Name: Gif extraheren uit de sluipwesp Trichogramma dendrolimi met behulp van een kunstmatige gastheer (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-10-06T13:50:00.000+00:00
Duration: 3 min 53 s
Description: Leer een efficiënte methode voor gifextractie uit de sluipwesp Trichogramma dendrolimi met behulp van een kunstmatige gastheer. Dit protocol verbetert de onderzoeksmogelijkheden naar gifcompositie en functie.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

We erkennen financiële steun van de Natural Science Foundation van de provincie Hainan (subsidie nr. 323QN262), de National Natural Science Foundation of China (subsidie nr. 31701843 en 32172483), het Jiangsu Agriculture Science and Technology Innovation Fund (subsidienr. CX(22)3012 en CX(21)3008), de "Shuangchuang Doctor" Foundation van de provincie Jiangsu (subsidie nr. 202030472) en het startfonds van de Nanjing Agricultural University (subsidie nr. 804018).

1. Insectenkweek
<ol><li>Voer Corcyra cephalonica op maïsmeel bij een temperatuur van 26 ± 1°C en een relatieve luchtvochtigheid van 40% ± 10%.</li>
	<li>Kweek de T. dendrolimi-stam uit de Jilin-insect binnenshuis met de eieren van Corcyra cephalonica als gastheer. Voer wespenvolwassenen 10% sucrosewater in Drosophila-buizen bij een temperatuur van 26 ± 1 °C, relatieve vochtigheid van 70% ± 10%, licht (L): donker (D) periode van 14 uur: 10 uur.</li>
</ol>2. Bereiding van eierkaarten van polyethyleen plastic folie
<ol><li>Neem een polyethyleen plastic folie met een lengte van 16 cm, een breedte van 12 cm en een dikte van 20 μm. Druk 30 halfronde uitsteeksels met een diameter van 2-3 mm en een hoogte van ongeveer 3 mm uit met behulp van een glazen slijpstaaf volgens de standaard PCR-plaatlay-out van 96 gaten. NOTITIE: Het proces van het uitpersen van 30 halfronde uitsteeksels met behulp van een glazen slijpstaaf moet worden gedaan met inachtneming van de druk, omdat een te harde pers het plastic zal doorboren en de geëxtraheerde giftige slijpstaaf zal verontreinigen.</li>
	<li>Desinfecteer de geperste polyethyleen plastic folie door beide zijden gedurende 1 uur bloot te stellen aan ultraviolet (UV) licht.</li>
	<li>Voeg een kleine hoeveelheid 10% polyvinylalcohol toe aan het halfronde oppervlak.</li>
</ol>3. Trichogramma dendrolimi parasitisme
<ol><li>Plaats na CO2 -anesthesie T. dendrolimi vrouwelijke wespen in een verzameldoos en het aantal wespen was ~ 3000.</li>
	<li>Plaats de bolle kant van de filmeierkaart in de richting van de opvangbak en zet de randen vast met een elastiekje.</li>
	<li>Voeg 4 μl aminozuuroplossing (6 g/l leucine, 4 g/l fenylalanine, 4,25 g/l histidine) toe aan elk halfcirkelvormig uitsteeksel. Bedek het met een platte polyethyleen plastic folie van 16 cm lang en 12 cm breed. Gebruik een elastiekje om de opvangbak goed af te dekken met twee vellen plastic.</li>
	<li>Laat T. dendrolimi wespen 4-8 uur vrij parasiteren en geef 10% sucrosewater door bevochtigd katoen.</li>
</ol>4. T . dendrolimi gif verzamelen
<ol><li>Verkrijg de geparasiteerde aminozuuroplossing uit het binnenste uitsteeksel van de kunstmatige eikaart en breng deze over naar de dop van buisjes van 1,5 ml.</li>
	<li>Bedek de buisdop met een nylon net van 10 μm met een diameter van 25 mm, maak het nylon net en de centrifugebuis stevig vast. Zet de centrifugebuis rechtop voor een korte centrifugatie met behulp van een minicentrifuge (1360 x g) gedurende 10 s en vang de gefilterde oplossing (~100 μL T. dendrolimi-gif ) op.</li>
	<li>Meet de concentratie van het opgevangen T. dendrolimi-gif met behulp van een Bicinchoninic acid (BCA)-testkit (Tabel met materialen).</li>
	<li>Bewaar het gif bij -80 °C voor verdere analyses.</li>
</ol>5. SDS-PAGE-analyses
<ol><li>Voeg 30 μL T. dendrolimi gif toe aan 10 μL 4x natriumdodecylsulfaat-polyacrylamidegelelektroforese (SDS-PAGE) monsterlaadbuffer (Materiaaltabel) en verwarm gedurende 10 minuten op 95 °C.</li>
	<li>Voer SDS-PAGE gel uit op 130 V gedurende 120 min.</li>
	<li>Kleurs en ontkleuring van de SDS-PAGE-gel met behulp van het eiwitkleuringsapparaat (Materiaaltabel).</li>
</ol>

