Name: Equibiaxiaal rekapparaat voor sterk vergrote live-cell confocale fluorescentiemicroscopie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-13T13:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 41 s
Description: Leer hoe cellen reageren op mechanische stimuli met een pneumatisch equibiaxiaal rekapparaat voor live-cell confocale fluorescentiemicroscopie. Deze methode onderzoekt mechanobiologische processen in zowel fysiologische als pathologische contexten.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Huang, L., Mathieu, P. S., Helmke, B. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+stretching+device+for+high-resolution+live-cell+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">A stretching device for high-resolution live-cell imaging.</a> Ann Biomed Eng. 38 (5), 1728-1740 (2010).</li>
<li>Meza, D., Abejar, L., Rubenstein, D. A., Yin, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+shearing-stretching+device+that+can+apply+physiological+fluid+shear+stress+and+cyclic+stretch+concurrently+to+endothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomech.+Eng%22%5BJournal%5D)">A shearing-stretching device that can apply physiological fluid shear stress and cyclic stretch concurrently to endothelial cells.</a> J Biomech. Eng. 138 (3), 4032550(2016).</li>
<li>Constantinou, I., Bastounis, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell-stretching+devices%3A+advances+and+challenges+in+biomedical+research+and+live-cell+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Cell-stretching devices: advances and challenges in biomedical research and live-cell imaging.</a> Trends Biotechnol. 41 (7), 939-950 (2023).</li>
<li>Trepat, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Viscoelasticity+of+human+alveolar+epithelial+cells+subjected+to+stretch%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Viscoelasticity of human alveolar epithelial cells subjected to stretch.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 287 (5), L1025-L1034 (2004).</li>
<li>Kaunas, R., Nguyen, P., Usami, S., Chien, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cooperative+effects+of+Rho+and+mechanical+stretch+on+stress+fiber+organization%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Cooperative effects of Rho and mechanical stretch on stress fiber organization.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 102 (44), 15895-15900 (2005).</li>
<li>Barbee, K. A., Macarak, E. J., Thibault, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strain+measurements+in+cultured+vascular+smooth+muscle+cells+subjected+to+mechanical+deformation%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">Strain measurements in cultured vascular smooth muscle cells subjected to mechanical deformation.</a> Ann Biomed Eng. 22 (1), 14-22 (1994).</li>
<li>Wipff, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+covalent+attachment+of+adhesion+molecules+to+silicone+membranes+for+cell+stretching+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">The covalent attachment of adhesion molecules to silicone membranes for cell stretching applications.</a> Biomaterials. 30 (9), 1781-1789 (2009).</li>
<li>Wen, H., Blume, P. A., Sumpio, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+integrins+and+focal+adhesion+kinase+in+the+orientation+of+dermal+fibroblasts+exposed+to+cyclic+strain%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Wound+J%22%5BJournal%5D)">Role of integrins and focal adhesion kinase in the orientation of dermal fibroblasts exposed to cyclic strain.</a> Int Wound J. 6 (2), 149-158 (2009).</li>
<li>Chu, S. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanical+stretch+induces+hair+regeneration+through+the+alternative+activation+of+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Commun%22%5BJournal%5D)">Mechanical stretch induces hair regeneration through the alternative activation of macrophages.</a> Nat. Commun. 10 (1), 1524(2019).</li>
<li>Le Roux, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+mechanochemical+feedback+between+curved+membranes+and+BAR+protein+self-organization%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Commun%22%5BJournal%5D)">Dynamic mechanochemical feedback between curved membranes and BAR protein self-organization.</a> Nat. Commun. 12 (1), 6550(2021).</li>
<li>Kosmalska, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physical+principles+of+membrane+remodelling+during+cell+mechanoadaptation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Commun%22%5BJournal%5D)">Physical principles of membrane remodelling during cell mechanoadaptation.</a> Nat. Commun. 6 (1), 7292(2015).</li>
<li>Quiroga, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mechanosensing+mechanism+controls+plasma+membrane+shape+homeostasis+at+the+nanoscale%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">A mechanosensing mechanism controls plasma membrane shape homeostasis at the nanoscale.</a> Elife. 12, e72316(2023).</li>
<li>Casares, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hydraulic+fracture+during+epithelial+stretching%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Mater%22%5BJournal%5D)">Hydraulic fracture during epithelial stretching.</a> Nat Mater. 14 (3), 343-351 (2015).</li>
<li>Beedle, A. E. M., et al. Fibrillar adhesion dynamics govern the timescales of nuclear mechano-response via the vimentin cytoskeleton. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBeedle%2C+AEM+%22bioRxiv%22">bioRxiv</a>. , (2023).</li>
