Name: Nat afschuinen van micro-injectienaalden met behulp van constante luchtdruk voor feedback over het openen van de naald (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-09-27T13:20:00.000+00:00
Duration: 6 min
Description: Leer een pneumatische afschuiningstechniek voor micro-injectienaalden met constante luchtdruk. Deze methode garandeert consistente scherpte en nauwkeurige controle over de naaldopening voor genetisch onderzoek bij insecten.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Protocol voor het nat afschuinen van micro-injectienaalden onder constante luchtdruk

<ol><li>Rubin, G. M., Spradling, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+transformation+of+Drosophila+with+transposable+Element+Vectors%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Genetic transformation of Drosophila with transposable Element Vectors.</a> Science. 218 (4570), 348-353 (1982).</li>
<li>O'Brochta, D. A., Atkinson, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transformation+systems+in+insects%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Transformation systems in insects.</a> Methods Mol Biol. 260, 227-254 (2004).</li>
<li>Handler, A. M., James, A. A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHandler%2C+AM+%22Insect+Transgenesis%3A+Methods+and+Applications%22">Insect Transgenesis: Methods and Applications</a>. , CRC Press. Boca Rato. (2000).</li>
<li>Harrell, R. A. Mosquito embryo microinjection. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHarrell%2C+RA+%22Cold+Spring+Harbor+Protocols%22">Cold Spring Harbor Protocols</a>. , 10.1101/pdb.prot107686 (2023).</li>
<li>Allen, M. L., O'Brochta, D. A., Atkinson, P. W., Levesque, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stable%2C+germ-line+transformation+of+Culex+Quinquefasciatus+%28Diptera%3A+Culicidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Entomol%22%5BJournal%5D)">Stable, germ-line transformation of Culex Quinquefasciatus (Diptera: Culicidae).</a> J Med Entomol. 38 (5), 701-710 (2001).</li>
<li>Grossman, G. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Germline+transformation+of+the+malaria+vector%2C+Anopheles+gambiae%2C+with+the+piggyBac+transposable+element%5BTitle%5D)+AND+%22Insect+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Germline transformation of the malaria vector, Anopheles gambiae, with the piggyBac transposable element.</a> Insect Mol Biol. 10 (6), 597-604 (2001).</li>
<li>Adelman, Z. N., Jasinskiene, N., James, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+applications+of+transgenesis+in+the+yellow+fever+mosquito%2C+Aedes+aegypti%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Biochem+Parasitol%22%5BJournal%5D)">Development and applications of transgenesis in the yellow fever mosquito, Aedes aegypti.</a> Mol Biochem Parasitol. 121 (1), 1-10 (2002).</li>
<li>Perera, O. P., Harrell, R. A., Handler, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Germ-line+transformation+of+the+South+American+malaria+vector%2C+Anopheles+albimanus%2C+with+a+piggyBac%2FEGFP+transposon+vector+is+routine+and+highly+efficient%5BTitle%5D)+AND+%22Insect+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Germ-line transformation of the South American malaria vector, Anopheles albimanus, with a piggyBac/EGFP transposon vector is routine and highly efficient.</a> Insect Mol Biol. 11 (4), 291-297 (2002).</li>
<li>Harrell, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mosquito+embryo+microinjection+under+halocarbon+oil+or+in+aqueous+solution%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harb+Protoc%22%5BJournal%5D)">Mosquito embryo microinjection under halocarbon oil or in aqueous solution.</a> Cold Spring Harb Protoc. , 10.1101/pdb.prot108203 (2023).</li>
