9C2-media.</li>
		<li>Verwijder het MSC-medium uit de MSC-kolf en gooi het weg. Voeg gezuiverde H9C2-media toe aan de MSC-kolf. Incubeer de kolf gedurende 6 uur onder normoxische omstandigheden (5% CO2 , 20 % O2 en 37 °C).</li>
		<li>Extraheer de exosomen uit de co-gekweekte geconditioneerde media met behulp van het totale exosoomisolatiereagens volgens de instructies van de fabrikant.</li>
		<li>Verifieer de identificatie van exosomen door western blot-detectie van gemeenschappelijke exosomale eiwitten met antilichamen tegen CD-63 (1:1000)17.</li>
		<li>Voer nanodeeltjesvolganalyse (NTA) uit om de exosomen te kwantificeren en de grootte van nanodeeltjes en de verdeling ervan te beoordelen. Om dit te doen, lost u het totale eiwit (50 μg) van exosomen op in 500 μL PBS om de concentratie en grootteverdeling van exosomen te bepalen met behulp van een nanodeeltjesvolganalysator.</li>
		<li>Analyseer de gegevens met behulp van software voor het volgen van nanodeeltjes.</li>
	</ol></li>
</ol>2. Coronaire bypassoperatie van de pomp
<ol><li>Voorbereiding van dieren<ol><li>Weeg het dier (vrouwelijke Yorkshire-Landrace-varkens van 16 weken oud) 3 dagen voordat de operatie wordt gepland. Vast het dier gedurende 12 uur voor de operatie terwijl het tijdens het vasten toegang heeft tot water.</li>
		<li>Geef buprenorfine 0,18 mg/kg via intramusculaire route 2-4 uur voor de operatie.</li>
	</ol></li>
	<li>Inductie van het dier<ol><li>Verdoof het dier door intramusculaire injectie van 6,6 mg/kg tiletamine-zolazepam/xylazine.</li>
		<li>Wacht 15 minuten om voldoende sedatie te garanderen door de kaaktonus te beoordelen, gevolgd door plaatsing van de 22G-katheter in de centrale oorader. OPMERKING: Een andere perifere ader kan worden overwogen (d.w.z. cefalische ader) als de oorader onvoldoende is.</li>
		<li>Breng plaatselijk oogzalf toe aan elk oog. Dien 1-2 mg/kg propofol toe via intraveneuze route om algemene anesthesie te induceren. De kaaktonus weerspiegelt op de meest betrouwbare wijze de diepte van de anesthesie en moet gedurende de hele procedure worden beoordeeld.</li>
		<li>Intubeer het dier met een endotracheale tube van de juiste grootte.</li>
	</ol></li>
	<li>Chirurgie<ol><li>Scheer het borstbeen en de lies van het dier ter voorbereiding op een chirurgische ingreep.</li>
		<li>Stel mechanische beademing in op 10-15 ademhalingen per minuut, zuurstof 1-4 l/min en isofluraan 1,0-3,0% indien nodig om diepe anesthesie voor operaties te behouden. Controleer op afwezige oog- of kaakreflex om diepe anesthesie te bevestigen.</li>
		<li>Apparatuur voor positiebewaking (elektrocardiogram, CO2 aan het einde van het getij, hartslag, zuurstofverzadiging, bloeddruk en temperatuur) op het dier.</li>
		<li>Sluit de infuuskatheter aan op een zak met normale zoutoplossing of lactaatoplossing om continu onderhoudsvloeistoffen toe te dienen.</li>
		<li>Bereid de huid voor met behulp van een aseptische techniek met povidonjodiumscrub en -oplossing 3x voor voldoende steriliteit en om het risico op postoperatieve wondinfectie te minimaliseren.</li>
		<li>Geef lidocaïne via intravasculaire route (oplaaddosis van 2 mg/kg of continue infusie in een dosis van 50 mcg/kg/min) om aritmieën te voorkomen.</li>
		<li>Plaats het dier dorsaal en drapeer het met steriele handdoeken.</li>
		<li>Voer een linker of rechter femorale slagader uit voor plaatsing van de arteriële lijn met behulp van de Seldinger-techniek, gevolgd door het aansluiten van de katheter op de transducer voor continue bloeddrukbewaking op het moment van de operatie.</li>
		<li>Gebruik monopolaire elektrocauterisatie om een incisie van 20 cm te maken die zich uitstrekt van de sternale inkeping proximaal tot aan de processus xyphoid distaal, en om lagen spieren, onderhuids vet en bindweefsel tot aan het borstbeen in te snijden.</li>
		<li>Voer een mediane sternotomie uit met behulp van een oscillerende zaag. OPMERKING: Standaardzaag wordt vermeden voor herhaalde sternotomie, omdat dit een hoger risico op myocardletsel met zich meebrengt door eerdere pericardiale verklevingen van de linker thoracotomieprocedure die is uitgevoerd om de LAD-constrictor te plaatsen.</li>
		<li>Verdeel de achterste sternale plaat met een schaar. Gebruik een gespecialiseerde thoraxretractor voor een adequate visualisatie van het mediastinum.</li>
		<li>Ontleed verklevingen met behulp van monopolaire elektrocauterisatie of de Metzenbaum-schaar. Ontleed voorzichtig de peristernale spier en het vet om de linker interne borstslagader (LIMA) bloot te leggen.</li>
		<li>Zodra LIMA zijdelings op de borstrand is blootgesteld, scheidt u het voorzichtig van de borstwand met behulp van stompe dissectie met elektrocauterisatietip. Gebruik de LIMA als een geskeletteerd transplantaat.</li>
		<li>Begin met dissectie op het niveau van de 3e intercostale ruimte. Breng de linker sternale rand voorzichtig omhoog voor optimale visualisatie.</li>
		<li>Gebruik zachte tractie op de adventitia om de arteriële en veneuze takken van LIMA bloot te leggen. Knip de LIMA-zijde van de takken af met hemoclips en schroei de borstwandzijde van de takken dicht. NOTITIE: Zorg ervoor dat de clip op de LIMA niet dichtschroeit, omdat dit leidingvernauwing kan veroorzaken.</li>
		<li>Zodra een eerste segment van LIMA is gemobiliseerd, gaat u door met de dissectie proximaal naar het niveau van de subclavia-ader en distaal tot de LIMA-bifurcatie.</li>
		<li>Zodra de dissectie is voltooid, dient u heparine toe via intraveneuze route in een dosis van 100-300 E/kg. Wacht 3 minuten nadat de heparine is toegediend.</li>
		<li>Knip na 3 minuten het distale uiteinde van de LIMA, net voor het niveau van de LIMA-bifurcatie, af en verdeel de leiding. Naai het distale uiteinde met een gratis 2-0 zijden hechtband.</li>
