Name: Toediening van vluchtige anesthetica aan zebravislarven voor gedragsobservatie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-06T13:30:00.000+00:00
Duration: 4 min 55 s
Description: Leer een toegankelijke methode voor het toedienen van vluchtige anesthetica aan zebravislarven in een gasdichte kamer voor gedragsexperimenten. Dit protocol maakt gedetailleerde farmacologische studies mogelijk zonder dure apparatuur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Wasilczuk, A. Z., Maier, K. L., Kelz, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mouse+as+a+model+organism+for+assessing+anesthetic+sensitivity%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Enzymol%22%5BJournal%5D)">The mouse as a model organism for assessing anesthetic sensitivity.</a> Methods Enzymol. 602, 211-228 (2018).</li>
<li>Shortal, B. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+validation+of+brain+target-controlled+infusion+of+propofol+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Development and validation of brain target-controlled infusion of propofol in mice.</a> PLoS One. 13, 1-14 (2018).</li>
<li>Halbach, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Yolk+sac+of+zebrafish+embryos+as+backpack+for+chemicals%5BTitle%5D)+AND+%22Environ+Sci+Technol%22%5BJournal%5D)">Yolk sac of zebrafish embryos as backpack for chemicals.</a> Environ Sci Technol. 54 (16), 10159-10169 (2020).</li>
<li>Bedell, V. M., Meng, Q. C., Pack, M. A., Eckenhoff, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+vertebrate+model+to+reveal+neural+substrates+underlying+the+transitions+between+conscious+and+unconscious+states%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">A vertebrate model to reveal neural substrates underlying the transitions between conscious and unconscious states.</a> Sci Rep. 10, 1-10 (2020).</li>
<li>Stetter, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isoflurane+anesthesia+in+amphibians%3A+Comparison+of+five+application+methods%5BTitle%5D)+AND+%22In+American+Association+of+Zoo+Veterinarians%22%5BJournal%5D)">Isoflurane anesthesia in amphibians: Comparison of five application methods.</a> In American Association of Zoo Veterinarians. , Puerto Vallarta, Mexico. 255-257 (1996).</li>
<li>Woll, K. A., Eckenhoff, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-throughput+screening+to+identify+anesthetic+ligands+using+Xenopus+laevis+tadpoles%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Enzymol%22%5BJournal%5D)">High-throughput screening to identify anesthetic ligands using Xenopus laevis tadpoles.</a> Methods Enzymol. 602, 177-187 (2018).</li>
<li>Meyer, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zur+Theorie+der+Alkoholnarkose%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Exp+Pathol+Pharmakol%22%5BJournal%5D)">Zur Theorie der Alkoholnarkose.</a> Arch Exp Pathol Pharmakol. 46, 338-346 (1901).</li>
<li>Downes, H., Courogen, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contrasting+effects+of+anesthetics+in+tadpole+bioassays%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Exp+Ther%22%5BJournal%5D)">Contrasting effects of anesthetics in tadpole bioassays.</a> J Pharmacol Exp Ther. 278, 284-296 (1996).</li>
<li>Kalueff, A. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Towards+a+comprehensive+catalog+of+zebrafish+behavior+1.0+and+beyond%5BTitle%5D)+AND+%22Zebrafish%22%5BJournal%5D)">Towards a comprehensive catalog of zebrafish behavior 1.0 and beyond.</a> Zebrafish. 10, 70-86 (2013).</li>
<li>Abramova, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+pregnanolone+glutamate+and+its+metabolites+on+GABAA+and+NMDA+receptors+and+zebrafish+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Chem+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Effects of pregnanolone glutamate and its metabolites on GABAA and NMDA receptors and zebrafish behavior.</a> ACS Chem Neurosci. 14, 1870-1883 (2023).</li>
<li>Germann, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+behavioral+effects+of+GABAergic+low-and+high-efficacy+neuroactive+steroids+in+the+zebrafish+larvae+assay%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Chem+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Comparison of behavioral effects of GABAergic low-and high-efficacy neuroactive steroids in the zebrafish larvae assay.</a> ACS Chem Neurosci. 15, 909-915 (2024).</li>