<li>Louradour, I., Ghosh, K., Inbar, E., Sacks, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CRISPR%2FCas9+mutagenesis+in+Phlebotomus+papatasi%3A+The+immune+deficiency+pathway+impacts+vector+competence+for+Leishmania+major%5BTitle%5D)+AND+%22mBio%22%5BJournal%5D)">CRISPR/Cas9 mutagenesis in Phlebotomus papatasi: The immune deficiency pathway impacts vector competence for Leishmania major.</a> mBio. 10 (4), e01941(2019).</li>
<li>Tamura, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Germline+transformation+of+the+silkworm+Bombyx+mori+L.+using+a+piggyBac+transposon-derived+vector%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Germline transformation of the silkworm Bombyx mori L. using a piggyBac transposon-derived vector.</a> Nat Biotechnol. 18 (1), 81-84 (2000).</li>
<li>BV-10 Micropipette Beveler Operation Manual Rev. 3.00. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.manualslib.com/manual/2073788/Sutter-Instrument-Bv-10.html">https://www.manualslib.com/manual/2073788/Sutter-Instrument-Bv-10.html</a> (2018).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1.0 mm O.D. microcapillaries</td><td>World Precision Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Beveler pedestal oil</td><td>Sutter Instruments</td><td>008</td><td></td></tr><tr><td>Bicycle fender clip</td><td>VeloOrange</td><td>R-clip 4-pack</td><td>https://velo-orange.com/products/vo-r-clip-4-pack</td></tr><tr><td>Boom Stand Microscope</td><td>AmScope</td><td></td><td>AMScope 3.5X-90X Trinocular LED Boom Stand Stereo Microscope of gelijkwaardig</td></tr><tr><td>BV-10 Beveler</td><td>Sutter Instruments</td><td>BV-10</td><td></td></tr><tr><td>Diamond abrasive plate&nbsp;</td><td>Sutter Instruments</td><td>104F</td><td>Diamant slijpplaat - extra fijn (0,2 &micro; tot 1,0 &micro; puntgroottes)</td></tr><tr><td>Gasket, Buna-N</td><td>Clippard Instrument Laboratory, Inc.</td><td>11761-2-pkg</td><td>Wordt gebruikt om de verbinding te verzegelen op T&nbsp; of L connectoren, indien niet al inbegrepen bij deze onderdelen</td></tr><tr><td>Hose Clamp</td><td>Clippard Instrument Laboratory, Inc.</td><td>5000-2-pkg</td><td></td></tr><tr><td>Hose connector</td><td>Clippard Instrument Laboratory, Inc.</td><td>CT4-pkg</td><td>Heeft 5 slangklemmen nodig</td></tr><tr><td>Microinjection Needle Holder</td><td>World Precision Instruments</td><td>MPH3-10</td><td>Naaldhouder voor microcapillairen met een buitendiameter van 1 mm</td></tr><tr><td>P-2000</td><td>Sutter Instruments</td><td></td><td>Elke naaldtrekker</td></tr><tr><td>Photo-Flo 200 Solution</td><td>B&amp;H Photo, Video and Audio</td><td>BH #KOPF200P&nbsp; MFR #1464510</td><td>bevochtigingsmiddel</td></tr><tr><td>Pressure Gauge</td><td>Clippard Instrument Laboratory, Inc.</td><td>PG-100</td><td>0-100 psi meter</td></tr><tr><td>Reference wick</td><td>Sutter Instruments</td><td>X050300</td><td></td></tr><tr><td>Reference wick holder</td><td>Sutter Instruments</td><td>M100019</td><td></td></tr><tr><td>Regulator</td><td>Clippard Instrument Laboratory, Inc.</td><td>01-Mar</td><td>Heeft #10-32 poorten nodig voor verbindingen</td></tr><tr><td>Rubber Packing Sheet 6 inx 6 in</td><td>Danco</td><td>Model # 59849</td><td></td></tr><tr><td>T fitting</td><td>Clippard Instrument Laboratory, Inc.</td><td>15002-2-pkg</td><td></td></tr><tr><td>Threaded Bar</td><td></td><td></td><td>Ofwel een draadstaaf of staaf met draadverbinding. Draden moeten 10-32 zijn.</td></tr><tr><td>Urethane tubing</td><td>Clippard Instrument Laboratory, Inc.</td><td>URH1-0804-BLT-050</td><td></td></tr></tbody></table>