		<li>Bereid het proximale uiteinde voor op transplantatie. Inspecteer de kwaliteit van de doorstroming visueel door het transplantaat een paar seconden te laten bloeden.</li>
		<li>Klem het distale uiteinde van de LIMA-leiding voorzichtig vast met een atraumatische bulldogklem om bloedingen te voorkomen. Open het hartzakje met een omgekeerde T en maak een incisie van ongeveer 5-6 cm. Plaats hechtingen van 3-0 grootte op het hartzakje voor tractie aan beide zijden van de spleet.</li>
		<li>Stabiliseer de LAD met siliconen retractietapes en weefselstabilisator, die aan het sternale oprolmechanisme is bevestigd. Maak een arteriotomie in de LAD-slagader distaal van de stenose (veroorzaakt door constrictorband) met een 11-bladig en verleng met een irisschaar.</li>
		<li>Plaats een coronaire shunt van de juiste grootte in de LAD. Voer de LIMA naar LAD-anastomose uit met 7-0 lopende niet-resorbeerbare hechting met behulp van een off-pump bypass-techniek. Laat de bulldog-occluder los op de LIMA en bevestig de hemostase.</li>
	</ol></li>
	<li>Bereiding van van mesenchymale stamcellen (MSC) afgeleide exosoompleisters<ol><li>Na succesvolle isolatie van exosomen uit MSC's, suspendeert u ongeveer 3 x 108 exosomen in 3 ml normale zoutoplossing en voegt u deze toe aan de collageenspons.</li>
		<li>Breng 3 ml exosoomsuspensie gedurende 10 minuten op kamertemperatuur bij ongeveer 22 °C. Plaats 2 absorbeerbare collagesponzen (elk 1,27 cm x 2,54 cm) in een middelgrote petrischaal.</li>
		<li>Gebruik een spuit van 5 ml met een naald van 18 G om de exosoomsuspensie voorzichtig te mengen. Pipetteer langzaam 1,5 ml suspensie op elke collageenspons en wacht 5 minuten voor volledige absorptie.</li>
	</ol></li>
	<li>Plaatsing van exosoompleister<ol><li>Plaats de met exosomen beladen spons ondersteboven op het overwinteringsgebied van het hart, het epicardium van het voorste septumgebied in de verdeling van de LAD.</li>
		<li>Plaats voorzichtig twee sponzen om het overwinterende gebied van het hart te bedekken. Gebruik een polyglactinegaas van 3,5 cm x 1,0 cm om elke collageenspons te bedekken.</li>
		<li>Naai het gaas op het epicardium met fijne 7-0 onderbroken hechtingen.</li>
	</ol></li>
	<li>Plaatsing van de thoraxbuis<ol><li>Plaats een thoraxbuis via een afzonderlijke steekincisie, in de buurt van het inferieure aspect van de sternotomie-incisie. Plaats de thoraxbuis voorzichtig over het voorste aspect van het hart.</li>
		<li>Zodra de buis op zijn plaats zit, plaatst u een hechtdraad met een koord van de portemonnee met 3-0 hechting met behulp van een horizontale matrassteek om de wond te kunnen sluiten bij het verwijderen van de buis.</li>
		<li>De thoraxbuis wordt gehandhaafd tot volledige sluiting van de borstkas.</li>
	</ol></li>
	<li>Borst sluiting<ol><li>Benader het borstbeen met niet-resorbeerbare hechtingen met behulp van een achtvormig patroon. Dien 1 mg/kg bupivacaïne toe via intramusculaire route over de gehele lengte van de incisie. NOTITIE: Hechting wordt gebruikt in plaats van draden om interferentie met MRI-beeldvorming te voorkomen.</li>
		<li>Sluit de lagen van spieren en huid op de standaard manier met respectievelijk 2-0 en 3-0 resorbeerbare hechtdraad.</li>
		<li>Voer een ademinhouding en afzuiging uit om alle lucht uit de borstholte te evacueren. Houd de luchtwegdruk op het beademingsapparaat voorzichtig in de gaten en houd de druk tussen 15-22 mmHg en laat los wanneer deze is voltooid.</li>
		<li>Zodra alle lucht is geëvacueerd, verwijdert u de thoraxbuis terwijl u de wond sluit met behulp van de hechting van het taskoord. Breng plaatselijk zelfklevende lijm aan om de sternale incisie te bedekken.</li>
	</ol></li>
	<li>Postoperatieve zorg na de operatie<ol><li>Haal het dier geleidelijk van de beademing af terwijl de incisie in de huid wordt gesloten. Zorg ervoor dat het dier spontaan kan ademen en reflexen kan beschermen voordat u het dier loskoppelt van anesthesieapparatuur.</li>
		<li>Verwijder de endotracheale tube nadat u hebt bevestigd dat het dier zijn luchtwegen kan beschermen. Bedek de huidincisie met steriel en niet-klevend verband ingebed met antibiotische zalf om postoperatieve wondinfectie te minimaliseren.</li>
		<li>Blijf elke 15 minuten vitale functies controleren, waaronder hartslag, ademhalingsfrequentie en lichaamstemperatuur, totdat het dier in staat is om zijn positie zonder hulp vast te houden.</li>
		<li>Zorg ervoor dat het dier niet onbeheerd wordt achtergelaten totdat het in staat is om zijn kop op te tillen en omhoog te houden en zonder hulp kan staan. Dien meloxicam toe in een dosis van 0,2 mg/kg via subcutane route voordat het dier naar de bergingseenheid wordt vervoerd.</li>
		<li>Transporteer het dier naar de bergingseenheid als het dier stabiel is. Houd het verband op de operatieplaats op de incisie tot postoperatieve dag 3. Vervang het verband als het vuil wordt.</li>
		<li>Blijf de pijn, de incisie in de huid en het algehele welzijn van het dier de eerste 5 dagen na de operatie controleren. Dien indien nodig eenmaal daags een halve dosis meloxicam (0,1 mg/kg) toe bij doorbraakpijn.</li>
		<li>Verblijf het dier gedurende de eerste 5 dagen na de operatie alleen, terwijl de incisie(s) genezen om het risico op postoperatieve wondinfectie door een ander dier te verminderen. Breng het dier na 5 dagen terug naar de groepshuisvesting.</li>
		<li>Meld eventuele complicaties of veranderingen in de toestand van het dier (koorts, ascites, gewichtsverlies, gebrek aan eetlust enz.) aan de dierenarts of het bevoegde personeel.</li>
	</ol></li>
</ol>3. Coronaire angiografie met behulp van femorale toegang
<ol><li>Zet het dier vast op de operatietafel in de rugligging. Start mechanische ventilatie met 10-15 ademhalingen per minuut. Stel zuurstof in op 2-4 l/min, isofluraan op 1% en 4%, indien nodig om een diep anesthesieniveau te behouden.</li>
