Een efficiënte methode voor het extraheren van epitelie van de menselijke eileider voor analyses van één cel

1.4K weergaven

07:03 min.

28 maart 2025

10.3791/67753-v

28 maart 2025

1.4K weergaven

Lauryn Ruegg¹^,² , Laura B. James-Allan¹^,² , Gabriella DiBernardo¹^,² , Christopher Ochoa¹^,²^,³ , Yan-Ruide Li⁴^,⁵ , Lili Yang²^,³^,⁴^,⁵^,⁶^,⁷ , Sanaz Memarzadeh¹^,²^,³^,⁷^,⁸^,⁹

¹Department of Obstetrics and Gynecology, David Geffen School of Medicine, University of California, Los Angeles, ²Eli and Edythe Broad Center of Regenerative Medicine and Stem Cell Research, University of California, Los Angeles, ³Molecular Biology Institute, University of California, Los Angeles, ⁴Department of Bioengineering, University of California, Los Angeles, ⁵Department of Microbiology, Immunology and Molecular Genetics, University of California, Los Angeles, ⁶Parker Institute for Cancer Immunotherapy, University of California, Los Angeles, ⁷The Jonsson Comprehensive Cancer Center, University of California Los Angeles, ⁸The VA Greater Los Angeles Healthcare System, ⁹Department of Medical and Molecular Pharmacology, David Geffen School of Medicine, University of California, Los Angeles

Dit protocol beschrijft een eendaagse methode voor de isolatie van menselijke eileiderepitheelcellen. Geïsoleerde epitheelcellen kunnen worden geplateerd in 2-dimensionale (2D) cultuur of worden gedissocieerd in eencellige suspensies en worden gebruikt in stroomafwaartse experimenten, waaronder flowcytometrie en eencellige RNA-sequencing.

Meer video's verkennen

Isolatie van epitheelcellen

enkelcel-suspensie

single-cell RNA-sequencing

mechanische digestie

enzymatische digestie

EpCAM-positieve cellen

contaminatie door stromale cellen

Chapters in this video

0:00

Introduction

1:11

Fallopian Tube Collection and Preparation for Epithelial Cell Isolation

2:06

Epithelial Cell Isolation and Dissociation

4:18

Digestion of Isolated Epithelial Cells to Obtain a Single-Cell Suspension

6:02

Representative Results