Name: Voorspelling van de significantie van antilichamen tegen rode bloedcellen met behulp van de monocyt-macrofaagtest (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-02-07T14:40:00.000+00:00
Duration: 11 min 27 s
Description: Leer de monocyt-macrofaagtest voor voorspelling van rode bloedcelantilichamen in transfusiegeneeskunde. Deze verbeterde methode biedt hogere gevoeligheid dan de traditionele monocyt-monolaagtest.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Tong, T. N., Branch, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+a+monocyte+monolayer+assay+to+evaluate+Fc%CE%B3+receptor-mediated+phagocytosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Use of a monocyte monolayer assay to evaluate Fcγ receptor-mediated phagocytosis.</a> J Vis Exp. (119), e55039(2017).</li>
<li>Tong, T. N., Cen, S., Branch, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+monocyte+monolayer+assay%3A+Past%2C+present+and+future%5BTitle%5D)+AND+%22Transfus+Med+Rev%22%5BJournal%5D)">The monocyte monolayer assay: Past, present and future.</a> Transfus Med Rev. 33 (1), 24-28 (2019).</li>
<li>Frias Boligan, K., Sandhu, G., Branch, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+to+evaluate+the+potential+clinical+significance+of+antibodies+to+red+blood+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc%22%5BJournal%5D)">Methods to evaluate the potential clinical significance of antibodies to red blood cells.</a> Curr Protoc. 2 (8), e504(2022).</li>
<li>Lemay, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+first+case+of+severe+acute+hemolytic+transfusion+reaction+caused+by+anti-Sc2%5BTitle%5D)+AND+%22Transfusion%22%5BJournal%5D)">The first case of severe acute hemolytic transfusion reaction caused by anti-Sc2.</a> Transfusion. 58 (11), 2506-2512 (2018).</li>
<li>Tong, T. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+utility+of+a+monocyte+monolayer+assay+in+the+assessment+of+intravenous+immunoglobulin-associated+hemolysis%5BTitle%5D)+AND+%22Transfusion%22%5BJournal%5D)">The utility of a monocyte monolayer assay in the assessment of intravenous immunoglobulin-associated hemolysis.</a> Transfusion. 60 (12), 3010-3018 (2020).</li>
<li>Srivastava, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SCAR%3A+the+high-prevalence+antigen+013.008+in+the+Scianna+blood+group+system%5BTitle%5D)+AND+%22Transfusion%22%5BJournal%5D)">SCAR: the high-prevalence antigen 013.008 in the Scianna blood group system.</a> Transfusion. 61 (1), 246-254 (2021).</li>
<li>Branch, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potentially+clinically+significant+anti-Dib+identified+by+monocyte+monolayer+assay+before+transfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Transfusion%22%5BJournal%5D)">Potentially clinically significant anti-Dib identified by monocyte monolayer assay before transfusion.</a> Transfusion. 61 (1), 331-332 (2021).</li>
<li>Italiani, P., Boraschi, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+monocytes+to+M1%2FM2+macrophages%3A+Phenotypical+vs.+functional+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">From monocytes to M1/M2 macrophages: Phenotypical vs. functional differentiation.</a> Front Immunol. 5, 514(2014).</li>
<li>Mills, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((M1+and+M2+macrophages%3A+Oracles+of+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Crit+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">M1 and M2 macrophages: Oracles of health and disease.</a> Crit Rev Immunol. 32 (6), 463-488 (2012).</li>
<li>Atri, C., Guerfali, F. Z., Laouini, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+human+macrophage+polarization+in+inflammation+during+infectious+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Role of human macrophage polarization in inflammation during infectious diseases.</a> Int J Mol Sci. 19 (6), 1801(2018).</li>
<li>Bertani, F. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Classification+of+M1%2FM2-polarized+human+macrophages+by+label-free+hyperspectral+reflectance+confocal+microscopy+and+multivariate+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Classification of M1/M2-polarized human macrophages by label-free hyperspectral reflectance confocal microscopy and multivariate analysis.</a> Sci Rep. 7, 8965(2017).</li>