<li>Hoyt, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photomotor+responses+in+zebrafish+and+electrophysiology+reveal+varying+interactions+of+anesthetics+targeting+distinct+sites+on+gamma-aminobutyric+acid+type+A+receptors%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Photomotor responses in zebrafish and electrophysiology reveal varying interactions of anesthetics targeting distinct sites on gamma-aminobutyric acid type A receptors.</a> Anesthesiology. 137, 568(2022).</li>
<li>Li, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+the+locomotor+activities+of+zebrafish+larvae+under+the+influence+of+various+neuroactive+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+Trans+Med%22%5BJournal%5D)">Characterization of the locomotor activities of zebrafish larvae under the influence of various neuroactive drugs.</a> Annals Trans Med. 6, 173(2018).</li>
<li>McCarroll, M. N., Gendelev, L., Kinser, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+behavioural+profiling+identifies+GABA+and+serotonin+receptor+ligands+related+to+sedation+and+paradoxical+excitation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Zebrafish behavioural profiling identifies GABA and serotonin receptor ligands related to sedation and paradoxical excitation.</a> Nat Commun. 10, 4078(2019).</li>
<li>Plasencia, D. M., Rodgers, L. H., Knighton, A. R., Eckenhoff, R. G., White, E. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antagonism+of+propofol+anesthesia+by+alkyl-fluorobenzene+derivatives%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Antagonism of propofol anesthesia by alkyl-fluorobenzene derivatives.</a> Sci Rep. 14, 15943(2024).</li>
<li>Dash, S. N., Lipika, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Flight+for+fish+in+drug+discovery%3A+A+review+of+zebrafish-based+screening+of+molecules%5BTitle%5D)+AND+%22Biology+Lett%22%5BJournal%5D)">Flight for fish in drug discovery: A review of zebrafish-based screening of molecules.</a> Biology Lett. 19, 20220541(2023).</li>
<li>Nelson, J. C., Michael, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+behavior+as+a+gateway+to+nervous+system+assembly+and+plasticity%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Zebrafish behavior as a gateway to nervous system assembly and plasticity.</a> Development. 149, 177998(2022).</li>
<li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sevoflurane+postconditioning+ameliorates+cerebral+hypoxia%2Freoxygenation+injury+in+zebrafish+involving+the+Akt%2FGSK-3%CE%B2+pathway+activation+and+the+microtubule-associated+protein+2+promotion%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">Sevoflurane postconditioning ameliorates cerebral hypoxia/reoxygenation injury in zebrafish involving the Akt/GSK-3β pathway activation and the microtubule-associated protein 2 promotion.</a> Biomed Pharmacother. 175, 116693(2024).</li>
<li>Abdallah, S. J., Thomas, B. S., Jonz, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aquatic+surface+respiration+and+swimming+behaviour+in+adult+and+developing+zebrafish+exposed+to+hypoxia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Biol%22%5BJournal%5D)">Aquatic surface respiration and swimming behaviour in adult and developing zebrafish exposed to hypoxia.</a> J Exp Biol. 218, 1777-1786 (2015).</li>
<li>Targ, A. G., Yasuda, N., Eger, E. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Solubility+of+I-653%2C+sevoflurane%2C+isoflurane%2C+and+halothane+in+plastics+and+rubber+composing+a+conventional+anesthetic+circuit%5BTitle%5D)+AND+%22Anesth+Analg%22%5BJournal%5D)">Solubility of I-653, sevoflurane, isoflurane, and halothane in plastics and rubber composing a conventional anesthetic circuit.</a> Anesth Analg. 69, 218-225 (1989).</li>
<li>Yang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drug-selective+Anesthetic+insensitivity+of+zebrafish+lacking+%CE%B3-aminobutyric+acid+Type+A+receptor+%CE%B23+subunits%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Drug-selective Anesthetic insensitivity of zebrafish lacking γ-aminobutyric acid Type A receptor β3 subunits.</a> Anesthesiology. 131, 1276-1291 (2019).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>96 well glass microplates</td><td>Zinsser North America</td><td>3600500</td><td>"Deze glazen microplaten zijn gemaakt van speciaal hoogwaardig, temperatuurbestendig borosilicaatglas en de oppervlakken zijn zuur gepolijst. Platen zijn rechthoekig in de standaard SBS-microplatevoetafdruk (85 x 127 mm). Deze glazen reactormicroplaten zijn voornamelijk ontworpen voor gebruik bij chemische toepassingen en zijn bestand tegen temperaturen tot 530&deg; C. Ze kunnen worden geautoclaveerd. Ze worden machinaal bewerkt uit een homogeen glasplaat en hebben een uniforme geometrie en vorm om consistente temperaturen van put tot put te bieden (typisch binnen 0,2 graden C)."