Kunstmatige parasitering van de gastheer door Trichogramma dendrolimi en gifextractie

<ol><li>Pennacchio, F., Strand, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+of+developmental+strategies+in+parasitic+hymenoptera%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Entomology%22%5BJournal%5D)">Evolution of developmental strategies in parasitic hymenoptera.</a> Annual Review of Entomology. 51, 233-258 (2006).</li>
<li>Yan, Z. C., Ye, X. H., Wang, B. B., Fang, Q., Ye, G. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Research+advances+on+composition%2C+function+and+evolution+of+venom+proteins+in+parasitoid+wasps%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Journal+of+Biological+Control%22%5BJournal%5D)">Research advances on composition, function and evolution of venom proteins in parasitoid wasps.</a> Chinese Journal of Biological Control. 33 (1), 1-10 (2017).</li>
<li>Asgari, S., Rivers, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Venom+proteins+from+endoparasitoid+wasps+and+their+role+in+host-parasite+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Entomology%22%5BJournal%5D)">Venom proteins from endoparasitoid wasps and their role in host-parasite interactions.</a> Annual Review of Entomology. 56, 313-335 (2011).</li>
<li>Moreau, S. J. M., Guillot, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+and+prospects+on+biosynthesis%2C+structures%2C+and+functions+of+venom+proteins+from+parasitic+wasps%5BTitle%5D)+AND+%22Insect+Biochemistry+and+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Advances and prospects on biosynthesis, structures, and functions of venom proteins from parasitic wasps.</a> Insect Biochemistry and Molecular Biology. 35 (11), 1209-1223 (2005).</li>
<li>Yan, Z. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+venom+serpin+splicing+isoform+of+the+endoparasitoid+wasp+Pteromalus+puparum+suppresses+host+prophenoloxidase+cascade+by+forming+complexes+with+host+hemolymph+proteinases%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+Biological+Chemistry%22%5BJournal%5D)">A venom serpin splicing isoform of the endoparasitoid wasp Pteromalus puparum suppresses host prophenoloxidase cascade by forming complexes with host hemolymph proteinases.</a> Journal Biological Chemistry. 292 (3), 1038-1051 (2017).</li>
<li>Woelke, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Description+and+biology+of+two+new+egg+parasitoid+species+%28Hymenoptera%3A+Trichogrammatidae%29+reared+from+eggs+of+Heliconiini+butterflies+%28Lepidoptera%3A+Nymphalidae%3A+Heliconiinae%29+in+Panama%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Natural+History%22%5BJournal%5D)">Description and biology of two new egg parasitoid species (Hymenoptera: Trichogrammatidae) reared from eggs of Heliconiini butterflies (Lepidoptera: Nymphalidae: Heliconiinae) in Panama.</a> Journal of Natural History. 53 (11-12), 639-657 (2019).</li>
<li>Zang, L. S., Wang, S., Zhang, F., Desneux, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+control+with+Trichogramma+in+China%3A+History%2C+present+status%2C+and+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Entomology%22%5BJournal%5D)">Biological control with Trichogramma in China: History, present status, and perspectives.</a> Annual Review of Entomology. 66, 463-484 (2021).</li>
<li>Nettles, W. C. J., Morrison, R. K., Xie, Z. N., Ball, D., Shenkir, C. A., Vinson, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synergistic+action+of+potassium+chloride+and+magnesium+sulfate+on+parasitoid+wasp+oviposition%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Synergistic action of potassium chloride and magnesium sulfate on parasitoid wasp oviposition.</a> Science. 218, 4568(1982).</li>
