Name: Muizen achterpoot explantatiemodel voor het bestuderen van de mechanobiologie van achillespees impingement (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-12-08T13:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 19 s
Description: Ontdek een muizen achterpoot explantatiemodel voor het bestuderen van mechanobiologie en fibrocartilagevorming bij achillespees impingement. Deze methode behoudt de in vivo-omgeving voor nauwkeurige spanningsanalyse.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

De auteurs zijn dankbaar voor de steun en hulp van Jeff Fox en Vidya Venkatramani van de Histology, Biochemistry and Molecular Imaging (HBMI) Core van het University of Rochester Center for Musculoskeletal Research, gedeeltelijk gefinancierd door P30AR06965. Daarnaast willen de auteurs het Centrum voor Lichtmicroscopie en Nanoscopie (CALMN) van het University of Rochester Medical Center bedanken voor hulp bij multifotonenmicroscopie. Deze studie werd gefinancierd door R01 AR070765 en R01 AR070765-04S1, evenals 1R35GM147054 en 1R01AR082349.

Inzicht in peesimpingement - Muizen explantatiemodel voor het bestuderen van mechanobiologie

De auteurs hebben niets te onthullen.

Het experimentele explantatieplatform van de achterpoten van muizen in combinatie met het weefselkweekprotocol dat in deze studie wordt beschreven, biedt een geschikt model voor het bestuderen van de mechanobiologie van impingement-gedreven fibrokraakbeenvorming bij de insertie van de achillespees. Het nut van dit explantatiemodel wordt aangetoond door de representatieve resultaten, die wijzen op behoud van de levensvatbaarheid van de cellen gelijktijdig met een significante en ruimtelijk heterogene verandering in Toluïd...

