Name: Het craniale Neurale Protocol van de Lijstcellen Driedimensionaal in vitro Differentiatie voor Gemultiplexte Analyse (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-02-14T14:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 55 s
Description: Leer een driedimensionaal in vitro protocol voor differentiatie van craniale neurale lijstcellen uit muizenembryonale stamcellen. Deze methode reduceert variabiliteit in neurosfeergrootte en ondersteunt gemultiplexte analyses.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Rothstein, M., Bhattacharya, D., Simoes-Costa, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+molecular+basis+of+neural+crest+axial+identity%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">The molecular basis of neural crest axial identity.</a> Dev Biol. 444, S170-S180 (2018).</li>
<li>Smeriglio, P., Zalc, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cranial+neural+crest+cells+contribution+to+craniofacial+bone+development+and+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Osteoporos+Rep%22%5BJournal%5D)">Cranial neural crest cells contribution to craniofacial bone development and regeneration.</a> Curr Osteoporos Rep. 21 (5), 624-630 (2023).</li>
<li>Zalc, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reactivation+of+the+pluripotency+program+precedes+formation+of+the+cranial+neural+crest%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Reactivation of the pluripotency program precedes formation of the cranial neural crest.</a> Science. 371 (6529), eabb4776(2021).</li>
<li>Perera, S. N., Kerosuo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+road+again%3A+Establishment+and+maintenance+of+stemness+in+the+neural+crest+from+embryo+to+adulthood%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">On the road again: Establishment and maintenance of stemness in the neural crest from embryo to adulthood.</a> Stem Cells. 39 (1), 7-25 (2021).</li>
<li>Nguyen, B. H., Ishii, M., Maxson, R. E., Wang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Culturing+and+manipulation+of+O9-1+neural+crest+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Culturing and manipulation of O9-1 neural crest cells.</a> J Vis Exp. (140), e58346(2018).</li>
<li>Ishii, M., Arias, A. C., Liu, L., Chen, Y. B., Bronner, M. E., Maxson, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+stable+cranial+neural+crest+cell+line+from+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Dev%22%5BJournal%5D)">A stable cranial neural crest cell line from mouse.</a> Stem Cells Dev. 21 (17), 3069-3080 (2012).</li>
<li>Rada-Iglesias, A., Bajpai, R., Prescott, S., Brugmann, S. A., Swigut, T., Wysocka, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epigenomic+annotation+of+enhancers+predicts+transcriptional+regulators+of+human+neural+crest%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Epigenomic annotation of enhancers predicts transcriptional regulators of human neural crest.</a> Cell Stem Cell. 11 (5), 633-648 (2012).</li>
<li>Cederquist, G. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Specification+of+positional+identity+in+forebrain+organoids%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Specification of positional identity in forebrain organoids.</a> Nat Biotechnol. 37 (4), 436-444 (2011).</li>
<li>Rada-Iglesias, A., Bajpai, R., Swigut, T., Brugmann, S. A., Flynn, R. A., Wysocka, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+unique+chromatin+signature+uncovers+early+developmental+enhancers+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A unique chromatin signature uncovers early developmental enhancers in humans.</a> Nature. 470 (7333), 279-283 (2011).</li>
<li>Prescott, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancer+divergence+and+cis-regulatory+evolution+in+the+human+and+chimp+neural+crest%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Enhancer divergence and cis-regulatory evolution in the human and chimp neural crest.</a> Cell. 163 (1), 68-83 (2015).</li>
<li>Chaddah, R., Arntfield, M., Runciman, S., Clarke, L., van der Kooy, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clonal+neural+stem+cells+from+human+embryonic+stem+cell+colonies%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Clonal neural stem cells from human embryonic stem cell colonies.</a> J Neurosci. 32 (23), 7771-7781 (2012).</li>
<li>Bajpai, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CHD7+cooperates+with+PBAF+to+control+multipotent+neural+crest+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">CHD7 cooperates with PBAF to control multipotent neural crest formation.</a> Nature. 463 (7283), 958-962 (2010).</li>