<li>Tilden, R. L., Ferkovich, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kairomonal+stimulation+of+oviposition+into+an+artificial+substrate+by+the+endoparasitoid+Microplitis+croceipes+%28Hymenoptera%29Braconidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+the+Entomological+Society+of+America%22%5BJournal%5D)">Kairomonal stimulation of oviposition into an artificial substrate by the endoparasitoid Microplitis croceipes (Hymenoptera)Braconidae).</a> Annals of the Entomological Society of America. 81 (1), 152-156 (1988).</li>
<li>Xie, Z. N., Li, L., Xie, Y. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+culture+of+Habrobracon+hebetor%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Journal+of+Biological+Control%22%5BJournal%5D)">In vitro culture of Habrobracon hebetor.</a> Chinese Journal of Biological Control. 5 (2), 49-51 (1989).</li>
<li>Han, S. T., Liu, W. H., Li, L. Y., Chen, Q. X., Zeng, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Breeding+Trichogramma+ostriniae+with+artificial+eggs%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Environmental+Entomology%22%5BJournal%5D)">Breeding Trichogramma ostriniae with artificial eggs.</a> Journal of Environmental Entomology. 21 (1), 9-12 (1999).</li>
<li>Li, L. Y., Chen, Q. X., Liu, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oviposition+behavior+of+twelve+species+of+Trichogramma+and+its+influence+on+the+efficiency+of+rearing+them+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Environmental+Entomology%22%5BJournal%5D)">Oviposition behavior of twelve species of Trichogramma and its influence on the efficiency of rearing them in vitro.</a> Journal of Environmental Entomology. 11 (1), 31-35 (1989).</li>
<li>Xing, J. Q., Li, L. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rearing+of+an+egg+parasite+Anastatus+japonicus+Ashmead+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Entomologica+Sinica%22%5BJournal%5D)">Rearing of an egg parasite Anastatus japonicus Ashmead in vitro.</a> Acta Entomologica Sinica. 33 (2), 166-173 (1990).</li>
<li>Moreau, S. J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%22It+stings+a+bit+but+it+cleans+well%22%3A+Venoms+of+Hymenoptera+and+their+antimicrobial+potential%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Insect+Physiology%22%5BJournal%5D)">"It stings a bit but it cleans well": Venoms of Hymenoptera and their antimicrobial potential.</a> Journal of Insect Physiology. 59 (2), 186-204 (2013).</li>
<li>Moreau, S. J. M., Asgari, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Venom+proteins+from+parasitoid+wasps+and+their+biological+function%5BTitle%5D)+AND+%22Toxins%22%5BJournal%5D)">Venom proteins from parasitoid wasps and their biological function.</a> Toxins. 7 (7), 2385-2412 (2015).</li>
</ol>

De auteur heeft niets te onthullen en geen concurrerende financiële belangen.

Hier presenteren we een methode om gif uit T. dendrolimi te extraheren met behulp van kunstmatige gastheren. De belangrijkste punten in het experiment met het verzamelen van gif zijn als volgt. (1) Tijdens de bereiding moet T. dendrolimi snel worden verdoofd met een passende concentratie CO2 . Als de CO2 - concentratie te laag is, is deze onvoldoende om de Trichogramma snel te verdoven. Omgekeerd, als de concentratie te hoog is, kan Trichogramma afsterven, waardoo...