<li>Kechagia, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+laminin-keratin+link+shields+the+nucleus+from+mechanical+deformation+and+signalling%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Mater%22%5BJournal%5D)">The laminin-keratin link shields the nucleus from mechanical deformation and signalling.</a> Nat Mater. 22 (11), 1409-1420 (2023).</li>
<li>Andreu, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+force+loading+rate+drives+cell+mechanosensing+through+both+reinforcement+and+cytoskeletal+softening%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Commun%22%5BJournal%5D)">The force loading rate drives cell mechanosensing through both reinforcement and cytoskeletal softening.</a> Nat. Commun. 12 (1), 4229(2021).</li>
<li>Phuyal, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanical+strain+stimulates+COPII+-dependent+secretory+trafficking+via+Rac1%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+J%22%5BJournal%5D)">Mechanical strain stimulates COPII -dependent secretory trafficking via Rac1.</a> EMBO J. 41 (18), e110596(2022).</li>
<li>Oria, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Force+loading+explains+spatial+sensing+of+ligands+by+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Force loading explains spatial sensing of ligands by cells.</a> Nature. 552 (7684), 219-224 (2017).</li>
<li>Cole, R. W., Jinadasa, T., Brown, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+and+interpreting+point+spread+functions+to+determine+confocal+microscope+resolution+and+ensure+quality+control%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Measuring and interpreting point spread functions to determine confocal microscope resolution and ensure quality control.</a> Nat Protoc. 6 (12), 1929-1941 (2011).</li>
<li>Faure, M. L., Gómez-González, M., Baguer, O., Comelles, J., Martínez, E., Arroyo, M., Trepat, X., Roca-Cusachs, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3D+Micropatterned+Traction+Force+Microscopy%3A+A+Technique+to+Control+3D+Cell+Shape+While+Measuring+Cell-Substrate+Force+Transmission%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Science%22%5BJournal%5D)">3D Micropatterned Traction Force Microscopy: A Technique to Control 3D Cell Shape While Measuring Cell-Substrate Force Transmission.</a> Advanced Science. 46, 2406932(2024).</li>
<li>Bogdanov, A. M., Kudryavtseva, E. I., Lukyanov, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-fading+media+for+live+cell+GFP+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Anti-fading media for live cell GFP imaging.</a> PLoS One. 7 (12), 53004(2012).</li>
<li>Richter, K. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glyoxal+as+an+alternative+fixative+to+formaldehyde+in+immunostaining+and+super-resolution+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+J%22%5BJournal%5D)">Glyoxal as an alternative fixative to formaldehyde in immunostaining and super-resolution microscopy.</a> EMBO J. 37 (1), 139-159 (2018).</li>
<li>Kopek, B. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diverse+protocols+for+correlative+super-resolution+fluorescence+imaging+and+electron+microscopy+of+chemically+fixed+samples%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Diverse protocols for correlative super-resolution fluorescence imaging and electron microscopy of chemically fixed samples.</a> Nat Protoc. 12 (5), 916-946 (2017).</li>
<li>Balachandran, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cyclic+strain+induces+dual-mode+endothelial+to+mesenchymal+transformation+of+the+cardiac+valve%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Cyclic strain induces dual-mode endothelial to mesenchymal transformation of the cardiac valve.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 108 (50), 19943-19948 (2011).</li>
<li>Kamble, H., Barton, M. J., Jun, M., Park, S., Nguyen, N. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+stretching+devices+as+research+tools%3A+Engineering+and+biological+considerations%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Chip%22%5BJournal%5D)">Cell stretching devices as research tools: Engineering and biological considerations.</a> Lab Chip. 16 (17), 3193-3203 (2016).</li>
<li>Jorba, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonlinear+elasticity+of+the+lung+extracellular+microenvironment+is+regulated+by+macroscale+tissue+strain%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Biomater%22%5BJournal%5D)">Nonlinear elasticity of the lung extracellular microenvironment is regulated by macroscale tissue strain.</a> Acta Biomater. 92, 265-276 (2019).</li>