	<li>Plaats ECG-afleidingen op de ledemaat van het dier om het hartritme te controleren. Evalueer het dier op de diepte van de anesthesie. Beschouw het dier als diep verdoofd wanneer de oog- of kaakreflex afwezig is.</li>
	<li>Reinig de borst en nek met povidonjodiumscrub en drapeer het dier vervolgens met handdoeken.</li>
	<li>Toegang tot de dijbeenslagader via een chirurgische uitsparing en leg de dijbeenslagader en ader bloot. Maak een incisie in de lengterichting van 1-2 mm met een mes nr. 11 in de dijbeenslagader en kannuleren de slagader met behulp van een 11 Fr inbrenghuls in het vaatlumen.</li>
	<li>Nadat u toegang hebt verkregen, gaat u de katheter vooruit om coronaire angiografie uit te voeren om de anatomische doorgankelijkheid van het LIMA-LAD-transplantaat te beoordelen.</li>
</ol>

Aanvullende exosoomtherapie: verbetering van myocardiaal herstel na CABG-chirurgie

<ol><li>Dai, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global%2C+regional%2C+and+burden+of+ischaemic+heart+disease+and+its+attributable+risk+factors%2C+1990-2017%3A+results+from+the+Global+Burden+of+Disease+Study+2017%5BTitle%5D)+AND+%22European+heart+journal.+Quality+of+care+%26+clinical+outcomes%22%5BJournal%5D)">Global, regional, and burden of ischaemic heart disease and its attributable risk factors, 1990-2017: results from the Global Burden of Disease Study 2017.</a> European heart journal. Quality of care & clinical outcomes. 8 (1), 50-60 (2022).</li>
<li>Tsao, C. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+Disease+and+Stroke+Statistics-2022+Update%3A+A+Report+From+the+American+Heart+Association%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Heart Disease and Stroke Statistics-2022 Update: A Report From the American Heart Association.</a> Circulation. 145 (8), e153-e639 (2022).</li>
<li>Rahimtoola, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+hibernating+myocardium%5BTitle%5D)+AND+%22American+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">The hibernating myocardium.</a> American Heart Journal. 117 (1), 211-221 (1989).</li>
<li>Canty, J. M. Jr, Fallavollita, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hibernating+myocardium%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Nuclear+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Hibernating myocardium.</a> Journal of Nuclear Cardiology. 12 (1), 104-119 (2005).</li>
<li>Page, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Revascularization+of+chronic+hibernating+myocardium+stimulates+myocyte+proliferation+and+partially+reverses+chronic+adaptations+to+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Revascularization of chronic hibernating myocardium stimulates myocyte proliferation and partially reverses chronic adaptations to ischemia.</a> Journal of the American College of Cardiology. 65 (7), 684-697 (2015).</li>
<li>Aggarwal, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Persistent+diastolic+dysfunction+in+chronically+ischemic+hearts+following+coronary+artery+bypass+graft%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Persistent diastolic dysfunction in chronically ischemic hearts following coronary artery bypass graft.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 165 (6), e269-e279 (2023).</li>
<li>Olsen, F. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prognostic+Value+and+Interplay+Between+Myocardial+Tissue+Velocities+in+Patients+Undergoing+Coronary+Artery+Bypass+Grafting%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Prognostic Value and Interplay Between Myocardial Tissue Velocities in Patients Undergoing Coronary Artery Bypass Grafting.</a> The American Journal of Cardiology. 144, 37-45 (2021).</li>
<li>Virani, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+Disease+and+Stroke+Statistics-2021+Update%3A+A+Report+From+the+American+Heart+Association%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Heart Disease and Stroke Statistics-2021 Update: A Report From the American Heart Association.</a> Circulation. 143 (8), e254-e743 (2021).</li>
<li>Hocum Stone, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+Swine+Model+of+Chronic+Cardiac+Ischemia+Treated+by+Off-Pump+Coronary+Artery+Bypass+Graft+Surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3AJoVE%22%5BJournal%5D)">Surgical Swine Model of Chronic Cardiac Ischemia Treated by Off-Pump Coronary Artery Bypass Graft Surgery.</a> Journal of Visualized Experiments:JoVE. (133), e57229(2018).</li>
<li>White, F. C., Carroll, S. M., Magnet, A., Bloor, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary+collateral+development+in+swine+after+coronary+artery+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Coronary collateral development in swine after coronary artery occlusion.</a> Circulation Research. 71 (6), 1490-1500 (1992).</li>
<li>Righetti, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interventricular+septal+motion+and+left+ventricular+function+after+coronary+bypass+surgery%3A+evaluation+with+echocardiography+and+radionuclide+angiography%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Interventricular septal motion and left ventricular function after coronary bypass surgery: evaluation with echocardiography and radionuclide angiography.</a> The American Journal of Cardiology. 39 (3), 372-377 (1977).</li>
<li>Hocum Stone, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recovery+of+hibernating+myocardium+using+stem+cell+patch+with+coronary+bypass+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Recovery of hibernating myocardium using stem cell patch with coronary bypass surgery.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 62 (1), e3-e16 (2021).</li>
