Name: Identificatie en classificatie van positiespecifieke GABA A-receptorsubeenheid missense-varianten voor hun rol in hippocampale piramidale neuronen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-06T13:15:00.000+00:00
Duration: 8 min 4 s
Description: Ontdek een multiscale raamwerk voor het analyseren van pathogene GABA A-receptormutaties in CA1 piramidale neuronen. Deze methode helpt onderzoekers de neurale mechanismen van epilepsie te begrijpen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td>Brian2&nbsp;</td><td>Sorbonne Université, INSERM, CNRS, Institut de la Vision, Frankrijk; Imperial College London, Verenigd Koninkrijk</td><td>2.8.0.4</td><td>Stimberg et al., 2019 (https://pypi.org/project/Brian2/ )</td></tr><tr><td>dbNSFP server&nbsp;&nbsp;</td><td>Genos Bioinformatics LLC, VS</td><td>v3.0</td><td>Liu et al., 2020 (http://database.liulab.science/dbNSFP) (https://sites.google.com/site/jpopgen/dbNSFP)</td></tr><tr><td>HOPE&nbsp;&nbsp;</td><td>Centre for Molecular and Biomolecular Informatics CMBI, Radboud Universiteit, Nederland&nbsp;</td><td>1.1.1</td><td>Venselaar et al., 2010 (https://www3.cmbi.umcn.nl/hope/)</td></tr><tr><td>Jalview&nbsp;&nbsp;</td><td>University of Dundee, VK</td><td>JV2</td><td>Waterhouse et al., 2009 (https://www.jalview.org/)</td></tr><tr><td>Jupyter Notebook</td><td>Project Jupyter, VS</td><td></td><td>https://jupyter.org/install&nbsp;</td></tr><tr><td>Phyton</td><td>Python Software Foundation, VS</td><td>3.13</td><td>https://www.python.org/downloads/</td></tr><tr><td>Protter&nbsp;&nbsp;</td><td>ETH Zürich, Zwitserland</td><td>Versie 1.0</td><td>Omasits, et al., 2014 (https://wlab.ethz.ch/protter/start/)</td></tr><tr><td>R&nbsp;</td><td>The R Foundation for Statistical Computing, VS</td><td>R versie 4.3.2&nbsp;</td><td>&nbsp;https://www.r-project.org/&nbsp;</td></tr><tr><td>RStudio</td><td>Posit software, PBC, VS</td><td>RStudio 2023.12.1+402 "Ocean Storm" Release</td><td>https://posit.co/downloads/</td></tr></tbody></table>

identificatie en classificatie van positiespecifieke gaba a-receptorsubeenheid missense-varianten voor hun rol in hippocampale piramidale neuronen

Identification and Classification of Position-specific GABAA Receptor Subunit Missense Variants for Their Role In Hippocampal Pyramidal Neurons

Identificatie en classificatie van positiespecifieke GABA A-receptorsubeenheid missense-varianten voor hun rol in hippocampale piramidale neuronen

Understanding the effects of functionally unknown variants in epilepsy associated genes is crucial for elucidating disease pathophysiology and developing ...

identification-classification-position-specific-gabaa-receptor

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowetenschap

Neuronen zijn in de eerste elektrofysiologische gekarakteriseerd. Dan het cytoplasma van de opgenomen neuron is opgezogen en onderworpen aan transcriptie-PCR analyse achteruit om de expressie van mRNA's voor de neurotransmitters synthese enzymen, ion kanalen en receptoren op te sporen.

Profiling Voltage-gated kalium kanaal mRNA expressie in Nigral Neuronen met behulp van Single-cell RT-PCR-technieken

Hier laten wij het gebruik van fluorescente Alexa kleurstof gekoppeld met α-bungarotoxine aan GABAA-receptor oppervlak lokalisatie en endocytose in hippocampale neuronen meten. Door het gebruik van constructies, voorzien van een korte extracellulaire tag die bindt α-bungarotoxin, kan de analyse van plasmamembraaneiwit endocytische mensenhandel worden bereikt.

Met behulp van een α-bungarotoxin Binding Site Tag om te studeren GABA A receptor membraanlokalisatie en handel

Corticale netwerken worden gecontroleerd door een kleine, maar gevarieerde set van remmende interneuronen. Functioneel onderzoek van interneuronen vereist daarom gerichte opname en strenge identificatie. Hier beschreven is een gecombineerde aanpak met whole-cell opnames van enkele of synaptically gekoppelde paren van neuronen met intracellulaire etikettering, post-hoc-morfologische en immunocytochemische analyse.