</td></tr><tr><td>2.0 mL Clear, Large Opening, 9 mm Thread Vials&nbsp;</td><td>Chemglass Life Sciences</td><td>CV-1150-1232</td><td>"Met een 40% grotere opening zijn deze flessen specifiek ontworpen om in robotarm autosamplers te werken. Ze bevatten ook het unieke Step Vial-ontwerp dat een beperkt volume-inzetstuk precies in het nekje van de fles centreert. "</td></tr><tr><td>3M Double Coated Tape 9490LE</td><td>AbbVie Inc</td><td>24WG90</td><td>"3M Double Coated Tape 9490LE met 3M Laminating Adhesive 300LSE biedt hoge hechtingskracht op de meeste oppervlakken, inclusief veel kunststoffen met lage oppervlakte-energie zoals polypropyleen en poedergecoate verven. De acrylische kleefstof biedt ook uitstekende hechting op oppervlakken die lichtjes zijn vervuild met olie, typisch gebruikt bij machineonderdelen. 3M double coated tape 9490LE biedt de toegevoegde functie van 3M Laminating Adhesive 300MP aan één kant om uitstekende hechtingskracht te bieden aan een verscheidenheid aan schuim- en textielmaterialen (6 inch x 5 yard)"</td></tr><tr><td>DanioVision Observation Chamber</td><td>Noldus</td><td>DVOC-0041</td><td>"DanioVision is een compleet systeem, ontworpen voor het hoogdoorvoertesten van zebravislarven in multi-well platen. Het omvat de Observatiekamer en de bekende EthoVision XT videotrackingsoftware."</td></tr><tr><td>DanioVision Temperature Control Unit</td><td>Noldus</td><td>DVTCU-0011</td><td>"De DanioVision Temperatuurregelunit is een doorstromend systeem: water stroomt gelijkmatig onder de welplade op de temperatuur naar keuze. De temperatuur is overal hetzelfde in de welplade."</td></tr><tr><td>Ethovision XT16 software</td><td>Noldus</td><td>NSE-EV-BASE</td><td>"EthoVision XT is de meest toegepaste videotrackingsoftware die het gedrag, de beweging en de activiteit van elk dier volgt en analyseert, gedeponeerd door Noldus"</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Piramal Critical Care</td><td>NDC # 66794-017-10</td><td>Vloeistof voor inhalatie, een niet-brandbaar niet-explosief inhalatieanestheticum, bevattend 100 mL isoflurane. Opgeslagen bij gecontroleerde kamertemperatuur 20&ordm; tot 25&ordm; C</td></tr><tr><td>Scotch-Weld Instant Adhesive Primer AC79 Clear</td><td>3M</td><td>"62-3916-0860-1 (Product ID) C2103N (Lot)"</td><td>"3M Scotch-Weld Instant Adhesive Primer AC79 is ontworpen voor gebruik op moeilijk te verlijmen elastomeren met lage oppervlakte-energie, zoals EPDM, siliconen en andere rubbers. Voorbereiding en toepassing van het oppervlak zijn eenvoudig en de kleefstofprimer droogt snel om werkzaamheden snel te laten verlopen."</td></tr><tr><td>Silicone Sheets 0.5 mm thick</td><td>various suppliers</td><td>N/A</td><td>transparante siliconen platen werden bij meerdere leveranciers gekocht</td></tr><tr><td>Speedball Pop-in Hard Rubber Brayer with Plastic Frame, 4 Inches"</td><td>Speedball</td><td>793728</td><td>"De Speedball Pop-In Hard Brayer heeft een roller die uitklapt voor eenvoudig schoonmaken. Kunststof, één stuk frame met afneembare 4 inch brede roller. Gemaakt van puur natuurlijke gomrubber met een gemalen afwerking. De harde rubberen brayer is 4 inch breed met een stevig kunststof frame en is geweldig voor lijmpriktoepassing"</td></tr><tr><td>SureSTART 9 mm Screw Caps, Level 2 High-throughput Applications, Type: AVCS Screw Cap Black PP, White Silicone/RED PTFE Septa 1.0 mm</td><td>Thermo Scientific</td><td>6ASC9ST1B</td><td>"Gebruik Thermo Scientific SureSTART 9 mm schroefdoppen met schroefvials met een 9 mm opening. De prestatieniveau 2-doppen zijn vervaardigd en getest om lage bloeding, robuustheid en reproduceerbaarheid van resultaten te garanderen voor uw routine GC-MS en LC-MS analyses. Kies uit polypropyleen doppen met all-purpose silicone/PTFE septa van verschillende hardheidswaarden ontworpen om autosampler naaldproblemen te verminderen. Onze AVCS-doppen bevatten Advanced Vial Closure System technologie om optimale sealcompressie te garanderen bij het sluiten van een fles."</td></tr><tr><td>Ultane Sevoflurane</td><td>AbbVie Inc</td><td>NDC # 0074-4456-04</td><td>Vluchtige vloeistof voor inhalatie, wordt verpakt in amber gekleurde flessen met 250 mL sevoflurane. Opgeslagen bij gecontroleerde kamertemperatuur 15&ordm; tot 30&ordm; C</td></tr><tr><td>Wheaton Liquid Scintillation Vials, Caps Attached to Vials, Glass, Metal Foil / Pulp, 24-400, 20 mL&nbsp;</td><td>DWK Life Sciences</td><td>986561</td><td>20 mL scintillatievialen geconverteerd van Type I borosilicaatglasbuis, PET, of HDPE. Beschikbaar met dop bevestigd.</td></tr></tbody></table>