<li>Mayer, C. R., Arsenovic, P. T., Bathula, K., Denis, K. B., Conway, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+3D+printed+stretching+devices+for+imaging+force+transmission+in+live-cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Mol+Bioeng%22%5BJournal%5D)">Characterization of 3D printed stretching devices for imaging force transmission in live-cells.</a> Cell Mol Bioeng. 12 (4), 289-300 (2019).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Acetaat masker</td><td>JD Photodata</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Acrylamid</td><td>Biorad</td><td>161-0140</td><td>40% Acrylamide-oplossing</td></tr><tr><td>APS</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A3678</td><td>Ammoniumpersulfaat voor elektroforese, &ge;98%</td></tr><tr><td>Aptes</td><td>Sigma Aldrich</td><td>281778</td><td>(3-aminopropyl)triethoxysilaan</td></tr><tr><td>Autonome microfluïdische pomp</td><td>Elveflow Cobalt</td><td>Cobalt Dual</td><td>Cobalt Dual</td></tr><tr><td>Bisacrylamide</td><td>Biorad</td><td>161-0142</td><td>2% Bis-oplossing</td></tr><tr><td>Mes</td><td>Fisher Scientific</td><td>11733919</td><td>Didactic Group Hoja did&aacute;ctica X100 LAME BISTOURI STERILE N&deg;23&nbsp; LAMD23&nbsp;</td></tr><tr><td>Klippjes</td><td>Sprintis</td><td>AKXX000001</td><td>Bull Dog Klippjes, 32 mm, gemaakt van metaal, capaciteit 10 mm, vernikkeld</td></tr><tr><td>Coronabehandelaar</td><td>Electrotechnicproducts</td><td>BD-20AC, SKU:12051A</td><td>BD-20AC LABORATORY CORONA TREATER</td></tr><tr><td>Bekers</td><td>VWR</td><td>611-1368</td><td>VWR, Beaker Cups, Disposable, 250 mL</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Roche</td><td>10236276001</td><td>DAPI kleuring</td></tr><tr><td>Ethanol 96%</td><td>Panreac Qu&iacute;mica, SLU</td><td>131085-1212</td><td>Etanol 96% v/v para an&aacute;lisis, ACS- 2,5 L</td></tr><tr><td>Fibronectin</td><td>Sigma</td><td>F0895</td><td>Fibronectin, uit menselijk plasma, vloeibaar&nbsp; 0,1%</td></tr><tr><td>FluoSpheres Carboxylate-gemodificeerde Microspheres, 0,1 &micro;m</td><td>Life Technology</td><td>F8801, F8803</td><td>Geelgroen en rode fluorescerende kralen voor resolutiebeoordeling</td></tr><tr><td>FluoSpheres Carboxylate-gemodificeerde Microspheres, 0,2 &micro;m</td><td>Fisher Scientific</td><td>F8809, F8810</td><td>Geelgroen en rode fluorescerende kralen voor spanningskalibratie</td></tr><tr><td>Glutaraldehyde</td><td>Sigma Aldrich</td><td>G6403</td><td>Glutaraldehyde-oplossing 50% in H2O</td></tr><tr><td>Interferometer</td><td>Veeco&nbsp;</td><td>Wyko NT1100</td><td>Interferometer om de dikte van PDMS-membranen te meten</td></tr><tr><td>Isopropanol</td><td>Panreac Qu&iacute;mica, SLU</td><td>131090-1212&nbsp;</td><td>2-Propanol (Reag. Ph. Eur.) para an&aacute;lisis, ACS, ISO</td></tr><tr><td>Messing weegschaal</td><td></td><td></td><td>Op maat gemaakt</td></tr><tr><td>Lintvrije papieren zakdoekjes</td><td>Berkshire</td><td>DURX670, DR670090920</td><td>Nonwoven-doekjes</td></tr><tr><td>Smeermiddel (vaseline)</td><td>Sigma</td><td>16415</td><td>Vaseline</td></tr><tr><td>Maskeraligner</td><td>S&uuml;ss MicroTec&nbsp;</td><td>MJB4&nbsp;</td><td>Maskeraligner voor fotolitografie op PMMA-platen</td></tr><tr><td>Mowiol</td><td>Calbiochem - Merck</td><td>475904</td><td>MOWIOL 4-88 Reagens</td></tr><tr><td>NIKON microscoop spinning disk confocal</td><td>Nikon</td><td>Eclipse Ti-E/B</td><td>uitgerust met Nikon Ti-S-ER&nbsp; stage</td></tr><tr><td>NIKON Microscoop Upright</td><td>Nikon</td><td>Eclipse Ni-E</td><td>uitgerust met Nikon NI-SH-E stage</td></tr><tr><td>Objectief 60x</td><td>Nikon</td><td>CFI Apo NIR 60X W</td><td>NIR Apo 60X/1.0w DIC N2 WD 2.8</td></tr><tr><td>PBS oplossing</td><td>Gibco</td><td>14200067</td><td>DPBS, 10x</td></tr><tr><td>PDMS</td><td>Dow Corning</td><td>2401673921</td><td>Sylgard - 184 Siliconen Elastomer KIT DN 109</td></tr><tr><td>Petrischaalringdeksel (groot)</td><td>Proquinorte</td><td>93060</td><td>Plato de cultivo celular TPP SKU: 07177925 diametro 100</td></tr><tr><td>Petrischaalringdeksel (klein)</td><td>Proquinorte</td><td>93060</td><td>Plato de cultivo celular TPP SKU: 07177924</td></tr><tr><td>Plasma cleaner</td><td>Harrick&nbsp;</td><td>PDC-002</td><td>Oxygen Plasma Generator</td></tr><tr><td>PMMA platen en ringen</td><td></td><td></td><td>zie specificatietabel in aanvullende documenten</td></tr><tr><td>Prolong</td><td>Invitrogen</td><td>P36930 /P36934</td><td>ProLong Gold antifade reagens</td></tr><tr><td>Repel-Silane</td><td>GE Healthcare</td><td>17-1332-01</td><td>PlusOne Repel-Silane ES</td></tr><tr><td>Ringen /rubberring</td><td>Tecnifil</td><td></td><td>Op maat gemaakt</td></tr><tr><td>Spin coater</td><td>Laurel</td><td>WS-650Sz</td><td>Spin coater</td></tr><tr><td>SPY650-DNA</td><td>Spirochrome</td><td>SC 501</td><td>SPY650-DNA</td></tr><tr><td>Stuurlepel</td><td>VWR</td><td>231-0416</td><td>Eco short disposable spatula, double-ended spoon and scoop, PP and EcoPure additive</td></tr><tr><td>SU8 hars 2100</td><td>Microchem</td><td>Y111075</td><td>SU8-2100</td></tr><tr><td>SU8-ontwikkelaar</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>484431</td><td>Propyleenglycolmonomethyletheracetaat</td></tr><tr><td>TEMED</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T9281-50ML</td><td>N,N,N',N'-Tetramethylethyleendiamine, Bioreagens geschikt. Electroforese reagens</td></tr><tr><td>Trichloro(1H,1H,2H,2H-perfluoroctyl)silaan&nbsp;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>448931</td><td>&nbsp;Trichloro(1H,1H,2H,2H-perfluorooctyl)silaan</td></tr><tr><td>Pincet</td><td>IESMAT</td><td>T5039&nbsp;</td><td>Dumont HP Pincet 7 Roestvrij staal. 0,17 x 0,10mm tip.(Agar Scientific Ltd)</td></tr><tr><td>Vacuumcontroller</td><td>GARCAP/Parker</td><td>&nbsp;990-005203-005&nbsp;</td><td>Controlador de vacio&nbsp;</td></tr><tr><td>Vacuumcontroller fluigent</td><td>Fluigent</td><td>LU-FEZ-N800</td><td>LineUp Flow EZ (n800mbar)</td></tr><tr><td>Wit werkbladpapier</td><td>Raima</td><td>931.1001</td><td>&nbsp;Paper Raima 42 x 52</td></tr></tbody></table>

