Name: Kanker-geassocieerde fibroblasten van borsttumoren bij muizen als hulpmiddelen voor moleculaire en computationele studies (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-03T13:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 1 s
Description: Leer hoe kanker-geassocieerde fibroblasten borstkankerprogressie beïnvloeden met transcriptoomanalyse en computationele modellen. Deze methode onthult STAT3-gemedieerde mechanismen en identificeert therapeutische doelwitten.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

<table><tbody><tr><td>1Kb plus DNA ladder</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>10787018</td><td></td></tr><tr><td>24 well plate</td><td>Sarstedt</td><td>833922</td><td></td></tr><tr><td>96 well plate</td><td>Sarstedt</td><td>833924</td><td></td></tr><tr><td>Azijnzuur</td><td>Sigma Aldirch</td><td>695092</td><td></td></tr><tr><td>AgeI-HF</td><td>New England Biolabs</td><td>R3552</td><td>Bewaar bij -20 &deg;C</td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Meda Pharma</td><td>23907076</td><td></td></tr><tr><td>B&uuml;rker telkamer&nbsp;</td><td>VWR</td><td>40443703</td><td></td></tr><tr><td>Cautery Low Temp FineTip Disp</td><td>Keeler</td><td>AX10339KL</td><td></td></tr><tr><td>Centrifuge</td><td>Eppendorf</td><td>5810R</td><td></td></tr><tr><td>Conische buis 15 mL</td><td>Sarstedt</td><td>62554502</td><td></td></tr><tr><td>Conische buis 50 mL</td><td>Sarstedt</td><td>62547254</td><td></td></tr><tr><td>Cryopure 2 mL microtubes</td><td>Sarstedt</td><td>72380992</td><td></td></tr><tr><td>Kristalviolet</td><td>Sigma Aldirch</td><td>C0775</td><td>Bewaar bij RT, gebruik in een afzuigkap&nbsp;</td></tr><tr><td>Kweekplaat 100 mm diameter&nbsp;</td><td>Sarstedt</td><td>833902</td><td></td></tr><tr><td>Kweekplaat 60 mm diameter&nbsp;</td><td>Sarstedt</td><td>833920</td><td></td></tr><tr><td>ddH20</td><td>Homemade</td><td></td><td>Bewaar bij RT, gebruik in een biologische kap</td></tr><tr><td>Digitale schuifmaat</td><td>Preciva</td><td>02-301-2</td><td></td></tr><tr><td>Digitaal microscoop</td><td>Leica</td><td>DM6B</td><td></td></tr><tr><td>Dimethyl sulfaat</td><td>Sigma Aldirch</td><td>D8418</td><td>Gebruik in een biologische kap</td></tr><tr><td>Dulbecco&rsquo;s Modified Eagle&rsquo;s Medium (DMEM)</td><td>Gibco</td><td>11965092</td><td>Bewaar bij 4 &deg;C, gebruik in een biologische kap</td></tr><tr><td>EcoRI-HF</td><td>New England Biolabs</td><td>R3101</td><td>Bewaar bij -20 &deg;C</td></tr><tr><td>Ethyleendiaminetetraazijnzuur (EDTA)</td><td>Sigma Aldirch</td><td>E6758</td><td>Bewaar bij RT, gebruik in een biologische kap</td></tr><tr><td>Foetaal runderserum (FBS)</td><td>Gibco</td><td>16000044</td><td>Bewaar bij 4 &deg;C, gebruik in een biologische kap</td></tr><tr><td>Gezeefde punten 10 &micro;L</td><td>Sarstedt</td><td>703010255</td><td></td></tr><tr><td>Gezeefde punten 100 &micro;L</td><td>Sarstedt</td><td>703030255</td><td></td></tr><tr><td>Gezeefde punten 1000 &micro;L</td><td>Sarstedt</td><td>703060255</td><td></td></tr><tr><td>Gezeefde punten 20 &micro;L</td><td>Sarstedt</td><td>703030265</td><td></td></tr><tr><td>Gezeefde punten 200 &micro;L</td><td>Sarstedt</td><td>703031255</td><td></td></tr><tr><td>Filtropur S