Name: Organotypische weefselmodelsystemen voor het onderzoeken van gastheer-pathogeen interacties in vitro (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-03-28T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 41 s
Description: Leer organotypische weefselmodellen voor het bestuderen van gastheer-pathogeen interacties met orale epitheelcellen. Deze methode helpt onderzoekers ontstekingsreacties en nieuwe anti-biofilm therapieën te evalueren.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td>13 mm hydroxyapatite (HA) discs</td><td>Plasma Biotal Limited</td><td>n/a (made to order)</td><td>Substraat voor orale biofilmvorming, die het tandoppervlak nabootst</td></tr><tr><td>19 G naald (40 mm)&nbsp;</td><td>VWR</td><td>613-2028</td><td>Wordt gebruikt om HA-schijven uit platen te verwijderen en om weefsel uit inserts te snijden</td></tr><tr><td>24 well TC-behandelde platte bodem microtiterplaten met deksels&nbsp;</td><td>Scientific Laboratory Supplies</td><td>3524 (verpakking van 100)</td><td>Platen voor het kweken van biofilms en weefsel co-cultuur experimenten</td></tr><tr><td>Zuurgewassen glazen kralen (425-600 &mu;m)</td><td>Merck: Sigma-Aldrich</td><td>G8772</td><td>Voor weefsellyse om de opbrengst van RNA-extractie te verbeteren&nbsp;&nbsp;</td></tr><tr><td>Actinomyces naeslundii DSM 17233&nbsp;</td><td>Leibniz Institute DSMZ</td><td>n/a</td><td>Een van de micro-organismen die wordt gebruikt voor het complexe biofilmmodel</td></tr><tr><td>Bead Mill 24 Homogenizer (of equivalent)&nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td>15-340-163</td><td>Voor weefsellyse om de opbrengst van RNA-extractie te verbeteren&nbsp;&nbsp;</td></tr><tr><td>Bijouxes&nbsp; (7 mL)</td><td>Greiner Bio-One</td><td>189170 (700 per zak)</td><td>Wordt gebruikt voor biofilm sonicatie&nbsp;&nbsp;</td></tr><tr><td>cDNA-synthesekit (hoge capaciteit)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>4368814 (voor 200 reacties)</td><td>cDNA-synthese uit weefsel-RNA</td></tr><tr><td>Columbia Bloed Agar (CBA) basis&nbsp;</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>CM0331B (voor 500 gram)</td><td>Wordt gebruikt om CBA-platen te bereiden voor het kweken van aerobe micro-organismen</td></tr><tr><td>Defibrinerend paardenbloed</td><td>E&amp;O Laboratories</td><td>DHB</td><td>Wordt gebruikt om CBA- en FAA-platen aan te vullen voor het kweken van aerobe en anaërobe micro-organismen</td></tr><tr><td>Dulbecco's Fosfaat Gebufferde Saline (dPBS: zonder CaCl2 en MgCl2)</td><td>Merck: Sigma-Aldrich</td><td>DB537</td><td>dPBS voor celco-cultuur met biofilm sonicaat</td></tr><tr><td>Fusobacterium nucleatum ATCC 10953</td><td>American Type Culture Collection</td><td>n/a</td><td>Een van de micro-organismen die wordt gebruikt voor het complexe biofilmmodel</td></tr><tr><td>Fusobacterium nucleatum subspeks (subspp.) vincentii DSM 19507</td><td>Leibniz Institute DSMZ</td><td>n/a</td><td>Een van de micro-organismen die wordt gebruikt voor het complexe biofilmmodel</td></tr><tr><td>GraphPad Prism (versie 10)</td><td>GraphPad Software, Inc</td><td>n/a</td><td>Voor het maken van grafieken en gegevensanalyse&nbsp;</td></tr><tr><td>Human IL-8 ELISA-kit (ongecoat ELISA-kit met platen)</td><td>Thermo Fisher Scientific (Invitrogen)</td><td>88-8086-86 (voor 10 x 96 tests)</td><td>ELISA-kit en platen voor eiwitbeoordeling van uitgeput weefselmedium</td></tr><tr><td>Human Oral Epithelium (HOE)&nbsp;</td><td>Episkin</td><td>n/a (made to order)</td><td>Het epitheelweefsel dat wordt gebruikt voor het co-cultuurmodelsysteem</td></tr><tr><td>Inoculating loops (wegwerp, 10 &micro;L, of equivalent)&nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td>12870155 (verpakking van 1000)</td><td>Voor microbiologische kweek in vaste en vloeibare media</td></tr><tr><td>MicroAmp Fast Reaction 96-well qPCR-platen (0,1 mL)&nbsp;</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>4346907 (voor 10 platen)</td><td>Voor qPCR genexpressieprofilering van weefsel</td></tr><tr><td>Microbank kralen</td><td>Pro-Lab Diagnostics</td><td>PL.170</td><td>Opslag en cryoconservering van micro-organismen&nbsp;</td></tr><tr><td>Nuclease-vrij water</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>AM9935 (10 x 1,5 mL)</td><td>RT-PCR-kwaliteit water voor qPCR-experimenten&nbsp;</td></tr><tr><td>Petri Dishes (90 mm)</td><td>Fisher Scientific (Sterilin)&nbsp;</td><td>11309283 (verpakking van 500)</td><td>Wordt gebruikt voor de bereiding van agarplaten voor microbiële kweek</td></tr><tr><td>Fosfaat-gebufferde saline (PBS)</td><td>Thermo Fisher Scientific&nbsp;</td><td>18912014 (verpakking van 100 tabletten)</td><td>PBS voor standaardisatie van micro-organismen en biofilm wasstappen</td></tr><tr><td>Rneasy mini kit</td><td>Qiagen</td><td>74106 (voor 250 reacties)</td><td>Kolom-gebaseerde RNA-extractiekit voor weefsel&nbsp;</td></tr><tr><td>Roswell Park Memorial Institute 1640 medium</td><td>Merck: Sigma-Aldrich</td><td>R7755-10L (voor 10 L)&nbsp;</td><td>Media voor biofilmcultuur&nbsp;</td></tr><tr><td>RT2 profiler array</td><td>Qiagen</td><td>330171 (op maat gemaakt)</td><td>qPCR array met kant-en-klare primers voor genexpressieprofilering</td></tr><tr><td>Schaedler anaërobe agar basis</td><td>Merck: Sigma-Aldrich (Millipore)</td><td>91019 (voor 500 g)</td><td>Wordt gebruikt om Fastdious Anaerobic Agar-platen te bereiden&nbsp;</td></tr><tr><td>Schaedler anaërobe bouillon</td><td>Thermo Fisher Scientific&nbsp;</td><td>CM0497B (voor 500 g)</td><td>Vloeibaar medium voor de groei van anaërobe micro-organismen</td></tr><tr><td>Schroefkap Beadbug O-Ring buis&nbsp;</td><td>Scientific Laboratory Supplies</td><td>Z763837-1000EA (verpakking van 1000)</td><td>Voor gebruik in Bead Mill 24 homogenisator, om weefsel te lysen</td></tr><tr><td>Sonicatiebad</td><td>Fisher Scientific (Fisherbrand)</td><td>n/a</td><td>Voor sonicatie van biofilms van HA-schijven&nbsp;</td></tr><tr><td>Streptococcus intermedius DSM 20753&nbsp;</td><td>Leibniz Institute DSMZ</td><td>n/a</td><td>Een van de micro-organismen die wordt gebruikt voor het complexe biofilmmodel</td></tr><tr><td>Streptococcus mitis NCTC 12261</td><td>National Collection of Type Cultures</td><td>n/a</td><td>Een van de micro-organismen die wordt gebruikt voor het complexe biofilmmodel</td></tr><tr><td>Streptococcus oralis NTCC 11427&nbsp;</td><td>National Collection of Type Cultures</td><td>n/a</td><td>Een van de micro-organismen die wordt gebruikt voor het complexe biofilmmodel</td></tr><tr><td>SYBR-green (qPCRBIO SyGreen Mix Hi-ROX)</td><td>PCR Biosystems</td><td>PB20.12</td><td>SYBR-green mix voor qPCR&nbsp;</td></tr><tr><td>Todd Hewitt bouillon</td><td>Merck: Sigma-Aldrich</td><td>T1438&nbsp;</td><td>Media voor biofilmcultuur&nbsp;</td></tr><tr><td>Tryptone soja bouillon (TSB) medium</td><td>Merck: Sigma