<li>Murray, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrophage+polarization%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Physiol%22%5BJournal%5D)">Macrophage polarization.</a> Annu Rev Physiol. 79, 541-566 (2017).</li>
<li>Cohn, C., Delaney, M., Johnson, S. T., Katz, L. M., Schwartz, J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCohn%2C+C+%22Technical+Manual%22">Technical Manual</a>. , 21st Ed, American Association for the Advancement of Blood and Biotherapeutics. Maryland, USA. (2023).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1X PBS, pH 7.4, zonder Ca2+/Mg2+</td><td>Wisent Bioproducts&nbsp;</td><td>311-425-CL</td><td>Bewaar bij 4 graden of kamertemperatuur&nbsp;</td></tr><tr><td>AccutaseTM</td><td>STEMCELL Technologies&nbsp;</td><td>7920</td><td>Celaflossingsoplossing</td></tr><tr><td>ACK Lysis Buffer&nbsp;</td><td>STEMCELL Technologies&nbsp;</td><td>07850, 07800</td><td>Bewaar bij 4 graden</td></tr><tr><td>Anti-Human Globulin</td><td>NOVACLONE, Immunocor.&nbsp;</td><td>N/A</td><td>NOVACLONE Anti-IgG voor IAT-testen&nbsp;</td></tr><tr><td>Anti-Rh(D) (WinRho. SDF CDN)</td><td>Saol Therapeutics&nbsp;</td><td>1003092</td><td>Elke commerciële bron van Rh-immunoglobine is voldoende&nbsp;</td></tr><tr><td>Cell Scraper</td><td>UofT Medstore</td><td>83.395</td><td>cel loslating&nbsp;</td></tr><tr><td>Cell Strainer 70uM nylon</td><td>Falcon</td><td>352350</td><td>filter voor cellen&nbsp;</td></tr><tr><td>Chamber slide Nunc. Lab-TekTM II met deksel, RS glazen schuifstel Sterile&nbsp;</td><td>Thermo Fisher Scientific&nbsp;</td><td>154534</td><td>kamer slides voor MMA&nbsp;</td></tr><tr><td>Dekvlakken&nbsp;</td><td>VWR</td><td>48393-081</td><td>24 x 50 mm</td></tr><tr><td>Cytiva Ficoll Paque Plus, dichtheid 1,077 g/L</td><td>Thermo Fisher Scientific&nbsp;</td><td>17-1440-03</td><td>scheiding van PBMC's van vol bloed; dichtheidsgradiëntmedium</td></tr><tr><td>Elvanol montagemedium</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Dulbecco&rsquo;s PBS (D-PBS) zonder Ca2+/Mg2+, 15% (w/v) polyvinylhars en 30% (v/v) glycerine.</td></tr><tr><td>Fers vers bloed (ACD-buis) of Buffy-jas</td><td>Canadian Blood Services</td><td></td><td>Mag tot 36 uur op kamertemperatuur staan&nbsp;</td></tr><tr><td>Human recombinant GM-CSF</td><td>STEMCELL Technologies&nbsp;</td><td>78015.1</td><td>Cytokine voor polarisatie van M1-macrofagen</td></tr><tr><td>Human recombinant IFN-gamma</td><td>STEMCELL Technologies&nbsp;</td><td>78020</td><td>Cytokine voor polarisatie van M1-macrofagen</td></tr><tr><td>Human recombinant IL-4</td><td>STEMCELL Technologies&nbsp;</td><td>78045.1</td><td>Cytokine voor polarisatie van M2-macrofagen</td></tr><tr><td>Human recombinant M-CSF</td><td>STEMCELL Technologies&nbsp;</td><td>78057.1</td><td>Cytokine voor polarisatie van M2-macrofagen</td></tr><tr><td>ID-CellStab</td><td>Bio-Rad</td><td>005650 05740</td><td>RBC celopslag/stabilisatieoplossing&nbsp;</td></tr><tr><td>Isolation Medium&nbsp;</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>PBS Ca2+ en Mg2+ vrij + FBS 2% + 1mM EDTA</td></tr><tr><td>Lipopolysaaracide (LPS)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>L3024-5MG</td><td>Cytokine voor polarisatie van M1-macrofagen</td></tr><tr><td>Methanol (100%)</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Fixeren van slides&nbsp;</td></tr><tr><td>Monocyte Isolation Kit STEM-cells EasySep Human Monocyte Enrichment Kit zonder CD16 Depletion&nbsp;</td><td>STEMCELL Technologies&nbsp;</td><td>19058</td><td>Isolatie van monocyten uit PBMC's</td></tr><tr><td>Poly-D-ysine&nbsp;</td><td>UofT Medstore&nbsp;</td><td>P6407</td><td>Celhechtingsoplossing&nbsp;</td></tr><tr><td>Rh(D) positieve R2R2 RBC's</td><td>Canadian Blood Services</td><td>N/A</td><td>Ook commercieel verkrijgbaar</td></tr><tr><td>RPMI-1640</td><td>Wisent Bioproducts&nbsp;</td><td>350-000-CL</td><td>Aangevuld met 10% hitte-inactieve FBS, 1 mM GlutaMAX-supplement, 1 mM HEPES en 1% penicilline/streptomycine. Bewaar bij 4 graden.&nbsp;</td></tr><tr><td>Trypan Blue oplossing&nbsp;</td><td>Thermo Fisher Scientific&nbsp;</td><td>15250061</td><td>Celltellingsoplossing&nbsp;</td></tr></tbody></table>