<li>Sipahi, R., Zupanc, G. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stochastic+cellular+automata+model+of+neurosphere+growth%3A+Roles+of+proliferative+potential%2C+contact+inhibition%2C+cell+death%2C+and+phagocytosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Theor+Biol%22%5BJournal%5D)">Stochastic cellular automata model of neurosphere growth: Roles of proliferative potential, contact inhibition, cell death, and phagocytosis.</a> J Theor Biol. 445, 151-165 (2018).</li>
<li>Mori, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+neurosphere+size+on+the+growth+rate+of+human+neural+stem%2Fprogenitor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Res%22%5BJournal%5D)">Effect of neurosphere size on the growth rate of human neural stem/progenitor cells.</a> J Neurosci Res. 84 (8), 1682-1691 (2006).</li>
<li>Kress, C., Vandormael-Pournin, S., Baldacci, P., Cohen-Tannoudji, M., Babinet, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonpermissiveness+for+mouse+embryonic+stem+%28ES%29+cell+derivation+circumvented+by+a+single+backcross+to+129%2FSv+strain%3A+establishment+of+ES+cell+lines+bearing+the+Omd+conditional+lethal+mutation%5BTitle%5D)+AND+%22Mamm+Genome%22%5BJournal%5D)">Nonpermissiveness for mouse embryonic stem (ES) cell derivation circumvented by a single backcross to 129/Sv strain: establishment of ES cell lines bearing the Omd conditional lethal mutation.</a> Mamm Genome. 9 (12), 998-1001 (1998).</li>
<li>Simões-Costa, M., Bronner, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishing+neural+crest+identity%3A+a+gene+regulatory+recipe%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Establishing neural crest identity: a gene regulatory recipe.</a> Development. 142 (2), 242-257 (2015).</li>
<li>Memberg, S. P., Hall, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dividing+neuron+precursors+express+neuron-specific+tubulin%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Dividing neuron precursors express neuron-specific tubulin.</a> J Neurobiol. 27 (1), 26-43 (1995).</li>
<li>Kim, C. N., Shin, D., Wang, A., Nowakowski, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatiotemporal+molecular+dynamics+of+the+developing+human+thalamus%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Spatiotemporal molecular dynamics of the developing human thalamus.</a> Science. 382, eadf9941(2023).</li>
<li>Grimaldi, A., Comai, G., Mella, S., Tajbakhsh, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+bipotent+progenitors+that+give+rise+to+myogenic+and+connective+tissues+in+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22ELife%22%5BJournal%5D)">Identification of bipotent progenitors that give rise to myogenic and connective tissues in mouse.</a> ELife. 11, e70235(2022).</li>
<li>To, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+multiomic+atlas+of+human+early+skeletal+development%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A multiomic atlas of human early skeletal development.</a> Nature. 635 (8039), 657-667 (2024).</li>
<li>Bajpai, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+stages+of+rapid+and+uniform+neuralization+of+human+embryonic+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Differ%22%5BJournal%5D)">Molecular stages of rapid and uniform neuralization of human embryonic stem cells.</a> Cell Death Differ. 16 (6), 807-825 (2009).</li>
<li>Kerosuo, L., Nie, S., Bajpai, R., Bronner, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Crestospheres%2C+Long-term+maintenance+of+multipotent%2C+premigratory+neural+crest+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">Crestospheres, Long-term maintenance of multipotent, premigratory neural crest stem cells.</a> Stem Cell Reports. 5 (4), 499-507 (2015).</li>
<li>Abe, S., Yamaguchi, S., Sato, Y., Harada, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sphere-derived+multipotent+progenitor+cells+obtained+from+human+oral+mucosa+are+enriched+in+neural+crest+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Sphere-derived multipotent progenitor cells obtained from human oral mucosa are enriched in neural crest cells.</a> Stem Cells Transl Med. 5 (1), 117-128 (2016).</li>
<li>Jensen, J. B., Parmar, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strengths+and+limitations+of+the+neurosphere+culture+system%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Strengths and limitations of the neurosphere culture system.</a> Mol Neurobiol. 34 (3), 153-161 (2006).</li>