Een groot aantal pezen, waaronder de achillespees en rotator cuff-pezen, ervaren benige impingement als gevolg van normale anatomische positionering1,2,3,4. Peesimpingement genereert drukspanning die dwars op de longitudinale vezelas is gericht5,6,7. Gebieden van peesimpingement vertonen een uniek fenotype van fibrokraakbeen waarin gekrompen, ronde cellen (fibrochondrocyten) zijn ingebed in een ongeorganiseerd collageennetwerk met een duidelijk verhoogd glycosaminoglycaan (GAG)-gehalte2,3,4,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17,18,19,20,21,22,23,24. Eerdere studies suggereren dat de ongelijksoortige mechanische omgeving die wordt geproduceerd door peesimpingement deze GAG-rijke matrix in stand houdt door de afzetting van grote aggregerende proteoglycanen, met name aggrecan, te stimuleren, hoewel de onderliggende mechanismen onduidelijk zijn1,3,12,13,25,26,27,28,29,30,31,32,33,34,35,36,37,38,39. Hoewel fibrokraakbeen een normaal kenmerk is in aangetaste gebieden van gezonde pezen, is een afwijkend proteoglycaanmetabolisme geassocieerd met overmatige vorming van fibrokraakbeen een kenmerkend kenmerk van tendinopathie, een veel voorkomende en slopende ziekte die onevenredig vaak voorkomt bij chronisch aangetaste pezen1,40,41,42,43,44,45,46,47,48,49. Dienovereenkomstig wordt peesimpingement klinisch erkend als een belangrijke extrinsieke factor die verschillende van de meest voorkomende tendinopathieën aandrijft, waaronder rotator cuff-ziekte en insertionele achillespeesontsteking (IAT)50,51,52. Momenteel is de behandeling van tendinopathie inefficiënt. Ongeveer 47% van de patiënten met IAT heeft bijvoorbeeld een chirurgische ingreep nodig na mislukte conservatieve behandeling, met variabele postoperatieve uitkomsten53,54,55,56. Ondanks de schijnbare relatie tussen impingement en tendinopathie, zijn de mechanobiologische mechanismen waarmee cellen in een aangetaste pees hun mechanische omgeving waarnemen en erop reageren, slecht beschreven, wat het begrip van de pathogenese van tendinopathie verduistert en resulteert in een ontoereikende behandeling.
Explantatiemodellen zijn nuttige hulpmiddelen bij de studie van peesmechanobiologie57,58. Als een eerste stap in de richting van het begrijpen van de mechanobiologie van peesimpingement, hebben verschillende eerdere studies de cellulaire respons onderzocht na de toepassing van eenvoudige uniaxiale compressie op cellen of uitgesneden peesexplantaten 27,29,30,31,32,33,34,39. Cellen in vitro missen echter extracellulaire en pericellulaire matrices die de overdracht van spanningen vergemakkelijken, belangrijke groeifactoren en cytokines die vrijkomen door mechanische vervorming sekwestreren en substraat bieden voor focale adhesiecomplexen die een rol spelen bij mechanotransductie57,59. Bovendien kunnen zowel in vitro als excitant-onderzoeken niet worden gerecituleerd in de multiaxiale mechanische belastingsomgeving die wordt gegenereerd door peesimpingement in vivo, die afhankelijk is van anatomische kenmerken van het geïmpacteerde gebied 5,6. In de context van de beknelde achillespeesinsertie omvat dit omliggende weefsels zoals de retrocalcaneale slijmbeurs en Kager's vetkussen 60,61,62,63. Omgekeerd bieden in vivo modellen van peesimpingement 25,28,36,37,38,64,65,66 minimale controle over de omvang en frequentie van de belasting die rechtstreeks op de pees wordt uitgeoefend, wat een algemeen erkende beperking is van in vivo modellen voor het bestuderen van peesmechanobiologie 57,58,67,68,69,70. Gezien de uitdagingen bij het meten van peesspanning in vivo, is de interne rekomgeving die in deze modellen wordt gegenereerd vaak slecht gekarakteriseerd.
In dit manuscript presenteren we een op maat gemaakt experimenteel platform dat de invoeging van de achillespees op de calcaneus in de explantaten van de hele muizen van de achterpoten nabootst dat, in combinatie met dit weefselkweekprotocol, de levensvatbaarheid gedurende 7 dagen in explantatiekweek behoudt en studie van de biologische gevolgen van peesimpingement mogelijk maakt. Het platform is gebouwd op een 3D-geprinte polymelkzuur (PLA) basis die de basis vormt voor de bevestiging van de grepen en 3D-geprinte PLA-volumereductie-inzetstukken. De grepen worden gebruikt om het bovenbeen en de knie proximaal van de achillespees-myotendineuze overgang vast te klemmen met het caudale aspect van de achterpoot naar boven gericht, waardoor de achillespees van bovenaf kan worden afgebeeld met behulp van een ultrasone sonde of omgekeerde microscoop (Figuur 1A). Het volumereductie-inzetstuk glijdt langs een spoor op de basis en vermindert het benodigde volume weefselkweekmedia. Een gevlochten lijn die om de achterpoot is gewikkeld, wordt uit het platform geleid met behulp van het basisontwerp en een 3D-geprinte PLA-clip. Door aan het touwtje te trekken, wordt de achterpoot dorsaalgebogen en wordt de aanhechting van de achillespees tegen de calcaneus gedrukt, wat resulteert in een verhoogde