Sluipwespen zijn parasitaire vliesvleugelige insecten die belangrijke bronnen zijn voor biologische bestrijding1. Er is een grote verscheidenheid aan sluipwespen, met naar schatting meer dan 600.000 soorten2. De diversiteit van sluipwespen is veel groter dan die van andere giftige geleedpotigen, zoals slangen, kegelslakken, spinnen, schorpioenen en bijen. Gif is een belangrijke parasitaire factor bij sluipwespen. Voor succesvol parasitisme wordt gif in de gastheer geïnjecteerd, waardoor het gedrag, de immuniteit, de ontwikkeling en het metabolisme van de gastheer worden gemoduleerd. Bovendien vertoont het gif van sluipwespen een opmerkelijke diversiteit in zijn moleculaire structuren, doelen en functies, wat een weerspiegeling is van complexe co-evolutie met hun gastheren. Parasitair gif is dus een waardevolle en ondergewaardeerde hulpbron van actieve moleculen voor insectendodende of medische doeleinden4. In tegenstelling tot het gif van slangen, kegelslakken, spinnen, schorpioenen en bijen, kan sluipwespengif niet worden verzameld door directe stimulatie of elektrische stimulatie5. De huidige methode om sluipwespengif te extraheren is het ontleden van het gifreservoir. Sluipwespen zijn echter vaak klein en de dissectie van sluipwespen vereist hoge technische vaardigheden. Daarom, als we een manier kunnen vinden om het gif van sluipwespen efficiënt en gemakkelijk te verzamelen, zal het een grote hulp zijn om het gif van sluipwespen te onderzoeken.
Trichogramma (Hymenoptera: Trichogrammatidae) is een geslacht van sluipwespen uit de familie sluipwespen (~0,5 mm). Deze wespen behoren tot de meest gebruikte biologische bestrijdingsmiddelen, met name gericht op eieren van verschillende lepidoptera-plagen in zowel de landbouw als de bossen. T. dendrolimi, een van de meest gebruikte Trichogramma-soorten in China, is bijvoorbeeld op grote schaal toegepast om een verscheidenheid aan land- en bosbouwplagen te bestrijden, zoals Dendrolimus superans, Ostrinia furnacalis en Chilo suppressalis. Eerdere studies toonden aan dat Trichogramma-wespen hun eieren in kunstmatige gastheren konden injecteren7. Kunstmatige gastheren kunnen worden gemaakt met materialen zoals was8, agar9, Parafilm10 en plastic film11. De oplossing in kunstmatige gastheren die voldoende ovipositie voor Trichogramma induceert, kan eenvoudig zijn, zoals aminozuren of anorganische zouten12. Op basis van de eigenschap dat T. dendrolimi kunstmatige gastheren kan parasiteren, biedt deze studie een nieuwe methode om gif uit sluipwespen te extraheren met behulp van kunstmatige gastheren. Deze aanpak is gericht op het aanpakken van de tekortkomingen van lage opbrengst, lage zuiverheid en gevoeligheid voor verontreiniging in de huidige extractietechnieken. Door deze methode te gebruiken, kan een grote hoeveelheid zeer zuiver gif uit T. dendrolimi worden geëxtraheerd, wat voldoet aan de behoeften van wetenschappelijk onderzoek en screening van bioactieve moleculen voor insectendodende of medische doeleinden.

