Name: Larvale RNA-interferentie in zijderups Bombyx mori door Chitosan/dsRNA-afgifte van nanodeeltjes (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-10-04T14:55:00.000+00:00
Duration: 5 min 36 s
Description: Leer larvale RNA-interferentie in zijderupsen via chitosan/dsRNA-nanodeeltjes door voeding. Deze methode bereikt 79% gen-silencing en biedt een arbeidsbesparend alternatief voor injectie in genetisch onderzoek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Nanoparticle-gemedieerde dsRNA-voeding voor gen-uitschakeling in zijderupslarven

<ol><li>Xia, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+draft+sequence+for+the+genome+of+the+domesticated+silkworm+%28bombyx+mori%29%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">A draft sequence for the genome of the domesticated silkworm (bombyx mori).</a> Science. 306 (5703), 1937-1940 (2004).</li>
<li>Kawamoto, M., Kiuchi, T., Katsuma, S. Silkbase: An integrated transcriptomic and genomic database for bombyx mori and related species. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKawamoto%2C+M+%22Database+%28Oxford%29%22">Database (Oxford)</a>. 2022, (2022).</li>
<li>Yokoi, K., Tsubota, T., Jouraku, A., Sezutsu, H., Bono, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reference+transcriptome+data+in+silkworm+bombyx+mori%5BTitle%5D)+AND+%22Insects%22%5BJournal%5D)">Reference transcriptome data in silkworm bombyx mori.</a> Insects. 12 (6), (2021).</li>
<li>Mita, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+construction+of+an+est+database+for+bombyx+mori+and+its+application%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">The construction of an est database for bombyx mori and its application.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 100 (24), 14121-14126 (2003).</li>
<li>Zhou, Q. Z., Zhang, B., Yu, Q. Y., Zhang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bmncrnadb%3A+A+comprehensive+database+of+non-coding+rnas+in+the+silkworm%2C+bombyx+mori%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Bioinformatics%22%5BJournal%5D)">Bmncrnadb: A comprehensive database of non-coding rnas in the silkworm, bombyx mori.</a> BMC Bioinformatics. 17 (1), 370(2016).</li>
<li>Prasad, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silksatdb%3A+A+microsatellite+database+of+the+silkworm%2C+bombyx+mori%5BTitle%5D)+AND+%22Nucleic+Acids+Res%22%5BJournal%5D)">Silksatdb: A microsatellite database of the silkworm, bombyx mori.</a> Nucleic Acids Res. 33 (Database issue), D403-D406 (2005).</li>
<li>Ding, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rna-based+antiviral+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">Rna-based antiviral immunity.</a> Nat Rev Immunol. 10 (9), 632-644 (2010).</li>
<li>Yu, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delivery+of+dsRNA+for+RNAi+in+insects%3A+An+overview+and+future+directions%5BTitle%5D)+AND+%22Insect+Sci%22%5BJournal%5D)">Delivery of dsRNA for RNAi in insects: An overview and future directions.</a> Insect Sci. 20 (1), 4-14 (2013).</li>
<li>Liang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silencing+of+the+immune+gene+bmpgrp-l4+in+the+midgut+affects+the+growth+of+silkworm+%28bombyx+mori%29+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22Insect+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Silencing of the immune gene bmpgrp-l4 in the midgut affects the growth of silkworm (bombyx mori) larvae.</a> Insect Mol Biol. 32 (4), 340-351 (2023).</li>