voorspelling van de significantie van antilichamen tegen rode bloedcellen met behulp van de monocyt-macrofaagtest

Prediction of Red Blood Cell Antibody Significance Using the Monocyte-Macrophage Assay

Voorspelling van de significantie van antilichamen tegen rode bloedcellen met behulp van de monocyt-macrofaagtest

Derived from monocytes in the bone marrow, macrophages are large, innate immune cells that play a major role in clearing dead cells, debris, tumor cells, ...

prediction-red-blood-cell-antibody-significance-using-monocyte

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie en Infectie

This video showcases a monocyte monolayer assay utilizing primary monocytes from peripheral blood to assess Fcγ receptor-mediated phagocytosis with poly D antibody-opsonized R2R2 red blood cells.

An Assay for Studying Fc&#947; Receptor-Driven Phagocytosis in Monocyte Monolayers

Monocyt-afgeleide macrofagen belangrijke cellen van het aangeboren immuunsysteem. Hier beschrijven we een eenvoudig te...

Een<em&gt; In vitro</em&gt; Model te Heterogeniteit van Human Macrophage Differentiatie en Polarisatie Studie

Dit protocol beschrijft het gebruik van hele-cel MALDI-TOF massaspectrometrie op eukaryote cellen. Hier illustreren we de nauwkeurigheid van deze techniek door de meerdere activeringstoestanden van macrofagen te analyseren als reactie op hun micro-omgeving.

Whole-cell MALDI-TOF massaspectrometrie is een nauwkeurige en snelle methode om verschillende vormen van macrofaagactivering Analyseer

Hier beschrijven we twee assays voor het meten van complement activatie geïnduceerd door antilichamen tegen rode bloedcellen. Het grote voordeel boven de huidige assays is de kwantitatieve en eenvoudig te interpreteren natuur.

Methoden voor de kwantitatieve detectie van antilichaam-geïnduceerde complement activatie op de rode bloedcellen

Wij presenteren een eenvoudig en efficiënt protocol voor het genereren van humane macrofagen. Buffy coats worden door dubbele dichtheidsgradiënt centrifugatie en geïsoleerde monocyten worden vervolgens gedifferentieerd macrofagen in met Teflon beklede celkweek zakken. Dit maximaliseert macrofaag opbrengst en vergemakkelijkt cel oogsten voor volgende experimenten.

Isolatie van humane monocyten door Double gradiëntcentrifugering en hun differentiatie tot macrofagen in Teflon-coating Cell Culture Tassen

De monocyt monolaag assay (MMA) is een in vitro assay dat geïsoleerde primaire monocyten gebruikt, verkregen uit perifeer vol bloed van zoogdieren, om Fcγ receptor (FcγR)-gemedieerde fagocytose te evalueren.

Toepassing van een monocyt monolaag Gehalte aan Fcy receptor-gemedieerde fagocytose evalueren

Dit protocol geeft een analyse van de macrofage subpopulaties in het centraal zenuwstelsel van het volwassen muis door middel van flowcytometrie en is nuttig voor het bestuderen van meerdere markers die door deze cellen worden uitgedrukt.

Analyse van Microglia en Monocyt-afgeleide Macrofagen uit het Centrale Zenuwstelsel door Flow Cytometry

Hier presenteren we een protocol voor het karakteriseren van monocyt deelverzamelingen door volbloed stroom cytometry. Het gaat hierbij om overzichten hoe gate de subsets kunt weergeven en beoordelen van hun uitdrukking van oppervlakte markers en geven een voorbeeld van de beoordeling van de uitdrukking van de M1 (inflammatoire) en M2 markers (ontstekingsremmer).

Karakterisatie van menselijke monocyt deelverzamelingen door volbloed Stroom Cytometry analyse

Hier presenteren we een protocol om de Chemotactische activiteit van bloed monocyten in muizen modellen te kwantificeren, om de effecten van nutritionele, farmacologische en genetische interventies op bloed monocyten te beoordelen en om de in het bloed geafgeleide macrofagen te karakteriseren in Muismodellen met behulp van monocyte-chemoaantretant proteïne-1 (MCP-1)-geladen in de kelder membraan-afgeleide gel stekkers.

Kwantificering van monocyten Chemotactische activiteit in vivo en karakterisering van bloed monocyten afgeleide macrofagen

Het gebruik van referentiereagentia voor cytokine-afgifte zorgt voor meer reproduceerbare en gestandaardiseerde in vitro veiligheidsprofielen van immunotherapeutische monoklonale antilichamen. Hier beschrijven we hoe cytokine-afgiftetests kunnen worden gebruikt naast een referentiereagenspanel om de veiligheid van sommige therapeutische monoklonale antilichamen te voorspellen.

Gebruik van referentiereagentia om de robuustheid van cytokine-afgiftetests te bevestigen voor de voorspelling van de veiligheid van monoklonale antilichamen

Monocyten en macrofagen zijn zeer plastische en herprogrammeerbare immuuncellen die cruciaal zijn voor gezondheid en ziekte. Ze detecteren en reageren op een breed scala aan stimuli door specifieke differentiatieprogramma's en fenotypes aan te nemen. We hebben een in-vitro model gestandaardiseerd om macrofagen polarisatie en herprogrammering te bestuderen, wat een waardevol hulpmiddel voor onderzoek biedt.

Reprogrammeringsmodel van humane monocyte-afgeleide macrofagen voor in-vitro analyses

Leer de monocyt-macrofaagtest voor voorspelling van rode bloedcelantilichamen in transfusiegeneeskunde. Deze verbeterde methode biedt hogere gevoeligheid dan de traditionele monocyt-monolaagtest.

Voorspelling van de significantie van antilichamen tegen rode bloedcellen met behulp van de monocyt-macrofaagtest

Meer video's verkennen