<table><tbody><tr><td>10 &mu;m Nylon Net</td><td>Millipore</td><td>NY1002500</td><td>Voor het filteren van de eieren</td></tr><tr><td>10% Polyvinyl alcohol</td><td>Aladdin</td><td>P139533</td><td>Voor het aantrekken&nbsp; T. dendrolimi&nbsp; om eieren te leggen</td></tr><tr><td>10% Sucrose water</td><td>Sinopharm Chemical Reagent&nbsp;</td><td>10021463</td><td>Voer Trichogramma dendrolimi</td></tr><tr><td>4x LDS loading buffer</td><td>Ace Hardware</td><td>B23010301</td><td>SDS-PAGE</td></tr><tr><td>Collectiebox</td><td>Deli</td><td>8555</td><td>Container voor T. dendrolimi parasitisme</td></tr><tr><td>Future PAGE&nbsp; 4&ndash;12% (12 wells)</td><td>Ace Hardware</td><td>J70236502X</td><td>SDS-PAGE</td></tr><tr><td>GenScript eStain L1 proteïnekleuringsapparaat</td><td>GenScript</td><td>L00753</td><td>SDS-PAGE</td></tr><tr><td>Glazen maalstaaf&nbsp;&nbsp;</td><td>Applygen</td><td>tb6268</td><td>Halfkringe vormen&nbsp;</td></tr><tr><td>L- Leucine</td><td>Solarbio</td><td>L0011</td><td>Kunstmatige gastheercomponenten</td></tr><tr><td>L-Histidine</td><td>Aladdin</td><td>A2219458</td><td>Kunstmatige gastheercomponenten</td></tr><tr><td>L-Phenylalanine</td><td>Solarbio</td><td>P0010</td><td>Kunstmatige gastheercomponenten</td></tr><tr><td>Mini-Centrifuges</td><td>Scilogex</td><td>D1008</td><td>Centrifuge</td></tr><tr><td>MOPS-SDS running buffer</td><td>Ace Hardware</td><td>B23021</td><td>SDS-PAGE</td></tr><tr><td>Omni-Easy Instant BCA-eiwitanalysekit</td><td>Shanghai Yamay Biomedical Technology&nbsp;</td><td>ZJ102</td><td>Voor schatting van de concentratie van het venom-eiwit</td></tr><tr><td>PCR-plaatindeling van 96 gaten</td><td>Thermo Fisher</td><td>AB1400L</td><td>Halfkringe vormen&nbsp;</td></tr><tr><td>Polyethyleen kunststoffolie</td><td>Suzhou Aopang Trading &nbsp;</td><td>001c5427</td><td>Kunstmatige eenkaart</td></tr><tr><td>Voorgekleurde kleurproteïnemarkering(10&ndash;180 kDa)</td><td>YiFeiXue Biotech</td><td>YWB007</td><td>SDS-PAGE</td></tr><tr><td>Rubberen band</td><td>Guangzhou qianrui biology science and technology</td><td>009</td><td>De kunststoffolie en de collectiebox strak zetten</td></tr><tr><td>Siliconen rubber septummat, 96-well, ronde gat</td><td>Sangon Biotech</td><td>F504416-0001</td><td>Halfkringe vormen&nbsp;</td></tr></tbody></table>

gif extraheren uit de sluipwesp trichogramma dendrolimi met behulp van een kunstmatige gastheer

Extracting Venom from the Parasitoid Wasp Trichogramma dendrolimi Using an Artificial Host

Sluipwespen zijn een diverse groep vliesvleugelige insecten die van onschatbare waarde zijn voor de biologische bestrijding van plagen. Om succesvol parasitisme te garanderen, injecteren sluipwespen gif in hun gastheren om de immuniteit van hun gastheren te onderdrukken, de ontwikkeling, het metabolisme en zelfs het gedrag van gastheren te moduleren. Met meer dan 600.000 geschatte soorten overtreft de diversiteit van sluipwespen die van andere giftige dieren, zoals slangen, kegelslakken en spinnen. Sluipwespengif is een onderbelichte bron van bioactieve moleculen met potentiële toepassingen in ongediertebestrijding en geneeskunde. Het verzamelen van sluipwespif is echter een uitdaging vanwege het onvermogen om directe of elektrische stimulatie te gebruiken en de moeilijkheid bij dissectie vanwege hun kleine formaat. Trichogramma is een geslacht van kleine (~0,5 mm) ei-sluipwespen die veel worden gebruikt voor de biologische bestrijding van lepidoptera-plagen in zowel de landbouw als de bossen. Hier rapporteren we een methode voor het extraheren van gif uit T. dendrolimi met behulp van kunstmatige gastheren. Deze kunstmatige gastheren worden gemaakt met polyethyleenfilm en aminozuuroplossingen en vervolgens geënt met Trichogramma-wespen voor parasitisme. Het gif werd vervolgens verzameld en geconcentreerd. Deze methode maakt de extractie van grote hoeveelheden Trichogramma-gif mogelijk, terwijl besmetting van andere weefsels veroorzaakt door dissectie wordt vermeden, een veelvoorkomend probleem in dissectieprotocollen voor gifreservoirs. Deze innovatieve aanpak vergemakkelijkt de studie van Trichogramma-gif en maakt de weg vrij voor nieuw onderzoek en mogelijke toepassingen.