<li>Tian, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+control+of+a+lepidopteran+pest+Spodoptera+exigua+by+ingestion+of+bacteria+expressing+dsrna+of+a+non-midgut+gene%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Developmental control of a lepidopteran pest Spodoptera exigua by ingestion of bacteria expressing dsrna of a non-midgut gene.</a> PLoS One. 4 (7), e6225(2009).</li>
<li>Kamath, R. S., Martinez-Campos, M., Zipperlen, P., Fraser, A. G., Ahringer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effectiveness+of+specific+rna-mediated+interference+through+ingested+double-stranded+rna+in+Caenorhabditis+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Genome+Biol%22%5BJournal%5D)">Effectiveness of specific rna-mediated interference through ingested double-stranded rna in Caenorhabditis elegans.</a> Genome Biol. 2 (1), RESEARCH0002(2001).</li>
<li>Arimatsu, Y., Kotani, E., Sugimura, Y., Furusawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+characterization+of+a+cdna+encoding+extracellular+dsrnase+and+its+expression+in+the+silkworm+Bombyx+Mori%5BTitle%5D)+AND+%22Insect+Biochem+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Molecular characterization of a cdna encoding extracellular dsrnase and its expression in the silkworm Bombyx Mori.</a> Insect Biochem Mol Biol. 37 (2), 176-183 (2007).</li>
<li>Liu, J., Swevers, L., Iatrou, K., Huvenne, H., Smagghe, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bombyx+mori+DNA%2Frna+non-specific+nuclease%3A+Expression+of+isoforms+in+insect+culture+cells%2C+subcellular+localization+and+functional+assays%5BTitle%5D)+AND+%22J+Insect+Physiol%22%5BJournal%5D)">Bombyx mori DNA/rna non-specific nuclease: Expression of isoforms in insect culture cells, subcellular localization and functional assays.</a> J Insect Physiol. 58 (8), 1166-1176 (2012).</li>
<li>Christiaens, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+rnai+efficacy+in+Spodoptera+exigua+via+the+formulation+of+dsrna+with+guanylated+polymers%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Physiol%22%5BJournal%5D)">Increased rnai efficacy in Spodoptera exigua via the formulation of dsrna with guanylated polymers.</a> Front Physiol. 9, 316(2018).</li>
<li>Dass, C. R., Choong, P. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+chitosan+formulations+in+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Microencapsul%22%5BJournal%5D)">The use of chitosan formulations in cancer therapy.</a> J Microencapsul. 25 (4), 275-279 (2008).</li>
<li>Zhang, X., Zhang, J., Zhu, K. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chitosan%2Fdouble-stranded+RNA+nanoparticle-mediated+RNA+interference+to+silence+chitin+synthase+genes+through+larval+feeding+in+the+African+malaria+mosquito+%28Anopheles+gambiae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Insect+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Chitosan/double-stranded RNA nanoparticle-mediated RNA interference to silence chitin synthase genes through larval feeding in the African malaria mosquito (Anopheles gambiae).</a> Insect Mol Biol. 19 (5), 683-693 (2010).</li>
<li>Zhang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chitosan%2Finterfering+rna+nanoparticle+mediated+gene+silencing+in+disease+vector+mosquito+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Chitosan/interfering rna nanoparticle mediated gene silencing in disease vector mosquito larvae.</a> J Vis Exp. (97), e52523(2015).</li>
<li>Sandal, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanoparticle-shielded+dsrna+delivery+for+enhancing+rnai+efficiency+in+cotton+spotted+bollworm+Earias+vittella+%28lepidoptera%3A+Nolidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Nanoparticle-shielded dsrna delivery for enhancing rnai efficiency in cotton spotted bollworm Earias vittella (lepidoptera: Nolidae).</a> Int J Mol Sci. 24 (11), 9161(2023).</li>
