18 juli 2025
Dit protocol beschrijft een stapsgewijze procedure voor het oogsten van een gevasculariseerd en gerenerveerd buikwandtransplantaat, met details over de anatomische oriëntatiepunten, technische vereisten en toekomstige mogelijke klinische toepassingen.
Ons Franse laboratorium richt zich op het verbeteren van VCA om de oogstprotocollen te verbeteren, de conservering van transplantaten te optimaliseren, strategieën om ischemie-reperfusieschade te verminderen en menselijke tolerantie te induceren.
De belangrijkste huidige uitdagingen op het gebied van VCA zijn het standaardiseren van inkoopmethoden en het ontwikkelen van robuuste geprotocolleerde weefselconserveringstechnieken om de levensvatbaarheid van het transplantaat te garanderen en de functionele en immunologische resultaten op lange termijn te verbeteren. Dit protocol is bedoeld voor teams die gespecialiseerd zijn in VCA om hen te helpen geoptimaliseerde abdominale allotransplantaties uit te voeren op een betrouwbare en reproductieve manier. In tegenstelling tot andere technieken biedt dit protocol een stapsgewijze handleiding voor het verkrijgen van een geïrenerveerde buikwandtransplantatie, wat essentieel is voor optimaal functioneel herstel.
Onze Franse reconstructieve afdeling richt zich op het verbeteren van zenuwregeneratie, een groeiend veld met behulp van technieken zoals TMR, APNI en zenuwleidingen. Dit is vooral relevant tijdens de transplantatiestap van dit transplantaat.
Ons protocol roept belangrijke vragen op over hoeveel zenuwreparaties nodig zijn en welke technieken moeten worden gebruikt om zinvolle motorische reïnnervatie en functioneel herstel te bereiken.
Ons laboratorium zal zich richten op het behoud van transplantaten, wat de sleutel is tot een succesvolle transplantatie, en dit protocol zou een zeer nuttig model kunnen zijn als het wordt geoogst op een dode gefokte donor, maar het moet worden gedaan onder strikte onderzoeksvergunning.
[Docent] Plaats om te beginnen de patiënt in rugligging op de operatietafel met de armen langs het lichaam. Gebruik een dermografisch potlood om de bovenste grenslijn te tekenen, beginnend bij de processus xiphoid van het borstbeen. Verleng deze lijn lateraal en volg de onderrand van de ribbenkast aan beide zijden totdat deze een verticale lijn bereikt die twee tot drie centimeter lateraal van de voorste bovenste darmbeenwervelkolom ligt. Definieer de laterale grens met een verticale lijn die twee tot drie centimeter lateraal van de voorste superieure darmbeenkolom ligt. Trek vanaf dit punt een neerwaartse lijn om de puls van de dijbeenslagader te bereiken die zich ongeveer zeven tot 10 centimeter onder het liesligament bevindt. Trek vervolgens de ondergrens door aan elke kant een lijn uit te trekken van de puls van de dijbeenslagader naar de schaamstekel. Verbind beide zijden van de tekening langs de middellijn en eindig bij de schaambeensynthese om de driehoekige omtrek te voltooien. Voer een bilaterale incisie in de subcostale huid uit langs de eerder gemarkeerde lijn met behulp van een koud scalpelmes. Snijd vervolgens met behulp van een elektrocauterisatieapparaat door het onderhuidse weefsel totdat u de spierfascia bereikt. Snijd de fascia in die over de rectus abdominis-spieren ligt om de onderliggende spierlichamen bloot te leggen en transecteer de ribbeninserties van de rectus abdominis-spieren met het elektrocauterisatieapparaat. Identificeer nu de superieure epigastrische vaten achter de rectusspieren, lig ze zorgvuldig en snijd ze door met de elektrocauterisatie achter elke gemobiliseerde rectusspier, snijd de diepe spieraponeurose in, vervolgens de transversalis fascia en ten slotte de pariëtale peritoneale fascia. Ontleed lateraal de externe schuine spieren om de semilunaire lijn bloot te leggen en te identificeren. Maak een incisie in de huid met een koud scalpelmes volgens de eerder gemarkeerde zijgrens. Gebruik een elektrocauterisatieapparaat om de incisie door het onderhuidse weefsel voort te zetten totdat de aponeurotische laag van de externe schuine spieren is bereikt. Snijd vervolgens de uitwendige schuine spier in, gevolgd door de interne schuine spier, waarbij u een laterale marge van twee tot drie centimeter vanaf de halve maanlijn aanhoudt. Zoek vervolgens de thoracolumbale zenuwen tussen de interne schuine en dwarse buikspieren en ontleed deze zenuwen zorgvuldig zo ver mogelijk lateraal om ze te behouden. Zodra de thoracolumbale zenuwen zijn vastgezet, snijdt u de transversale abdominis-spier in, gevolgd door de transversalis fascia en vervolgens de pariëtale peritoneale fascia. Identificeer tijdens het loslaten