Een aangepaste methode voor intrathecale katheterisatie bij ratten

Intrathecale katheterisatie is op grote schaal toegepast in dierproeven, vooral die op neuropathische pijn. De traditionele methoden hebben echter nog steeds verschillende beperkingen. Hoewel sommige onderzoekers hebben geprobeerd de traditionele methoden te verbeteren, moeten de beschikbare methoden nog worden aangepast.

Hierin introduceren we een aangepaste methode voor intrathecale katheterisatie bij ratten die een eenvoudige, handige en betrouwbare benadering vertegenwoordigt voor herhaalde intrathecale toediening van geneesmiddelen. Bereid een 15 centimeter lange PE10 buis voor. Steek een 20 centimeter lange roestvrijstalen draad met twee gepolijste uiteinden als steun in de PE10-buis en markeer de buis op twee centimeter van het ene uiteinde.

Knip de scherpe punt van een naald van 22 G af en sluit het distale uiteinde af met een pincet. Snijd een epidurale katheter in stukjes van een centimeter. Steek vervolgens deze fragmenten in de 22G-naald zonder scherpe punt en sluit het distale uiteinde af met een verwarmde rechte pincet.

Dit apparaat werd de buisafdichtingsdop genoemd. Maak met een schaar een anti-allergische band van 0,3 centimeter maal 0,5 centimeter. Bereid de instrumenten voor op intrathecale katheterisatie, die vóór de operatie is gesteriliseerd.

Inclusief getande pincet, schaar, een maagsonde, een scalpelhandvat en mesjes nummer 10. Steriliseer de PE10-buis en de voerdraad gedurende ongeveer twee uur met ethanol. Verdoof ratten met 3%isofluraan met een debiet van drie liter per minuut.

Leg een rat op de operatietafel en de achterpoot werd met een tang afgeknipt. De afwezigheid van beweging van de achterpool als reactie op stimulatie bevestigde succesvolle anesthesie. Adequate en analgesie werd toegediend door intramusculaire injectie van één milligram per kilogram meloxicam vóór intrathecale katheterisatie.

Verwijdert het haar op de lumbale wervelkolom van de rug en op het gebied tussen twee oren met een scheerapparaat. Plaats een centrifugebuisje onder de buik van de rat bij de tailleheupovergang. Steriliseer de operatieplaatsen driemaal met een povidonejodine-oplossing en een ethanoloplossing.

Bedek de rat met aseptisch verband en leg de operatieplaatsen bloot. En was vervolgens voor de operatie met een normale zoutoplossing. Bepaal de locatie van de tussenwervelruimte tussen L5 en L6 door de processus spinalis van L6 in het midden tussen de linker en de rechter bilaterale darmbeenkammen te lokaliseren.

Fixeer de huid met de linkerduim en de wijsvinger van de operator en maak vervolgens een incisie van drie tot vier centimeter lang in de middellijn net boven de processus spinosus tussen L4 en S1. Scheid de onderhuidse weefsels botweg met een schaar. Lokaliseer de tussenwervelruimte tussen L5 en L6 opnieuw. Klem en til de processus L5 dorsaal op met een getande tang om de tussenwervelruimte uit te breiden.

Vervolgens scheidt botweg de spieren rond het wervellichaam met een schaar in de bovenkant van de L6 dorsale processus werd volledig blootgesteld. Wanneer de processus L5 dorsaal wordt opgetild met een getande tang en de tussenwervelruimte wordt uitgebreid met een andere pincet, reinigt u de L5 tot zes tussenwervelruimte met een watje totdat het omgekeerde V-gebied volledig bloot ligt. Prik de wervelkolom met een 23G-naald in het omgekeerde V-gebied, net onder de bovenkant van de processus L6 dorsaal.

Steek de PE10-buis met roestvrijstalen draad voorzichtig in een wervelkanaal op de prikplaats, 30 graden gekanteld in de richting van de staart. De insteekhoek werd aangepast totdat de PE10-buis zonder enige weerstand met succes kon worden ingebracht. Wanneer het gemarkeerde gebied van de PE10-buis de achterste spier bereikt, wordt de katheterisatie gestopt.