<li>Zhou, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chitosan%2Fdsrna+polyplex+nanoparticles+advance+environmental+rna+interference+efficiency+through+activating+clathrin-dependent+endocytosis%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Biol+Macromol%22%5BJournal%5D)">Chitosan/dsrna polyplex nanoparticles advance environmental rna interference efficiency through activating clathrin-dependent endocytosis.</a> Int J Biol Macromol. 253 (Pt 4), 127021(2023).</li>
<li>Liu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunological+function+of+bombyx+toll9-2+in+the+silkworm+%28Bombyx+mori%29+larval+midgut%3A+Activation+by+escherichia+coli%2Flipopolysaccharide+and+regulation+of+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Insect+Biochem+Physiol%22%5BJournal%5D)">Immunological function of bombyx toll9-2 in the silkworm (Bombyx mori) larval midgut: Activation by escherichia coli/lipopolysaccharide and regulation of growth.</a> Arch Insect Biochem Physiol. 116 (4), e22130(2024).</li>
<li>Cheng, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+silkworm+larvae+growth+and+properties+of+silk+fibres+after+direct+feeding+of+copper+or+silver+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Mater+Design%22%5BJournal%5D)">Characterization of silkworm larvae growth and properties of silk fibres after direct feeding of copper or silver nanoparticles.</a> Mater Design. 129, 125-134 (2017).</li>
<li>Wang, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+efficacy+of+rnai+mediated+by+various+nanoparticles+in+the+rice+striped+stem+borer+%28Chilo+suppressalis%29%5BTitle%5D)+AND+%22Pestic+Biochem+Physiol%22%5BJournal%5D)">Comparison of efficacy of rnai mediated by various nanoparticles in the rice striped stem borer (Chilo suppressalis).</a> Pestic Biochem Physiol. 165, 104467(2020).</li>
<li>Gurusamy, D., Mogilicherla, K., Palli, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chitosan+nanoparticles+help+double-stranded+rna+escape+from+endosomes+and+improve+rna+interference+in+the+fall+armyworm%2C+Spodoptera+frugiperda%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Insect+Biochem+Physiol%22%5BJournal%5D)">Chitosan nanoparticles help double-stranded rna escape from endosomes and improve rna interference in the fall armyworm, Spodoptera frugiperda.</a> Arch Insect Biochem Physiol. 104 (4), e21677(2020).</li>
<li>Qi, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rational+design+of+ros+scavenging+and+fluorescent+gold+nanoparticles+to+deliver+sirna+to+improve+plant+resistance+to+Pseudomonas+syringae%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nanobiotechnol%22%5BJournal%5D)">Rational design of ros scavenging and fluorescent gold nanoparticles to deliver sirna to improve plant resistance to Pseudomonas syringae.</a> J Nanobiotechnol. 22 (1), 446(2024).</li>
<li>Laisney, J., Loczenski Rose, V., Watters, K., Donohue, K. V., Unrine, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delivery+of+short+hairpin+rna+in+the+neotropical+brown+stink+bug%2C+Euschistus+heros%2C+using+a+composite+nanomaterial%5BTitle%5D)+AND+%22Pestic+Biochem+Physiol%22%5BJournal%5D)">Delivery of short hairpin rna in the neotropical brown stink bug, Euschistus heros, using a composite nanomaterial.</a> Pestic Biochem Physiol. 177, 104906(2021).</li>
<li>Terenius, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rna+interference+in+Lepidoptera%3A+An+overview+of+successful+and+unsuccessful+studies+and+implications+for+experimental+design%5BTitle%5D)+AND+%22J+Insect+Physiol%22%5BJournal%5D)">Rna interference in Lepidoptera: An overview of successful and unsuccessful studies and implications for experimental design.</a> J Insect Physiol. 57 (2), 231-245 (2011).</li>
