Name: In vivo Calciumbeeldvorming van neuronale ensembles in netwerken van primaire sensorische neuronen in intacte trigeminusganglia (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-01T13:20:00.000+00:00
Duration: 7 min 55 s
Description: Leer in vivo GCaMP-calciumbeeldvorming van trigeminusganglion-neuronen om sensorische netwerken te bestuderen. Deze methode onthult neurale activatiepatronen bij pijn en tastzin in muizen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

<table><tbody><tr><td>Anased Injection (Xylazine)</td><td>Covetrus, Akorn</td><td>33197</td><td></td></tr><tr><td>Flurar 5x/0.25 M27 obejctive</td><td>Cal Zeiss</td><td>420130-9900-000</td><td></td></tr><tr><td>Cotton Tipped Applicators</td><td>McKesson</td><td>24-106-1S</td><td></td></tr><tr><td>Curved Hemostat</td><td>Fine Science Tools</td><td>13007-12</td><td></td></tr><tr><td>DC Temperature Controller</td><td>FHC</td><td>40-90-8D</td><td></td></tr><tr><td>DC Temperature Controller Heating Pad</td><td>FHC</td><td>40-90-2-05</td><td></td></tr><tr><td>Dumont Ceramic Coated Forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>11252-50</td><td></td></tr><tr><td>FHC DC Temperature Controller</td><td>FHC</td><td>40-90-8D</td><td></td></tr><tr><td>Fluriso (Isoflurane)</td><td>MWI Animal Health, Piramal Group</td><td>501017</td><td></td></tr><tr><td>Friedman-Pearson Rongeurs</td><td>Fine Science Tools</td><td>16221-14</td><td></td></tr><tr><td>GelFoam</td><td>Pfizer</td><td>09-0353-01</td><td></td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>National Institutes of Health</td><td>ij153</td><td></td></tr><tr><td>Ketaset (Ketamine)</td><td>Zoetis</td><td>KET-00002R2</td><td></td></tr><tr><td>Model 923-B Mouse Gas Anesthesia Head Holder (Adult mouse)</td><td>Kopf Instruments</td><td>923-B</td><td></td></tr><tr><td>Luminescent Green Stage Tape</td><td>JSITON/ Amazon</td><td>B803YW8ZWL</td><td></td></tr><tr><td>M35 Compact Electric Lab Handpiece System</td><td>Buffalo Dental Manufacturing Co., Inc.</td><td>M35</td><td></td></tr><tr><td>Matrx VIP 3000 Isoflurane Vaporizer</td><td>Midmark</td><td>91305430</td><td></td></tr><tr><td>Micro dissecting scissors</td><td>Roboz</td><td>RS-5882</td><td></td></tr><tr><td>Micro dissecting spring scissors</td><td>Fine Science Tools</td><td>15023-10</td><td></td></tr><tr><td>Micro dissecting spring scissors</td><td>Roboz</td><td>RS-5677</td><td></td></tr><tr><td>Mini Rectal Thermistor Probe</td><td>FHC</td><td>40-90-5D-02</td><td></td></tr><tr><td>Operating scissors</td><td>Roboz</td><td>RS-6812</td><td></td></tr><tr><td>Pirt-GCaMP3 C57/BL/6J mice</td><td>Johns Hopkins University</td><td>N/A</td><td>Either sex can be imaged equally well. Mice should be at least 8 weeks old due to weak or intermittent Pirt promoter expression in younger mice.</td></tr><tr><td>Potassium chloride</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP366-500</td><td></td></tr><tr><td>Stereotaxic frame</td><td>Kopf Model 923-B</td><td>923-B</td><td></td></tr><tr><td>Sterotactic mask (active) for mice <30g with tubes</td><td>RWD Life Sciences</td><td>68663</td><td></td></tr><tr><td>Taper Fissure TNT Bur (31P)</td><td>Buffalo Dental Manufacturing Co., Inc.</td><td>31P-GOLD</td><td></td></tr><tr><td>td-Tomato C57BL/6J mice</td><td>Jackson Laboratory</td><td>7909</td><td></td></tr><tr><td>Top Plate, 6in x 10in</td><td>Newport</td><td>290-TP</td><td></td></tr><tr><td>Transfer pipette, 3mL</td><td>Cole Parmer</td><td>UX-06226-23</td><td></td></tr><tr><td>TrpV1-Cre C57BL/6J mice</td><td>Jackson Laboratory</td><td>17769</td><td></td></tr><tr><td>Zeiss LSM 800 confocal microscope</td><td>Cal Zeiss</td><td>LSM800</td><td></td></tr><tr><td>Zeiss Zen 2.6 Blue Edition Software</td><td>Cal Zeiss</td><td>Zen (Blue Edition) 2.6</td><td></td></tr></tbody></table>

in vivo calciumbeeldvorming van neuronale ensembles in netwerken van primaire sensorische neuronen in intacte trigeminusganglia

In Vivo Calcium Imaging of Neuronal Ensembles in Networks of Primary Sensory Neurons in Intact Trigeminal Ganglia

In vivo Calciumbeeldvorming van neuronale ensembles in netwerken van primaire sensorische neuronen in intacte trigeminusganglia

Calcium imaging is an important tool for monitoring signaling mechanisms that either influx Ca2+ into the cytosol or release Ca2+ from intracellular Ca2+ ...

in-vivo-calcium-imaging-neuronal-ensembles-networks-primary-sensory

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowetenschap

Source: Shannonhouse, J., et al.In Vivo Calcium Imaging of Neuronal Ensembles in Networks of Primary Sensory Neurons in Intact Dorsal Root Ganglia. J. Vis. Exp. (2023).The video demonstrates an in vivo calcium imaging technique to monitor neuronal activity in the dorsal root ganglia (DRG) of a transgenic mouse. DRG neurons express a calcium indicator that increases fluorescence intensity upon binding to calcium. Mechanical or thermal stimuli applied to a hind paw generate action potentials that...