nat afschuinen van micro-injectienaalden met behulp van constante luchtdruk voor feedback over het openen van de naald

Wet Beveling of Microinjection Needles Utilizing Constant Air Pressure for Feedback on Needle Opening

Nat afschuinen van micro-injectienaalden met behulp van constante luchtdruk voor feedback over het openen van de naald

Microinjection needles are a critical tool in the delivery of genome modification reagents, CRISPR components (guide RNAs, Cas9 protein, and donor ...

wet-beveling-microinjection-needles-utilizing-constant-air-pressure

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

Source: Poland, R. et al. Rodent Brain Microinjection to Study Molecular Substrates of Motivated Behavior. J. Vis. Exp. (2015)In this video, a water-filled microinjection setup consisting of a syringe and microinjector tubing is used for precise drug delivery. A rat with a pre-implanted guide cannula undergoes targeted brain microinjection, enabling accurate administration of therapeutic agents in awake animals with minimal tissue damage.

Microinjection-Based Delivery of a Therapeutic Agent into an Awake Rodent Brain

Source: Vanegas, M. I., et al. Microinjectrode System for Combined Drug Infusion and Electrophysiology. J. Vis. Exp. (2019)This video demonstrates a microelectrode-based microfluidic device that delivers drug solution through a capillary tube, using an oil-based marker solution for precise volume tracking and enabling simultaneous neural recording and drug infusion.

Microfluidic-Based Microinjectrode System for Combined Drug Infusion and Electrophysiology

Source: Paolone, G., et al. Personalized Needles for Microinjections in the Rodent Brain. J. Vis. Exp. (2018).This video demonstrates a rodent brain microneedle injection using a quartz microneedle with holes. The microneedle is attached to a syringe and micropump to control the delivery rate. The needle with the injection solution is inserted into the brain with the delivery speed set at low. Once positioned, the delivery speed is increased. The needle is withdrawn after a brief pause.

Rodent Brain Microinjection Using a Quartz Microneedle

Knaagdieren zijn een geschikt model om de moleculaire substraten van gedrag en complexe psychiatrische stoornissen te onderzoeken. Hersenmicro-injectie bij wakkere knaagdieren kan worden gebruikt om ziekte-substraten te verduidelijken. Een efficiënte en aanpasbare hersenmicro-injectiemethode evenals de uitvoering van een operante paradigma dat motivatie kwantificeert wordt gepresenteerd.

Knaagdieren Brain Micro-injectie om te studeren Molecular substraten van gemotiveerd gedrag

Hier beschrijven we een protocol voor microinjection in de knaagdier hersenen die gebruikmaakt van kwarts naalden. Deze naalden niet produceren detecteerbare weefselschade en zorgen voor betrouwbare levering zelfs in diepe regio's. Bovendien, zij kunnen worden aangepast aan de behoefte aan onderzoek door gepersonaliseerde designs en opnieuw kunnen worden gebruikt.

Gepersonaliseerde naalden voor Microinjections in de hersenen knaagdier

We beschrijven hoe micro- en photomanipulation technieken zoals FRAP en photoactivation inschakelen de bepaling van de parameters van de beweeglijkheid en de spatio dynamiek van eiwitten in het migreren van cellen. Experimentele uitlezingen omvatten subcellular dynamiek en omzet van beweeglijkheid toezichthouders of van de onderliggende actine cytoskelet.

Micromanipulation technieken waardoor analyse van morfogenetische dynamiek en een omzet van Cytoskeletal regelgevers

De zebravis is een modelsysteem dat heeft veel waardevolle eigenschappen met inbegrip van optische helderheid, snelle externe ontwikkeling, en, met name van belang op het gebied van gehoor en evenwicht extern gelegen zintuiglijke haarcellen. Dit artikel schetst hoe transgene zebrafish kan worden gebruikt voor de gehaltebepaling van zowel de Haarcel mechanosensation en de presynaptische functie in toto.

In Vivo Calcium beeldvorming van dwarslijn haarcellen in larvale zebravis

We presenteren een microinjectrode systeem ontworpen voor elektrofysiologie en geassisteerde levering van experimentele sondes (dat wil zeggen, nano sensoren, micro-elektroden), met optionele drug Infusion. Op grote schaal beschikbare microfluïdische componenten worden gekoppeld aan een canule met de sonde. Een stap-voor-stap protocol voor de microinjectrode constructie is inbegrepen, met resultaten tijdens infusie van muscimol in de makaak cortex.

Microinjectrode systeem voor gecombineerde geneesmiddel infusie en elektrofysiologie

CRISPR/Cas9 wordt steeds vaker gebruikt om genfunctie in niet-modelorganismen te karakteriseren. Dit protocol beschrijft hoe knock-out lijnen van Culex pipienste genereren, van het bereiden van injectiemengsels tot het verkrijgen en injecteren van muggenembryo's, evenals hoe geïnjecteerde muggen en hun nakomelingen op te wekken, te kruisen en te screenen op gewenste mutaties.

Embryo's van Culex-muggen voorbereiden en injecteren om null-mutaties te genereren met CRISPR/Cas9

Hier laten we zien cytoplasmatische micro-injectie...

Micro-injectie van de Xenopus laevis Eicellen

Leer een pneumatische afschuiningstechniek voor micro-injectienaalden met constante luchtdruk. Deze methode garandeert consistente scherpte en nauwkeurige controle over de naaldopening voor genetisch onderzoek bij insecten.

Nat afschuinen van micro-injectienaalden met behulp van constante luchtdruk voor feedback over het openen van de naald

Meer video's verkennen