Name: Generatie en karakterisering van baarmoederorganoïden van ratten uit endometrium-epitheliale stamcellen van ratten (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-08-02T14:40:00.000+00:00
Duration: 5 min 12 s
Description: Leer hoe u baarmoederorganoïden genereert uit rattenendometrium-epitheliale stamcellen met behulp van collageenase en matrigel. Deze methode ondersteunt onderzoek naar vrouwelijke voortplantingsbiologie en geneesmiddelontwikkeling.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Jabbour, H. N., Kelly, R. W., Fraser, H. M., Critchley, H. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endocrine+regulation+of+menstruation%5BTitle%5D)+AND+%22Endocr+Rev%22%5BJournal%5D)">Endocrine regulation of menstruation.</a> Endocr Rev. 27 (1), 17-46 (2006).</li>
<li>Garcia-Alonso, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mapping+the+temporal+and+spatial+dynamics+of+the+human+endometrium+in+vivo+and+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Genet%22%5BJournal%5D)">Mapping the temporal and spatial dynamics of the human endometrium in vivo and in vitro.</a> Nat Genet. 53 (12), 1698-1711 (2021).</li>
<li>Li, M., Izpisua Belmonte, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoids+-+preclinical+models+of+human+disease%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Organoids - preclinical models of human disease.</a> N Engl J Med. 380 (6), 569-579 (2019).</li>
<li>Mulaudzi, P. E., Abrahamse, H., Crous, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insights+on+three+dimensional+organoid+studies+for+stem+cell+therapy+in+regenerative+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Rev+Rep%22%5BJournal%5D)">Insights on three dimensional organoid studies for stem cell therapy in regenerative medicine.</a> Stem Cell Rev Rep. 20 (2), 509-523 (2024).</li>
<li>Boretto, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+organoids+from+mouse+and+human+endometrium+showing+endometrial+epithelium+physiology+and+long-term+expandability%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Development of organoids from mouse and human endometrium showing endometrial epithelium physiology and long-term expandability.</a> Development. 144 (10), 1775-1786 (2017).</li>
<li>Turco, M. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term%2C+hormone-responsive+organoid+cultures+of+human+endometrium+in+a+chemically+defined+medium%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Long-term, hormone-responsive organoid cultures of human endometrium in a chemically defined medium.</a> Nat Cell Biol. 19 (5), 568-577 (2017).</li>
<li>Tempest, N., Maclean, A., Hapangama, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endometrial+stem+cell+markers%3A+current+concepts+and+unresolved+questions%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Endometrial stem cell markers: current concepts and unresolved questions.</a> Int J Mol Sci. 19 (10), 3240(2018).</li>
<li>He, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+maintenance+of+human+endometrial+epithelial+stem+cells+and+their+therapeutic+effects+on+intrauterine+adhesion%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Biosci%22%5BJournal%5D)">Long-term maintenance of human endometrial epithelial stem cells and their therapeutic effects on intrauterine adhesion.</a> Cell Biosci. 12 (1), 175(2022).</li>
<li>Katsuda, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conversion+of+terminally+committed+hepatocytes+to+culturable+bipotent+progenitor+cells+with+regenerative+capacity%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Conversion of terminally committed hepatocytes to culturable bipotent progenitor cells with regenerative capacity.</a> Cell Stem Cell. 20 (1), 41-55 (2017).</li>
<li>Murphy, A. R., Campo, H., Kim, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strategies+for+modelling+endometrial+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Strategies for modelling endometrial diseases.</a> Nat Rev Endocrinol. 18 (12), 727-743 (2022).</li>
<li>Boretto, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+organoids+from+endometrial+disease+capture+clinical+heterogeneity+and+are+amenable+to+drug+screening%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Patient-derived organoids from endometrial disease capture clinical heterogeneity and are amenable to drug screening.</a> Nat Cell Biol. 21 (8), 1041-1051 (2019).</li>