Plus 0,20 &micro;m&nbsp;</td><td>Sarstedt</td><td>831826102</td><td></td></tr><tr><td>Filtropur S Plus 0,45 &micro;m&nbsp;</td><td>Sarstedt</td><td>831826</td><td></td></tr><tr><td>Fijne schaar</td><td>2Biol</td><td>1406009</td><td></td></tr><tr><td>Pincet</td><td>2Biol</td><td>1102412</td><td></td></tr><tr><td>Geneticine</td><td>Gibco</td><td>10131035</td><td>Bewaar bij 4 &deg;C, gebruik in een biologische kap</td></tr><tr><td>Lipofectamine 2000 Transfectiereagens</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>11668019</td><td>Bewaar bij 4 &deg;C, gebruik in een biologische kap</td></tr><tr><td>Matrigel invasiekamers met 8 &mu;m PET membraan&nbsp;</td><td>Corning</td><td>354480</td><td></td></tr><tr><td>Microplaatlezer (600 nm absorptie)</td><td>Promega</td><td>GM3500</td><td></td></tr><tr><td>Microtubes 1,5 mL&nbsp;</td><td>Sarstedt</td><td>7269001</td><td></td></tr><tr><td>Optimem</td><td>Gibco</td><td>31985047</td><td>Bewaar bij 4 &deg;C, gebruik in een biologische kap</td></tr><tr><td>Paraformaldehyde (PFA)</td><td>Sigma Aldirch</td><td>158127</td><td>Bewaar bij RT, gebruik in een afzuigkap</td></tr><tr><td>pBABE-neo largeTcDNA&nbsp;</td><td>Addgene</td><td>1780</td><td>Bewaar bij -20 &deg;C, gebruik in een biologische kap</td></tr><tr><td>pCL-Ampho</td><td>Novus Biological&nbsp;</td><td>18746853</td><td>Bewaar bij -20 &deg;C, gebruik in een biologische kap</td></tr><tr><td>pCMV-R8.74</td><td>Addgene</td><td>22036</td><td>Bewaar bij -20 &deg;C, gebruik in een biologische kap</td></tr><tr><td>pCMV-VSVG&nbsp;</td><td>Addgene</td><td>8454</td><td>Bewaar bij -20 &deg;C, gebruik in een biologische kap</td></tr><tr><td>Penicilline-Streptomycine (Pen Strepto, 10.000 &mu;g/mL)&nbsp;</td><td>Gibco</td><td>15140122</td><td>Bewaar bij 4 &deg;C, gebruik in een biologische kap</td></tr><tr><td>Phase contrast microscoop&nbsp;</td><td>Olympus&nbsp;</td><td>BX42</td><td></td></tr><tr><td>Fosfaat gebufferde saline&nbsp;(PBS)</td><td>Homemade</td><td></td><td>Bewaar bij RT, gebruik in een biologische kap</td></tr><tr><td>pLKO.1-Puro&nbsp;</td><td>Addgene</td><td>10878</td><td>Bewaar bij -20 &deg;C, gebruik in een biologische kap</td></tr><tr><td>Poly-L-lysine oplossing</td><td>Sigma Aldirch</td><td>P8920</td><td>Bewaar bij 4 &deg;C, gebruik in een biologische kap</td></tr><tr><td>Puromycine dihydrochloride van&nbsp;Streptomyces alboniger</td><td>Sigma Aldirch</td><td>P8833</td><td></td></tr><tr><td>rCutSmart Buffer&nbsp;</td><td>New England Biolabs</td><td>B6004</td><td>Bewaar bij -20 &deg;C</td></tr><tr><td>Rodent scheerapparaat</td><td>Aesculap</td><td>GT416</td><td></td></tr><tr><td>Roswell Park Memorial Institute (RPMI)</td><td>Gibco</td><td>61870010</td><td>Bewaar bij 4 &deg;C, gebruik in een biologische kap</td></tr><tr><td>Round-tip Thirsty-Swabs</td><td>Sigma Aldirch</td><td>Z744127</td><td></td></tr><tr><td>Scalpel</td><td>Gima</td><td>27041</td><td></td></tr><tr><td>Secura Semi Micro Balance</td><td>Sartorius</td><td>SECURA125-1S</td><td></td></tr><tr><td>Serologische pipet 10 mL&nbsp;</td><td>Sarstedt</td><td>861254001</td><td></td></tr><tr><td>Serologische pipet 2 mL&nbsp;</td><td>Sarstedt</td><td>861252001</td><td></td></tr><tr><td>Serologische pipet 25 mL&nbsp;