<li>Kolge, H., Kadam, K., Ghormade, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chitosan+nanocarriers+mediated+dsrna+delivery+in+gene+silencing+for+Helicoverpa+armigera+biocontrol%5BTitle%5D)+AND+%22Pestic+Biochem+Physiol%22%5BJournal%5D)">Chitosan nanocarriers mediated dsrna delivery in gene silencing for Helicoverpa armigera biocontrol.</a> Pestic Biochem Physiol. 189, 105292(2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1.5 mL centrifuge tube</td><td>Sangon</td><td>F601620</td><td>voor dsRNA- of nanodeeltjesreactie</td></tr><tr><td>10 &mu;l pipette</td><td>Eppendorf</td><td>P13473G</td><td>om vloeistof af te zuigen of op te schorsen</td></tr><tr><td>100 &mu;l pipette</td><td>Eppendorf</td><td>Q12115G</td><td>om vloeistof af te zuigen of op te schorsen</td></tr><tr><td>2.5 &mu;l pipette</td><td>Eppendorf</td><td>P20777G</td><td>om vloeistof af te zuigen of op te schorsen</td></tr><tr><td>20 &mu;l pipette</td><td>Eppendorf</td><td>H19229E</td><td>om vloeistof af te zuigen of op te schorsen</td></tr><tr><td>200 &mu;l pipette</td><td>Eppendorf</td><td>H20588E</td><td>om vloeistof af te zuigen of op te schorsen</td></tr><tr><td>6-well Clear TC-treated Multiple Well Plates</td><td>Costar</td><td>3516</td><td>voor het individueel kweken van zijderupsen</td></tr><tr><td>Azijnzuur</td><td>Aladdin</td><td>A116165</td><td>om TAE te maken</td></tr><tr><td>Agarose M</td><td>BBI Life Sciences</td><td>A610013</td><td>voor agarose gel electrophosis</td></tr><tr><td>Analytische balans</td><td>Sartorius</td><td>BSA224S</td><td>om ingrediënten te wegen</td></tr><tr><td>Centrifuge&nbsp;</td><td>Sartorius</td><td>Centrisart A-14C</td><td>om te centrifugeren om dsRNA of nanodeeltjes te vormen</td></tr><tr><td>Chitosan</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C3646</td><td>om te combineren met dsRNA voor de bereiding van nanodeeltjes</td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Sangon</td><td>A500895</td><td>om TAE te maken</td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>Aladdin</td><td>E130059</td><td>om TAE te maken, of voor dsRNA precipitatie</td></tr><tr><td>Diepvriezer</td><td>Siemens</td><td>iQ300</td><td>om dsRNA of nanodeeltjes op te slaan</td></tr><tr><td>GoTaq Green Master Mix</td><td>Promega</td><td>M712</td><td>voor PCR-reactie</td></tr><tr><td>GoTaq qPCR Master Mix</td><td>Promega</td><td>A6002</td><td>voor qRT-PCR-reactie</td></tr><tr><td>Isopropanol&nbsp;</td><td>Aladdin</td><td>I112011</td><td>voor dsRNA precipitatie</td></tr><tr><td>NanoDrop Microvolume UV-Vis Spectrofotometer</td><td>ThermoFisher</td><td>One</td><td>om de concentratie van dsRNA te bepalen</td></tr><tr><td>pH meter</td><td>Sartorius</td><td>&nbsp;PB-10</td><td>om buffers voor te bereiden</td></tr><tr><td>SanPrep Column PCR Product Purification Kit</td><td>Sangon</td><td>B518141</td><td>voor PCR product zuivering</td></tr><tr><td>Natriumacetaat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S2889</td><td>om 100 mM natriumacetaatbuffer te maken</td></tr><tr><td>Natriumsulfaat&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>239313</td><td>om 100 mM natriumsulfaatbuffer te maken</td></tr><tr><td>T7 RiboMAX Express RNAi System</td><td>Promega</td><td>P1700</td><td>voor dsRNA synthese</td></tr><tr><td>ThermoMixer</td><td>Eppendorf</td><td>C</td><td>voor dsRNA generatie of verwarming van nanodeeltjes</td></tr><tr><td>Tris</td><td>Sangon</td><td>A501492</td><td>om TAE te maken</td></tr><tr><td>Vortex&nbsp;</td><td>IKA</td><td>Vortex 3</td><td>om chitosan/dsRNA nanodeeltjes te bereiden</td></tr></tbody></table>

