Name: Beeldvorming van Ca2+ -signalen in kleine longaders bij fysiologische intraluminale druk (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-03-21T13:20:00.000+00:00
Duration: 5 min 35 s
Description: Leer een nieuw protocol voor Ca²⁺-beeldvorming in kleine longaders van muizen met confocale microscopie en Fluo-4 AM. Deze methode onthult hoe intraluminale druk calciumsignalen reguleert.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Suresh, K., Shimoda, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+circulation%5BTitle%5D)+AND+%22Compr+Physiol%22%5BJournal%5D)">Lung circulation.</a> Compr Physiol. 6 (2), 897-943 (2016).</li>
<li>Sundjaja, J. H., Bordoni, B. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSundjaja%2C+JH+%22Thorax%2C+heart+pulmonic+valve%22">Thorax, heart pulmonic valve</a>. , StatPearls Publishing. Treasure Island, FL, USA. (2024).</li>
<li>Daneva, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Caveolar+peroxynitrite+formation+impairs+endothelial+TRPV4+channels+and+elevates+pulmonary+arterial+pressure+in+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Caveolar peroxynitrite formation impairs endothelial TRPV4 channels and elevates pulmonary arterial pressure in pulmonary hypertension.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 118 (17), e2023130118(2021).</li>
<li>Daneva, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+pannexin+1-TRPV4+channel+signaling+lowers+pulmonary+arterial+pressure+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Endothelial pannexin 1-TRPV4 channel signaling lowers pulmonary arterial pressure in mice.</a> Elife. 10, e67777(2021).</li>
<li>Kuhr, F. K., Smith, K. A., Song, M. Y., Levitan, I., Yuan, J. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+mechanisms+of+pulmonary+arterial+hypertension%3A+role+of+Ca2%2B+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">New mechanisms of pulmonary arterial hypertension: role of Ca2+ signaling.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 302 (8), H1546-H1562 (2012).</li>
<li>Sonkusare, S. K., Laubach, V. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+TRPV4+channels+in+lung+edema+and+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Top+Membr%22%5BJournal%5D)">Endothelial TRPV4 channels in lung edema and injury.</a> Curr Top Membr. 89, 43-62 (2022).</li>
<li>Kuppusamy, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Purinergic+P2Y2+receptor-induced+activation+of+endothelial+TRPV4+channels+mediates+lung+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Signal%22%5BJournal%5D)">Purinergic P2Y2 receptor-induced activation of endothelial TRPV4 channels mediates lung ischemia-reperfusion injury.</a> Sci Signal. 16 (808), eadg1553(2023).</li>
<li>Alvarez, D. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transient+receptor+potential+vanilloid+4-mediated+disruption+of+the+alveolar+septal+barrier%3A+a+novel+mechanism+of+acute+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Transient receptor potential vanilloid 4-mediated disruption of the alveolar septal barrier: a novel mechanism of acute lung injury.</a> Circ Res. 99 (9), 988-995 (2006).</li>
<li>Balakrishna, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TRPV4+inhibition+counteracts+edema+and+inflammation+and+improves+pulmonary+function+and+oxygen+saturation+in+chemically+induced+acute+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">TRPV4 inhibition counteracts edema and inflammation and improves pulmonary function and oxygen saturation in chemically induced acute lung injury.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 307 (2), L158-L172 (2014).</li>
<li>Suresh, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reactive+oxygen+species+induced+Ca2%2B+influx+via+TRPV4+and+microvascular+endothelial+dysfunction+in+the+SU5416%2Fhypoxia+model+of+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Reactive oxygen species induced Ca2+ influx via TRPV4 and microvascular endothelial dysfunction in the SU5416/hypoxia model of pulmonary arterial hypertension.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 314 (5), L893-L907 (2018).</li>
<li>Haissaguerre, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spontaneous+initiation+of+atrial+fibrillation+by+ectopic+beats+originating+in+the+pulmonary+veins%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Spontaneous initiation of atrial fibrillation by ectopic beats originating in the pulmonary veins.</a> N Engl J Med. 339 (10), 659-666 (1998).</li>
