Name: Effectieve en veilige genafgifte aan de nier van de muis via langzame retrograde injectie van nierbekken van adeno-geassocieerde virusvectoren (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-01T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 24 s
Description: Leer een veilige methode voor gendelivery aan de muisnier via langzame retrograde injectie van AAV-vectoren in het nierbekken. Deze techniek transduceert proximale tubuli efficiënt zonder weefselschade.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td>0.45 &mu;m PVDF spuitfilter</td><td>MilliporeSigma</td><td>SLHVR33RS</td><td></td></tr><tr><td>1.5 mL microcentrifugebuis</td><td>Fisher Scientific</td><td>05-408-129</td><td></td></tr><tr><td>15 mL polypropyleenbuis</td><td>Corning</td><td>352097</td><td></td></tr><tr><td>16% paraformaldehyde (PFA)</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>15710</td><td></td></tr><tr><td>250 mL centrifugefles</td><td>Fisher Scientific</td><td>055641S24</td><td></td></tr><tr><td>2F Silicone slang</td><td>Sai Infusion Technologies</td><td>SIL-2-50</td><td></td></tr><tr><td>25G vlindernaald</td><td>Medex Supply</td><td>26708</td><td></td></tr><tr><td>2-methylbutaan</td><td>MilliporeSigma</td><td>MX0760</td><td></td></tr><tr><td>2x qPCR-reactiebuffer</td><td>Fisher Scientific</td><td>43-676-59</td><td>Power SYBR Green PCR Master Mix</td></tr><tr><td>30G naald</td><td>Becton-Dickinson & Co</td><td>305106</td><td></td></tr><tr><td>50 mL polypropyleenbuis</td><td>Corning</td><td>430291</td><td></td></tr><tr><td>5-0 monofilament naald</td><td>Ethicon</td><td>Y463G</td><td></td></tr><tr><td>5 M NaCl</td><td>Lonza</td><td>51202</td><td></td></tr><tr><td>6-0 absorberbare naald</td><td>Ethicon</td><td>J489G</td><td></td></tr><tr><td>7.5% Mini-PROTEAN TGX Precast Protein Gels, 10-well, 30 &micro;L</td><td>Bio-Rad</td><td>4561023</td><td></td></tr><tr><td>Amersham ImageQuant 800 Western Blot Imaging System (Cytiva)</td><td>Cytiva</td><td>29459405</td><td></td></tr><tr><td>Amicon 100 kDa MWCO, 15 mL buis</td><td>Millipore Sigma</td><td>UFC910024</td><td></td></tr><tr><td>Anti-aquaporin 2 (AQP2) antilichaam</td><td>Abcam</td><td>ab199975</td><td>Een marker voor verzamelbuisjes</td></tr><tr><td>Anti-Na-K-2Cl cotransporter 2 (NKCC2) antilichaam</td><td>StressMarq Biosciences</td><td>SPC-401</td><td>Een marker voor dikke opstijgende limbus cellen</td></tr><tr><td>Anti-konijn IgG Alexa Fluor 647 antilichaam</td><td>Jackson ImmunoResearch</td><td>111-605-144</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Wilms Tumor 1 (WT1) antilichaam</td><td>Abcam</td><td>ab89901</td><td>Een marker voor podocyten</td></tr><tr><td>Beckman Coulter OptiSeal buis, Polypropyleen, 29,9 mL</td><td>Fisher Scientific</td><td>NC9691210</td><td></td></tr><tr><td>Beckman Coulter OPTISEAL BUIZEN</td><td>Fisher Scientific</td><td>NC9611575</td><td></td></tr><tr><td>Benzonase</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>1016970001</td><td></td></tr><tr><td>Bovine serum albumine (BSA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>5470</td><td></td></tr><tr><td>Centrifugale ultrafiltratiebuis</td><td>MilliporeSigma</td><td>UFC9100</td><td>Amicon 100 kDa MWCO, 15 mL</td></tr><tr><td>Keramische kralenbuis</td><td>Fisher Scientific</td><td>15-340-154</td><td></td></tr><tr><td>Cesiumchloride</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C3032-1KG</td><td></td></tr><tr><td>Klemtang</td><td>Fine Science Tools</td><td>00071-14</td><td></td></tr><tr><td>Geverfde verwarmingspad</td><td>Stryker Medical</td><td>8002-062-012</td><td></td></tr><tr><td>Wattenstaafje</td><td>Puritan</td><td>806-WC</td><td></td></tr><tr><td>Dekglas</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-541B</td><td></td></tr><tr><td>Cryostat microtoom</td><td>Tanner Scientific</td><td>TN50</td><td></td></tr><tr><td>Gebogen tang</td><td>Fine Science Tools</td><td>11052-10</td><td></td></tr><tr><td>Gebogen type microvat clip</td><td>Kleinert-Kutz</td><td>65145</td><td>Klem voor de nierarterie en nier ader</td></tr><tr><td>Dialysecassette</td><td>Fisher Scientific</td><td>PIA52976</td><td></td></tr><tr><td>DNA extractiekit</td><td>Qiagen</td><td>57704</td><td>QIAamp MinElute Virus Spin Kit</td></tr><tr><td>D-Sorbitol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S6021-1KG</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco's Modified Eagle Medium- hoge glucose</td><td>Corning</td><td>15-013-CV</td><td>DMEM-hoge glucose (4,5 g/L)</td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Fisher Scientific</td><td>15-575-020</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>Decon Laboratories</td><td>2716GEA</td><td></td></tr><tr><td>Fetaal bovien serum (FBS)</td><td>VWR</td><td>89510-186</td><td></td></tr><tr><td>Gasdichte glazen spuit</td><td>Hamilton</td><td>1710 TLL</td><td></td></tr><tr><td>Glutaraldehyde-oplossing</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G6257</td><td></td></tr><tr><td>Therapiepomp</td><td>Kent Scientific</td><td>HTP-1500</td><td></td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Sigma Aldrich</td><td>H4034-100G</td><td></td></tr><tr><td>Hoechst 33342</td><td>Invitrogen</td><td>H3570</td><td></td></tr><tr><td>Homogenisator</td><td>Fisher Scientific</td><td>15-340-163</td><td></td></tr><tr><td>Menselijke embryonale nier (HEK) 293 cellen</td><td>Agilent</td><td>240073</td><td></td></tr><tr><td>IJsemmer</td><td>Fisher Scientific</td><td>07-210-104</td><td></td></tr><tr><td>Infusiespuitpomp</td><td>Harvard Apparatus</td><td>70-4507</td><td></td></tr><tr><td>Isofluraan</td><td>Piramal Critical Care</td><td>NDC 66794-017-10</td><td></td></tr><tr><td>L-glutamine</td><td>Fisher Scientific</td><td>25030-081</td><td></td></tr><tr><td>Vloeibare blokkeerpen</td><td>Ted Pella</td><td>22309</td><td></td></tr><tr><td>Lotus tetragonolobus lectin (LTL)- Fluorescein</td><td>Vector Laboratories</td><td>FL-1321-2</td><td>Een marker voor proximale tubuli</td></tr><tr><td>Magnesiumchloride (MgCl2)</td><td>MilliporeSigma</td><td>M1028</td><td></td></tr><tr><td>Meloxicam</td><td>VetOne</td><td>NDC 86136-012-10</td><td>Analgeticum</td></tr><tr><td>Microscoopglasplaatje</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-550-15</td><td></td></tr><tr><td>Montagemedium</td><td>SouthernBiotech</td><td>0100-01</td><td></td></tr><tr><td>Naaldhouder</td><td>Fine Science Tools</td><td>12501-13</td><td></td></tr><tr><td>OCT-compound</td><td>Sakura Finetek</td><td>4583</td><td></td></tr><tr><td>Oftalmische zalf</td><td>Bausch & Lomb</td><td>NDC 24208-313-34</td><td></td></tr><tr><td>PE-10 polyethyleenbuis</td><td>BD</td><td>427401</td><td>Binnendiameter: 0,28 mm</td></tr><tr><td>Penicilline & Streptomycine Mix</td><td>Fisher Scientific</td><td>15140-122</td><td></td></tr><tr><td>Fosfaat-gebufferde zoutoplossing (PBS)

