2 augustus 2024
Hier presenteren we een protocol voor het bestuderen van orthodontische tandbeweging (OTM), dat dient als een geschikt model voor het onderzoeken van de mechanismen van botaanpassing, wortelresorptie en de reactie van botcellen op mechanische stimuli. Deze uitgebreide gids biedt gedetailleerde informatie over het OTM-model, het verkrijgen van microcomputertomografie en de daaropvolgende analyse.
Het eerste doel van dit onderzoek is het analyseren van maxillaire botremodellering en vervolgens op resorptie als reactie op farmacologische stimuli of het gebruik van transgene Deze studie heeft tot doel de weg vrij te maken voor toekomstige therapeutische strategieën om botverlies geassocieerd met botremodellering te moduleren. Recente ontwikkelingen zijn onder meer de analyse van het moleculair ontwerp om het verlies van sterfte door botmassa te voorkomen of te behandelen. Deze innovatie is gericht op het verbeteren van tandheelkundige behandelingen, betrokken structuren zoals orthodontie en tandheelkundige implantaten.
De technologieën die momenteel worden gebruikt om het onderzoek in ons vakgebied vooruit te helpen, zijn onder meer het gebruik van genetisch gemodificeerde dieren, het automatiseren van macrotomografie-analyse, vooruitgang in veertechnologie en ontwikkelingen in materialen voor tanddescriptoren. Deze procedure wordt uitgevoerd onder anesthesie met de positie van de muis in een operatietafel en ondersteund door microscopie voor nauwkeurigheid. Oestrogeendeficiëntie, zoals waargenomen bij osteoporose, is in verband gebracht met een verhoogde remodellering van het maxillaire bot.
Toekomstig onderzoek zou het potentieel van moleculen zoals fosfaatkinase en dioxygenase 1 kunnen onderzoeken, als therapieën gericht op osteoclastische enzymen. Dit zijn strategieën die gericht zijn op het verbeteren van de bescherming van osteo's onder omstandigheden van mechanische belasting. Gebruik om te beginnen een distaal gesneden tang om de nikkel-titanium open spiraalveer van 0.25 bij 0.76 inch in zes lussen te snijden, met twee lusvormige uiteinden die loodrecht op de veer zijn geplaatst, met behulp van een orthodontische Weingart-tang.
Vorm de ronde chroomnikkeldraad met een diameter van 0,20 millimeter tot de gewenste configuratie met lusvormige uiteinden met behulp van een Matthew-pincet en een rond gevormd instrument als maatreferentie. Zet de lusvormige uiteinden van de spoel en de 0,20 millimeter ronde chroomnikkeldraad in elkaar. Evalueer na het verdoven van de muis de diepte van de anesthesie met behulp van de pedaalreflex.
Plaats de muis in een dorsale decubituspositie op een operatietafel, waarbij u zijn ledematen immobiliseert om de beweging te beperken en intra-orale toegang mogelijk te maken. Gebruik een mondopener, gemaakt van een draad met een diameter van 0,50 millimeter en vastgezet met een draad van 0,08 millimeter om volledige visualisatie te vergemakkelijken en tegelijkertijd hoofdbewegingen te voorkomen. Observeer onder een stereomicroscoop de intra-orale structuren.
Reinig en ets de juiste eerste kies en snijtanden met respectievelijk aceton en een zelfetsende primer. Verzamel met een microborstel een kleine hoeveelheid zelfetsende primer. En breng het aan op het occlusale oppervlak van de bovenste eerste kies.
Laat de primer op het occlusale oppervlak van kiezen en snijtanden gedurende 30 seconden uitharden. Verbind met behulp van lichtuitgeharde hars het distale uiteinde van een open spiraalveer van nikkel-titanium met zes lussen aan het occlusale oppervlak van de rechter eerste maxillaire kies. En lichtuitharding gedurende 30 seconden.