<li>Esfandiari, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endometriosis+organoids%3A+prospects+and+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Biomed+Online%22%5BJournal%5D)">Endometriosis organoids: prospects and challenges.</a> Reprod Biomed Online. 45 (1), 5-9 (2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Anti-CD15 (SSEA-1)</td><td>Abcam</td><td>ab135377</td><td>Konijn, 1:200 (IHC)</td></tr><tr><td>Anti-Estrogen Receptor alpha</td><td>Abcam</td><td>ab32063</td><td>Konijn, 1:200 (IHC)</td></tr><tr><td>Anti-pan Cytokeratin</td><td>Abcam</td><td>ab7753</td><td>Muis, 1:250 (IHC)</td></tr><tr><td>Anti-Progesterone Receptor</td><td>Abcam</td><td>ab101688</td><td>Konijn, 1:200 (IHC)</td></tr><tr><td>Anti-Ki67</td><td>Abcam</td><td>ab279653</td><td>Muis, 1:250 (IHC)</td></tr><tr><td>A8301</td><td>TargetMol</td><td>909910-43-6</td><td></td></tr><tr><td>&beta;-Estradiol</td><td>Merck</td><td>E8875</td><td></td></tr><tr><td>Cell Counting Kit-8</td><td>Beyotime</td><td>C0038</td><td></td></tr><tr><td>CD9</td><td>BioLegend</td><td>109819</td><td>1:20 (FC), Pacific Blue</td></tr><tr><td>CD24</td><td>BioLegend</td><td>101806</td><td>1:20 (FC), FITC</td></tr><tr><td>CD31</td><td>BioLegend</td><td>303120</td><td>1:20 (FC), APC</td></tr><tr><td>CD45</td><td>BioLegend</td><td>301703</td><td>1:20 (FC), PE</td></tr><tr><td>CHIR99021</td><td>TargetMol</td><td>CT99021</td><td></td></tr><tr><td>Cultrex Organoid Harvesting Solution</td><td>R&amp;D Systems</td><td>3700-100-01</td><td></td></tr><tr><td>Cy3 TSA Fluorescerend systeem Kit</td><td>APExBIO</td><td>K1051</td><td></td></tr><tr><td>Cy5 TSA Fluorescerend systeem Kit</td><td>APExBIO</td><td>K1052</td><td></td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Sigma</td><td>D9542</td><td>1 &mu;g/mL</td></tr><tr><td>DMEM/F-12</td><td>Invitrogen</td><td>11330032</td><td></td></tr><tr><td>EpCAM</td><td>BioLegend</td><td>369803</td><td>1:20 (FC), PerCP</td></tr><tr><td>Fluoresceïne TSA Fluorescerend systeem Kit</td><td>APExBIO</td><td>K1050</td><td></td></tr><tr><td>Geit anti-Konijn IgG, Alexa Fluor 488</td><td>Invitrogen</td><td>A-11008</td><td>1:500</td></tr><tr><td>Geit anti-Muis IgG, Alexa Fluor 555</td><td>Invitrogen</td><td>A-21422</td><td>1:500</td></tr><tr><td>Geit Anti-konijn IgG/HRP antilichaam</td><td>APExBIO</td><td>bs-0295G-HRP</td><td></td></tr><tr><td>Knockout serum vervanger</td><td>Invitrogen</td><td>10828028</td><td></td></tr><tr><td>Matrigel</td><td>Corning</td><td>356234</td><td></td></tr><tr><td>PrimeScript RT Master Mix</td><td>Takara</td><td>RR063A</td><td></td></tr><tr><td>Progesteron</td><td>Merck</td><td>57-83-0</td><td></td></tr><tr><td>Sprague-Dawley rat&nbsp;</td><td>Shanghai JieSiJie Laboratory Animals Co., LTD, China</td><td></td><td></td></tr><tr><td>SSEA-1</td><td>BioLegend</td><td>323047</td><td>1:20 (FC), APC</td></tr><tr><td>TB Green Fast qPCR Mix</td><td>Takara</td><td>RR820A</td><td></td></tr><tr><td>TriZOL</td><td>Invitrogen</td><td>15596026CN</td><td>RNA extractie</td></tr><tr><td>u-Slide 8-well platen</td><td>Ibidi</td><td>80827</td><td></td></tr><tr><td>Y27632</td><td>TargetMol</td><td>146986-50-7</td><td></td></tr><tr><td>qPCR primers van doelgenen&nbsp;</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Genen</td><td>Bedrijf</td><td>Sequenties</td><td></td></tr><tr><td>rat GAPDH F</td><td>Sangon biotech</td><td>GACATGCCGCCTGGAGAAAC</td><td></td></tr><tr><td>rat GAPDH R</td><td>Sangon biotech</td><td>AGCCCAGGATGCCCTTTAGT</td><td></td></tr><tr><td>rat Nanog F</td><td>Sangon biotech</td><td>GACTAGCAACGGCCTGACTCA</td><td></td></tr><tr><td>rat Nanog R&nbsp;</td><td>Sangon biotech</td><td>CTGCAATGGATGCTGGGATA</td><td></td></tr><tr><td>rat Sox2 F</td><td>Sangon biotech</td><td>ATTACCCGCAGCAAAATGAC</td><td></td></tr><tr><td>rat Sox2 R</td><td>Sangon biotech</td><td>ATCGCCCGGAGTCTAGTTCT</td><td></td></tr><tr><td>rat Oct4 F</td><td>Sangon biotech</td><td>CCCAGCGCCGTGAAGTTGGA</td><td></td></tr><tr><td>rat Oct4 R</td><td>Sangon biotech</td><td>ACCTTTCCAAAGAGAACGCCCA GG</td><td></td></tr></tbody></table>