Verwijdert langzaam de roestvrijstalen draad van de PE10-buis en sluit vervolgens de PE10-buis aan op een spuit, waardoor 20 microliter normale zoutoplossing wordt geïnjecteerd. Na verwijdering van de spuit kan er continu zoutoplossing uit de PE10-buis zijn gestroomd, wat aangeeft dat de PE10-buis met succes in de subarachnoïdale ruimte is ingebracht. Zodra is bevestigd dat de PE10 twee onbelemmerd is, hecht u de spieren aan één kant van het wervellichaam met een hechting van vier nul en maakt u een knoop.

Bind vervolgens de hechtdraad om de PE10-buis en maak nog een knoop. Snijd niet in de hechtdraad en de hechting in de spieren aan de andere kant. Bind de hechtdraad weer om de PE10-buis.

Maak een derde knoop en snijd de hechtdraad door. Maak een incisie van 0,5 centimeter lang op een centimeter net onder het middelpunt tussen de oren. Scheid de onderhuidse weefsels botweg met een schaar.

En steek de metalen sondebuis door de incisie naar de staart. Totdat de punt zichtbaar is in de lumbale incisie. Steek het distale uiteinde van de PE10-slang in de sondebuis totdat de PE10-slang het andere uiteinde van de sondebuis verlaat.

Trek vervolgens voorzichtig de maagsonde terug. Wanneer is bevestigd dat de PE10-buis weer vrij is, hecht u de resterende spieren rond de lumbale incisie met een hechting van vier nul. Bind de hechtdraad om de PE10-buis en maak nog een knoop.

Bevestig de PE10-buis opnieuw. Hecht de huid, vermijd schade aan de PE10-buis en hecht vervolgens de nekhuid met een hechting van vier nul. Bind de hechtdraad om de PE10-buis en maak een knoop om de PE10-buis te bevestigen.

Zodra de PE10-buis weer onbelemmerd is bevestigd, sluit u het extracorporale uiteinde van de PE10-buis af met een afsluitdop. De PE10-buis werd gedroogd met een stuk tissue en er werd meerdere keren een anti-allergische band om de PE10-buis geknoopt om te voorkomen dat de PE10-buis werd teruggetrokken tijdens bewegingen van de rat. Na de operatie brengt u de rat terug in zijn kooi en houdt u hem nauwlettend in de gaten tijdens het herstel van de narcose totdat hij weer bij bewustzijn komt.

Nadat de rat volledig wakker is, verwijdert u de afsluitdop en injecteert u 20 microliter 2%lidocaïne in de PE10-buis met een snelheid van 0,2 microliter per seconde via een Hamilton-spuit, gevolgd door de injectie van 10 microliter normale zoutoplossing. Sluit de PE10 buis af met een afsluitdop. Zet een rat op tafel en observeer zorgvuldig.

Verlamming van de onderste ledematen na intrathecale injectie van lidocaïne duidt op een succesvolle katheterisatie. Verlamming van de achterpoten duurt meestal ongeveer 30 minuten. Houd de rat nauwlettend in de gaten tijdens de herstelperiode tot volledig herstel van de ledemaatfunctie.

Volledige dwarslaesie van beide onderste ledematen van de ratten na intrathecale verbanning van lidocaïne duidde op een succesvolle katheterisatie. Vergelijking van de mate van succesvolle katheterisatie tussen onze aangepaste methoden en de eerder gerapporteerde methode. Het percentage succesvolle intrathecale katheterisatie voor onze gewijzigde methode was 95%, wat hoger was dan het percentage van 88% dat werd bereikt met de methode gerapporteerd door Hou et al.

Vergelijking van het percentage langdurig verblijfskatheters tussen onze gewijzigde methode en de eerder gerapporteerde methode. Het percentage langdurig verblijfskatheters op dag twee, vijf en zeven na intrathecale katheterisatie was respectievelijk 94%, 81% en 65%, in een onderzoek van Storkson et al. Het percentage langdurig verblijfskatheters twee, vijf en zeven dagen na intrathecale katheterisatie was respectievelijk 95%90% en 85% voor onze methode.

Concluderend kan de gewijzigde methode voor intrathecale katheterisatie dienen als een nuttig hulpmiddel voor de repetitieve intrathecale en toediening van geneesmiddelen en een eenvoudige, handige en betrouwbare manier zijn om de duur van de experimenten te verkorten.