<li>Ziegler, L., Grigoryan, S., Yang, I. H., Thakor, N. V., Goldstein, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+generation+of+Schwann+cells+from+human+embryonic+stem+cell-derived+neurospheres%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Rev+Rep%22%5BJournal%5D)">Efficient generation of Schwann cells from human embryonic stem cell-derived neurospheres.</a> Stem Cell Rev Rep. 7 (2), 394-403 (2011).</li>
</ol>

```html
<table>
<tbody>
<tr>
<td>0.22 &mu;m syringe filters</td>
<td>ClearLine</td>
<td>146560</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>15 mL High-Clarity Polypropylene Conical Tube</td>
<td>Falcon</td>
<td>352096</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>200 &micro;L ClearLine Plus Low Binding Filter Tips</td>
<td>Dutscher</td>
<td>713263</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>40 &micro;m filters</td>
<td>Falcon</td>
<td>352340</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>5 mL Serological pipette</td>
<td>Starstedt</td>
<td>86.1253.001</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>50 mL High-Clarity Polypropylene Conical Tube</td>
<td>Falcon</td>
<td>352070</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Accutase</td>
<td>Merck-Sigma</td>
<td>A6964</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Alexa Fluor 488 donkey anti rabbit IgG (H+L)</td>
<td>Thermofisher Scientific</td>
<td>A21206</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Alexa Fluor 594 donkey anti mouse IgG (H+L)</td>
<td>Thermofisher Scientific</td>
<td>A21203</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Alexa Fluor 647 donkey anti goat IgG (H+L)</td>
<td>Thermofisher Scientific</td>
<td>A31571</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Antibiotic-antimycotic solution&nbsp;</td>
<td>Merck-Sigma</td>
<td>A5955</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>B27 PLUS supplement</td>
<td>Thermofisher Scientific</td>
<td>17504044</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Bovine serum albumin (BSA)</td>
<td>Merck-Sigma</td>
<td>A9418</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Chloroform</td>
<td>Carlo Erba</td>
<td>438601</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Collagenase Type IV</td>
<td>Thermofisher Scientific, Gibco</td>
<td>17104019</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Costar 6 well clear TC-treated multiple well plates</td>
<td>Corning</td>
<td>3516</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Cover glasses, round</td>
<td>VWR</td>
<td>&nbsp;630-2113&nbsp;</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>DMEM KnockOut</td>
<td>Thermofisher Scientific</td>
<td>10829018</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>DMEM/F12+Glutamax</td>
<td>Thermofisher Scientific</td>
<td>10565018</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>DMEM high glucose</td>
<td>Merck-Sigma</td>
<td>D0822</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>DNA LoBind&nbsp;Tubes, 2 mL</td>
<td>Eppendorf</td>
<td>30108078</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>DNase/RNase-Free Distilled Water</td>
<td>Thermofisher Scientific</td>
<td>10977-035</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Dulbecco&rsquo;s Phosphate Buffered Saline (PBS)</td>
<td>Thermofisher Scientific</td>
<td>14190144</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Eppendorf Safe-Lock Tubes, 0.5 mL</td>
<td>Eppendorf</td>
<td>30121023</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Eppendorf Safe-Lock Tubes, 2 mL</td>
<td>Eppendorf</td>
<td>30120094</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>ESGRO mLIF Medium Supplement</td>
<td>Merck-Sigma</td>
<td>ESG1107</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Ethanol 70%</td>
<td>Carlo Erba</td>
<td>528170</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Fetal Bovine Serum</td>
<td>Merck-Sigma</td>
<td>F7524</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Fibronectin</td>
<td>Merck-Sigma</td>
<td>F085-2MG</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Fluoromount-G</td>
<td>Invitrogen</td>
<td>00-4958-02</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Gelatin solution</td>
<td>Merck-Sigma</td>
<td>ES-006-B</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>GlutaMAX</td>
<td>Thermofisher Scientific</td>
<td>35050061</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Human EGF</td>
<td>Peprotech</td>
<td>AF-100-15-500UG</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Human FGF-basic</td>
<td>Peprotech</td>