toediening van vluchtige anesthetica aan zebravislarven voor gedragsobservatie

Administration of Volatile Anesthetics to Zebrafish Larvae for Behavioral Observation

Toediening van vluchtige anesthetica aan zebravislarven voor gedragsobservatie

This study describes a unique method for administering volatile anesthetics, such as isoflurane and sevoflurane, to larval zebrafish during behavioral ...

administration-volatile-anesthetics-to-zebrafish-larvae-for

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowetenschap

Tonen we intraperitoneale injectie in volwassen zebravissen. We maken gebruik van een 10 ul NanoFil injectiespuit bestuurd door een Micro4 controller en UltraMicroPump III. Deze demonstratie omvat het gebruik van koud water als een verdoving.

Intraperitoneale injectie in de Adult zebravis

Source: Morsch, M.,  et. al., Triggering Cell Stress and Death Using Conventional UV Laser Confocal Microscopy. J. Vis. Exp. (2017) In this video, we explore the technique of high-intensity UV laser ablation for precisely targeting and studying individual neurons in transgenic zebrafish. We demonstrate how to prepare, immobilize, and visualize neuronal responses, highlighting the cellular dynamics of injury and recovery.

Selective Single-Neuron Laser Ablation in a Zebrafish Larva Using a Confocal Microscope

Source: Schramm, P. et al. In vivo Imaging of Fully Active Brain Tissue in Awake Zebrafish Larvae and Juveniles by Skull and Skin Removal. J. Vis. Exp. (2021)This video demonstrates the in vivo imaging of cerebellar neurons in transgenic zebrafish larvae, which express fluorescent proteins in Purkinje neurons. The process involves anesthetizing the larvae, immobilizing them in agarose, and carefully removing the pigmented skin to enhance light penetration and fluorescence intensity. Finally,...