organotypische weefselmodelsystemen voor het onderzoeken van gastheer-pathogeen interacties in vitro

Organotypic Tissue Model Systems for Investigating Host-Pathogen Interactions In Vitro

Organotypische weefselmodelsystemen voor het onderzoeken van gastheer-pathogeen interacties in vitro

Recapitulating the host-pathogen interface at the epithelial or mucosal barrier in vitro remains a challenging prospect for infection biologists. While ...

organotypic-tissue-model-systems-for-investigating-host-pathogen

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie en Infectie

Source: Alshehri, M. et. al., Organotypic Tissue Model Systems for Investigating Host-Pathogen Interactions In Vitro. J. Vis. Exp. (2025)This video demonstrates a co-culture model using multi-species oral biofilms and human oral epithelium. It highlights epithelial immune activation and enables the downstream analysis of host-pathogen interaction.

A Transwell Tissue Model for Studying Interactions Between Human Oral Biofilms and Epithelium

In this video, we describe the methodology for setting up an ex vivo gut organ culture system to study the interactions between mouse intestinal tissue fragments and specific gut bacteria. The device consists of two pairs of input-output ports, the first connecting the intestinal tissue lumen and supplying the specific bacterial suspension into it, and the second continuously supplying media to the device's wells to maintain ex vivo tissue viability.