In Vivo Calcium Imaging of Neuronal Ensembles in the Intact Dorsal Root Ganglia of a Mouse

We beschrijven een experimentele procedure voor het meten van neuronale activiteit door dual optische ramen boven bilaterale primaire somatosensorische corticies (S1) in Thy1-GCaMP6s transgene muizen met behulp van 2-foton (2 P) microscopie in vivo.

Imaging neurale activiteit in de primaire somatosensorische Cortex met behulp van Thy1-GCaMP6s transgene muizen

Hier presenteren we hoe we het geniculate ganglion van een levende, verdoofde laboratoriummuis kunnen blootleggen en hoe calciumbeeldvorming kan worden gebruikt om de reacties van ensembles van deze neuronen op smaakprikkels te meten, waardoor meerdere proeven met verschillende stimulerende middelen mogelijk zijn. Dit maakt diepgaande vergelijkingen mogelijk van welke neuronen op welke smaakstoffen reageren.

In vivo calciumbeeldvorming van muis geniculate ganglion neuron reacties op smaakprikkels

Dit protocol beschrijft de chirurgische blootstelling van het dorsale wortelganglion (DRG) gevolgd door GCaMP3 (genetisch gecodeerde Ca2 + indicator; Green Fluorescent Protein-Calmodulin-M13 Protein 3) Ca2+ beeldvorming van de neuronale ensembles met behulp van Pirt-GCaMP3-muizen tijdens het toepassen van een verscheidenheid aan stimuli op de ipsilaterale achterpoot.

In Vivo Calciumbeeldvorming van neuronale ensembles in netwerken van primaire sensorische neuronen in intacte dorsale wortelganglia

Het huidige protocol beschrijft in vivo calciumbeeldvorming voor het meten van de reacties van ensembles van lumbale-6 DRG-neuronen op somatische en viscerale stimuli. Er kunnen grondige vergelijkingen worden gemaakt tussen neuronen die reageren op verschillende stimuli. Dit protocol is waardevol voor het onderzoeken van mechanismen van viscerale pijn en somatische stimulatie, zoals acupunctuur.

In Vivo calciumbeeldvorming van de respons van neuronen in dorsale wortelganglia op somatische en viscerale stimuli

Genetisch gecodeerde calciumindicatoren (GECI) maken een robuuste analyse op populatieniveau van sensorische neuronsignalering mogelijk. Hier hebben we een nieuwe benadering ontwikkeld die in vivo GECI-visualisatie van de activiteit van trigeminusganglia-neuronen bij ratten mogelijk maakt.

In-vivo Calciumbeeldvorming van sensorische neuronen in het trigeminusganglion van de rat

Spontane activiteit van de ontwikkeling van neuronale netwerken kan worden gemeten met behulp van AM-ester vormen van calcium-gevoelige indicator kleurstoffen. Veranderingen in de intracellulaire calcium, met vermelding van neuronale activatie, worden gedetecteerd als voorbijgaande veranderingen in de indicator fluorescentie met een-of twee-foton beeldvorming. Dit protocol kan worden aangepast voor een bereik van hun ontwikkeling afhankelijk van neuronale...

Functionele Beeldvorming Calcium in ontwikkelingslanden Cortical Networks

Retrograde transport van fluorescente kleurstof labelt een sub-populatie van neuronen op basis van anatomische projectie. Gelabelde axons kunnen visueel worden...

Retrograde Fluorescerende Labeling Maakt Gerichte Extracellulair Single-unit Opnemen van geïdentificeerde neuronen<em&gt; In vivo</em

Met zijn kleine transparante lichaam, goed gedocumenteerde neuroanatomie en een groot aantal vatbaar genetische technieken en...

In vivo neuronale calcium Imaging in C. elegans

In dit artikel zullen we snel micro-iontoforese van neurotransmitters als een techniek om de integratie van postsynaptische signalen met een hoge ruimtelijke en temporele precisie onderzoeken.

Snel Micro-iontoforese van glutamaat en GABA: een nuttig instrument om Synaptic Integratie Onderzoek

Leer in vivo GCaMP-calciumbeeldvorming van trigeminusganglion-neuronen om sensorische netwerken te bestuderen. Deze methode onthult neurale activatiepatronen bij pijn en tastzin in muizen.

In vivo Calciumbeeldvorming van neuronale ensembles in netwerken van primaire sensorische neuronen in intacte trigeminusganglia

Meer video's verkennen