De eiwitconcentratie van representatieve gifmonsters werd gemeten met behulp van de eiwittestkit, met de resultaten weergegeven in tabel 1. De resultaten toonden aan dat de concentratie van gifeiwit die met deze methode werd verzameld, varieerde van 0,35 μg/μL tot 0,46 μg/μL, terwijl de negatieve controle van de aminozuuroplossing slechts een eiwitconcentratie had van 0,03 μg/μL tot 0,05 μg/μL. De concentratie gifeiwit die met deze methode wordt verzameld, is veel hoger dan die van negatieve controle, wa...

Hier presenteren we een protocol voor het extraheren van gif uit Trichogramma dendrolimi met behulp van een kunstmatige gastheer gemaakt met polyethyleenfilm en aminozuuroplossing.

Gif extraheren uit de sluipwesp Trichogramma dendrolimi met behulp van een kunstmatige gastheer

Parasitoid wasps are a diverse group of hymenopteran insects that serve as invaluable resources for pest biocontrol. To ensure successful parasitism, ...

Het gebrek aan efficiënte methoden voor het extraheren van gif beperkt vaak het onderzoek naar het gif van sluipwespen, vooral bij kleine sluipwespen. Deze studie biedt een efficiënte methode om het gif van Trichogramma te extraheren met follow-up poststudie van Trichogramma-gif, zoals de eiwitcompensatie en de analyse van de giffunctie. Voorheen was er geen methode voor het uitwisselen van sluipwespengif die het onderscheid van de gifreserve vereiste.Sluipwespen zijn echter klein. Niet alleen zijn de technische vereisten voor het onderscheiden van gif hoog, maar voortzetting van andere weefsels tijdens dissectie is ook gebruikelijk. Onze normale methode maakt gebruik van een kunstmatige gastheer, waardoor dergelijke problemen worden vermeden.In de toekomst zullen we ons richten op de landbouw en de medische toepassingen van Trichogramma-gif. We streven ernaar om specifieke insectendodende gifgenen te gebruiken voor ongediertebestrijding. Ondertussen zijn we van plan om het onbenutte potentieel van Trichogramma-gif in methodologie te onderzoeken, met name het toekomstige nut ervan bij het verbeteren van immunotherapietechnieken en bij de ontdekking van nieuwe antibioticamoleculen.

extracting-venom-from-parasitoid-wasp-trichogramma-dendrolimi-using

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Biochemie

Sluipwesp (parasitaire) wespen vormen een belangrijke klasse van natuurlijke vijanden van veel insecten...

Een inleiding tot sluipwespen van<em&gt; Drosophila</em&gt; En de Antiparasite immuunrespons

Dit artikel geeft een protocol voor de winning van gif van spinnen met behulp van elektrische stimulatie om 1) uitvoeren van proteomics karakterisering, 2) het stimuleren van gifklier genexpressie, en 3) uitvoeren van functionele studies van vergiften. Daarna volgt een omschrijving van gifklier microdissections genexpressie studies.

Extractie van Venom en Venom Gland Microdissections van Spinnen voor proteoom en transcriptoom Analyses

Microinjection van Nasonia vitripennis embryo's is een essentiële methode voor het genereren van de wijzigingen van het erfelijk genoom. Hier beschreven is een gedetailleerde procedure voor microinjection en transplanteren van Nasonia vitripennis embryo's, die toekomstige genoom manipulatie in dit organisme aanzienlijk zal vergemakkelijken.

