Oprichting van rattenmodellen die genderbevestigende hormoontherapieën nabootsen

Ons onderzoek ontwikkelde diermodellen om genderbevestigende hormoontherapieën voor transgender personen te repliceren, waarbij testosteron voor transgender mannen en oestrogeen met anti-androgeen voor transgender vrouwen werd gebruikt. We onderzoeken of degenen die deze therapieën ondergaan net zo kwetsbaar zijn voor chemicaliën in het milieu als de algemene bevolking en of er langdurige bijwerkingen zijn van hormoonbehandeling. Dit model is uniek in zijn vakgebied, aangezien er momenteel gegevens en hulpmiddelen beschikbaar zijn om de mogelijk verschillende gevoeligheid voor chemicaliën van transgenders die hormoontherapie ondergaan en hun bijwerkingen te evalueren.

Een belangrijke bevinding van ons werk is het gebruik van geslachtsspecifieke hepatische CPS als marker om het succes van hormoontherapieën te evalueren. Deze aanpak, die voor het eerst in onze studie is ontwikkeld, biedt een waardevol hulpmiddel om de nauwkeurigheid en effectiviteit van het model te bevestigen.

Ons protocol pakt de kloof aan in het begrijpen van de langetermijneffecten van hormoontherapieën. Het onderzoekt ook of dagelijkse blootstelling aan voedsel en milieuchemicaliën kan interageren met of de effecten van hormoonbehandelingen in de loop van de tijd kan veranderen.

In de toekomst zullen we onderzoeken of het model geschikt is voor langetermijntesten, en zullen we aanvullende biomarkers onderzoeken, zoals smalle gedragstests om therapie-effecten beter te beoordelen.

[Docent] Begin met het knijpen en optillen van de huid op de injectieplaats om testosteron en oestradiol plus cyproteronacetaat opgelost in sesamolie toe te dienen. Steek de naald van een spuit van één milliliter evenwijdig aan de rug van het dier. Zodra de naald erin zit, injecteert u langzaam 100 microliter testosteron of 200 microliter oestradiol plus cyproteronacetaat, afhankelijk van het model. Plaats na twee weken behandeling elke verdoofde rat in rugligging op een verwarmingskussen. Maak vervolgens een spuit van vijf milliliter klaar met een naald van 21 gauge en zorg ervoor dat het vacuüm wordt verwijderd. Gebruik vingers om het hart te lokaliseren. Reinig de thoracale wand voorzichtig en steek de naald voorzichtig in de laterale thoracale wand, loodrecht op het lichaam, op het punt dat is uitgelijnd met de gebogen ellebogen, tussen ribben vijf en zes. Zodra de naald de hartkamer bereikt, komt het bloed via capillaire middelen in de spuit. Trek de zuiger van de spuit langzaam en continu terug totdat het bloed is afgezogen. Zet na het offer elk dier op de snijtafel in rugligging, met de voorpoten naar boven en de achterpoten naar beneden. Bevestig de ledematen met pinnen en bestrooi vervolgens het ventrale oppervlak van het dier met een desinfecterende oplossing om de dissectie voor te bereiden. Knip met een schaar langs de middellijn van het schaambeen tot de bovenbuik. Maak twee laterale sneden langs de mediale oppervlakken van elke achterpoot vanaf de middellijn van de ventrale abdominale incisie en leg de buikingewanden bloot. Snijd bij mannelijke ratten de teelballen weg die zich in de intra-abdominale scrotumzak bevinden. Druk op de scrotumzak om ervoor te zorgen dat de teelballen uitsteken en pak ze voorzichtig vast. Gebruik een tang om het viscerale vet vast te houden en snijd vervolgens voorzichtig de teelballen weg van de ingewanden. Weeg de teelballen voordat u ze opbergt in Bois-oplossing voor histopathologische analyse. Pak bij vrouwelijke ratten de baarmoeder voorzichtig vast. Identificeer de eierstokken aan de uiteinden van beide baarmoederhoorns en snijd ze weg van het omringende viscerale vetweefsel. Weeg de eierstokken na excisie. Pak vervolgens de lever vast met een tang en zorg ervoor dat deze niet breekt. Gebruik een tang om het xiphoid-proces vast te pakken en knip het diafragma volledig af met een schaar. Gebruik een schaar om de lever van het middenrif te scheiden. Til de processus xiphoid op met een tang en haal de lever uit de buikholte. Weeg na excisie de lever en bewaar deze op de juiste manier. Knip met een schaar loodrecht langs de nek van het dier. Verwijder de huid en het spierstelsel om de luchtpijp, waar de schildklier zich bevindt, bloot te leggen. Knip de uiteinden van de luchtpijp voorzichtig af om de schildklier te verwijderen. Nadat u de testis hebt verwijderd, pakt u de bijbal, die aan de achterrand van de testis is bevestigd en zich in het scrotum bevindt. Om sperma te verzamelen, reinigt u de staart van de rechter bijbal door vet en bindweefsel met een schaar te verwijderen. Scheid de staart van het resterende deel en plaats deze in een petrischaaltje met één milliliter DMEM. Knip de staart af met een schaar en gebruik een pastpipet om de inhoud voorzichtig te laten vloeien en het loslaten te vergemakkelijken. Breng nu de opgevangen vloeistof over in een buis van 15 milliliter en stel het volume in op 10 milliliter met DMEM om een verdunningsfactor van één tot 10 te bereiken. Pipetteer de inhoud om te homogeniseren en een suspensie te creëren. Neem na voorzichtig schudden 10 microliter van de suspensie om de Neubauer-kamer te laden.