Name: Een microscopische 2,3,5-triphenyltetrazoliumchloride-assay voor nauwkeurige en betrouwbare analyse van myocardschade (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-11-28T12:30:00.000+00:00
Duration: 11 min 17 s
Description: Leer een verfijnde TTC-kleuringstechniek voor nauwkeurige analyse van myocardschade. Deze methode verbetert beeldkwaliteit en betrouwbaarheid bij het beoordelen van infarctgrootte en cardiomyocytviabiliteit.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Bolli, R., Becker, L., Gross, G., Mentzer, R., Balshaw, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+protection+at+a+crossroads%3A+the+need+for+translation+into+clinical+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Myocardial protection at a crossroads: the need for translation into clinical therapy.</a> Circ Res. 95 (2), 125-134 (2004).</li>
<li>Murphy, E., Steenbergen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+underlying+acute+protection+from+cardiac+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Mechanisms underlying acute protection from cardiac ischemia-reperfusion injury.</a> Physiol Rev. 88 (2), 581-609 (2008).</li>
<li>Bohl, S., Medway, D. J., Schulz-Menger, J., Schneider, J. E., Neubauer, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Refined+approach+for+quantification+of+in+vivo+ischemia-reperfusion+injury+in+the+mouse+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Refined approach for quantification of in vivo ischemia-reperfusion injury in the mouse heart.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 297 (6), H2054-H2058 (2009).</li>
<li>Liepinsh, E., Kuka, J., Zvejniece, L., Vilskersts, R., Dambrova, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+heart+and+brain+tissue+preparation+for+digital+macro+photography+after+ischemia-reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Rodent heart and brain tissue preparation for digital macro photography after ischemia-reperfusion.</a> J Vis Exp. (180), e62942(2022).</li>
<li>Kim, S. -C., Boehm, O., Meyer, R., Hoeft, A., Knüfermann, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+murine+closed-chest+model+of+myocardial+ischemia+and+reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">A murine closed-chest model of myocardial ischemia and reperfusion.</a> J Vis Exp. (65), e3896(2012).</li>
<li>Lindsey, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+for+experimental+models+of+myocardial+ischemia+and+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Guidelines for experimental models of myocardial ischemia and infarction.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 314 (4), H812-H838 (2018).</li>
<li>Ding, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+refined+TTC+assay+precisely+detects+cardiac+injury+and+cellular+viability+in+the+infarcted+mouse+heart%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">A refined TTC assay precisely detects cardiac injury and cellular viability in the infarcted mouse heart.</a> Sci Rep. 14 (1), 25214(2024).</li>
<li>Zhu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IL-6+coaxes+cellular+dedifferentiation+as+a+pro-regenerative+intermediate+that+contributes+to+pericardial+ADSC-induced+cardiac+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">IL-6 coaxes cellular dedifferentiation as a pro-regenerative intermediate that contributes to pericardial ADSC-induced cardiac repair.</a> Stem Cell Res Ther. 13 (1), 44(2022).</li>
<li>Zhu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sfrp1+as+a+pivotal+paracrine+factor+in+the+trained+pericardial+stem+cells+that+foster+reparative+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Sfrp1 as a pivotal paracrine factor in the trained pericardial stem cells that foster reparative activity.</a> Stem Cells Transl Med. 13 (2), 137-150 (2023).</li>
<li>Yellon, D. M., Hausenloy, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Myocardial reperfusion injury.</a> N Engl J Med. 357, 1121-1135 (2007).</li>
<li>Li, C., Chen, M., Zhang, D., Xu, T., Wang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+injury+induced+by+obstructive+jaundice%3A+a+comprehensive+review%5BTitle%5D)+AND+%22Perioper+Precis+Med%22%5BJournal%5D)">Cardiac injury induced by obstructive jaundice: a comprehensive review.</a> Perioper Precis Med. 28 (1), 28-38 (2025).</li>