effectieve en veilige genafgifte aan de nier van de muis via langzame retrograde injectie van nierbekken van adeno-geassocieerde virusvectoren

Effective and Safe Gene Delivery to the Mouse Kidney via Slow Retrograde Renal Pelvis Injection of Adeno-Associated Virus Vectors

Effectieve en veilige genafgifte aan de nier van de muis via langzame retrograde injectie van nierbekken van adeno-geassocieerde virusvectoren

The development of effective in vivo tools and methods for gene delivery to the kidney is crucial for advancing basic kidney research and gene therapy for ...

effective-safe-gene-delivery-to-mouse-kidney-via-slow-retrograde

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

In this video, we demonstrate recombinant adeno associated virus-based gene delivery in the mouse pup. This method helps in studying gene expression in the targeted cells.

Recombinant Adeno Associated Virus Based Gene Delivery: A Technique for Transgene Delivery and Cardiac-Specific Expression in Rodent Model

Source:Pourshafie, N., et al. Systemic Delivery of MicroRNA Using Recombinant Adeno-associated Virus Serotype 9 to Treat Neuromuscular Diseases in Rodents. J. Vis. Exp. (2018).In this video, a spinal and bulbar muscular atrophy or SBMA-affected mouse undergoes tail vein injection of recombinant AAV (Adeno-associated vectors) vectors carrying a plasmid encoding therapeutic microRNA. The vector produces microRNA that binds to mutant AR (Androgen receptor)-mRNA (messenger ribonucleic acid),...