<li>Heijman, J., Voigt, N., Nattel, S., Dobrev, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+and+molecular+electrophysiology+of+atrial+fibrillation+initiation%2C+maintenance%2C+and+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Cellular and molecular electrophysiology of atrial fibrillation initiation, maintenance, and progression.</a> Circ Res. 114 (9), 1483-1499 (2014).</li>
<li>Brunton, T. L., Fayrer, J. XXII <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Note+on+independent+pulsation+of+the+pulmonary+veins+and+vena+cava%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+R+Soc+Lond%22%5BJournal%5D)">Note on independent pulsation of the pulmonary veins and vena cava.</a> Proc R Soc Lond. 25, 174-176 (1877).</li>
<li>Namekata, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Involvement+of+the+Na%28%2B%29%2FCa%282%2B%29+exchanger+in+the+automaticity+of+guinea-pig+pulmonary+vein+myocardium+as+revealed+by+SEA0400%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Sci%22%5BJournal%5D)">Involvement of the Na(+)/Ca(2+) exchanger in the automaticity of guinea-pig pulmonary vein myocardium as revealed by SEA0400.</a> J Pharmacol Sci. 110 (1), 111-116 (2009).</li>
<li>Cros, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regional+differences+in+Ca2%2B+signaling+and+transverse-tubules+across+left+atrium+from+adult+sheep%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Regional differences in Ca2+ signaling and transverse-tubules across left atrium from adult sheep.</a> Int J Mol Sci. 24 (3), 2347(2023).</li>
<li>Dabertrand, F., Nelson, M. T., Brayden, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ryanodine+receptors%2C+calcium+signaling%2C+and+regulation+of+vascular+tone+in+the+cerebral+parenchymal+microcirculation%5BTitle%5D)+AND+%22Microcirculation%22%5BJournal%5D)">Ryanodine receptors, calcium signaling, and regulation of vascular tone in the cerebral parenchymal microcirculation.</a> Microcirculation. 20 (4), 307-316 (2013).</li>
<li>Nair, R., Lamaa, N. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aNair%2C+R+%22Pulmonary+capillary+wedge+pressure%22">Pulmonary capillary wedge pressure</a>. , StatPearls Publishing. Treasure Island, FL, USA. (2024).</li>
<li>Fukuta, H., Little, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cardiac+cycle+and+the+physiologic+basis+of+left+ventricular+contraction%2C+ejection%2C+relaxation%2C+and+filling%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+Fail+Clin%22%5BJournal%5D)">The cardiac cycle and the physiologic basis of left ventricular contraction, ejection, relaxation, and filling.</a> Heart Fail Clin. 4 (1), 1-11 (2008).</li>
<li>Daneva, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+IK+and+SK+channel+activation+decreases+pulmonary+arterial+pressure+and+vascular+remodeling+in+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Pulm+Circ%22%5BJournal%5D)">Endothelial IK and SK channel activation decreases pulmonary arterial pressure and vascular remodeling in pulmonary hypertension.</a> Pulm Circ. 13 (1), e12186(2023).</li>
<li>Marziano, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nitric+oxide-dependent+feedback+loop+regulates+transient+receptor+potential+vanilloid+4+%28TRPV4%29+channel+cooperativity+and+endothelial+function+in+small+pulmonary+arteries%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Heart+Assoc%22%5BJournal%5D)">Nitric oxide-dependent feedback loop regulates transient receptor potential vanilloid 4 (TRPV4) channel cooperativity and endothelial function in small pulmonary arteries.</a> J Am Heart Assoc. 6 (12), e007157(2017).</li>
<li>Chen, Y. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+smooth+muscle+Ca2%2B-signaling+nanodomains+in+blood+pressure+regulation%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Novel smooth muscle Ca2+-signaling nanodomains in blood pressure regulation.</a> Circulation. 146 (7), 548-564 (2022).</li>
<li>Sonkusare, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elementary+Ca2%2B+signals+through+endothelial+TRPV4+channels+regulate+vascular+function%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Elementary Ca2+ signals through endothelial TRPV4 channels regulate vascular function.</a> Science. 336, 597-601 (2012).</li>
