Digitale planimetrie voor het beoordelen van de kinetiek van wondsluiting in een muismodel

Ons onderzoek richt zich op het standaardiseren van macroscopische wondmeting met behulp van een gecontroleerde beeldvorming die is opgezet door te zorgen voor consistentie en lichtpositie en -afstand, of protocollen, heeft tot doel de variabiliteit te minimaliseren en de frequentie van wondsluitingsmeting in preklinische modellen te verbeteren. We pakken het gebrek aan standaardisatie in microscopische wondmetingen aan. De huidige methodologieën missen vaak controlevoorwaarden, wat leidt tot inconsistente gegevens.

Ons protocol biedt onze toepasselijke opstelling die zorgt voor een uniforme belichting, positionering en afstand, waardoor de waarschijnlijkheid wordt verkleind en de reproduceerbaarheid wordt verbeterd. Ons protocol elimineert veelvoorkomende bronnen van meetbias door beeldvormingsomstandigheden te standaardiseren. In tegenstelling tot handmatige methoden, zorgt het voor consistentie tussen experimenten, waardoor nauwkeurige vergelijkingen mogelijk zijn en de variabiliteit in oppervlakte- en omtrekmetingen van wonden wordt verminderd.

Ons resultaat maakt nauwkeurigere en reproduceerbare wondmeetgegevens mogelijk door een gestandaardiseerde methodologie te bieden. Dit is de basis voor het evalueren van therapeutische interventies en preklinisch wondonderzoek. Bevestig om te beginnen een aluminium profiel met sleuven aan de binnenkant van de zijrand van het dak.

Plaats twee rechthoekige aluminium platen met een midden van polyethyleen in de groeven van de dakprofielen om door beide profielen te kunnen glijden. Monteer een 20 centimeter RGB LED TL buislamp in een hoek van 45 graden aan de onderrand van het eerste paneel met behulp van dubbelzijdige tape. Monteer vervolgens een rechthoekig schuimplaatpaneel met een centrale ronde uitsparing van 7.82 centimeter op elk dakpaneel om de installatie van de cameralens mogelijk te maken.

Snijd voor de vloerconstructie eerst vierkanten met een zijlengte van 2,54 centimeter uit elke hoek van de witte schuimplaat van 40 bij 40 centimeter. Deze stap zorgt ervoor dat de foamboard goed past binnen de vloervlakprofielen. Na het bijsnijden van de hoeken plaatst u de schuimplaat op de vloerprofielen.

Bevestig klittenbandstrips aan aluminium profielen A en B om gemakkelijk interne fotocabine-elementen te manipuleren. Een vaste lijmbevestiging op een centimeter van de rand van twee schuimkartonnen vierkanten aan de ene kant en plaats ze op de voor- en achterwanden. Lijm met siliconen twee panelen aan de zijden C en D om de linker- en rechterzijwanden te vormen.

Plaats een 3D-geprint masker op 11,5 centimeter van de rand van een voorgesneden rechthoek van 40 bij 28 centimeter wit schuimkarton om de muizen onder inademingsnarcose te houden. Lijm het vervolgens op het midden van de referentiebasis. Bevestig het 3D-geprinte liniaalblok op één centimeter van de linkerkant van de muisbasis om plaats te bieden aan het meetreferentie-element voor digitale beeldverwerking.

Bevestig vervolgens een roestvrijstalen liniaal van 15 centimeter met schaalverdeling aan het liniaalblok en installeer de volledige referentiebasis in de cabine voor het schalen van het beeld. Nadat u de muis hebt verdoofd, gebruikt u een steriele biopsiepons van vijf millimeter om met cirkelvormige bewegingen druk uit te oefenen om een dermo-epidermale incisie ter hoogte van het schouderblad te maken. Verwijder de flap met een gekartelde tang en knip af met een irispuntschaar.

Plaats met een juwelierstang een cirkelvormige huidfilm met een diameter van één centimeter over de wond om besmetting en samentrekking te voorkomen. Om beelden van de wonden vast te leggen, plaatst u de referentiebasis in het midden van de vloer van de fotocabine. Plaats vervolgens de verdoofde muis in buikligging op het muisplatform.

Installeer de voorwand van de fotocabine en maak macroscopische beelden. Om de gemaakte back-upafbeelding in imagej te openen, navigeert u naar Bestand, Openen en Zoeken. Klik vervolgens op Openen.

Maximaliseer nu de afbeelding, selecteer het gereedschap voor een rechte lijn en zoom vervolgens met de plustoets in op de liniaal naast de muis. Teken een rechte lijn van 10 millimeter op de afbeelding van de liniaal. Ga naar analyseren en schaal instellen.

Voer 10 in als de bekende afstand. Stel de lengte-eenheid in op millimeters en klik op OK. Gebruik vervolgens het rechthoekgereedschap om het gebied rond de wond te selecteren met een breedte en een hoogte van 150 en noteer de X- en Y-waarden.

Klik vervolgens met de rechtermuisknop op de rechthoek en selecteer dupliceren. Geef de gedupliceerde afbeelding een naam en druk op Enter. Druk in de nieuwe afbeelding twee keer op plus om in te zoomen.

Als u de afbeelding wilt scheiden in kleurkanalen, navigeert u naar Afbeelding, Type en RGB-stapel. Klik in de afbeelding met de rechtermuisknop op de afbeelding, selecteer dupliceren en druk op OK in het duplicaatvenster. Klik vervolgens op de afbeelding van het rode kanaal, selecteer de afbeelding, pas deze aan en drempel om deze te segmenteren.

Kies Standaard en klik op Toepassen om de drempelwaarde toe te passen. Corrigeer het interessegebied of de ROI om volledige wonddekking te garanderen en segmentatievervormingen te voorkomen. Als u de omtrek van het interessegebied wilt definiëren, selecteert u Bewerken, gaat u vervolgens naar selectie en kiest u Selectie maken.

Selecteer daarna Bewerken, vervolgens Selectie en klik op Toevoegen aan manager om het toe te voegen aan de ROI-manager. Als u de segmentatie wilt valideren, opent u het venster ROI-manager en selecteert u de ROI die u wilt controleren. Klik op Meer, Vertalen, voer de opgenomen X- en Y-waarden in en druk op OK.

Maximaliseer de originele afbeelding en selecteer vervolgens de ROI in de ROI-manager. Gebruik de pijltjestoetsen om de ROI aan te passen totdat deze is uitgelijnd met de wond. Zodra de segmentatie is bevestigd, verkrijgt u de wondmetingen door Analyseren en Meten te selecteren.

Het wondsluitingspercentage steeg aanvankelijk tot 138,04% op dag twee als gevolg van ontstekingsprocessen, voordat het afnam en vorderde naar herstel- en consolidatiefasen, met consistente sluiting waargenomen na dag zeven. De intrekafstand van de wondrand nam aanvankelijk toe tijdens de ontstekingsfase, maar begon na dag drie af te nemen, zoals blijkt uit de vergelijking van Gilman, wat wijst op geleidelijke samentrekking van de wond.