dwarsdrukspanning 5,6 (Figuur 1A). Het platform bevindt zich in een acrylbad dat de explantaties van de achterpoot ondergedompeld houdt in weefselkweekmedia. Door het strakke koord met plakband aan de buitenkant van het bad te bevestigen, wordt de dorsaalflexie van de enkel in stand gehouden om statische impingement van de achillespeesinsertie te produceren. CAD-bestanden voor 3D-geprinte componenten worden geleverd in meerdere formaten (aanvullend bestand 1), waardoor ze kunnen worden geïmporteerd in een reeks commerciële en gratis, open-source CAD-software voor aanpassing aan experimentele behoeften. Als er geen toegang tot 3D-printers beschikbaar is voor fabricage, kunnen CAD-bestanden worden verstrekt aan online 3D-printservices die de onderdelen tegen lage kosten printen en verzenden.
Belangrijk is dat het triceps surae-Achilles musculotendineuze complex zowel de knie- als de enkelgewrichten overspant 71,72,73. Bijgevolg wordt de trekspanning in de achillespees beïnvloed door knieflexie. Knie-extensie plaatst de achillespees onder spanning, terwijl knieflexie de spanning vermindert. Door eerst de knie te strekken en vervolgens de enkel passief te dorsaalbuigen, kunnen drukspanningen bij de geïmpacteerde insertie worden gesuperponeerd op trekspanningen. Omgekeerd, door de enkel passief dorsaalbuigend te maken met de knie gebogen, wordt de trekspanning verminderd en blijft de drukspanning bestaan. Het huidige protocol onderzoekt drie van dergelijke voorwaarden. 1) Voor statische impingement wordt de voet dorsaalgebogen tot < 110° ten opzichte van het scheenbeen om de insertie te beïnvloeden, met de knie gebogen om de spanning te verminderen. 2) Voor de basislijnspanningsgroep wordt de enkel gestrekt boven 145° dorsaalflexie met de knie gestrekt, waardoor bij het inbrengen overwegend trekspanning ontstaat. 3) Voor de onbelaste groep worden explantaten gekweekt in een petrischaal met de knie en enkel in neutrale posities in afwezigheid van extern uitgeoefende belasting. De hierboven genoemde hoeken worden fotografisch gemeten ten opzichte van een coördinatensysteem waarbij de voet en het scheenbeen evenwijdig zijn onder een hoek van 180° en loodrecht op een hoek van 90°.
De belangrijkste stappen van het protocol zijn onder meer: 1) dissectie van explantaten van de achterpoten en zorgvuldige verwijdering van de huid en plantarispees; 2) explantatiecultuur na een 48 uur durende voorbehandeling met dexamethason; 3) weefseldoorsnede en histologische kleuring; en 4) kleurenbeeldanalyse om de vorming van fibrokraakbeen te beoordelen. Na dissectie wordt elke explantatie van de achterpoot gedurende 48 uur voorbehandeld in kweekmedia aangevuld met dexamethason74. Contralaterale ledematen van elke muis worden toegewezen aan afzonderlijke experimentele groepen voor paarsgewijze vergelijking, wat helpt bij het beheersen van biologische variabiliteit. Na de voorbehandeling worden de explantaten op platforms geplaatst zoals hierboven beschreven en nog 7 dagen gekweekt (Figuur 1B). Aanvullende vergelijkingen worden gemaakt met een voorbehandelde (dag 0) groep waarin explantaten direct na de 48 uur voorbehandeling worden verwijderd.
Na explantatiecultuur worden de achterpoten bijgesneden, formaline gefixeerd, ontkalkt en ingebed in paraffine. Seriële doorsnede in sagittale oriëntatie biedt visualisatie van de achillespees vanaf de myotendineuze overgang tot de calcaneale insertie, terwijl de sectiediepte door de hele pees kan worden gevolgd. Terminale deoxynucleotidyltransferase (TdT)-gemedieerde dUTP X-nick-labeling (TUNEL) wordt gebruikt om DNA-schade secundair aan apoptose te visualiseren en de levensvatbaarheid te beoordelen. Toluïdineblauwe histologie en aangepaste kleurenbeeldanalyse worden uitgevoerd om veranderingen in GAG-kleuring te kwantificeren. Toluïdineblauw gekleurde weefselsecties worden vervolgens gebruikt voor SHG-beeldvorming om veranderingen in de organisatie van collagevezels te karakteriseren (Figuur 1B).
De verstrekte representatieve resultaten suggereren een veranderde histologische kleuring van de GAG-rijke matrix en desorganisatie van het extracellulaire collageennetwerk gegenereerd door 7 dagen statische impingement binnen het model. Dit model kan worden gebruikt om moleculaire mechanismen te onderzoeken die ten grondslag liggen aan impingement-gedreven fibrokraakbeenachtige verandering.

```html