Injecting Recombinant Adeno-Associated Vectors in a Spinal and Bulbar Muscular Atrophy Mouse Model

Implantatie van kankercellen in het orgaan van oorsprong kan dienen als een nuttige preklinisch model om nieuwe therapieën te evalueren. MB49 blaascarcinoom cellen kunnen worden gekweekt in de blaas na intravesicale instillatie. Dit protocol toont katheterisatie van de blaas muis behoeve van tumor implantatie en adenovirale levering.

Een orthotope Blaaskanker Model voor Gene Delivery Studies

De beschreven postauriculaire chirurgische benadering maakt een snelle en directe toediening mogelijk in de scala tympani van de muizencochlea, terwijl bloedverlies en sterfte bij dieren wordt geminimaliseerd. Deze methode kan worden gebruikt voor cochleaire therapie met behulp van moleculaire, farmacologische en virale toediening aan postnatale muizen via het ronde venmembraan.

Chirurgische methode voor viraal gemedieerde Gene Levering aan de Mouse Inner Ear door het ronde venster membraan

In dit manuscript wordt een methode beschreven om recombinant adeno-geassocieerd virus 9 (rAAV9) vectoren te bereiden voor het manipuleren van genexpressie in het muizenhart.

Voorbereiding van de rAAV9 tot overexpressie of Knockdown Genes in Mouse Hearts

Hier beschrijven we de levering van microRNA met behulp van een recombinant adeno-associated virus serotype 9 in een muismodel van een neuromusculaire ziekte. Eenmalige perifere toediening in muizen geleid tot aanhoudende miRNA overexpressie in spieren en motorische neuronen, bieden een kans om studie miRNA functie en therapeutisch potentieel in vivo.

Systemische levering van MicroRNA met behulp van Recombinant Adeno-associated Virus Serotype 9 voor de behandeling van neuromusculaire ziekten bij knaagdieren

Het doel van de huidige studie was het ontwikkelen en valideren van de kracht en de veiligheid van de lever-adeno-geassocieerde virus 9 (AAV9) -gemedieerde genafgifte door gebruik te maken van een nieuwe subpiale genafgifte techniek bij volwassen muizen.

Subpiaal Adeno-geassocieerde Virus 9 (AAV9) Vector Levering in Volwassene Muizen

Dit protocol beschrijft een methode om te injecteren plasmide DNA in de nier van de muis via de renal bekken te produceren transgenic expressie specifiek in de nier.

Hydrodynamische Renal bekken injectie voor niet-virale expressie van eiwitten in de nier

Beschrijven we een nieuwe methode voor de levering van DNA plasmide in de cellen van de urothelial van muis blaas in vivo via de urinebuis catheterisatie en electroporation. Het biedt een snelle en gemakkelijke manier voor het genereren van autochtone Muismodellen van ziekten van de blaas.

Nieuwe methode van plasmide DNA levering aan muis blaas Urothelium door Electroporation

Hier beschrijven we een geoptimaliseerd protocol voor laterale staartaderinjectie bij muizen om adeno-geassocieerd virus (AAV) systemisch toe te dienen bij volwassen muizen. Daarnaast beschrijven we protocollen van veelgebruikte assays om AAV-transductie te beoordelen.

Consistente toediening van adeno-geassocieerd virus via laterale staartaderinjectie bij volwassen muizen

Dit protocol beschrijft hoe intrasplentische injectie van AAV8-afgeleverd klein haarspeld-RNA dezelfde gen-knockdown-efficiëntie in de lever bereikt als injectie van de poortader, wat een eenvoudigere procedure vertegenwoordigt met veel lagere perioperatieve en postoperatieve mortaliteit en complicaties.

Efficiënte genknockdown in de lever via intrasplenische injectie van adeno-geassocieerd virus serotype 8 (AAV8)-afgeleverd klein haarspeld-RNA

Leer een veilige methode voor gendelivery aan de muisnier via langzame retrograde injectie van AAV-vectoren in het nierbekken. Deze techniek transduceert proximale tubuli efficiënt zonder weefselschade.

Effectieve en veilige genafgifte aan de nier van de muis via langzame retrograde injectie van nierbekken van adeno-geassocieerde virusvectoren (Video) | JoVE Journal

Effectieve en veilige genafgifte aan de nier van de muis via langzame retrograde injectie van nierbekken van adeno-geassocieerde virusvectoren

Meer video's verkennen