Embryo Microinjection en transplantatie techniek voor Nasonia vitripennis genoom manipulatie

Hoewel veel insecten in de onderorde Wantsen (Insecta: Hemiptera) zijn giftig, de samenstelling van hun gif en de functies van hun vergift toxinen zijn meestal onbekend. Dit protocol wordt beschreven methoden om te heteropteran boosdoeners voor verdere karakterisering, met behulp van elektrostimulatie, intimidatie en klier dissectie van de oogst.

Oogsten van Venom toxines uit Assassin insecten en andere Heteropteran insecten

Ganaspis brasiliensis - een larvale parasitoïde van Drosophila suzukii (een wereldwijde invasieve fruitgewasplaag) - is goedgekeurd of wordt overwogen voor introductie in Europa en de Verenigde Staten voor biologische bestrijding van deze plaag. Dit artikel geeft protocollen voor zowel kleinschalige als grootschalige opfok van deze parasitoïde.

Methoden voor het fokken van de parasitoïde Ganaspis brasiliensis, een veelbelovend biologisch bestrijdingsmiddel voor de invasieve Drosophila suzukii

De manipulatie van RNA-interferentie (RNAi) vormt een formidabele uitdaging bij veel sluipwespen met een kleine grootte, zoals Trichogramma-wespen . Deze studie schetste een efficiënte RNAi-methode in Trichogramma denrolimi. De huidige methodologie biedt een robuust model voor het onderzoeken van genregulatie in Trichogramma-wespen .

RNA-interferentie in de ei-sluipwesp, Trichogramma dendrolimi Matsumura

Het doel van dit protocol is het faciliteren van functionele analyse van parasitoïde-gastheerinteracties in Asobara japonica en Drosophila melanogaster. Door geoptimaliseerde kweekmethoden, een infectietest met één eicel en RNAi-gemedieerde gen-knockdown.

Protocollen voor efficiënte opvoeding en functionele analyse van de endoparasitoïde wesp Asobara japonica en haar gastheer Drosophila melanogaster

We presenteren richtlijnen voor het ontwikkelen van synthetische 'chemische transducers' die communicatie kunnen induceren tussen van nature niet-verwante eiwitten. Daarnaast worden gedetailleerde protocollen gepresenteerd voor het synthetiseren en testen van een specifieke 'transducer' die een groeifactor in staat stelt om een ontgiftingsenzym te activeren en bijgevolg de splitsing van een antikanker prodrug te reguleren.

Nabootsen van de Functie van de signaaleiwitten: Toward Kunstmatige Signaaltransductie Therapy

We presenteren de opstelling en experimentele procedure om smFRET-gegevens te verkrijgen van grote donor-acceptor-netwerken met een TIRF-microscoop. De stapsgewijze analyse van deze metingen met de Bayesiaanse inferentiesoftware Fast-NPS levert hoog opgeloste structurele informatie op via de toepassing van aangepaste kleurstofmodellen.

Structurele Informatie van Single-molecule FRET experimenten met de Fast Nano-positioneringssysteem

We zijn erin geslaagd een methode te ontwikkelen voor RNA-isolatie uit plantenzaden die grote hoeveelheden oliën, eiwitten en polyfenolen bevatten, die remmende effecten hebben op RNA-isolatie met hoge zuiverheid. Onze methode is geschikt voor het monitoren van de expressie van genen met transcripten op laag niveau in zaden.

Een efficiënte methode voor het isoleren van zeer gezuiverde RNA uit zaden voor gebruik in Quantitative Analysis Transcriptome

Leer een efficiënte methode voor gifextractie uit de sluipwesp Trichogramma dendrolimi met behulp van een kunstmatige gastheer. Dit protocol verbetert de onderzoeksmogelijkheden naar gifcompositie en functie.

Gif extraheren uit de sluipwesp Trichogramma dendrolimi met behulp van een kunstmatige gastheer

Meer video's verkennen