Activeer de spoel met behulp van een speciaal ontworpen apparaat met een rail en een slingermechanisme dat aan de operatietafel is bevestigd. Sluit het vrije lusvormige uiteinde van de ronde draad van 0,20 millimeter aan op de haak van de spanningsmeter. Beweeg na activering van de slinger de operatietafel langs de rail totdat de dynamometer een kracht van 0.35 newton registreert.
Bevestig de ronde draad van 0,20 millimeter aan beide bovenste snijtanden om de spoel te verankeren. Knip de draad door om de muis los te koppelen van de dynamometer. Voeg nog een hoeveelheid hars toe, zodat de metalen rand van het apparaat niet bloot komt te liggen en de muis pijn doet.
En lichtuitharding gedurende 30 seconden. Haal de muis van de tafel. Behandel de muis na de operatie met een zoutoplossing om uitdroging tijdens de aanpassingsperiode met het apparaat te voorkomen.
Oogst om te beginnen het kaakbeen van de geëuthanaseerde muis met een scherpe schaar door al het zachte weefsel af te knippen. Het jukbeen in het sagittale vlak en de fronton nasale hechting en spheno occipitale synchondrose in het coronale vlak. Fixeer het kaakbeen gedurende 48 uur in 10%-neutraal gebufferde formaline.
Om micro-CT-scans van het kaakbeen uit te voeren, gebruikt u een isotrope voxelgrootte van 9 tot 18 micrometer, röntgeninstellingen van 50 kilovolt, 0,5 millimeter aluminiumfilter en een rotatiehoek van 0,5 graden voor scans met hoge resolutie. Reconstrueer de verkregen beelden met behulp van het microtomografiereconstructieprogramma dat is aangegeven door de fabrikant van de gebruikte micro-CT. Om de orthodontische tandbeweging te kwantificeren, meet u het verschil in lineaire afstand tussen de cementglazuurovergang van de eerste en tweede molaren van de rechterhemi maxilla ten opzichte van de linker hemi maxilla.
Om de monsters te controleren op de aanwezigheid van orthodontisch geïnduceerde inflammatoire wortelresorptie, selecteert u met behulp van de handmatige contourmethode het interessegebied van de distovestibulaire wortel van de eerste maxillaire kies. Meet de dichtheid van de wortelmineralen en het percentage van het wortelvolume per totaal volume. Onderzoek van een orthodontisch tandbewegingsmuismodel met een uitgeoefende kracht van 0,35 newton toonde aan dat de gemiddelde afstand tussen de eerste en tweede molaren van cementglazuur aan de controlezijde 243,69 micrometer bedroeg.
Aan de kant van de orthodontische tandbeweging was de gemiddelde verbindingsafstand tussen cement en glazuur 284,66 micrometer.
Dit onderzoek presenteert een protocol voor het bestuderen van orthodontische tandverplaatsing (OTM) in een muismodel, met de nadruk op remodellering van het maxillaire bot en wortelresorptie als reactie op mechanische stimuli. Belangrijke bevindingen tonen de effectiviteit van dit model aan voor het analyseren van tandverplaatsing en het evalueren van potentiële therapeutische strategieën om botverlies te voorkomen.
Orthodontische tandverplaatsing (OTM) bij muizen biedt een robuust in vivo model voor het bestuderen van botremodeling-dynamiek onder gecontroleerde mechanische kracht, wat direct bijdraagt aan de validatie van targets in een vroeg stadium voor botadaptatieroutes. Kwantitatieve micro-CT-analyse van tandverplaatsing en wortelresorptie maakt nauwkeurige meting van biologische reacties mogelijk, wat de voorspellende betrouwbaarheid in translationeel botbiologisch onderzoek ondersteunt. Dit model is strategisch gepositioneerd voor de preklinische evaluatie van therapeutische interventies die gericht zijn op de activiteit van osteoclasten en osteoblasten.
Dit OTM-muismodel is geïntegreerd in het continuüm van ontdekking naar preklinische fase en slaat een brug tussen mechanistische studies en translationeel onderzoek naar botadaptatie en orthodontische interventies.