larvale rna-interferentie in zijderups bombyx mori door chitosan/dsrna-afgifte van nanodeeltjes

Larval RNA Interference in Silkworm Bombyx mori through Chitosan/dsRNA Nanoparticle Delivery

Larvale RNA-interferentie in zijderups Bombyx mori door Chitosan/dsRNA-afgifte van nanodeeltjes

The silkworm, Bombyx mori, is an important economic insect with thousands of years of history in China. Meanwhile, the silkworm is the model insect of ...

larval-rna-interference-silkworm-bombyx-mori-through-chitosandsrna

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

RNA-interferentie (RNAi) gebaseerde gen knockdown technieken vormen de kern van Tribolium onderzoek. Hier geven we een overzicht van onze larvale RNAi techniek Tribolium castaneum. Larvale RNAi is een eenvoudige, maar krachtige techniek die een snelle toegang tot verlies-van-functie fenotypes biedt, waardoor onderzoekers om de functie van genen te bestuderen in verschillende contexten.

Larvale RNA interferentie in de Rode Bloem Kever, Tribolium castaneum

Hier beschrijven we een werkwijze voor het remmen van genfunctie in ziektedragers muggen door het gebruik van chitosan / interfererende RNA nanodeeltjes die worden opgenomen door larven.

Chitosan / interfererende RNA nanodeeltjes gemedieerde gen silencing in Disease Vector muggenlarven

Dit manuscript toont de uitputting van de genexpressie in de middendarm van de Duitse kakkerlak via orale inname van double-stranded RNA ingekapseld in liposomen.

Praktisch gebruik van RNA-interferentie: mondelinge levering van Double-stranded RNA in liposomen dragers voor kakkerlakken

Dit artikel demonstreert nieuwe technieken ontwikkeld voor mondelinge levering van double-stranded RNA (dsRNA) via de vaatbundels weefsels van planten voor RNA-interferentie (RNAi) in het floëem sap voederen van insecten.

Double-stranded RNA orale afleveringsmethoden voor het opwekken van RNA-interferentie in het floëem en Hemipteran insecten Plant-sap-voeding

RNA interferentie is een breed toepasbare, krachtige techniek voor het manipuleren van genexpressie in specifieke ontwikkelingsstadia. Hier beschrijven we de noodzakelijke stappen voor de implementatie van deze techniek in de aquatische duikkever Thermonectus marmoratus, van de verwerving van gensequenties tot het knockdownen van genen die de structuur of het gedrag beïnvloeden.

RNA Interferentie in aquatische kevers als een krachtig instrument voor het manipuleren van genexpressie op specifieke ontwikkelingstijdpunten

Het protocol beschrijft de vorming van robuuste en biocompatibele DNA-beladen microcapsules als gemultiplexte in vitro biosensoren die verschillende liganden kunnen volgen.

Bereiding van multifunctionele op zijde gebaseerde microcapsules geladen met DNA-plasmiden die coderen voor RNA-aptameren en riboswitches

Hier introduceren we een gedetailleerde soaking-methode van RNA-interferentie in Bursaphelenchus xylophilus om de studie van genfuncties te vergemakkelijken.

Toepassing van RNA-interferentie in de dennenaaltjes, Bursaphelenchus xylophilus

De manipulatie van RNA-interferentie (RNAi) vormt een formidabele uitdaging bij veel sluipwespen met een kleine grootte, zoals Trichogramma-wespen . Deze studie schetste een efficiënte RNAi-methode in Trichogramma denrolimi. De huidige methodologie biedt een robuust model voor het onderzoeken van genregulatie in Trichogramma-wespen .

RNA-interferentie in de ei-sluipwesp, Trichogramma dendrolimi Matsumura

In dit artikel zullen we laten zien hoe het centrale zenuwstelsel ontleden uit derde instar Drosophila larven.

Dissectie van larvale CNS in Drosophila melanogaster

Dit protocol wordt beschreven hoe u immunohistochemie uit te voeren op ontleed Drosophila larve.

Drosophila larven NMJ Immunohistochemie

Leer larvale RNA-interferentie in zijderupsen via chitosan/dsRNA-nanodeeltjes door voeding. Deze methode bereikt 79% gen-silencing en biedt een arbeidsbesparend alternatief voor injectie in genetisch onderzoek.

Larvale RNA-interferentie in zijderups Bombyx mori door Chitosan/dsRNA-afgifte van nanodeeltjes

Meer video's verkennen