<li>Arias-Cavieres, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ryanodine+receptor-mediated+calcium+release+has+a+key+role+in+hippocampal+LTD+induction%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Ryanodine receptor-mediated calcium release has a key role in hippocampal LTD induction.</a> Front Cell Neurosci. 12, 403(2018).</li>
<li>Chen, Y. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calcium+signal+profiles+in+vascular+endothelium+from+Cdh5-GCaMP8+and+Cx40-GCaMP2+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vasc+Res%22%5BJournal%5D)">Calcium signal profiles in vascular endothelium from Cdh5-GCaMP8 and Cx40-GCaMP2 mice.</a> J Vasc Res. 58 (3), 159-171 (2021).</li>
<li>Ottolini, M., Sonkusare, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+calcium+signaling+mechanisms+in+arterial+smooth+muscle+and+endothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Compr+Physiol%22%5BJournal%5D)">The calcium signaling mechanisms in arterial smooth muscle and endothelial cells.</a> Compr Physiol. 11 (2), 1831-1869 (2021).</li>
<li>Boyette, L. C., Burns, B. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBoyette%2C+LC+%22Physiology%2C+pulmonary+circulation%22">Physiology, pulmonary circulation</a>. , StatPearls Publishing. Treasure Island, FL, USA. (2024).</li>
<li>Ottolini, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Local+peroxynitrite+impairs+endothelial+transient+receptor+potential+vanilloid+4+channels+and+elevates+blood+pressure+in+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Local peroxynitrite impairs endothelial transient receptor potential vanilloid 4 channels and elevates blood pressure in obesity.</a> Circulation. 141 (16), 1318-1333 (2020).</li>
<li>Shan, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phosphorylation+of+the+ryanodine+receptor+mediates+the+cardiac+fight+or+flight+response+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Phosphorylation of the ryanodine receptor mediates the cardiac fight or flight response in mice.</a> J Clin Invest. 120 (12), 4388-4398 (2010).</li>
<li>Knot, H. J., Standen, N. B., Nelson, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ryanodine+receptors+regulate+arterial+diameter+and+wall+%5BCa2%2B%5D+in+cerebral+arteries+of+rat+via+Ca2%2B-dependent+K%2B+channels%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Ryanodine receptors regulate arterial diameter and wall [Ca2+] in cerebral arteries of rat via Ca2+-dependent K+ channels.</a> J Physiol. 1 (Pt 1), 211-221 (1998).</li>
<li>Tischbirek, C., Birkner, A., Jia, H., Sakmann, B., Konnerth, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deep+two-photon+brain+imaging+with+a+red-shifted+fluorometric+Ca2%2B+indicator%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Deep two-photon brain imaging with a red-shifted fluorometric Ca2+ indicator.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 112 (36), 11377-11382 (2015).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Custom-Designed SparkAn Software&nbsp;</td><td>University of Vermont</td><td></td><td>https://github.com/vesselman/SparkAn</td></tr><tr><td>Fluo-4, AM</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>F14201</td><td></td></tr><tr><td>FN1 Upright Microscope&nbsp;</td><td>Nikon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Heater/Temperature Controller&nbsp;</td><td>Warner Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Imaging System&nbsp;</td><td>Andor&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>iQ 3.x acquisition Software</td><td>Andor&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>iXon EMCCD Cameras</td><td>Andor&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Nylon Thread for Tying Blood Vessels</td><td>Living Systems Instrumentation</td><td>THR-G</td><td></td></tr><tr><td>Pressure Myography Chamber&nbsp;</td><td>Instrumentation and Model Facility, University of Vermont, Burlington, VT, USA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Revolution WD (with Borealis) High Speed Spinning Disk Confocal Imaging System</td><td>Andor&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ryanodine</td><td>Bio-Techne</td><td>1329</td><td></td></tr><tr><td>Servo Pressure Controller&nbsp;</td><td>Living Systems Instrumentation</td><td></td><td></td></tr><tr><td>SS Dissection Pins, 0.2mm dia</td><td>Living Systems Instrumentation</td><td>PIN-0.2mm</td><td></td></tr><tr><td>Tubing Pump REGLO</td><td>ISMATEC</td><td>ISM4212</td><td></td></tr></tbody></table>

