Name: Driedimensionaal weefselmodel met hoge doorvoer voor kwantificering van elektroporatiedrempels (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-19T13:20:00.000+00:00
Duration: 8 min 23 s
Description: Ontdek computationele modellering om elektroporatiedrempels te kwantificeren met driedimensionale weefselmimetica. Deze methode optimaliseert transfertieprotocollen voor efficiëntere gentherapie.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

<table><tbody><tr><td>0.25% trypsin-EDTA</td><td>Gibco</td><td>25200056</td><td></td></tr><tr><td>1000 uL pipette tips</td><td>Fisher Scientific</td><td>13-811-164</td><td></td></tr><tr><td>15 mL conische buis</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-959-70C</td><td></td></tr><tr><td>200 uL pipette tips</td><td>Fisher Scientific</td><td>13-811-139</td><td></td></tr><tr><td>304 roestvrijstalen stompe puntnaalden</td><td>McMaster Carr</td><td>75165A753</td><td></td></tr><tr><td>316 Roestvrijstalen buis</td><td>McMaster Carr</td><td>89785K319</td><td></td></tr><tr><td>Acrylic</td><td>McMaster Carr</td><td>8505K754</td><td></td></tr><tr><td>Bioveiligheidskast</td><td>Fisher Scientific</td><td>13-261-312</td><td></td></tr><tr><td>CAD software</td><td>Dassault Systems</td><td>SolidWorks</td><td></td></tr><tr><td>Centrifuge</td><td>Nuaire</td><td>NU-C200R</td><td></td></tr><tr><td>Elektroporator</td><td>Hbio</td><td>45-0662</td><td>Een op maat gemaakt apparaat en een BTX ECM 830 systeem werden gebruikt in deze studie</td></tr><tr><td>EMEM</td><td>Fisher Scientific</td><td>MT10009CV</td><td>Dit kan variëren&nbsp; als je een andere cellijn gebruikt dan HEK293</td></tr><tr><td>Falcon 12-wells heldere platte bodem TC-behandelde Multiwell celcultuurplaat, met deksel</td><td>Corning</td><td>353043</td><td>Elke 12-wells plaat kan worden gebruikt, zorg er alleen voor dat de well afmetingen worden meegenomen bij het fabriceren van de elektrodehouder.</td></tr><tr><td>FBS</td><td>Fisher Scientific</td><td>A5670701</td><td></td></tr><tr><td>Vezeloptische Temperatuur Sonde</td><td>Micronor Inc.</td><td>TS5-20MM-02</td><td></td></tr><tr><td>GFP-Plasmid</td><td>Aldeveron</td><td>gWiz-GFP</td><td></td></tr><tr><td>HEK293 Cellen</td><td>ATCC</td><td>CRL-1573</td><td>Andere cellijnen kunnen worden gebruikt, zorg er alleen voor dat het juiste kweekmedium wordt gebruikt</td></tr><tr><td>Hot Plate</td><td>Thermoelectric Cooling America Corporation</td><td>AHP-301CPV</td><td></td></tr><tr><td>IJs of gekoelde parelbad</td><td>Fisher Scientific</td><td>10-876-001</td><td></td></tr><tr><td>Beeldanalyse software</td><td>Leica</td><td>LAS X</td><td></td></tr><tr><td>Incubator</td><td>Fisher Scientific</td><td>15-015-2633</td><td></td></tr><tr><td>Omgekeerde Fluorescerende Microscoop</td><td>Leica</td><td>DMi8</td><td></td></tr><tr><td>Laser Snijder</td><td>McMaster Carr</td><td>7344N11</td><td></td></tr><tr><td>Penicilline-streptomycine</td><td>Fisher Scientific</td><td>15140122</td><td></td></tr><tr><td>Pipet Kit</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-388-100</td><td></td></tr><tr><td>Simulatie Software</td><td>COMSOL</td><td>COMSOL Multiphysics 6.2</td><td></td></tr><tr><td>T75 Flacon</td><td>Fisher Scientific</td><td>156499</td><td></td></tr><tr><td>Type I Runder Collageen Oplossing</td><td>Advanced Biomatrix</td><td>5005</td><td>3 mg/mL</td></tr></tbody></table>

driedimensionaal weefselmodel met hoge doorvoer voor kwantificering van elektroporatiedrempels

High-Throughput Capable Three-Dimensional Tissue Model for Quantification of Electroporation Thresholds

Driedimensionaal weefselmodel met hoge doorvoer voor kwantificering van elektroporatiedrempels

Electroporation is a promising technology utilizing electrical pulses for macromolecule delivery and soft-tissue ablation, with applications that include ...

high-throughput-capable-three-dimensional-tissue-model-for

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bio-engineering

Geoptimaliseerd transfectie strategie voor Expressie en elektrofysiologische opname van recombinant voltage-gated ion kanalen in HEK-293T cellen

Dit protocol beschrijft de microfabricagetechnieken die nodig zijn om een lab-on-a-chip, microfluïdisch elektroporatieapparaat te bouwen. De experimentele opstelling voert gecontroleerde transfecties op één celniveau uit in een continue stroom en kan worden uitgebreid naar hogere doorvoersnelheden met populatiegebaseerde controle. Er wordt een analyse verstrekt die de mogelijkheid toont om de mate van celmembraanpermeabilisatie in realtime elektrisch te bewaken.