<li>Puigserver, P., Spiegelman, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peroxisome+proliferator-activated+receptor-gamma+coactivator+1+alpha+%28PGC-1+alpha%29%3A+transcriptional+coactivator+and+metabolic+regulator%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrine+Reviews%22%5BJournal%5D)">Peroxisome proliferator-activated receptor-gamma coactivator 1 alpha (PGC-1 alpha): transcriptional coactivator and metabolic regulator.</a> Endocrine Reviews. 24 (1), 78-90 (2003).</li>
<li>Henning, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiovascular+Exosomes+and+MicroRNAs+in+Cardiovascular+Physiology+and+Pathophysiology%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiovascular+Translational+Research%22%5BJournal%5D)">Cardiovascular Exosomes and MicroRNAs in Cardiovascular Physiology and Pathophysiology.</a> Journal of Cardiovascular Translational Research. 14 (2), 195-212 (2021).</li>
<li>Chen, Y., Liu, Y., Dorn, G. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((2nd.+Mitochondrial+fusion+is+essential+for+organelle+function+and+cardiac+homeostasis%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">2nd. Mitochondrial fusion is essential for organelle function and cardiac homeostasis.</a> Circulation Research. 109 (12), 1327-1331 (2011).</li>
<li>Pittenger, M. F., Martin, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cells+and+their+potential+as+cardiac+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cells and their potential as cardiac therapeutics.</a> Circulation Research. 95 (1), 9-20 (2004).</li>
<li>Campos-Silva, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+sensitivity+detection+of+extracellular+vesicles+immune-captured+from+urine+by+conventional+flow+cytometry%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">High sensitivity detection of extracellular vesicles immune-captured from urine by conventional flow cytometry.</a> Scientific Reports. 9 (1), 2042(2019).</li>
<li>Hocum Stone, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetic+resonance+imaging+assessment+of+cardiac+function+in+a+swine+model+of+hibernating+myocardium+3+months+following+bypass+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Magnetic resonance imaging assessment of cardiac function in a swine model of hibernating myocardium 3 months following bypass surgery.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 153 (3), 582-590 (2017).</li>
<li>Stone, L. L. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+Respiratory+Capacity+is+Restored+in+Hibernating+Cardiomyocytes+Following+Co-Culture+with+Mesenchymal+Stem+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Medicine%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial Respiratory Capacity is Restored in Hibernating Cardiomyocytes Following Co-Culture with Mesenchymal Stem Cells.</a> Cell Medicine. 11, 2155179019834938(2019).</li>
<li>Lamy, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skeletonized+vs+Pedicled+Internal+Mammary+Artery+Graft+Harvesting+in+Coronary+Artery+Bypass+Surgery%3A+A+Post+Hoc+Analysis+From+the+COMPASS+Trial%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Skeletonized vs Pedicled Internal Mammary Artery Graft Harvesting in Coronary Artery Bypass Surgery: A Post Hoc Analysis From the COMPASS Trial.</a> JAMA Cardiology. 6 (9), 1042-1049 (2021).</li>
<li>Shim, J. K., Choi, Y. S., Yoo, K. J., Kwak, Y. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Carbon+dioxide+embolism+induced+right+coronary+artery+ischaemia+during+off-pump+obtuse+marginalis+artery+grafting%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Cardio-Thoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Carbon dioxide embolism induced right coronary artery ischaemia during off-pump obtuse marginalis artery grafting.</a> European Journal of Cardio-Thoracic Surgery. 36 (3), 598-599 (2009).</li>
<li>Aklog, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Future+technology+for+off-pump+coronary+artery+bypass+%28OPCAB%29%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Future technology for off-pump coronary artery bypass (OPCAB).</a> Seminars in Thoracic and Cardiovascular Surgery. 15 (1), 92-102 (2003).</li>
<li>Hou, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiolabeled+cell+distribution+after+intramyocardial%2C+intracoronary%2C+and+interstitial+retrograde+coronary+venous+delivery%3A+implications+for+current+clinical+trials%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Radiolabeled cell distribution after intramyocardial, intracoronary, and interstitial retrograde coronary venous delivery: implications for current clinical trials.</a> Circulation. 112 (9 Suppl), I150-I156 (2005).</li>
<li>Gallet, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exosomes+secreted+by+cardiosphere-derived+cells+reduce+scarring%2C+attenuate+adverse+remodelling%2C+and+improve+function+in+acute+and+chronic+porcine+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Exosomes secreted by cardiosphere-derived cells reduce scarring, attenuate adverse remodelling, and improve function in acute and chronic porcine myocardial infarction.</a> European Heart Journal. 38 (3), 201-211 (2017).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Deze studie presenteert het eerste varkensmodel van chronisch ischemisch myocardium, waarin werd aangetoond dat behandeling met een MSC-afgeleide exosoom-beladen collageenpleister tijdens chirurgische revascularisatie de diastolische en systolische functie herstelt bij inotrope stimulatie, mogelijk door zich te richten op mitochondriaal herstel. Eerder werd aangetoond dat in een groot diermodel van HIB de diastolische en systolische functie, zoals gemeten door cardiale MRI, aangetast blijft en slechts licht verbetert bij...