<td>100-18B</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Human SOX9 Antibody</td>
<td>R&amp;Dsystems</td>
<td>AF3075</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Insulin from bovine pancreas</td>
<td>Merck-Sigma</td>
<td>I6634</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>iScript cDNA Synthesis Kit</td>
<td>Biorad</td>
<td>1708891</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Mouse Anti-Human AP-2 alpha Monoclonal Antibody, Unconjugated</td>
<td>DSHB</td>
<td>3B5</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Mouse Anti-Human PAX7 Monoclonal Antibody, Unconjugated</td>
<td>DSHB</td>
<td>PAX7</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>N2 supplement</td>
<td>Thermofisher Scientific</td>
<td>17502048</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Neurobasal Medium</td>
<td>Thermofisher Scientific</td>
<td>21103049</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Non-Tissue culture treated plate, 96 well, Flat bottom</td>
<td>Falcon</td>
<td>351172</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Non-Tissue culture treated plate, 96 well, U-bottom</td>
<td>Falcon</td>
<td>351177</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Paraformaldehyde 16% solution, em grade</td>
<td>Electron Microscopy Sciences</td>
<td>15710</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Propan-2-ol</td>
<td>Carlo Erba</td>
<td>415154</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Purified anti-Tubulin &beta; 3 (TUJ1) Antibody</td>
<td>Biolegend</td>
<td>MMS-435P</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>RapiClear 1.47</td>
<td>Sunjin Lab</td>
<td>RC147001</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>RapiClear 1.52</td>
<td>Sunjin Lab</td>
<td>RC152001</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Scotch Double Sided 12.7 mm &times; 22.8 m</td>
<td></td>
<td></td>
<td>Clear fibreless double sided tape</td>
</tr>
<tr>
<td>SensiFAST SYBR No-ROX Kit</td>
<td>Meridian Bioscience</td>
<td>BIO-98020</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Sterile Disposable Surgical Scalpels</td>
<td>Swann-Morton</td>
<td>05XX</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Superfrost Plus Adhesion Microscope Slides</td>
<td>Epredia</td>
<td>J1800AMNZ</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Triton X-100</td>
<td>Thermofisher Scientific</td>
<td>A16046.AP</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>TRIzol Reagent</td>
<td>FisherScientific</td>
<td>15596026</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Trypsine-EDTA (0.05%)</td>
<td>Thermofisher Scientific</td>
<td>25300054</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>Tween-20</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>10113103</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>TWIST1 Rabbit mAb (IF Formulated)</td>
<td>Cell signaling technology</td>
<td>E7E2G</td>
<td></td>
</tr>
<tr>
<td>&beta;-mercaptoethanol</td>
<td>Thermofisher Scientific</td>
<td>3135001

het craniale neurale protocol van de lijstcellen driedimensionaal in vitro differentiatie voor gemultiplexte analyse

Cranial Neural Crest Cells Three-Dimensional In Vitro Differentiation Protocol for Multiplexed Assay

Het craniale Neurale Protocol van de Lijstcellen Driedimensionaal in vitro Differentiatie voor Gemultiplexte Analyse

With their remarkable capacity to generate both ectodermal and mesenchymal derivatives, cranial neural crest cells (CNCC) have attracted a lot of interest ...

cranial-neural-crest-cells-three-dimensional-vitro-differentiation

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

Om neurale lijst stamcellen (NCSC) kweken in vitro, is een speciaal medium (NCSCM) vereist. Essentieel onderdeel van NCSCM is kippenembryo extract (CEE). We beschrijven hier accurate technieken om een ​​maximale hoeveelheid van pure en hoge kwaliteit CEE, inclusief details zoals de isolatie, maceratie, centrifugeren en filtratie processen te produceren.

Productie van Chick Embryo Extract voor de teelt van Muizen neurale lijst Stem Cells

Isolatie van embryonale neurale lijst van de neurale buis vergemakkelijkt het gebruik...

Isolatie en Cultuur van neurale lijst cellen van embryonale Murine Neural Tube

This video illustrates a technique for isolating cranial neural folds from the midbrain region of chick embryos. It presents a detailed dissection process of the neural folds, their placement, and attachment on fibronectin-coated coverslips, followed by the observation of neural crest cell migration from the neural folds.