equibiaxiaal rekapparaat voor sterk vergrote live-cell confocale fluorescentiemicroscopie

Equibiaxial Stretching Device for High Magnification Live-Cell Confocal Fluorescence Microscopy

Equibiaxiaal rekapparaat voor sterk vergrote live-cell confocale fluorescentiemicroscopie

Cells are continuously exposed to mechanical forces in physiological and pathological situations, including a variety of tensile and compressive stresses. ...

equibiaxial-stretching-device-for-high-magnification-live-cell

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bio-engineering

Xenopus embryonale epitheel is een ideaal modelsysteem om cel gedrag, zoals polariteit ontwikkeling en vorm veranderen tijdens epitheliale morfogenese bestuderen. Traditionele histologie van vaste monsters wordt in toenemende mate aangevuld door live-cell imaging confocale. Hier laten we zien methoden om de kikker weefsel te isoleren en te visualiseren live-epitheliale cellen en hun cytoskelet met behulp van live-cell confocale microscopie.

Live-cell imaging en kwantitatieve analyse van de embryonale epitheelcellen in Xenopus laevis</em

Wordt het gebruik van een constante kracht axiaal optische pincetten om de mechanische eigenschappen van korte DNA moleculen te verkennen. Door stretching DNA axiaal, minimaliseren we sterische hindernissen en artefacten die in conventionele laterale manipulatie, waardoor we DNA-moleculen te bestuderen zo kort ~ 100 nm.