De fabricage en werking van een continu flow, micro-elektroporatiesysteem met permeabilisatiedetectie

Dit werk beschrijft de ontwikkeling van flexibele interdigitated elektroden voor implementatie in 3D hersentumormodellen, namelijk in vitro cultuur, in ovo model en in vivo murine  model. De voorgestelde methode kan worden gebruikt om de effecten van gepulseerde elektrische velden op tumoren op verschillende niveaus van complexiteit te evalueren.

Flexibele organische elektronische apparaten voor gepulseerde elektrische veldtherapie van glioblastoom

Driedimensionale hartweefsels die bio-engineered zijn met behulp van van stamcellen afgeleide cardiomyocyten zijn naar voren gekomen als veelbelovende modellen voor het bestuderen van gezond en ziek menselijk myocardium in vitro , terwijl ze de belangrijkste aspecten van de inheemse cardiale niche recapituleren. Dit manuscript beschrijft een protocol voor het vervaardigen en analyseren van gemanipuleerde hartweefsels met een hoog gehalte die zijn gegenereerd uit door de mens geïnduceerde...

Ontwerp van een bioreactor om de data-acquisitie en modeldoorvoer van gemanipuleerde hartweefsels te verbeteren

Poreuze substraatelektroporatie (PSEP) combineert een consistente, hoge doorvoer met een hoge cellevensvatbaarheid. De introductie van transepitheliale elektrische impedantiemetingen (TEEI) geeft inzicht in de intermediaire processen van PSEP en maakt labelvrije levering mogelijk. In dit artikel wordt een methode besproken voor het gelijktijdig uitvoeren van PSEP-afgifte-experimenten en TEEI-meetanalyse.

Poreuze elektroporatie op basis van substraat met transepitheliale elektrische impedantiebewaking

Voor het bestuderen van reacties van exciteerbare cellen in vitro, beschrijft het protocol optische monitoring van veranderingen in het genereren van actiepotentiaal als gevolg van elektroporatie op een eenvoudig exciteerbaar celmodel van genetisch gemanipuleerde tet-on spiking HEK-cellen, evenals veranderingen in transmembraanspanning met geautomatiseerde extractie van relevante parameters.

Monitoring van door elektroporatie geïnduceerde veranderingen in het genereren van actiepotentieel in genetisch gemanipuleerde Tet-On Spiking HEK-cellen

Hier presenteren we de acute genetische manipulatie van gesneden menselijke corticale organoïden door elektroporatie. Deze corticale organoïdemodellen zijn bijzonder vatbaar voor injectie, aangezien ventrikelachtige structuren gemakkelijk kunnen worden geïdentificeerd na het snijden, waardoor functioneel onderzoek naar de ontwikkeling van de menselijke corticale ontwikkeling, neurologische ontwikkelingsstoornissen en corticale evolutie mogelijk is.

Elektroporatie van gesneden menselijke corticale organoïden voor onderzoek naar de genfunctie

Elektroporatie is het gebruik van gepulseerde elektrische velden (PEF's) om voorbijgaande poriën in celculturen te creëren om moleculaire lading te introduceren. Deze techniek wordt de laatste tijd veel gebruikt in onderzoeks- en klinische omgevingen. Hier beschrijven we elektroporatietechnieken met behulp van het recent ontwikkelde "Electroporation Cytometry System" voor het uitvoeren van fluorescentiemicroscopie in levende cellen.

Een elektroporatiecytometrieprotocol voor live-cell, fluorescentiemicroscopie met behulp van U2 OS-celcultuur

Hier presenteren we een protocol om een uniek tweelaags microfluïdisch apparaat te fabriceren om de elektromechanische regulatie van de homeostase van epitheelweefsel te bestuderen. Het apparaat past statische fysiologische elektrische stromen toe die loodrecht op het weefselvlak staan, wat van invloed is op de adhesie, proliferatie en extrusie van cellen tot cel. Beeldvorming van levende cellen en mechanische stressmetingen onthullen mechanismen van deze processen.

Onthullende elektromechanische controle van weefselhomeostase met behulp van een tweelaags microfluïdisch apparaat

Dit protocol beschrijft miniaturiseerde CRISPR–Cas9 genoombewerking van de TCRα/β receptor in primaire menselijke T-cellen met behulp van 'DMF-ection', een digitaal microfluïdisch (DMF) elektroporatieplatform. De methode maakt parallelle, laag-input genbewerking met hoge levensvatbaarheid mogelijk en is verder aanpasbaar voor mRNA-levering in meercellige 3D-sferoïden.

Een digitaal microfluïdisch elektroporatieplatform voor low-input CRISPR-genoombewerking en mRNA-transfectie in suspensie-T-cellen en 3D-celmodellen

Dit protocol beschrijft een volledige, reproduceerbare workflow voor patiëntspecifieke elektrische veldsimulatie en validatie van elektrochemotherapie (ECT) voor spinale metastase. De workflow integreert multimodale beeldvorming, semi-automatische en handmatige segmentatie, modellering van weefselgeleidbaarheid, lineaire eindige-elementen elektrische veldsimulatie en experimentele validatie via post-procedure MRI-gebaseerde necrose-overlapanalyse.

Patiëntspecifieke elektrische veldsimulatie bij spinale metastase elektrochemotherapie

Ontdek computationele modellering om elektroporatiedrempels te kwantificeren met driedimensionale weefselmimetica. Deze methode optimaliseert transfertieprotocollen voor efficiëntere gentherapie.

Driedimensionaal weefselmodel met hoge doorvoer voor kwantificering van elektroporatiedrempels

Meer video's verkennen