Name: Screening van traditionele Chinese geneeskundige verbindingen op remming van UCHL3-activiteit op basis van moleculaire docking en deubiquitinerende enzymsondetechnologie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-22T14:40:00.000+00:00
Duration: 10 min 25 s
Description: Ontdek moleculaire docking en enzymsondetechnologie voor het screenen van traditionele Chinese geneeskunde op UCHL3-remmers. Deze methode identificeerde Danshensu als nieuwe inhibitor met therapeutisch potentieel.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

<meta charset="utf8"></head><body>Virtuele screening en validatie van UCHL3-remmers met behulp van moleculaire docking

<table><tbody><tr><td>30% Acrylamide</td><td>Beijing Lablead Biotech Co., Ltd</td><td>A3291</td><td></td></tr><tr><td>Ammoniumpersulfaat</td><td>China National Medicines Corporation Ltd</td><td>10002616</td><td></td></tr><tr><td>Anti-rabbit IgG, HRP-gekoppeld Antilichaam&nbsp;#7074</td><td>Cell Signaling Technology</td><td>7074P2</td><td></td></tr><tr><td>BeyoECL Plus</td><td>Beyotime</td><td>P0018S</td><td></td></tr><tr><td>Bradford-eiwit-assaykit</td><td>Beyotime</td><td>P0006</td><td></td></tr><tr><td>ClonExpress Ultra One Step Cloning Kit</td><td>Vazyme</td><td>C115-01</td><td></td></tr><tr><td>Danshensu</td><td>Shanghai yuanye Bio-Technology Co., Ltd</td><td>B20254</td><td></td></tr><tr><td>DMSO</td><td>Ameresco, Inc.</td><td>21K2356571</td><td></td></tr><tr><td>Elektroforesesysteem</td><td>Liuyi Biotechnology</td><td>112-0630</td><td></td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Sigma</td><td>H3375</td><td></td></tr><tr><td>His-getagd eiwitzuiveringskit (NTA-Ni agarose magnetische kralen)</td><td>Beyotime</td><td>P2247S</td><td></td></tr><tr><td>Immun-Blot PVDF-membraan, rol, 26 cm x 3,3 m</td><td>Bio-Rad Laboratories (Shanghai) Co., Ltd</td><td>1620177</td><td></td></tr><tr><td>Isopropylalcohol</td><td>Macklin</td><td>I811925</td><td></td></tr><tr><td>M5 vooraf geverfd eiwitladder</td><td>Mei5 Biotechnology Co.Ltd</td><td>MF-212-01</td><td></td></tr><tr><td>Maestro</td><td>Schr&ouml;dinger&rsquo;s</td><td>https://www.schrodinger.com/platform/products/maestro/</td><td></td></tr><tr><td>Methylalcohol</td><td>China National Medicines Corporation Ltd</td><td>10014108</td><td></td></tr><tr><td>MF-Millipore</td><td>Millipore</td><td>HAWP04700</td><td></td></tr><tr><td>MyFug&nbsp;minicentrifuge</td><td>Sigma</td><td>Z764183</td><td></td></tr><tr><td>Pierce Dilutie-Free Rapid Gold BCA-eiwit-assay</td><td>Thermo Scientific</td><td>A55860</td><td></td></tr><tr><td>PR-619</td><td>Cell Signaling Technology</td><td>26065S</td><td></td></tr><tr><td>Primaire Antilichaamverdunningsbuffer voor Western Blot</td><td>Macklin</td><td>P917820</td><td></td></tr><tr><td>Recombinant Human HA-Ubiquitin Vinyl Sulfone Eiwit, CF</td><td>R&amp;D Systems</td><td>U-212-025</td><td></td></tr><tr><td>Recombinant Human Ubiquitin AMC Eiwit, CF</td><td>R&amp;D Systems</td><td>U-550-050</td><td></td></tr><tr><td>Magermelk</td><td>Becton,Dickinson and Company</td><td>232100</td><td></td></tr><tr><td>Natriumdodecylsulfaat (SDS)</td><td>Ameresco, Inc.</td><td>205-788-1</td><td></td></tr><tr><td>TEMED</td><td>Ameresco, Inc.</td><td>2545C134</td><td></td></tr><tr><td>Tween 20</td><td>Beijing Lablead Biotech Co., Ltd</td><td>0777-1</td><td></td></tr><tr><td>UCHL3 (D25E6) Rabbit mAb</td><td>Cell Signaling Technology</td><td>8141T</td><td></td></tr></tbody></table>

screening van traditionele chinese geneeskundige verbindingen op remming van uchl3-activiteit op basis van moleculaire docking en deubiquitinerende enzymsondetechnologie

Screening Traditional Chinese Medicine Compounds for Inhibiting UCHL3 Activity Based on Molecular Docking and Deubiquitinating Enzyme Probe Technology

Screening van traditionele Chinese geneeskundige verbindingen op remming van UCHL3-activiteit op basis van moleculaire docking en deubiquitinerende enzymsondetechnologie

Deubiquitinating enzymes&#160;(DUBs) play a pivotal role in modulating ubiquitination homeostasis, with UCHL3 being an archetypal cysteine DUB intricately ...

screening-traditional-chinese-medicine-compounds-for-inhibiting-uchl3

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Hier beschrijven we een celgebaseerde reportergen-test als waardevol hulpmiddel om chemische bibliotheken te screenen op verbindingen die post-transcriptionele controlemechanismen moduleren die worden uitgeoefend via 3’ UTR.

