Flavonoïde inhoud tijdens de groei en bloemontwikkeling van Calendula officinalis L.

Onze studie maakt gebruik van een toegankelijke en betrouwbare colorimetrische methode om het totale flavonoïde te kwantificeren, waardoor gegevensanalyse in fytochemische laboratoria wordt vergemakkelijkt en het onderzoek naar verbindingen met therapeutische eigenschappen wordt ondersteund.

Het flavonoïdegehalte in calendula wordt bestudeerd tijdens de bloemontwikkeling om de optimale oogsttijd te bepalen en het medicinale en commerciële potentieel te maximaliseren.

Ons protocol is een gevoelige en efficiënte microtechniek die het mogelijk maakt om flavonoïden te kwantificeren met behulp van kleine monsterhoeveelheden, waardoor het gebruik van oplosmiddelen wordt geoptimaliseerd en de analyse met plantaardig materiaal beperkt is.

[Docent] Droog om te beginnen het plantmateriaal 48 uur lang in een heteluchtoven op 40 graden Celsius. Eenmaal droog, haal je het uit de oven, doe je het gedroogde materiaal in papieren enveloppen en bewaar je ze in het donker bij kamertemperatuur. Vries het plantmateriaal in met vloeibare stikstof om het voor te bereiden op het malen. Maal vervolgens het bevroren materiaal in een porseleinen vijzel tot het een uniforme textuur heeft. Bereid de monsters voor door van elk monster 25 milligram van het verpulverde materiaal af te wegen. Voeg 500 microliter 80% methanol toe aan het gewogen materiaal. Om flavonoïden te extraheren, incubeer je het mengsel een uur lang bij 70 graden Celsius. Centrifugeer het mengsel na de incubatie gedurende 13 minuten bij 731 g. Bereid nu aliquots voor door 150 microliter van het verkregen extract te nemen en er 37 microliter 80% methanol aan toe te voegen. Neem 50 microliter van het extract en voeg 100 microliter van een molair kaliumacetaat en 100 microliter 10% aluminiumchloride toe. Voltooi de oplossing door het totale volume van het mengsel op vijf milliliter te brengen met behulp van gedestilleerd water. Stel de absorptiegolflengte van een spectrofotometer in op 415 nanometer en meet de absorptie van de oplossing. Genereer de kalibratiecurve door quercetineoplossingen te bereiden van 50, 100, 175 en 350 milligram per milliliter. Om kalibratiemonsters voor te bereiden, pipetteert u 500 microliter van de quercetineoplossing vanaf het laatste punt van de kalibratiecurve en voegt u 100 microliter 10% aluminiumchloride en 100 microliter van één molair kaliumacetaat toe aan de oplossing. Voeg vervolgens 1,5 milliliter 80% methanol en 2,8 milliliter gedestilleerd water toe. Laat de kalibratieoplossingen 40 minuten rusten bij kamertemperatuur. Stel de absorptiegolflengte van de spectrofotometer in op 415 nanometer en meet de absorptie van de kalibratiemonsters om de kalibratiecurve te construeren. Bereken tot slot de flavonoïdenconcentratie en het flavonoïdengehalte per gram droog materiaal. Deze tabel geeft een overzicht van de variatie in flavonoïden en de flavonoïdeproductie per plant, van de eerste knopvorming tot de volledige bloei en vruchtontwikkeling van de calendulabloemhoofdjes. Hogere niveaus van totale flavonoïdeconcentratie werden waargenomen tussen stadium acht en 11, wat overeenkomt met knoppen met gescheiden kelkblaadjes tot volledig geopende bloemhoofdjes. In eerdere stadia, zoals knoppen met verenigde kelkblaadjes, en in latere stadia, zoals senescente bloemhoofdjes, waren de flavonoïdeconcentraties 22% tot 27% lager in vergelijking met volledig geopende bloemhoofdjes. Deze figuur toont de meting van de totale flavonoïdeconcentratie in de droge stof van calendulabloemhoofdjes, ligulaatbloemen en buisvormige bloemen in de ontwikkelingsstadia van bloemen. De resultaten suggereren dat het begrijpen van de variatie van de flavonoïdeconcentratie tussen verschillende bloemstructuren en stadia nuttig is voor het bepalen van de optimale oogsttijd om het flavonoïdegehalte in calendula-bloemhoofdjes te maximaliseren.