<table><tbody><tr><td>Absorbent underpads</td><td>VWR</td><td>82020-845</td><td>Voor dissectie op tafel</td></tr><tr><td>Acrylic bath</td><td>Source One</td><td>X001G46CB1</td><td>Bevat het explantplatform ondergedompeld in kweekmedium</td></tr><tr><td>Autoclave bin</td><td>Thermo Scientific</td><td>13-361-20</td><td>Gebaten als secundaire beveiliging, houdt twee platforms vast</td></tr><tr><td>Base</td><td>-</td><td>-</td><td>3D geprint van CAD-bestanden die zijn verstrekt als aanvullende bestanden</td></tr><tr><td>Braided line</td><td>KastKing</td><td>30lb test</td><td>Gebruikt om rond de poot te wikkelen en enkeldorsiflexie toe te passen</td></tr><tr><td>Clip</td><td>-</td><td>-</td><td>3D geprint van CAD-bestanden die zijn verstrekt als aanvullende bestanden</td></tr><tr><td>Cover glass</td><td>Fisherbrand</td><td>12-541-034</td><td>Rechthoekig, No. 2, 50 mm x 24 mm</td></tr><tr><td>Cytoseal XYL</td><td>VWR</td><td>8312-4</td><td>Xyleen-gebaseerde montage media voor coverslipping Toluidine blauw gekleurde weefselsecties</td></tr><tr><td>Dexamethasone</td><td>MP Biomedical LLC</td><td>194561</td><td>CAS#50-02-2</td></tr><tr><td>Dimethyl sulfoxide (DMSO), anhydrous</td><td>Invitrogen by ThermoFisher</td><td>D12345</td><td>CAS#67-68-5, gebruikt om dexamethasone op te lossen in geconcentreerde stockoplossingen</td></tr><tr><td>Double-sided tape</td><td>Scotch Brand</td><td>34-8724-5195-9</td><td>Om zandpapier aan Grip platens te bevestigen</td></tr><tr><td>Dulbecco's Modified Eagle Medium (1X DMEM)</td><td>Gibco by ThermoFisher</td><td>11965092</td><td>hoge glucose, (-) pyruvate, (+) glutamine</td></tr><tr><td>EDTA tetrasodium salt dihydrate</td><td>Thermo Scientific Chemicals</td><td>J15700.A1</td><td>CAS#10378-23-1, gebruikt om 14% EDTA-oplossing voor sample decalcificatie te maken</td></tr><tr><td>Ethanol, 200 proof</td><td>Thermo Scientific</td><td>T038181000</td><td>CAS#64-17-5, 1 L levering</td></tr><tr><td>Foam biopsy pads</td><td>Leica</td><td>3801000</td><td>Gebruikt met verwerkingscassettes, helpt de enkelgewrichten in de gewenste positie te houden tijdens fixatie en decalcificatie</td></tr><tr><td>Forceps, #SS Standard Inox</td><td>Dumont</td><td>11203-23</td><td>Recht, glad, fijne uiteinden</td></tr><tr><td>Forceps, Micro-Adson 4.75"</td><td>Fisherbrand</td><td>13-820-073</td><td>Recht, fijne uiteinden met gekartelde tanden</td></tr><tr><td>Garnet Sandpaper, 50-D Grit</td><td>Norton</td><td>M600060 01518</td><td>Of ander grofkorrelig zandpapier</td></tr><tr><td>Glacial acetic acid</td><td>Fisher Chemical</td><td>A38S-500</td><td>CAS#64-19-7, voor het aanpassen van de pH van natriumacetaatbuffer gebruikt voor Toluidine blauw histologie, evenals 14% EDTA decalcificatie oplossing</td></tr><tr><td>Grips</td><td>ADMET</td><td>GV-100NT-A4</td><td>Roestvrijstalen vice grips, schroeven en veren beschreven in het protocol zijn inbegrepen</td></tr><tr><td>Histobond Adhesive Microscope Slides</td><td>VWR</td><td>16005-108</td><td>Sagittale secties van achterpoot explantaten hechten betrouwbaar aan deze glijbanen door alle kleuring protocollen</td></tr><tr><td>In situ Cell Death Detection Kit, TMR Red</td><td>Roche</td><td>12156792910</td><td>TUNEL assay</td></tr><tr><td>Labeling tape</td><td>Fisherbrand</td><td>15-959</td><td>Of elke andere markeringstape van voorkeur</td></tr><tr><td>L-ascorbic acid</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A4544-100G</td><td>CAS#50-81-7, voor kweekmediumformulering</td></tr><tr><td>Neutral buffered formalin, 10%</td><td>Leica</td><td>3800600</td><td>Voor sample fixatie, 5 gallon levering</td></tr><tr><td>Nunc petri dishes</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P7741-1CS</td><td>100 mm diameter x 25 mm hoogte, houdt explantaten ondergedompeld in 70 mL kweekmedium zoals beschreven in het protocol</td></tr><tr><td>Penicillin-streptomycin (100X)</td><td>Gibco by ThermoFisher</td><td>15140122</td><td>Voeg 5 mL toe aan 500 mL 1X DMEM voor 1% v/v (1X) werkconcentratie</td></tr><tr><td>Polylactic acid (PLA) 1.75 mm filament</td><td>Hatchbox</td><td>-</td><td>Kies filament diameter compatibel met uw 3D printer extruder, in kleur naar keuze.</td></tr><tr><td>Processing cassettes</td><td>Leica</td><td>3802631</td><td>Voor fixatie, decalcificatie en paraffine-inbedding</td></tr><tr><td>Prolong Gold Antifade Reagent with DAPI</td><td>Invitrogen by ThermoFisher</td><td>P36931</td><td>Montage media voor coverslipping weefselsecties na TUNEL</td></tr><tr><td>Proteinase K</td><td>Fisher BioReagents</td><td>BP1700-50</td><td>CAS#39450-01-6, gebruikt voor antigeenretrieval in TUNEL protocol</td></tr><tr><td>Scissors, Fine</td><td>FST</td><td>14094-11</td><td>Recht, scherp</td></tr><tr><td>Slide Staining Set, 12-place</td><td>Mercedes Scientific</td><td>MER 1011</td><td>Rack met 12 kleurbakken en glijbanen voor Toluidine blauw histologie</td></tr><tr><td>Sodium acetate, anhydrous</td><td>Thermo Scientific Chemicals</td><td>A1318430</td><td>CAS#127-09-3, gebruikt om buffer voor Toluidine blauw histologie te maken</td></tr><tr><td>Tissue-Tek Accu-Edge Low Profile Microtome Blades</td><td>VWR</td><td>25608-964</td><td>Voor paraffine secties</td></tr><tr><td>Toluidine Blue O</td><td>Thermo Scientific Chemicals</td><td>348601000</td><td>CAS#92-31-9</td></tr><tr><td>Volume Reduction Insert</td><td>-</td><td>-</td><td>3D geprint van CAD-bestanden die zijn verstrekt als aanvullende bestanden</td></tr><tr><td>Xylenes</td><td>Leica</td><td>3803665</td><td>4 gallon levering voor histologische kleuring</td></tr></tbody></table>
```