In Vivo Imaging of Zebrafish Larval Brain for Visualizing Cerebellar Neurons

Een eenvoudige methode om extracellulaire veldpotentialen opnemen in het larvale zebravis voorhersenen beschreven. De methode omvat een...

Voorhersenen Elektrofysiologische Opname in larvale zebravis

Ons laboratorium ontwikkelde een nieuwe high-throughput geautomatiseerde imaging systeem dat nuttig is voor de detectie van verschillende gedragingen in 7 dagen oude zebravis larven. Het systeem kan worden gebruikt voor het detecteren van subtiele veranderingen in het gedrag na de larven zijn blootgesteld aan milieu-toxische stoffen of geneesmiddelen.

Geautomatiseerde High-throughput Behavioral Analyses in zebravis Larven

Gegevensmanipulaties om gerichte stress of dood in individuele cellen te veroorzaken, zijn relatief moeilijk te bereiken. Hier wordt een ablatie-aanpak met een resolutie van één cel beschreven om selectief stress te veroorzaken en individuele cellen in celkweek en levende dieren te doden, gebaseerd op een standaard confocale UV-laser.

Triggering Cell Stress en Dood met behulp van conventionele uv laser confocale microscopie

Hier presenteren we een betrouwbare, minimaal invasieve en kosteneffectieve methode om elektrocardiogrammen op te nemen en te interpreteren in levende verdoemde volwassen zebravis.

In vivo oppervlakte elektrocardiografie voor volwassen zebravis

Dit artikel beschrijft een methode voor het monteren van fragiele zebravis embryo's voor uitgebreide time-lapse confocale microscopie. Deze voordelige methode is eenvoudig uit te voeren met behulp van regelmatige glazen bodem microscopie gerechten voorbeeld vorming op elke omgekeerde Microscoop. De montage wordt uitgevoerd in lagen van agarose bij verschillende concentraties.

Een gelaagde montagemethode voor de uitgebreide time-lapse confocale microscopie van hele zebravis embryo's

Laserablatie is een breed toepasbare technologie voor het bestuderen van regeneratie in biologische systemen. Het gepresenteerde protocol beschrijft het gebruik van een standaard laserscanning confocale microscoop voor laserablatie en de daaropvolgende time-lapse beeldvorming van het regenereren van interneuromastcellen in de zebravis laterale lijn.

Confocale Microscoop-gebaseerde Laser Ablatie en Regeneratie Test in Zebrafish Interneuromast Cellen

Hier presenteren we een methode om de zebravis embryonale hersenen in vivo tot larvale en juveniele stadia in beeld te brengen. Deze microinvasieve procedure, aangepast aan elektrofysiologische benaderingen, biedt toegang tot cellulaire en subcellulaire details van volwassen neuronen en kan worden gecombineerd met optogenetica en neurofarmacologische studies voor het karakteriseren van hersenfunctie en medicamenteuze interventie.

In vivo beeldvorming van volledig actief hersenweefsel in wakkere zebravislarven en juvenielen door schedel- en huidverwijdering

Hier presenteren we een gedetailleerd protocol om neurale activiteit te onderzoeken in hersengebieden van transgene zebravissen die GCaMP-calciumindicatoren tot expressie brengen met behulp van confocale microscopie.

In vivo Confocale fluorescentiebeeldvorming van neurale activiteit geïnduceerd door sensorische stimulatie bij gedeeltelijk ingeperkte larvale zebravissen

Leer een toegankelijke methode voor het toedienen van vluchtige anesthetica aan zebravislarven in een gasdichte kamer voor gedragsexperimenten. Dit protocol maakt gedetailleerde farmacologische studies mogelijk zonder dure apparatuur.

Toediening van vluchtige anesthetica aan zebravislarven voor gedragsobservatie

Meer video's verkennen