Stretching korte sequenties van DNA met Constant Force Axiale optisch pincet

We presenteren in dit artikel een nieuw strekken platform dat kan worden gebruikt om cel responsen op complexe anisotrope biaxiale mechanische vervorming onderzoeken en kwantificeren van de mechanische eigenschappen van biologisch weefsel.

A Novel Stretching platform voor toepassingen in de Cel en Weefsel Mechanobiology

Er werd een nieuw beeldvormingsprotocol ontwikkeld met behulp van een op maat gemaakte motorgestuurde mechanische actuator om de meting van realtime-responsen op mechanische spanning in levende cellen mogelijk te maken. Relevant voor mechanobiologie, kan het systeem spanningen tot 20% toepassen terwijl het realtime beeldvorming met confocale of atomaire krachtmicroscopie mogelijk maakt.

Live cell imaging tijdens Mechanical Stretch

Nieuwe hulpmiddelen voor het mechanobiology onderzoek nodig zijn om te begrijpen hoe mechanische spanning activeert biochemische paden en lokt biologische reacties. Hier presenteren we een nieuwe methode voor selectief mechanische stimulatie van geïmmobiliseerdet dieren met een val van de microfluidic waardoor hoge resolutie beeldvorming van cellulaire reacties.

Met behulp van een Microfluidics apparaat voor mechanische stimulatie en hoge resolutie Imaging van C. elegans

Met behulp van een eerder ontworpen apparaat om mechanische belasting toe te passen op aanhangende cellen, dit document beschrijft een vernieuwde substratum geometrie en een aangepaste apparaat voor hoge-resolutie single-cell beeldvorming van gespannen cellen met een 100x olie onderdompeling doelstelling.

Hoge-resolutie beeldvorming van kern dynamiek in levende cellen onder Éénassige trekspanning

Hier gepresenteerd is het protocol van de Conpokal techniek, die confocale en atomaire kracht microscopie combineert in een enkel instrument platform. Conpokal biedt dezelfde cel, dezelfde regio, in de buurt van gelijktijdige confocale beeldvorming en mechanische karakterisering van levende biologische monsters.

Near Simultaneous Laser Scanning Confocal and Atomic Force Microscopy (Conpokal) op Live Cells

Hier wordt een protocol gepresenteerd voor superresolutie live-cell imaging in intact weefsel. We hebben de voorwaarden gestandaardiseerd voor beeldvorming van een zeer gevoelige volwassen stamcelpopulatie in zijn inheemse weefselomgeving. Deze techniek omvat het balanceren van temporele en ruimtelijke resolutie om de directe observatie van biologische verschijnselen in levend weefsel mogelijk te maken.

Superresolutie live celbeeldvorming van subcellulaire structuren

Hier beschrijven we computationele hulpmiddelen en methoden die visualisatie en analyse van drie- en vierdimensionale beeldgegevens van muizenembryo's mogelijk maken in de context van axiale elongatie en segmentatie, verkregen door into optische projectietomografie en door live beeldvorming en whole-mount immunofluorescentiekleuring met behulp van multifotonenmicroscopie.

Drie- en vierdimensionale visualisatie- en analysebenaderingen om gewervelde axiale rek en segmentatie te bestuderen

Superresolutiemicroscopie kan een gedetailleerd inzicht geven in de organisatie van componenten binnen het synaptonemale complex bij meiose. Hier demonstreren we een protocol om individuele eiwitten van het Caenorhabditis elegans synaptonemale complex op te lossen.

Superresolutiemicroscopie van het synaptonemale complex binnen de Caenorhabditis elegans kiembaan

Hier presenteren we een nieuw apparaat dat isotrope en uniaxiale spanningsgolfvormen op cellen toepast, terwijl het cultuur ondersteunt op substraten met instelbare stijfheid en aanpasbare eiwitmatrices. Dit eenvoudige, economische platform stelt onderzoekers in staat te onderzoeken hoe mechanische signalen de cellulaire functie reguleren in zowel fundamentele studies als ziektegerelateerde contexten.

Een nieuw platform voor in vitro cellulaire stretching en beeldvorming

Leer hoe cellen reageren op mechanische stimuli met een pneumatisch equibiaxiaal rekapparaat voor live-cell confocale fluorescentiemicroscopie. Deze methode onderzoekt mechanobiologische processen in zowel fysiologische als pathologische contexten.

Equibiaxiaal rekapparaat voor sterk vergrote live-cell confocale fluorescentiemicroscopie

Meer video's verkennen