High-throughput screening voor Chemische Modulators van Post-transcriptioneel gereguleerde genen

Het huidige protocol Gegevens een werkwijze voor het meten van de activiteit van functioneel homoloog ubiquitinerings enzymen. Gespecialiseerde probes covalent enzym passen en zorgen voor detectie. Deze methode heeft de potentie om nieuwe therapeutische targets te identificeren.

Methode voor het meten van de activiteit van ubiquitinerings Enzymen in cellijnen en weefselmonsters

De interactie tussen HCN kanalen en hun ondersteunende subunit is geïdentificeerd als een therapeutisch doel in depressieve stoornis. Hier wordt een fluorescentie-polarisatie- methode voor het identificeren van kleinmoleculige remmers van dit eiwit-eiwit interactie, gepresenteerd.

Methode voor het identificeren van kleinmoleculige remmers van het eiwit-eiwit interactie tussen HCN1 en TRIP8b

Deze paper gebruikt een stroom cytometry-gebaseerde assay naar scherm bibliotheken van chemische inhibitoren voor de identificatie van remmers en de bijbehorende doelen die van invloed zijn T-cel receptor signalering. De hier beschreven methoden kunnen ook worden uitgebreid voor high-throughput screening.

Identificatie van bemiddelaars/Mediators van T-cel Receptor signalering via de Screening van chemische remmer bibliotheken

De huidige studie biedt gedetailleerde in vitro ubiquitylatie assay protocollen voor de analyse van E3 ubiquitine ligase katalytische activiteit. Recombinante eiwitten werden tot expressie gebracht met behulp van prokaryote systemen zoals Escherichia coli-cultuur.

In vitro Analyse van E3 Ubiquitine Ligase Functie

Dit protocol legt uit hoe het effect van genetische variatie geassocieerd met neurologische ontwikkelingsstoornissen op de deubiquitylerende enzymactiviteit kan worden gemeten door recombinante eiwitzuivering te combineren met ubiquitineketensplitsingstesten.

Het meten van enzymatische activiteit van met neurologische ontwikkelingsstoornissen geassocieerde deubiquitylerende enzymen via een in vitro ubiquitineketensplitsingstest

Dit protocol introduceert een fluorometrische screeningsmethodologie die geoptimaliseerd is voor het identificeren van natuurlijke product- of kleinmolecuulremmers van eiwitsynthese. De praktische bruikbaarheid maakt het geschikt voor zowel bacheloronderwijs in geneesmiddelenontdekkingstechnieken als voor implementatie in medicinale chemiecampagnes.

Een op fluorescentie gebaseerd protocol voor voorlopige screening van eiwitsyntheseremmers uit natuurlijke bronnen

Dit protocol beschrijft het gebruik van ultra-high-performance vloeistofchromatografie in combinatie met hybride quadrupool-Orbitrap hoge-resolutie massaspectrometrie (UHPLC-Q-Orbitrap HRMS), gecombineerd met netwerkfarmacologie en moleculaire koppeling, om de materiële basis van de Yiqi Qingjie-formule (YQQJ) voor de behandeling van IgA-nefropathie (IgAN) te voorspellen en te valideren.

Verklaring van de materiële basis van de Yiqi Qingjie-formule tegen IgA-nefropathie met behulp van UHPLC-Q-Orbitrap HRMS geïntegreerd met netwerkfarmacologie

Een klysma is een vorm van traditionele Chinese geneeskunde (TCM) therapie die wordt gebruikt om ernstige acute pancreatitis (SAP) te behandelen. De therapie omvat het inbrengen van een TCM-vloeistof in het rectum en de dikke darm via de anus om de vloeistof in de darm te houden en door het darmslijmvlies te absorberen. Deze studie heeft tot doel de klysmaprocedure voor SAP-patiënten te standaardiseren.

Klysma van traditionele Chinese geneeskunde voor patiënten met ernstige acute pancreatitis

In deze studie wordt een reeks methoden gepresenteerd om DESI-MSI-monsters van fabrieken voor te bereiden, en een procedure voor DESI-assemblage-installatie, MSI-gegevensverzameling en -verwerking wordt in detail beschreven. Dit protocol kan in verschillende omstandigheden worden toegepast voor het verkrijgen van ruimtelijke metaboloominformatie in planten.

Visualisatie van metabolieten geïdentificeerd in het ruimtelijke metaboloom van de traditionele Chinese geneeskunde met behulp van DESI-MSI

Ontdek moleculaire docking en enzymsondetechnologie voor het screenen van traditionele Chinese geneeskunde op UCHL3-remmers. Deze methode identificeerde Danshensu als nieuwe inhibitor met therapeutisch potentieel.

Screening van traditionele Chinese geneeskundige verbindingen op remming van UCHL3-activiteit op basis van moleculaire docking en deubiquitinerende enzymsondetechnologie (Video) | JoVE Journal

Screening van traditionele Chinese geneeskundige verbindingen op remming van UCHL3-activiteit op basis van moleculaire docking en deubiquitinerende enzymsondetechnologie

Meer video's verkennen