Een muismodel om de structurele en functionele resultaten op lange termijn te evalueren na de omkering van langdurige unilaterale ureterobstructie

Mijn laboratorium werkt aan de mechanismen en therapie om de langetermijnresultaten na nierbeschadiging te verbeteren, en de specifieke focus van dit protocol is het ontwikkelen van een hulpmiddel om langetermijnresultaten te bestuderen na omkering van urinewegobstructie. We hebben een muismodel ontwikkeld van unilaterale omkeerbare ureterobstructie, waarmee we de functionele en structurele resultaten op lange termijn van het omkeren van urinewegobstructie in de nier kunnen evalueren. Andere methoden vereisen meerdere operaties of microchirurgische expertise, waar de meeste laboratoria geen toegang toe hebben. Omdat dit eenzijdige obstructie is, staan de meeste andere methoden bovendien geen functionele evaluatie van herstel toe zonder gesplitste nierfunctietests uit te voeren. Er zijn er eigenlijk maar twee. De eerste is een consistente plaatsing van de vasculaire klem op dezelfde positie op de proximale urineleider in elk experiment, en de tweede is het verwijderen van de vasculaire klem enkele dagen later zonder schade aan de urineleider of nier te veroorzaken.

[Rachel] Bereid om te beginnen de chirurgische kant van een verdoofde muis voor met antiseptica. Maak met een schaar en tang een longitudinale dorsale incisie van 1,5 centimeter langs de middellijn door de huid en de onderhuidse lagen. Maak een kleine incisie door de linkerflankspier en fascia boven de nier. Exterioriseer vervolgens met een tang de linkernier. Met een stompe tang. Ontleed voorzichtig het vet aan de onderpool en wat bindweefsel bij de urineleider. Zoek het gebied van de urineleider. Scheid vervolgens de urineleider samen met het bindweefsel van de niersteel om te voorkomen dat de nierader en slagader met de klem worden opgenomen. Gebruik klemappliers om de vasculaire klem te openen en plaats deze direct onder het nierbekken op de urineleider. Gebruik de markeringen op de klem om ervoor te zorgen dat er een gelijkmatige druk wordt uitgeoefend op alle muizen. Gebruik nu een met zoutoplossing doordrenkt steriel wattenstaafje om de nier voorzichtig met de klem terug in de retroperitoneale ruimte te duwen. Hecht vervolgens de spierlaag met een resorbeerbare hechtdraad. Gebruik skinclips om de skinlaag te sluiten. Om de ureterklem te verwijderen, verwijdert u de wondklemmen en reinigt u vervolgens het operatiegebied zonder opnieuw vorm te geven met behulp van de originele incisies om toegang te krijgen tot de klem. Open de spierlaag opnieuw en leg de retroperitoneale ruimte bloot. Gebruik een tang om de klem voorzichtig in de retroperitoneale ruimte te lokaliseren zonder de nier te exterioriseren. Open met klemaanbrengers de klem voorzichtig terwijl u het omringende weefsel met een tang wegtrekt om het veilig te verwijderen. Exteïriseer nu de nier om het nierbekken te inspecteren op obstructie. Een gezwollen nierbekken bevestigt hydronefrose. Duw de nier terug in de retroperitoneale ruimte met behulp van een met zoutoplossing doordrenkt steriel wattenstaafje en hecht de incisie dicht zoals aangetoond. Om contralaterale nefrectomie uit te voeren, opent u de dorsale plaats opnieuw met behulp van de oorspronkelijke huidincisie. In grootte, de rechterflankspier en fascia boven de nier. Exteïriseer vervolgens de rechternier met een tang. Houd de rechternier vast met een gladde, gebogen tang en ontleed de bovenste en onderste pool vrij van het omringende weefsel. Nadat de nier is bevrijd, bindt u een Foro-zijden hechtdraad rond de niervaten en urineleider met behulp van een dubbele chirurgische knoop. Wacht ongeveer 30 seconden tot de nier donkerder wordt. Houd hem vervolgens vast met de gladde gebogen tang en verwijder hem door distaal naar de knoop te knippen met een gebogen schaar. Duw de resterende niersteel voorzichtig terug in de retroperitoneale ruimte met behulp van een met zoutoplossing doordrenkt steriel wattenstaafje en sluit vervolgens de spier- en huidlagen met hechtingen en clips. Typische metingen van overleving en nierfunctie werden 84 dagen na omkeerbare unilaterale ureterobstructie uitgevoerd. Functionele studies vergeleken omkeerbare unilaterale ureterobstructie met nefrectomie alleen voor bloedureumstikstof, transdermale glomerulaire filtratiesnelheid en urinaire osmolariteit na 18 uur waterdeprivatie. De osmolariteitswaarden in de urine waren op dezelfde tijdstippen duidelijk lager dan bij nefrectomiecontrolemuizen.