beeldvorming van ca2+ -signalen in kleine longaders bij fysiologische intraluminale druk

Imaging Ca2+ Signals in Small Pulmonary Veins at Physiological Intraluminal Pressures

Beeldvorming van Ca2+ -signalen in kleine longaders bij fysiologische intraluminale druk

Pulmonary veins (PVs) carry oxygen-rich blood from the lungs back to the left heart, thus serving an important function in the delivery of oxygen-rich ...

imaging-ca2-signals-small-pulmonary-veins-at-physiological

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

Om de pulmonale verspreiding en vaatstelsel reacties te oefenen te beoordelen, beschrijven we de zuurstof diffusie capaciteit techniek multiple-geïnspireerd om capillaire bloedvolume en membraan diffusiecapaciteit, evenals geagiteerd zoutoplossing contrast echocardiografie te bepalen voor de aanwerving van intrapulmonale arterioveneuze anastomosen beoordelen.

Evaluatie van Pulmonary capillair bloed Volume, Membraan diffusiecapaciteit en Intrapulmonaire arterioveneuze anastomosen tijdens de training

We beschrijven een imaging protocol waarmee de behandelaar te visualiseren, in real-time, de patiënt de intravasculaire en extravascular ruimte volumes en diurese en vloeistof verwijdering parameters ook op Westers ingesteld voor de veilige en efficiënte behandeling van longoedeem.

Bed echografie voor leidende vloeistof verwijderen bij patiënten met longoedeem: het omgekeerde-watervallen-Protocol

De afmetingen van de longaders (PV) zijn belangrijke parameters bij het plannen van pulmonale aderisolatie. 2D transo-oesofageale echocardiografie kan slechts beperkte gegevens over de pv's opleveren; 3D-echocardiografie kan echter relevante diameters en gebieden van de PV's evalueren, evenals hun ruimtelijke relatie met omliggende structuren.

Driedimensionale echocardiografische methode voor de visualisatie en beoordeling van specifieke parameters van de longaders

Hier beschrijven we een correlatieve workflow voor de excisie, druk, fixatie en beeldvorming van de muriene longklep om de bruto-conformatie en lokale extracellulaire matrixstructuren te bepalen.

Chirurgie en monsterverwerking voor correlatieve beeldvorming van de muriene longklep

Intravitale fluorescentiemicroscopie kan worden gebruikt om leukocyten-endotheelinteracties en capillaire perfusie in realtime te bestuderen. Dit protocol beschrijft methoden om deze parameters in de pulmonale microcirculatie in beeld te brengen en te kwantificeren met behulp van een vacuümgestabiliseerd longbeeldvormingssysteem.

Intravitale widefield fluorescentiemicroscopie van pulmonale microcirculatie bij experimenteel acuut longletsel met behulp van een vacuümgestabiliseerd beeldvormingssysteem

Point-of-care echografie (POCUS) van de longen biedt snelle antwoorden in snel veranderende klinische scenario's. We presenteren een efficiënt en informatief protocol voor beeldacquisitie voor gebruik in acute zorgomgevingen.

Point-of-Care longechografie bij volwassenen: beeldacquisitie

Point-of-care echografie evaluatie van de inferieure vena cava (IVC) wordt vaak gebruikt om onder andere de volumestatus te identificeren. Beeldvorming moet systematisch worden uitgevoerd om herhaalbaarheid te garanderen. Dit manuscript bespreekt de methoden en valkuilen van echografisch IVC-onderzoek.

Beeldacquisitiemethode voor de sonografische beoordeling van de inferieure vena cava

Nauwkeurige intracardiale echocardiografie (ICE) toont een aanzienlijke nauwkeurigheid bij het schatten van de linker atriale structuur, een prospectieve en veelbelovende methode voor het schatten van de hartstructuur. Hier stellen we een protocol voor voor driedimensionale modellering van het linker atrium en de longaders met ICE en snelle anatomische mapping (FAM) katheterremodellering.

Driedimensionale modellering van het linker atrium en de longaders met een nauwkeurige intracardiale echocardiografiebenadering

Dit protocol demonstreert microscopiegeleide isolatie en immunofluorescentiekleuring van longaders van muizen. We bereiden weefselmonsters voor die het linker atrium, de longaders en de bijbehorende longen bevatten en kleuren ze voor cardiale troponine T en Connexin 43.

Microdissectie en immunofluorescentiekleuring van myocardiale hulzen in longaders van muizen

Het protocol hier biedt een snelle, op fenotype gebaseerde benadering voor gerichte echografie van de hypotensieve patiënt, met behulp van subcostale beelden van de inferieure vena cava en het hart, met extra weergaven van de bovenste longen en pleurale ruimtes.

Echocardiografische beoordeling met behulp van alleen subxiphoid-onderzoek voor hypotensieve patiënten

Hier presenteren we een protocol voor de toepassing van POCUS aan het bed bij het ARDS-beheer binnen de intensive care. Het beschrijft gestandaardiseerde technieken voor long-, hart-, diafragma-, veneuze en maagonderzoeken om beademing te sturen, het afbouwen te voorspellen en complicaties te voorkomen.

De toepassing van point-of-care echografie (POCUS) bij de behandeling van het Acute Ademische Distresssyndroom (ARDS) op de intensive care

Leer een nieuw protocol voor Ca²⁺-beeldvorming in kleine longaders van muizen met confocale microscopie en Fluo-4 AM. Deze methode onthult hoe intraluminale druk calciumsignalen reguleert.

Beeldvorming van Ca²⁺ -signalen in kleine longaders bij fysiologische intraluminale druk

Meer video's verkennen