muizen achterpoot explantatiemodel voor het bestuderen van de mechanobiologie van achillespees impingement

Murine Hind Limb Explant Model for Studying the Mechanobiology of Achilles Tendon Impingement

Peesbotsing op bot genereert een multiaxiale mechanische belastingomgeving met duidelijk verhoogde transversale compressieve rek, die een gelokaliseerd fibrokraakbeenfenotype opwekt dat wordt gekenmerkt door accumulatie van glycosaminoglycaan (GAG)-rijke matrix en remodellering van het collageennetwerk. Hoewel fibrokraakbeen een normaal kenmerk is in aangetaste gebieden van gezonde pezen, zijn overmatige GAG-afzetting en desorganisatie van het collageennetwerk kenmerkende kenmerken van tendinopathie. Dienovereenkomstig wordt impingement klinisch erkend als een belangrijke extrinsieke factor bij het ontstaan en de progressie van tendinopathie. Toch blijft de mechanobiologie die ten grondslag ligt aan peesimpingement onderbelicht. Eerdere pogingen om de cellulaire respons op peesimpingement op te helderen, hebben uniaxiale compressie toegepast op cellen en peesexplantaten in vitro weggesneden. Geïsoleerde cellen missen echter een driedimensionale extracellulaire omgeving die cruciaal is voor de mechanorespons, en zowel in vitro als excitatiestudies kunnen de multiaxiale spanningsomgeving die wordt gegenereerd door peesimpingement in vivo niet recapituleren, wat afhankelijk is van anatomische kenmerken van het geïmpacteerde gebied. Bovendien missen in vivo modellen van peesimpingement controle over de mechanische belastingsomgeving. Om deze beperkingen te overwinnen, presenteren we een nieuw explantatiemodel van de achterpoten van muizen dat geschikt is voor het bestuderen van de mechanobiologie van achillespeesimpingement. Dit model houdt de achillespees in situ om de lokale anatomie te behouden en reproduceert de multiaxiale spanningsomgeving die wordt gegenereerd door botsing van de achillespeesinsertie op de calcaneus tijdens passief toegepaste dorsaalflexie van de enkel met behoud van cellen in hun oorspronkelijke omgeving. We beschrijven een weefselkweekprotocol dat integraal deel uitmaakt van dit model en presenteren gegevens die een duurzame levensvatbaarheid van explantatie gedurende 7 dagen aantonen. De representatieve resultaten tonen een verbeterde histologische GAG-kleuring en verminderde uitlijning van de collageenvezel secundair aan impingement, wat wijst op verhoogde vorming van fibrokraakbeen. Dit model kan gemakkelijk worden aangepast om verschillende mechanische belastingsregimes te onderzoeken en maakt het mogelijk om moleculaire routes te manipuleren die van belang zijn om mechanismen te identificeren die fenotypische veranderingen in de achillespees mediëren als reactie op impingement.