An Ex Vivo Gut Organ Culture System to Study Host-Microbiota Interactions

Terwijl in vitro studie van gastheer-pathogeen interacties de karakterisering van specifieke immuunresponsen mogelijk maakt, zijn in vivo modellen vereist om de effecten van complexe responsen te observeren. Door gebruik van Candida albicans blootstelling gevolgd door Pseudomonas aeruginosa-gemedieerde longinfectie, hebben we een muismodel gevestigd van microbiële interacties betrokken bij de pathogeniteit van ventilateur-geassocieerde pneumonie.

Bestuderen van microbiële gemeenschappen<em&gt; In Vivo</em&gt;: Een model van de Host-gemedieerde interactie tussen<em&gt; Candida albicans</em&gt; En<em&gt; Pseudomonas aeruginosa</em&gt; In het Airways

De ex vivo orgaankweek maakt onderzoek naar biologische processen mogelijk in de context van de intacte weefselarchitectuur. Hier introduceren we een methode van ex vivo kweek van de muizencolon, die kan worden gebruikt om aangeboren immuniteit en antimicrobiële gastheerverdediging in de darm te bestuderen.

De<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Colon Organ Cultuur en het gebruik ervan in Antimicrobial Host Defensie Studies

Gut host-microbe interacties werden geschat aan de hand van een nieuwe benadering van het combineren van een synthetische mondelinge Gemeenschap, in vitro gastro-intestinale spijsvertering en een model van het epitheel van de dunne darm. Presenteren we een methode die aangepast worden kan voor de beoordeling van de cel invasie van ziekteverwekkers en multispecifieke biofilms, of zelfs om te testen op het overlevingsvermogen van probiotische formuleringen.

Beoordelen van de levensvatbaarheid van een synthetische bacteriële Consortium op de In Vitro -Interface van het Gut-Host-microbe

We beschrijven beide tests in vitro en in vivo infectie die kunnen worden gebruikt voor het analyseren van de activiteiten van host-encoding factoren.

Met behulp van een bacteriële ziekteverwekker sonde voor Cellulair en Organismic niveau Host Reacties

Dit artikel presenteert een unieke methode voor het analyseren van gastheer-microbioom interacties met behulp van een nieuw darmorgaancultuursysteem voor ex vivo experimenten.

Een darmorgaankweeksysteem voor het analyseren van host-microbiota-interacties

Hier beschrijven we de constructie van een basis driedimensionaal (3D) intestinale cellijnmodelsysteem en een paraffine-inbeddingsprotocol voor lichtmicroscopische evaluatie van vaste darmequivalenten. Kleuring van geselecteerde eiwitten maakt de analyse van meerdere visuele parameters van een enkel experiment mogelijk voor mogelijk gebruik in preklinische onderzoeken naar geneesmiddelen.

Basis driedimensionaal (3D) darmmodelsysteem met een immuuncomponent

Enteroïden zijn in opkomst als een nieuw model voor het bestuderen van weefselfysiologie en pathofysiologie, medicijnontwikkeling en regeneratieve geneeskunde. Hier beschrijven we een 2D-enteroïde-afgeleid kweeksysteem van rundercellen dat co-kweek met relevante weefselceltypen mogelijk maakt. Dit model biedt een translationeel voordeel voor modellering van gastro-intestinaal onderzoek.

Generatie van een rundvee primair enteroïde-afgeleid tweedimensionaal monolaagkweeksysteem voor toepassingen in translationeel biomedisch onderzoek

Dit protocol beschrijft de generatie van een muisprostaat-organoïde-gebaseerd model dat in 2D is gekweekt. Het omvat organoïde dissociatie, celzaadvorming, differentiatie, beoordeling van de epitheelintegriteit en in-vitro infectie met uropathogene Escherichia coli. Het model biedt apicale toegankelijkheid en is geschikt voor het bestuderen van gastheer-pathogeen interacties, waarmee het beperkingen van traditionele 3D-organoïde systemen overwint.

Generatie van een model gebaseerd op een muisprostaatorganoïde voor het bestuderen van gastheer-pathogeen interacties

De studie presenteert een methode voor in vitro onderzoek van bacteriële infecties met behulp van intestinale organoïden afkomstig van weefselstamcellen. Het protocol beschrijft hoe organoïden in twee dimensies kunnen worden gekweekt en onderscheiden, geïnfecteerd met adherent-invasieve Escherichia coli, en belangrijke metingen worden beoordeeld, waaronder het doorbreken van de epitheliale barrière, infectiebeeldvorming en de repitheliale RNA-respons.

Een tweedimensionale organoïde cultuur op invasine of basement membraanextract om gastheer-bacteriën interacties te bestuderen

Leer organotypische weefselmodellen voor het bestuderen van gastheer-pathogeen interacties met orale epitheelcellen. Deze methode helpt onderzoekers ontstekingsreacties en nieuwe anti-biofilm therapieën te evalueren.

Organotypische weefselmodelsystemen voor het onderzoeken van gastheer-pathogeen interacties in vitro

Meer video's verkennen