Wereldwijd treft ernstige CAD meer dan honderd miljoen patiënten, en hoewel het sterftecijfer is gedaald, blijft het een van de belangrijkste doodsoorzaken 1,2. CAD heeft een breed klinisch spectrum van myocardinfarct (MI) tot ischemie met behoud van levensvatbaarheid. Het meeste preklinische onderzoek richt zich op MI, gekenmerkt door de aanwezigheid van infarctweefsel, aangezien het mogelijk is om te bestuderen in kleine en grote diermodellen. Dat model richt zich echter niet op patiënten met behoud van levensvatbaarheid en vatbaar voor revascularisatie. De meeste patiënten die CABG ondergaan, hebben een verminderde bloedtoevoer en een beperkte functie, terwijl de variabiliteit in contractiele reserve en levensvatbaarheid behoudenblijft3. Zonder behandeling kunnen deze patiënten evolueren naar gevorderd hartfalen en plotselinge dood, vooral tijdens verhoogdewerkdruk4. Bij deze patiënten is coronaire bypasstransplantaat (CABG) een effectieve therapie, maar leidt mogelijk niet tot volledigfunctioneel herstel. Belangrijk is dat diastolische disfunctie, die een marker is voor slechtere klinische resultaten, niet herstelt na revascularisatie, wat suggereert dat er behoefte is aan nieuwe adjuvante therapieën tijdens CABG 6,7. Momenteel zijn er geen klinisch beschikbare adjuvante interventies die met CABG worden gebruikt om cardiomyocyten weer volledig functioneel te maken. Dit is een grote therapeutische kloof, aangezien veel patiënten ondanks de juiste revascularisatie evolueren naar gevorderd hartfalen8.
Er werd een innovatief varkensmodel van chronische myocardischemie gecreëerd dat vatbaar is voor CABG, om klinische CAD-ervaring na te bootsen9. Varkens bieden een goed model van hartaandoeningen ten opzichte van andere grote dieren, omdat ze geen epicardiale overbruggingscollateralen hebben, dus stenose van de LAD alleen resulteert in regionale ischemie10. In dit onderzoek werden vrouwelijke Yorkshire-Landrace-varkens van 16 weken oud gebruikt. In dit model werd de LAD gerevasculariseerd met off-pump CABG met behulp van het transplantaat van de linker interne borstslagader (LIMA) (aanvullende tabel 1). Percutane coronaire interventie (PCI) is niet mogelijk om de stenose te openen, aangezien de constrictor een stijf apparaat is. Cardiale magnetische resonantiebeeldvorming (MRI) wordt gebruikt om de globale en regionale functie, coronaire anatomie en levensvatbaarheid van weefsel te beoordelen. Cardiale MRI-analyse toonde aan dat de diastolische functie, gekenmerkt door een piekvulsnelheid (PFR), ondanks CABG6 aangetast blijft. Het mechanisme van diastolische disfunctie houdt waarschijnlijk verband met verminderde mitochondriale bio-energetica en collageenvorming in HIB die aanhouden na CABG11.
Mesenchymale stamcellen (MSC) bieden therapeutische signalering via exosomen om het myocardherstel te verbeteren wanneer ze worden toegepast tijdens CABG. In dit varkensmodel en parallelle in vitro studies werd aangetoond dat plaatsing van een epicardiale MSC-vicrylpleister tijdens CABG de contractiele functie herstelt met een toename van belangrijke mitochondriale eiwitten, namelijk PGC-1α12, een belangrijke regulator van het mitochondriale energiemetabolisme13. Het in vitro model stelde ons in staat om het signaleringsmechanisme van MSC's op verminderde mitochondriale functie te onderzoeken. Exosomen zijn uitgescheiden stabiele microvesikels (50-150 nm) die eiwitten of nucleïnezuren bevatten, waaronder microRNA (miRNA)14. Recente in vitro gegevens suggereren dat MSC-afgeleide exosomen een belangrijk signaalmechanisme zijn dat nodig is voor het herstel van de mitochondriale ademhaling.
Van stamcellen afgeleide exosomen zijn veelbelovende aanvullende therapieën omdat ze gemakkelijk toegankelijk zijn, commercieel kunnen worden geproduceerd en geen ethische conflicten hebben. Met het oog op klinische translatie werd een collageenpleister gemaakt die is ingebed met MSC-afgeleide exosomen die operatief kan worden gehecht aan het overwinteringsgebied van het myocardium. Er werd aangetoond dat er sprake is van een aanhoudende afgifte van exosomen met behulp van deze pleister en dat het een celvrije regeneratieve therapie biedt met een paracrien signaleringsmechanisme dat gericht is op mitochondriaal herstel en de mitochondriale biogenese verbetert15. Deze procedure biedt het preklinische model om de impact te bestuderen van MSC-afgeleide therapieën om de hartfunctie te verbeteren door middel van het verbeteren van de mitochondriale functie en het verminderen van ontstekingen op het moment van revascularisatie en het omkeren van de aanpassingen van de myocyten aan chronische ischemie.
In deze studie wordt een chirurgische methode getoond van off-pump CABG met behulp van LIMA naar LAD-anastomose om het gebied van proximale LAD-stenose te omzeilen dat de standaardbehandeling voor patiënten met CAD nabootst. Als aanvullende therapie met CABG werd de chirurgische toepassing van MSC-afgeleide exosoom ingebedde collageenpleister op het ischemische gebied van het myocardium gedemonstreerd. Dit chirurgische model kan worden gebruikt om de fysiologische reacties op het paracriene effect te bestuderen die worden waargenomen bij het gebruik van een exosoompleister, evenals de moleculaire mechanismen van herstel.