Isolating Cranial Neural Folds From a Chick Embryo for a Neural Crest Cell Culture

Neurale lijst (NC) cellen afkomstig van menselijke pluripotente stamcellen (HPSC) hebben een groot potentieel voor het modelleren van de menselijke ontwikkeling en ziekte en voor celvervangingstherapieën. Hier, een voedingsvrije aanpassing van de momenteel...

Voedingsvrije Afleiding van neurale stamcellen uit humane pluripotente stamcellen

Met het doel om veranderingen in miRNA's in gedifferentieerde menselijke neurale stamcellen (hNSC's) te karakteriseren, beschrijven we hNSC-differentiatie op een driedimensionaal systeem, de evaluatie van veranderingen in microRNA-expressie door miRNA PCR-array en computationele analyse voor miRNA-doelwitvoorspelling en de validatie ervan door middel van een dual luciferase-assay.

Differentiatie van een menselijke neurale stamcellen Line op Three Dimensional Culturen, Analyse van MicroRNA en vermeende doelwit-genen

We beschrijven een werkwijze voor het gebruiken van muriene embryonale stamcellen voor het genereren van twee- of driedimensionaal embryoïde lichamen. Vervolgens hebben we uitgelegd hoe neurale differentiatie van de embryoid lichaamscellen door retinolzuur, en hoe ertoe te bewegen hun staat van differentiatie te analyseren door voorlopercellen cel marker immunofluorescentie en immunoblotting.

Analyse van retinoïnezuur geïnduceerde neurale differentiatie van muis embryonale stamcellen in twee en drie-dimensionale embryoiden organen

Dit protocol beschrijft de dissectie en de cultuur van craniale neurale Crest cellen van muismodellen, voornamelijk voor de studie van de Celmigratie. We beschrijven de gebruikte technieken voor Live Imaging en de analyse van veranderingen in snelheid en celvorm.

Dissectie, cultuur en analyse van primaire Cranial neurale Crest cellen van de muis voor de studie van neurale Crest Celdelaminatie en migratie

Hier gepresenteerd is een protocol voor het genereren van een eencellige cultuur van menselijke embryonale stamcellen en hun daaropvolgende differentiatie in neurale voorlopercellen. Het protocol is eenvoudig, robuust, schaalbaar en geschikt voor geneesmiddelen screening en toepassingen voor regeneratieve geneeskunde.

Efficiënte Neurale differentiatie met behulp van eencellige cultuur van menselijke embryonale stamcellen

In dit protocol beschrijven we een stabiele, zeer efficiënte differentiatiestrategie voor het genereren van postganglionische sympathische neuronen uit menselijke pluripotente stamcellen. Dit model zal neuronen beschikbaar stellen voor het gebruik van studies van meerdere autonome aandoeningen.

Efficiënte differentiatie van postganglionic Sympathische neuronen met behulp van menselijke pluripotente stamcellen onder Feeder-vrije en chemisch gedefinieerde cultuurvoorwaarden

Hier hebben we een goedkope en eenvoudig te bedienen methode opgezet die een snelle en efficiënte differentiatie van embryonale stamcellen naar neuronen stuurt. Deze methode is geschikt voor popularisering onder laboratoria en kan een nuttig hulpmiddel zijn voor neurologisch onderzoek.

Neuronale differentiatie van embryonale stamcellen van muizen in vitro

Dit veelzijdige protocol beschrijft de isolatie van premigratory neural crest cells (NCC's) door de excisie van craniale neurale plooien van kuikenembryo's. Bij plating en incubatie komen migrerende NCC's tevoorschijn uit neurale vouwexplantaten, waardoor celmorfologie en migratie in een vereenvoudigde 2D-omgeving kunnen worden beoordeeld.

Voorbereiding en morfologische analyse van Chick Cranial Neural Crest Cell Cultures

Leer een driedimensionaal in vitro protocol voor differentiatie van craniale neurale lijstcellen uit muizenembryonale stamcellen. Deze methode reduceert variabiliteit in neurosfeergrootte en ondersteunt gemultiplexte analyses.

Het craniale Neurale Protocol van de Lijstcellen Driedimensionaal in vitro Differentiatie voor Gemultiplexte Analyse

Meer video's verkennen