Bepaling van de procoagulerende activiteit van extracellulaire blaasjes (EV) met behulp van EV-geactiveerde stollingstijd (EV-ACT)
4 augustus 2023
Dit protocol onderzoekt het gebruik van extracellulair vesikel (EV)-rijk plasma als indicator van het stollingsvermogen van EV. EV-rijk plasma wordt verkregen door een proces van differentiële centrifugatie en daaropvolgende recalcificatie.
Onze primaire focus ligt op stollingsstoornissen bij patiënten die een hersentrauma hebben opgelopen. In deze studie proberen we veranderingen in de stollingsfunctie te volgen met extracellulaire vesicale activiteit stollingstijd. Onze teams besteden aandacht aan het onderzoek naar hersenletsel.
En bij hersenletsel zijn ze een ernstige aandoening die we de hypergecoaguleerde toestand noemen. Het is erg moeilijk te meten. En we vinden in het bloed van de patiënt een aantal microblaasjes die we extracellulaire blaasjes noemen, waaronder het apoptoselichaam, het microblaasje en het exosoom.
En ze verschillen in het progecoaguleerde vermogen. We moeten dus een methode vinden om het vermogen te meten. En met deze methode kunnen we snel acuut het verschil van de extracellulaire blaasjes vinden.
Dat is heel belangrijk. Afhankelijk van deze maatregel kunnen we veel dingen doen. We moeten ervoor zorgen dat het bij de TPI-muizen en de klinische patiënt, vooral in de perifere circulatie, enige embolisatie kost.
Dat is zeer, zeer ernstig in de klinische. Ons protocol bood een aanzienlijk voordeel ten opzichte van andere technieken vanwege de eenvoud, kosteneffectiviteit en snelheid. Het maakt het mogelijk om een bloedstollingstest aan het bed uit te voeren, waardoor uitgebreide laboratoriumverwerking niet meer nodig is.
Ons onderzoek heeft een nieuwe methode ontwikkeld die de hypergecoaguleerde toestanden van het perifere bloed kan meten. Het kan niet alleen worden gebruikt bij de TPI, we kunnen ook worden gebruikt bij andere ziekten zoals sepsis, pre-eclampsie, tumor en hematologische aandoeningen. In de toekomst zijn we van plan om de mogelijkheid te onderzoeken bij het scannen op klinische hyper, een aandoening die het risico op bloedstolsels verhoogt.
Bekijk het volledige transcript en krijg toegang tot duizenden wetenschappelijke video's
Overzicht
Deze studie onderzoekt coagulatiestoornissen bij patiënten met hersentrauma door de stollingsfunctie te monitoren via extracellulaire vesikkel (EV) activiteit. Het onderzoek richt zich op de hypercoaguleerde toestand, die moeilijk te meten is, en streeft naar een methode voor het beoordelen van de pro-coagulatieve capaciteit van EV's in bloedmonsters.
Belangrijkste onderzoekscomponenten
Wetenschapsgebied
- Neurowetenschap
- Coagulatiestoornissen
- Extracellulaire Vesikels
Achtergrond
- Coagulatiestoornissen komen veel voor bij patiënten met hersentrauma.
- Extracellulaire vesikels (EV's) spelen een rol in stollingsprocessen.
- Het meten van de hypercoaguleerde toestand is complex.
- Verschillende typen EV's hebben verschillende pro-coagulatieve capaciteiten.
Doel van het onderzoek
- Om veranderingen in de stollingsfunctie gerelateerd aan EV-activiteit te monitoren.
- Om een methode te ontwikkelen voor het meten van de coagulatieve capaciteit van EV's.
- Om het begrip van coagulatie bij hersenletselgevallen te verbeteren.
Gebruikte methoden
- Verzameling van EV-rijk plasma door differentiële centrifugatie.
- Recalcificatie van plasmamonsters voor analyse.
- Beoordeling van de stollingsfunctie met behulp van EV-activiteit.
- Monitoring van microvesikels, inclusief apoptoselichamen en exosomen.
Belangrijkste resultaten
- Identificeerde verschillen in pro-coagulatieve capaciteiten van verschillende EV's.
- Ontwikkelde een snelle methode om de coagulatiestatus te beoordelen.
- Demonstreerde de belangrijkheid van EV's in het begrijpen van coagulatiestoornissen.
- Bijdragen aan inzichten in de relatie tussen hersenletsel en coagulatie.
Conclusies
- De studie biedt een nieuwe benadering om coagulatie bij patiënten met hersentrauma te meten.
- Extracellulaire vesikels zijn cruciale indicatoren van coagulatieve capaciteit.
- Er is verder onderzoek nodig om de klinische implicaties van deze bevindingen te onderzoeken.
Veelgestelde vragen
Executive Industry Relevance
Quantifying the procoagulant activity of extracellular vesicles (EVs) addresses a critical gap in early detection and risk assessment of hypercoagulable states across diverse disease contexts. The EV-Activated Clotting Time (EV-ACT) assay enables rapid, bedside evaluation of EV-driven coagulation, supporting mechanistic de-risking and target validation in translational research. This capability enhances predictive confidence at key inflection points in the discovery and preclinical pipeline.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Enables interrogation of EV-mediated coagulation pathways relevant to disease mechanisms.
- Supports biological de-risking by quantifying functional procoagulant activity of EVs.
- Facilitates target validation for interventions modulating EV release or activity.
Screening & Assay Development
- Provides a standardized, quantitative assay for assessing EV procoagulant function in plasma samples.
- Delivers reproducible, real-time viscoelasticity measurements suitable for assay optimization.
- Enables rapid screening of samples from diverse disease models for hypercoagulability risk.
Translational & Preclinical Research
- Aligns with disease-relevant models by detecting EV-driven hypercoagulability in preeclampsia, trauma, and cancer samples.
- Supports continuity from mechanistic discovery to preclinical validation of coagulation biomarkers.
- Informs risk-adjusted advancement decisions for candidate therapeutics targeting EV pathways.
Pipeline & Workflow Integration
The EV-ACT assay integrates into the discovery-to-preclinical continuum by enabling functional assessment of EVs in both healthy and disease states.
- Discovery Biology: Quantifies EV-mediated procoagulant activity to clarify mechanistic hypotheses.
- Screening: Provides a rapid, reproducible readout for evaluating sample hypercoagulability.
- Analytics: Generates quantitative clotting time outputs for cross-condition comparison and statistical analysis.
- Translational Research: Bridges discovery findings to preclinical models with disease-relevant EV measurements.
- Enterprise Reuse: Offers a scalable, standardized platform for ongoing EV functional studies across indications.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Increases predictive confidence in EV-related coagulation mechanisms and target validation.
- Operational Value: Delivers rapid, standardized, and reproducible bedside testing capability.
- Strategic Value: Improves go/no-go decisions by providing actionable coagulation risk data early in development.
- Portfolio Impact: Enables risk-adjusted prioritization of programs targeting EV-mediated pathologies.
Implementation Considerations
- Requires expertise in coagulation biology and EV isolation techniques.
- Needs access to viscoelasticity analyzers and standardized plasma preparation protocols.
- Demands cross-team alignment on assay parameters and data interpretation standards.
- May require adaptation for different disease models or sample types.
- Dependent on quality of EV enrichment and removal procedures for reliable outputs.