```html
<table><tbody><tr><td>5 Ethibond</td><td>Ethicon</td><td>MG46G</td><td>Suture</td></tr><tr><td># 40 clipper blade</td><td>Oster</td><td>078919-016-701</td><td>Verwijder haar van operatielocaties</td></tr><tr><td>0 Vicryl</td><td>Ethicon</td><td>J208H</td><td>Suture</td></tr><tr><td>1 mL Syringe</td><td>Medtronic/Covidien</td><td>1188100777</td><td>Toedienen van injecteerbare middelen</td></tr><tr><td>1" medical tape</td><td>Medline</td><td>MMM15271Z</td><td>Veiligstellen van wondverband en IV-katheters</td></tr><tr><td>1000mL 0,9% Natriumchloride</td><td>Baxter</td><td>2B1324X</td><td>IV-vervangende vloeistof</td></tr><tr><td>12 mL Syringe</td><td>Medtronic/Covidien</td><td>8881512878</td><td>Toedienen van injecteerbare middelen</td></tr><tr><td>18 ga naalden</td><td>BD</td><td>305185</td><td>Toediening van injecteerbare middelen</td></tr><tr><td>20 ga naalden</td><td>BD</td><td>305175</td><td>Toediening van injecteerbare middelen</td></tr><tr><td>20 mL Syringe</td><td>Medtronic/Covidien</td><td>8881520657</td><td>Toedienen van injecteerbare middelen</td></tr><tr><td>2-0 Vicryl</td><td>Ethicon</td><td>J317H</td><td>Suture</td></tr><tr><td>250 mL 0,9% zoutoplossing</td><td>Baxter</td><td>&nbsp;UE1322D</td><td>Vervangende IV-vloeistof</td></tr><tr><td>3 mL Syinge</td><td>Medtronic/Covidien</td><td>1180300555</td><td>Toedienen van injecteerbare middelen</td></tr><tr><td>3-0 Vicryl</td><td>Ethicon</td><td>VCP824G</td><td>Suture</td></tr><tr><td>36" Drukbewakingsbuis</td><td>Smith&rsquo;s Medical</td><td>MX563</td><td>Verbind art. Lijn&nbsp; naar transducer</td></tr><tr><td>4,0 mm ID endotracheale buis</td><td>Medline</td><td>DYND43040</td><td>Etablissement van de luchtweg voor Hibernation</td></tr><tr><td>4-0 Tevdek II-strengen</td><td>Deknatel</td><td>7-922</td><td>Suture om constrictor rond LAD te bevestigen</td></tr><tr><td>48" Drukbewakingsbuis</td><td>Smith&rsquo;s Medical</td><td>MX564</td><td>Verbind art. Lijn&nbsp; naar transducer</td></tr><tr><td>500mL 0,9% Natriumchloride</td><td>Baxter</td><td>2B1323Q</td><td>Geneesmiddelentoediening, voorzie mist voor Blower Mister</td></tr><tr><td>6&nbsp; mL Syringe</td><td>Medtronic/Covidien</td><td>1180600777</td><td>Toedienen van injecteerbare middelen</td></tr><tr><td>6,0 mm ID endotracheale buis</td><td>Mallinckrodt</td><td>86049</td><td>Etablissement van de luchtweg voor Revasc,MRI en Terminatie</td></tr><tr><td>6,5 mm ID endotracheale buis</td><td>Medline</td><td>DYND43065</td><td>Etablissement van de luchtweg voor Revasc,MRI en Terminatie</td></tr><tr><td>6" drukbuis</td><td>Smith&rsquo;s Medical</td><td>MX560</td><td>Verzamel beenmerg</td></tr><tr><td>60 mL Syringe</td><td>Medtronic/Covidien</td><td>8881560125</td><td>Toedienen van injecteerbare middelen</td></tr><tr><td>7,0 mm ID endotracheale buis</td><td>Medline</td><td>DYND43070</td><td>Etablissement van de luchtweg voor Revasc,MRI en Terminatie</td></tr><tr><td>7-0 Prolene</td><td>Ethicon</td><td>M8702</td><td>Suture</td></tr><tr><td>Advanced DMEM (1X)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>12491023</td><td></td></tr><tr><td>Alcohol Prep pads</td><td>MedSource</td><td>MS-17402</td><td>Huiddesinfectie</td></tr><tr><td>Amicon Ultra-15 Centrifugal Filter Unit</td><td>Millipore Sigma</td><td>UFC910024</td><td></td></tr><tr><td>Anesthesieapparaat</td><td>Drager</td><td>Fabious Trio</td><td>onderhoudt algemene anesthesie</td></tr><tr><td>Anesthesieapparaat + ventilator</td><td>DRE Drager- Fabius Tiro</td><td>DRE0603FT</td><td>Zuurstof en inhalatiemiddel aan de patiënt toedienen</td></tr><tr><td>Anesthesiemonitor</td><td>Phillips&nbsp; Intellivue</td><td>MP70</td><td>Multiparameter voor patiëntveiligheid</td></tr><tr><td>Arterial Line Kit</td><td>Arrow</td><td>ASK-04510-HF</td><td>Femorale katheter voor bloeddrukbewaking</td></tr><tr><td>Artificial Tears</td><td>Rugby</td><td>0536-1086-91</td><td>Ogen smeren om oogdroogheid te voorkomen</td></tr><tr><td>Bair Hugger</td><td>3M</td><td>Model 505</td><td>Patiëntverwarmingssysteem</td></tr><tr><td>Basic pack</td><td>Medline</td><td>DYNJP1000</td><td>Steriele doeken en tafelovertrek</td></tr><tr><td>Blood Collection Tubes- green top</td><td>Fisher Scientific</td><td>02-689-7</td><td>Verzamel microsferenbloedmonsters</td></tr><tr><td>Blower Mister Kit</td><td>Medtronic/Covidien</td><td>22120</td><td>Ruimen van het operatieveld voor vaat-anastomose</td></tr><tr><td>BODIPY TR Ceramide</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>D7540</td><td></td></tr><tr><td>Beenmergnaald- 25mm 15 ga IO-naald</td><td>Vidacare</td><td>9001-VC-005</td><td>Verzamel beenmerg</td></tr><tr><td>Bone Wax</td><td>Medline</td><td>ETHW31G</td><td>Hemostase van gesneden bot</td></tr><tr><td>Bovie Cautery hand piece</td><td>Covidien</td><td>E2516</td><td>Hemostase</td></tr><tr><td>Bupivicaine</td><td>Pfizer</td><td>00409-1161-01</td><td>Lokaal verdovingsmiddel</td></tr><tr><td>Buprenorphine 0,3 mg/mL</td><td>Sigma Aldrich</td><td>B9275</td><td>Pre-operatief analgeticum voor overlevingsprocedures</td></tr><tr><td>Cell Scrapers</td><td>Corning</td><td>353085</td><td></td></tr><tr><td>Cephazolin 