Representatieve beelden van TUNEL-gekleurde weefselsecties tonen minimale apoptotische kernen in het lichaam van de achillespees na 7 dagen explantatiekweek in experimentele groepen (Figuur 2A). Kwantificering van deze beelden levert bewijs dat het weefselkweekprotocol gemiddeld tot 78% levensvatbaarheid behoudt in de achillespees na 7 dagen explantatiekweek onder belastingsomstandigheden (Figuur 2B).
Kwalitatief wordt een verbeterde ...

We presenteren een op maat gemaakt experimenteel platform en weefselkweekprotocol dat fibrokraakbeenachtige verandering nabootst die wordt aangedreven door impingement van de achillespeesinsertie in explantaten van de achterpoten van muizen met aanhoudende cellevensvatbaarheid, en biedt een model dat geschikt is voor het onderzoeken van de mechanobiologie van peesimpingement.

Muizen achterpoot explantatiemodel voor het bestuderen van de mechanobiologie van achillespees impingement

Tendon impingement upon bone generates a multiaxial mechanical strain environment with markedly elevated transverse compressive strain, which elicits a ...

We bestuderen de mechanobiologie die ten grondslag ligt aan peesimpingement en het proces waarmee deze unieke mechanische vraag de vorming van gelokaliseerd vezelkraakbeen in gezondheid en ziekte stimuleert. Hier proberen we de matrix te karakteriseren voor modellering ten opzichte van ruimtelijk heterogene patronen van multiaxiale mechanische rek, gegenereerd door impingement en moleculaire mechanismen te identificeren die deze respons mediëren. In vitro modellen voor het bestuderen van impingement mechanobiologie hebben eenvoudige compressie toegepast op geïsoleerde peescellen of kunstmatige uniaxiale compressie op gedeeltelijke en hele peesexplantaten.Gevestigde diermodellen van peesimpingement, het manipuleren van externe bronnen van peesimpingement in vivo, meestal chirurgisch en het verkennen van biologie na het hervatten van fysieke activiteit. In vitro modellen vertonen aanzienlijke beperkingen omdat geïsoleerde cellen hun driedimensionale extracellulaire omgeving missen, cruciaal voor mechano-respons. Hoewel excijnde explantatiemodellen deze beperking omzeilen, slagen beide er niet in om multiaxiale spanningspatronen te recreëren die worden gegenereerd door impingement in

murine-hind-limb-explant-model-for-studying-mechanobiology-achilles

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bio-engineering

Het protocol beschrijft efficiënte en reproduceerbare Trek-biomechanische testmethoden voor muriene pezen door het gebruik van Custom-Fit 3D-gedrukte armaturen.

Biomechanische beproeving van Muriene pezen

Dit protocol presenteert een testsysteem dat wordt gebruikt om kwantificeerbare en gecontroleerde vermoeidheidsblessures in een achillespees van een rat te induceren voor een in-vivo model van door overbelasting geïnduceerde tendinopathie. De procedure bestaat uit het vastzetten van de enkel van de rat aan een gewrichtsactuator die passieve enkeldorsaalflexie uitvoert met een op maat geschreven MATLAB-script.