generatie en karakterisering van baarmoederorganoïden van ratten uit endometrium-epitheliale stamcellen van ratten

Generation and Characterization of Rat Uterus Organoids from Rat Endometrial Epithelial Stem Cells

Generatie en karakterisering van baarmoederorganoïden van ratten uit endometrium-epitheliale stamcellen van ratten

Endometrial organoids offer valuable insights into the development and pathophysiology of endometrial diseases and serve as platforms for drug testing. ...

generation-characterization-rat-uterus-organoids-from-rat-endometrial

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

Een protocol voor het genereren van menselijke primaire endometriale organoïden die bestaan uit epitheliale en stromale cellen en behouden kenmerken van het inheemse endometrium weefsel wordt gepresenteerd. Dit protocol beschrijft methoden van uteriene weefsel verwerving tot de histologische verwerking van endometriale organoïden.

Generatie van multicellulaire humane primaire Endometriale Organoïden

Dit protocol beschrijft methodologieën om endometriumepitheelorganoïden van muizen vast te stellen voor genexpressie en histologische analyses.

Het vaststellen van 3D-endometriumorganoïden uit de baarmoeder van de muis

Hier presenteren we een protocol om darmorganoïden van ratten te genereren en deze te gebruiken in verschillende stroomafwaartse toepassingen. Ratten zijn vaak een geprefereerd preklinisch model, en het robuuste intestinale organoïdesysteem voorziet in de behoefte aan een in vitro systeem om in vivo studies te begeleiden.

Generatie en manipulatie van darmorganoïden van ratten

Generatie van de Mens CD40-geactiveerde B-cellen

Explantaten van de centrale regio van de rat lens epitheel synchroon te onderscheiden wanneer gekweekt in de aanwezigheid van FGF-2. Immunofluorescentie microscopie van dergelijke culturen kan verschaft nieuwe informatie over de genexpressie en signalering afspraken verbonden aan terminale differentiatie.

Voorbereiding en Cultuur van Rat Lens Epitheliale Explantaten voor het bestuderen van terminale differentiatie

Rat MSC's werden geïsoleerd uit dijbeen en dij-en vervolgens verrijkt door magnetische celsortering. Gesorteerde cellen werden bevestigd voor de expressie van de oppervlakte markers door flowcytometrie. Deze cellen werden ook gekweekt in klonale dichtheid aan enkele kolonies vormen en vervolgens deze kolonies werden van elkaar gescheiden door het klonen van cilinders.

Isolatie en Verrijking van Rat mesenchymale stamcellen (MSC&#39;s) en de scheiding van Single-kolonie Derived MSC&#39;s

Een snelle, robuuste manier van isoleren levensvatbare volwassen epitheliale stamcellen uit menselijke huid is beschreven. De methode maakt gebruik van enzymatische afbraak van de huid collageen matrix, gevolgd door het plukken van de haarfollikels en isolatie van single cell suspensies of weefsel fragmenten voor celkweek.

Isolatie en Cultuur van Volwassen epitheliale stamcellen uit menselijke huid

Primaire hepatocyten een waardevol hulpmiddel om biochemische, moleculaire en metabolische functies in een fysiologisch relevante experimentele systeem te evalueren. We beschrijven een betrouwbaar protocol voor rat in situ leverperfusie, die consequent levensvatbare hepatocyten genereert tot to1.0 ×...

Isolatie en Primaire Cultuur van Rat levercellen

Het genereren van geïnduceerde pluripotente stamcellen (IPSC) lijnen produceert lijnen van verschillende ontwikkelingspotentieel, zelfs als ze passeren standaard tests voor pluripotentie. Hier beschrijven we een protocol muizen volledig zijn verkregen uit iPSCs die de iPSC lijnen gedefinieerd als hebbende full pluripotentie...

Generatie van Muizen Afgeleid van geïnduceerde pluripotente stamcellen

Een eenvoudige werkwijze beschreven voor de inductie van epitheliale naar mesenchymale transitie (EMT) in verschillende celtypen. Methoden voor de analyse van cellen in EMT toestanden met immunocytochemie inbegrepen.

Inductie en analyse van epitheliale naar mesenchymale transitie

Leer hoe u baarmoederorganoïden genereert uit rattenendometrium-epitheliale stamcellen met behulp van collageenase en matrigel. Deze methode ondersteunt onderzoek naar vrouwelijke voortplantingsbiologie en geneesmiddelontwikkeling.

Generatie en karakterisering van baarmoederorganoïden van ratten uit endometrium-epitheliale stamcellen van ratten

Meer video's verkennen