van het allotransplantaat de diepe inferieure epigastrische steeltjes die zich op het diepe oppervlak van de rectus abdominis-spieren bevinden. Maak een incisie in de huid langs het onderste ontwerp met behulp van een koud scalpelmes. Ga met behulp van een elektrisch scalpel verder met de dissectie door het onderhuidse weefsel totdat u het crurale gespierde aponeurotische vlak van de dij bereikt. Identificeer nu de grote vena saphena, ligate en transecteer deze. Zoek vervolgens de laterale femorale huidzenuw en snijd deze door. Snijd de crurale fascia in en zorg ervoor dat deze wordt opgenomen in het transplantaatmonster. Breng vervolgens de twee driehoekige fascia huidflappen onder de liesligamenten omhoog totdat de femurvaten bloot komen te liggen. Ontleed aan beide zijden zorgvuldig de dijbeenslagader en -ader, samen met hun collaterale takken, inclusief de oppervlakkige inferieure epigastrische en oppervlakkige circumflexe darmbeenvaten. Ga door met de dissectie in de richting van de uitwendige darmbeenslagader en -ader, waarbij u de diepe inferieure epigastrische en diepe circumflexe darmvliesvaten identificeert en behoudt. Lus vervolgens de diepe inferieure epigastrische vaten met een siliconenlus ter bescherming. Om de dissectie boven het liesligament voort te zetten, verwijdert u de gespierde fascia over de darmbeenspier om beschadiging van de diepe circumflexe darmbeenvaten te voorkomen. Maak met een elektrisch scalpel de rectus abdominis-spieren los van hun schaambeenaanhechtingen, zodat de diepe inferieure epigastrische vaten intact blijven. Vervolgens wordt de inhoud van het lieskanaal geligate en doorsneden, inclusief het ronde ligament van de baarmoeder en de ilioinguinale zenuw bij vrouwen. Om de dissectie te voltooien, ligate en snijdt u de diepe circumflex iliacale, oppervlakkige circumflex iliacale en oppervlakkige inferieure epigastrische vaten bij hun oorsprong op de externe iliacale en femurvaten. Zorg ervoor dat de twee diepe inferieure epigastrische vasculaire steeltjes bevestigd blijven aan zowel het abdominale wandtransplantaat als het lichaam van de donor. Identificeer en markeer na het verwijderen van de abdominale ingewanden de diepe inferieure epigastrische vaten aan beide zijden, meestal één slagader en twee aders per kant. Ontleed en ligate deze vaten zorgvuldig bij hun oorsprong van de externe bekkenvaten, en doorsnijd vervolgens de vaten om het transplantaat vrij te maken. Katheteriseer nu elke diepe inferieure epigastrische slagader met behulp van een vasculaire canule uitgerust met een kraan en bevestig deze met een ligatuur aan het arteriële lumen. Bevestig ten slotte een irrigatieset aan de canules en spoel het transplantaat met één tot drie liter conserveringsoplossing van de Universiteit van Wisconsin, getemperd op vier graden Celsius. Houd onder lage druk een debiet aan van ongeveer 100 milliliter per minuut, met een maximum van 100 millimeter kwik totdat het effluent helder is. De gemiddelde bruikbare lengte van de thoracolumbale zenuwen die zowel aan de rechter- als aan de linkerkant werden ontleed, was 68 millimeter met individuele zenuwlengtes variërend van 60 tot 85 millimeter. De diepe inferieure epigastrische slagader meet 85 millimeter aan de linkerkant en 71 millimeter aan de rechterkant voordat hij het transplantaat binnengaat.
Bekijk het volledige transcript en krijg toegang tot duizenden wetenschappelijke video's
Dit protocol beschrijft een stapsgewijze procedure voor het oogsten van een gevasculariseerd en geherinnerveerd allograft van de buikwand, met een gedetailleerde beschrijving van de anatomische oriëntatiepunten en technische vereisten. Het doel is om protocollen voor gevasculariseerde samengestelde allotransplantatie (VCA) te verbeteren voor betere klinische resultaten.
De gestandaardiseerde winning en conservering van gevasculariseerde, geherinnerveerde allografts van de buikwand vullen een kritisch gat in de reconstructieve transplantatie bij complexe defecten van de buikwand. Dit protocol ondersteunt translationeel onderzoek door reproduceerbare graft-levensvatbaarheid en functioneel herstel mogelijk te maken, wat een directe impact heeft op vroege ontdekkingen en de ontwikkeling van preklinische modellen in tissue engineering. De adoptie ervan kan mechanistische onzekerheden verminderen en portfoliobeslissingen in R&D voor regeneratieve geneeskunde en transplantatie informeren.
Dit protocol is geïntegreerd in het continuüm van ontdekking tot preklinisch onderzoek voor reconstructieve transplantatie en ondersteunt zowel vroege mechanistische studies als de ontwikkeling van translationele modellen.