Een passief testsysteem voor dorsaalflexie van de enkel voor een in vivo model van door overbelasting geïnduceerde tendinopathie

Hier presenteren we een assembloid-modelsysteem om peescellulaire overspraak na te bootsen tussen het dragende peeskernweefsel en een extrinsiek compartiment met celpopulaties die worden geactiveerd door ziekte en letsel. Als belangrijke use case laten we zien hoe het systeem kan worden ingezet om ziekterelevante activering van extrinsieke endotheelcellen te onderzoeken.

Engineering Tendon Assembloids om cellulaire overspraak bij ziekte en reparatie te onderzoeken

Dit artikel en de bijbehorende video presenteren ons protocol voor het genereren van weefsel-engineered darm in muizen, waarbij een organoid units-on-scaffold benadering.

Tissue Engineering van de darm in een muizenmodel

We presenteren in dit artikel een nieuw strekken platform dat kan worden gebruikt om cel responsen op complexe anisotrope biaxiale mechanische vervorming onderzoeken en kwantificeren van de mechanische eigenschappen van biologisch weefsel.

A Novel Stretching platform voor toepassingen in de Cel en Weefsel Mechanobiology

De mechanische eigenschappen en de microstructuur van de extracellulaire matrix sterk beïnvloeden 3D migratie van cellen. Een in vitro werkwijze om de tijdruimtelijk celmigratie gedrag biofysisch variabele omgevingen zowel bevolking en afzonderlijke cel niveaus, gaande beschreven.

Concentrische Gel Systeem om de biofysische rol van matrix Microenvironment op 3D-Cell Migratie Bestudeer

Scaffolds voor weefselengineering moeten het complexe biochemische en biofysische micro-omgeving van de cellulaire niche nabootsen. Hier laten we het gebruik van interfaciale polyelektrolytcomplexatievezels zien als een platform om samengestelde, meercomponenten polymeer scaffolds met aanhoudende biochemische afgifte te creëren.

Composiet Steigers van Interfacial Polyelectrolyte vezels voor stoffelijk Controlled Release van biomoleculen

Een protocol voor de fabrikatie van kunststof microfluidic apparaten met transparante weergave-poorten voor zichtbaar en infrarood licht beeldvorming wordt beschreven.

Zachte lithografische Procedure voor de productie van kunststof Microfluidic apparaten met weergave-poorten transparant voor zichtbaar en infrarood licht

Dit document leest de gebruikers van in vivo de scanners van de micro-berekend tomografie (µCT) hoe anesthetize, correct positie en de hind-limb van een rat voor minimale bewegingen beperken tijdens hoge resolutie beeldvorming van het scheenbeen. Het resultaat is een hoge kwaliteitsbeelden dat kunnen worden verwerkt om te bot-microarchitectuur nauwkeurig te kwantificeren.

Juiste positionering en terughoudendheid van een Rat Hind-Limb voor gerichte hoge resolutie beeldvorming van bot met behulp van de Micro-architectuur In Vivo Micro-berekend tomografie

Tijdens de landing, lager lichaam botten Ervaar grote mechanische belastingen en zijn vervormd. Het is essentieel voor het meten van de vervorming van het bot voor een beter begrip van de mechanismen van beenverwondingen stress effecten zijn gekoppeld. Een nieuwe aanpak onderwerp-specifieke spier-en modellering en eindige elementen analyse wordt gebruikt om te meten tibiale stam tijdens dynamische bewegingen.

Onderwerp-specifieke Musculoskeletal Model voor het bestuderen van bot-stam tijdens dynamische beweging

Ontdek een muizen achterpoot explantatiemodel voor het bestuderen van mechanobiologie en fibrocartilagevorming bij achillespees impingement. Deze methode behoudt de in vivo-omgeving voor nauwkeurige spanningsanalyse.

Muizen achterpoot explantatiemodel voor het bestuderen van de mechanobiologie van achillespees impingement

Meer video's verkennen