1 gr</td><td>Pfizer</td><td>00409-0805-01</td><td>Antibioticum</td></tr><tr><td>Chest Tube</td><td>Covidien</td><td>8888561043</td><td>Evacueert lucht uit de borstholte</td></tr><tr><td>Cloroprep</td><td>Becton Dickenson</td><td>260815</td><td>Chirurgische huidvoorbereiding</td></tr><tr><td>CPT tube</td><td>BD</td><td>362753</td><td>MSC-isolatie van beenmerg</td></tr><tr><td>Delrin Constrictor</td><td>U of MN</td><td>Custom made</td><td>Maakt stenose van LAD</td></tr><tr><td>Dermabond</td><td>Ethicon</td><td>DNX12</td><td>Huidlijm</td></tr><tr><td>DMEM (1X) Dulbecco's Modified Eagle Medium, HEPES</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>12430062</td><td></td></tr><tr><td>Dobutamine 12,5 mg/mL</td><td>Pfizer</td><td>00409-2344-01</td><td>Verhoogt de bloeddruk en hartslag tijdens de tweede microsfeerbloedverzameling</td></tr><tr><td>ECG Pads</td><td>DRE</td><td>1496</td><td>Hartritme monitoren</td></tr><tr><td>Exosome-Depleted FBS</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>A2720801</td><td></td></tr><tr><td>Falcon Disposable Polystyrene Serological Pipe

chirurgisch varkensmodel van chronische myocardischemie behandeld door met exosomen beladen collageenpleister en off-pump coronaire bypasstransplantaat

Surgical Porcine Model of Chronic Myocardial Ischemia Treated by Exosome-laden Collagen Patch and Off-pump Coronary Artery Bypass Graft

Chronische myocardischemie als gevolg van progressieve stenose van de kransslagader leidt tot overwinterend myocardium (HIB), gedefinieerd als myocardium dat zich aanpast aan verminderde zuurstofbeschikbaarheid door de metabole activiteit te verminderen, waardoor onomkeerbaar cardiomyocytenletsel en -infarct worden voorkomen. Dit verschilt van een hartinfarct, omdat HIB het potentieel heeft voor herstel met revascularisatie. Patiënten met significante coronaire hartziekte (CAD) ervaren chronische ischemie, waardoor ze risico lopen op hartfalen en plotselinge dood. De standaard chirurgische ingreep voor ernstige CAD is coronaire bypassoperatie (CABG), maar het is aangetoond dat het een onvolmaakte therapie is, maar er bestaan geen aanvullende therapieën om myocyten te herstellen die zijn aangepast aan chronische ischemie. Om deze lacune aan te pakken, werd een chirurgisch model van HIB met varkens gebruikt dat vatbaar is voor CABG en het klinische scenario nabootst. Het model omvat twee operaties. De eerste operatie omvat het implanteren van een 1,5 mm stijve constrictor op de linker voorste dalende (LAD) slagader. Naarmate het dier groeit, veroorzaakt de constrictor geleidelijk een aanzienlijke stenose, wat resulteert in een verminderde regionale systolische functie. Zodra de stenose 80% bereikt, worden de myocardiale stroom en functie aangetast, waardoor HIB ontstaat. Vervolgens wordt een off-pump CABG uitgevoerd met de linker interne borstslagader (LIMA) om het ischemische gebied te revasculiseren. Het dier herstelt een maand om een optimale myocardiale verbetering mogelijk te maken voordat het wordt geofferd. Dit maakt fysiologische en weefselstudies van verschillende behandelingsgroepen mogelijk. Dit diermodel toont aan dat de hartfunctie ondanks CABG aangetast blijft, wat suggereert dat er behoefte is aan nieuwe aanvullende interventies. In deze studie werd een collageenpleister ontwikkeld die is ingebed met van mesenchymale stamcellen (MSC) afgeleide exosomen, die operatief kan worden aangebracht op het epicardiale oppervlak distaal van LIMA-anastomose. Het materiaal past zich aan het epicardium aan, is absorbeerbaar en vormt de steiger voor de aanhoudende afgifte van signaalfactoren. Deze regeneratieve therapie kan myocardherstel stimuleren dat niet alleen op revascularisatie reageert. Dit model vertaalt zich naar de klinische arena door middel van fysiologische en mechanistische verkenningen met betrekking tot herstel bij HIB.

Na revascularisatie wordt coronaire angiografie uitgevoerd om te beoordelen op LAD-stenose (meer dan 80%) en doorgankelijkheid van het LIMA-LAD-transplantaat (Figuur 1). Vier weken na de revascularisatieoperatie en het plaatsen van de met exosomen beladen collageenpleister, wordt cardiale MRI uitgevoerd om de systolische en diastolische functie van het hart in rust en onder stress te beoordelen met behulp van een lage dosis dobutamine-infusie van 5 μg/kg/min. De systolische functie wordt gea...

Deze studie presenteert een chirurgisch varkensmodel van chronische myocardischemie als gevolg van progressieve kransslagaderstenose, resulterend in een verminderde hartfunctie zonder infarct. Na ischemie ondergaan dieren een off-pump coronaire bypass-transplantatie met epicardiale plaatsing van van stamcellen afgeleide met exosomen beladen collageenpleister. Deze aanvullende therapie verbetert de myocardfunctie en het herstel.

Chirurgisch varkensmodel van chronische myocardischemie behandeld door met exosomen beladen collageenpleister en off-pump coronaire bypasstransplantaat

Chronic myocardial ischemia resulting from progressive coronary artery stenosis leads to hibernating myocardium (HIB), defined as myocardium that adapts ...