kanker-geassocieerde fibroblasten van borsttumoren bij muizen als hulpmiddelen voor moleculaire en computationele studies

Cancer-Associated Fibroblasts from Mouse Mammary Tumors as Tools for Molecular and Computational Studies

Kanker-geassocieerde fibroblasten van borsttumoren bij muizen als hulpmiddelen voor moleculaire en computationele studies

A compelling body of research has confirmed the critical role of the tumor microenvironment (TME) in the growth and aggressiveness of breast cancer (BC). ...

cancer-associated-fibroblasts-from-mouse-mammary-tumors-as-tools-for

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Kankeronderzoek

In dit rapport tonen we een systeem te isoleren en cultuur donor cellen van de muis borstklier, en orthotopically deze cellen transplantatie in ontvangende muizen om de stromale analyseren: epitheel interacties tijdens mammatumor ontwikkeling.

Borstklieren transplantatie van stromale cellen en carcinoom cellen in C57BL/6J Muizen

Carcinoom-geassocieerde fibroblasten (cafe's), rijk aan myofibroblasten aanwezig in de tumor stroma, spelen een belangrijke rol in het besturen van tumorprogressie. We ontwikkelden een coimplantation tumor xengraft model voor het genereren van experimenteel CAFS uit humane fibroblasten borstklieren. Het protocol beschrijft hoe om vast te stellen CAF myofibroblasten dat het vermogen om tumorgenese bevorderen verwerven.

Experimentele Generatie van Carcinoom-geassocieerde fibroblasten (cafe&#39;s) van Human Borst fibroblasten

Cancer Associated Fibroblasten (CAF) te vergemakkelijken tumorinitiatie, groei en progressie door te geven dat bevordert de proliferatie, angiogenese en ontsteking. Hier beschrijven we een methode om pure populaties van normale fibroblasten en CAF isoleren van verse muis en humane weefsels door celsortering, met PDGFRα als oppervlaktemerker.

Isolatie van normale en kankergeassocieerde fibroblasten van verse weefsels door fluorescentie-geactiveerde celsortering (FACS)

Hier beschrijven we het model en de aanpak om functies van pulmonaire alveolaire macrofagen in kankermetastase te bestuderen. Om de rol van deze cellen in metastase te demonstreren, werd het syngene (4T1) model van borstkanker gebruikt in combinatie met de depletie van alveolaire macrofagen met clodronat liposomen.

Het bestuderen van de rol van alveolaire macrofagen in de uitzaaiing van borstkanker

Een protocol om kankercellen en fibroblasten samen te injecteren en de tumorgroei in de loop van de tijd te volgen, wordt verstrekt. Dit protocol kan worden gebruikt om de moleculaire basis voor de rol van fibroblasten als regulatoren van tumorgroei te begrijpen.

Een muismodel om de rol van kanker-geassocieerde fibroblasten in tumorgroei te onderzoeken

Dit artikel heeft tot doel een protocol te bieden voor de isolatie en kweek van primaire kanker-geassocieerde fibroblasten uit een syngenetisch muizenmodel van triple-negatieve borstkanker en hun toepassing voor de preklinische studie van nieuwe nanodeeltjes die zijn ontworpen om zich te richten op de tumormicro-omgeving.

Isolatie van primaire kanker-geassocieerde fibroblasten uit een syngenetisch muizenmodel van borstkanker voor de studie van gerichte nanodeeltjes

Meercellige 3D-tumorsferoïden werden bereid met longadenocarcinoomcellen, fibroblasten en monocyten, gevolgd door de isolatie van kanker-geassocieerde fibroblasten (CAFs) uit deze sferoïden. Geïsoleerde CAFs werden vergeleken met normale fibroblasten om de mitochondriale gezondheid te beoordelen door het mitochondriale transmembraanpotentieel, reactieve zuurstofsoorten en enzymatische activiteiten te bestuderen.

Beoordeling van mitochondriale gezondheid in kankergeassocieerde fibroblasten geïsoleerd uit 3D meercellige longtumorenferoïden

We ontwikkelden een methode om succesvol te verwijderen, verwerken, delen en vlek voor histopathologische evaluatie, mammariumweefsel dat oorspronkelijk op glijbanen was vastgezet als gehele mounts. Deze methode kan de verzameling en evaluatie van de hele membraan van de borstklier bevorderen in onderzoeken voor reproductieve en ontwikkelingstest.

Sectie Mammary Gland Whole Mounts voor Lesion Identificatie

Dit protocol beschrijft een eenvoudige en handige methode voor het opslaan van perifeer bloed en serum/plasma voor downstream analyses uitgevoerd, zoals single nucleotide polymorphism (SNP) evaluatie en analyse ELISA.

Gedroogd bloed en Serum vlekken als een nuttig instrument voor Sample opslag om te evalueren van kanker, Biomarkers

Het doel van dit protocol is om een 3D in vitro model te vestigen om de differentiatie van met kanker geassocieerde fibroblasten (CAFs) in een tumor bulk-achtige omgeving te bestuderen, die kan worden aangepakt in verschillende analysesystemen, zoals immunofluorescentie, transcriptionele analyse en Life Cell Imaging.

Een 3D-Spheroid-model als een fysiologisch systeem voor de differentiatie van kanker-geassocieerde fibroblasten en invasies in vitro studies

Leer hoe kanker-geassocieerde fibroblasten borstkankerprogressie beïnvloeden met transcriptoomanalyse en computationele modellen. Deze methode onthult STAT3-gemedieerde mechanismen en identificeert therapeutische doelwitten.

Kanker-geassocieerde fibroblasten van borsttumoren bij muizen als hulpmiddelen voor moleculaire en computationele studies

Meer video's verkennen