Whole-cell patch-clamp opnamen van Morphologically- en neurochemisch-geïdentificeerde hippocampus Interneurons

De moleculaire mechanismen die de coördinatie van de vorming van remmende GABA-erge synapsen tijdens ontogenie zijn grotendeels onbekend. Om deze processen te onderzoeken, hebben we een co-cultuurmodel systeem dat embryonale medium stekelige GABAerge neuronen samen gekweekt met stabiel getransfecteerde humane embryonale nier 293 (HEK293) cellen die functionele GABAA-receptoren omvat ontwikkeld.

Remmende Synapse Formation in een co-cultuur model Integratie GABAergic Medium Maxomys Neuronen en HEK293 cellen die stabiel GABA A Receptoren

Elektroconvulsietherapie overname (ECS) is een experimentele diermodel van elektroconvulsieve therapie voor ernstige depressie. ECS stimuleert wereldwijd activiteit in de hippocampus, wat leidt tot synaptogenese en synaptische plasticiteit. Hier beschrijven we methoden voor ECS inductie bij ratten en voor subcellular versplintering van hun hippocampi te onderzoeken van inbeslagneming-geïnduceerde veranderingen in synaptic eiwitten.

Elektroconvulsietherapie vangsten bij ratten en versplintering van hun Hippocampi te onderzoeken van inbeslagneming-geïnduceerde veranderingen in postsynaptisch dichtheid eiwitten

We beschrijven de bladerdeeg-techniek, waarbij farmacologische reagentia tijdens geheel-cel patch-clamp opname kunnen worden beheerd, en benadrukken verschillende aspecten van de functies die cruciaal voor het succes ervan zijn.

Geheel-cel stromingen geïnduceerd door Puff toepassing van GABA in de hersenen segmenten

Gerichte volgende-generatie rangschikken is een tijd - en kostenbesparende aanpak die wordt steeds populairder in zowel ziekteonderzoek en klinische diagnostiek. Het protocol beschreven hier presenteert de complexe workflow vereist voor het rangschikken en het proces van de bioinformatica gebruikt ter identificatie van de genetische varianten die aan de ziekte bijdragen.

Next-generation Sequencing en Bioinformatics pijpleiding om te evalueren van genetische determinanten van constitutionele ziekte gericht

Dit protocol beschrijft de kritische stappen en voorzorgsmaatregelen moeten uitvoeren van eencellige multiplex omgekeerde transcriptie polymerase-kettingreactie na patch-clamp. Deze techniek is een eenvoudige en effectieve methode voor het analyseren van het profiel van de expressie van een vooraf vastgesteld samenstel van genen van een enkele cel gekenmerkt door patch-clamp recordings.

Eencellige Multiplex omgekeerde transcriptie Polymerase-kettingreactie na Patch-clamp

Hier presenteren we protocollen om te ontdekken van verbindingen actief bij GABAA -receptoren, van de binding aan de Fysiologie en farmacologie.

Methoden voor de ontdekking van nieuwe verbindingen moduleren van een Receptor Gamma - aminoboterzuur Typ een transmissie

Neuronale prikkelbaarheid kan worden gedifferentieerd door middel van een dynamisch proces van endo- en exocytose van excitatory ionotropic glutamaat receptoren. Hier beschreven is een toegankelijke, hoge-inhoud assay voor het kwantificeren van de groepen van de bevolking van de oppervlakte en interne receptor.

Een High-inhoud Assay voor het toezicht op AMPA Receptor mensenhandel

Ontdek een multiscale raamwerk voor het analyseren van pathogene GABA A-receptormutaties in CA1 piramidale neuronen. Deze methode helpt onderzoekers de neurale mechanismen van epilepsie te begrijpen.

Identificatie en classificatie van positiespecifieke GABA A-receptorsubeenheid missense-varianten voor hun rol in hippocampale piramidale neuronen (Video) | JoVE Journal

Identificatie en classificatie van positiespecifieke GABA A-receptorsubeenheid missense-varianten voor hun rol in hippocampale piramidale neuronen

Meer video's verkennen