Het algemene doel van deze chirurgische ingreep is het creëren van een chirurgisch model van revascularisatie van de kransslagader met behulp van LIMA naar LAD-bypass, en het gebruik van met exosomen beladen collageenpleister als aanvulling om fysiologische verbetering van de hartfunctie aan te tonen. Ons in-vivo-model is een model met één vat dat geen comorbiditeiten bevat, wat niet representatief is voor de typische klinische situatie voor patiënten die een behandeling ondergaan voor meervatsziekte. Ondanks deze beperking heeft ons model echter consequent betrouwbare resultaten opgeleverd en heeft het de sterftecijfers laag gehouden.We hebben een klinisch relevante adjuvante therapie ontwikkeld voor gebruik tijdens CABG en hebben tot doel de cellulaire mechanismen te begrijpen die de myocardiale functionele verbetering bij chronische myocardischemie stimuleren. Volledig herstel van ischemisch weefsel lijkt af te hangen van herstel van mitochondriale mogelijkheden en verminderde ontsteking; vertegenwoordigt een nieuw studiegebied.

surgical-porcine-model-chronic-myocardial-ischemia-treated-exosome

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Hier tonen we een protocol om te standaardiseren bemonsteringsprocedures van een gevestigde varkens model van acuut myocardinfarct teneinde haar translationeel waarde in de kennis van de pathofysiologie van myocardiale ischemie/reperfusie letsel en het testen van nieuwe drugkandidaten.

Verbetering van een gesloten borst varkens myocardiaal infarct Model door standaardisatie van weefsel en bloed bemonsteringsprocedures

Dit protocol biedt een chirurgische grote diermodel van chronische, één vaartuig ischemie die resulteert in regionale afwijkingen, maar maakt geen infarct, bekend als winterslaap myocard. Na totstandkoming van chronische ischemie, dieren worden behandeld met off-pomp LIMA-LAD coronaire bypass prothese chirurgie te revascularize de ischemische weefsel.

Chirurgische varkens Model van chronische cardiale ischemie behandeld door Off-Pump coronaire bypassoperatie Graft

Hier beschrijven we een pre-klinisch groot dier (Porcine) model van orthotopic harttransplantatie dat stevig is vastgesteld en gebruikt om nieuwe cardioprotective strategieën te onderzoeken.

Een preklinisch varkens model van Orthotopic harttransplantatie

Chirurgisch trauma veroorzaakt een ontstekingsreactie. Cytokines en endogene liganden zijn bekend voor het moduleren van een myocard infarct grootte na ischemie en reperfusie. We presenteren een aangepaste gesloten kist model van muizen ischemie en reperfusie met behulp van gewichten opknoping om de effecten van thoracotomie te minimaliseren.

Een murine Closed-borst Model van myocardiale ischemie en reperfusie

We introduceren een chirurgische methode experimentele ischemie / reperfusie (I / R) letsel veroorzaken simuleren myocardiaal infarct (MI) in muismodellen die zorgt voor meer duidelijkheid in positionering van de ligatie van de LAD (LAD) om de reproduceerbaarheid te verhogen MI van experimenten in muizen.

Een muizenmodel van myocard ischemie-reperfusie schade door de eileiders van de LAD

Dit artikel beschrijft een nieuwe niet-occlusieve coronaire anastomotische connector in een porcine off-pump coronaire bypass (OPCAB) model. Deze gemakkelijk te gebruiken coronaire connector heeft intrinsiek potentieel om minimaal invasieve OPCAB-chirurgie te vergemakkelijken.

Evaluatie van een Novel Laser-bijgestaan ​​Coronaire Anastomotische Connector - de Drie-eenheid Clip - in een Varkens Off-pomp bypass Model

Hartfalen is de belangrijkste oorzaak van ziekenhuisopname en een belangrijke doodsoorzaak. Een model van permanente ligatie van de linker voorste afdalende kransslagader bij muizen wordt toegepast om ventriculaire remodellering en cardiale disfunctie na een myocardinfarct te onderzoeken. De techniek van invasieve hemodynamische metingen bij muizen wordt gepresenteerd.

Permanente Ligatie van de linker anterior Aflopend Kransslagader in Muizen: Een model van Post-myocardinfarct Remodelling en hartfalen

Deze video demonstreert een model om de ontwikkeling van myointimale hyperplasie na veneuze interpositiechirurgie bij ratten te bestuderen.

Vein Interpositie Model: Een geschikt model om te studeren Bypass Graft Patency

We bieden een betrouwbare methode voor ligatie van de linker voorwaartse dalende slagader (LAD) in een muismodel. Deze methode is relatief minder invasief dan andere methoden, waarbij endotracheale intubatie, een linkszijdige thoracotomie-aanpak en thoracentese betrokken zijn. Deze methode kan worden gebruikt als model voor zowel acuut als chronisch myocardinfarct (MI).

Murine Left Anterior Descending (LAD) coronaire Ligatie: een verbeterde en vereenvoudigd model voor myocardinfarct

De draad myograph techniek wordt gebruikt om vasculaire vlotte spier functies en de scherm nieuwe drugs te onderzoeken. Wij rapporteren een gedetailleerd protocol voor het meten van de isometrische contractility van de muis mesenterische slagader en voor het screenen van de nieuwe skeletspierrelaxantia van vasculaire glad spierweefsel.

Isometrische Contractility meting van de muis mesenterische slagader met behulp van draad Myography

Leer een chirurgisch varkensmodel van chronische myocardischemie met exosoombeladen collageenpleister tijdens off-pump CABG. Deze methode toont verbetering van hartfunctie en mitochon-driale restauratie.

Chirurgisch varkensmodel van chronische myocardischemie behandeld door met exosomen beladen collageenpleister en off-pump coronaire bypasstransplantaat (Video) | JoVE Journal

Chirurgisch varkensmodel van chronische myocardischemie behandeld door met exosomen beladen collageenpleister en off-pump coronaire bypasstransplantaat

Meer video's verkennen