<li>Chang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%C3%9F-tubulin+contributes+to+Tongyang+Huoxue+decoction-induced+protection+against+hypoxia%2Freoxygenation-induced+injury+of+sinoatrial+node+cells+through+SIRT1-mediated+regulation+of+mitochondrial+quality+surveillance%5BTitle%5D)+AND+%22Phytomedicine%22%5BJournal%5D)">ß-tubulin contributes to Tongyang Huoxue decoction-induced protection against hypoxia/reoxygenation-induced injury of sinoatrial node cells through SIRT1-mediated regulation of mitochondrial quality surveillance.</a> Phytomedicine. 108, 154502(2023).</li>
<li>Li, Z., Hu, B., Zou, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Research+advances+in+understanding+the+role+and+mechanism+of+pyroptosis+in+myocardial+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Perioper+Precis+Med%22%5BJournal%5D)">Research advances in understanding the role and mechanism of pyroptosis in myocardial ischemia-reperfusion injury.</a> Perioper Precis Med. 2 (2), 52-63 (2024).</li>
<li>Ouyang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+immunostaining-based+approach+for+assessing+myocardial+viability+in+the+infarcted+mouse+hearts%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cardiovasc+Med%22%5BJournal%5D)">An immunostaining-based approach for assessing myocardial viability in the infarcted mouse hearts.</a> Front Cardiovasc Med. 12, 1598314(2025).</li>
<li>Benedek, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+TTC+staining+for+the+evaluation+of+tissue+injury+in+the+early+phases+of+reperfusion+after+focal+cerebral+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Use of TTC staining for the evaluation of tissue injury in the early phases of reperfusion after focal cerebral ischemia in rats.</a> Brain Res. 1116 (1), 159-165 (2006).</li>
<li>Lindsey, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+for+in+vivo+mouse+models+of+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Guidelines for in vivo mouse models of myocardial infarction.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 321 (6), H1056-H1073 (2021).</li>
<li>Lujan, H. L., Janbaih, H., Feng, H. -Z., Jin, J. -P., DiCarlo, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+ischemia%2C+reperfusion%2C+and+infarction+in+chronically+instrumented%2C+intact%2C+conscious%2C+and+unrestrained+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Regul+Integr+Comp+Physiol%22%5BJournal%5D)">Myocardial ischemia, reperfusion, and infarction in chronically instrumented, intact, conscious, and unrestrained mice.</a> Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 302 (12), R1384-R1400 (2012).</li>
<li>Redfors, B., Shao, Y., Omerovic, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+infarct+size+and+area+at+risk+assessment+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Clin+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Myocardial infarct size and area at risk assessment in mice.</a> Exp Clin Cardiol. 17 (4), 268-272 (2012).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1.25x objectief</td><td>Olympus</td><td>PlanApo 1.25X/0.04</td><td>Beeldvorming</td></tr><tr><td>10 mL spuiten</td><td>B.Braum</td><td>4617100V</td><td>Retro-perfusie</td></tr><tr><td>2,3,5-trifenyltetrazoliumboorchloride</td><td>Milipore</td><td>1.08380.0100</td><td>Chemische stoffen</td></tr><tr><td>20 G canule</td><td>BD</td><td>305895</td><td>Retro-perfusie</td></tr><tr><td>3  mL spuiten</td><td>B.Braum</td><td>4617022V</td><td>Retro-perfusie</td></tr><tr><td>3-weg stopcock</td><td>B.Braum</td><td>16494C</td><td>Retro-perfusie</td></tr><tr><td>Aquamount&nbsp;</td><td>BDH</td><td>362262H</td><td>Cryosectomie</td></tr><tr><td>Balans</td><td>Ohaus</td><td>N/A</td><td>Wegen van chemicaliën</td></tr><tr><td>Binoculair microscoop</td><td>Leica</td><td>MZ6</td><td>Canule</td></tr><tr><td>C57BL/6J</td><td>Janvier</td><td>N/A</td><td>Dieren</td></tr><tr><td>Camera</td><td>Olympus</td><td>UC30</td><td>Beeldvorming</td></tr><tr><td>Dekglasjes</td><td>Epredia</td><td>BB02400500A113MN20</td><td>Cryosectomie</td></tr><tr><td>Cryostaat</td><td>Leica</td><td>M850</td><td>Cryosectomie</td></tr><tr><td>Dubbel gedistilleerd water</td><td>MIlipore</td><td>N/A</td><td>Oplossen van chemicaliën</td></tr><tr><td>Fijne dissectieschaart</td><td>AESCULAP</td><td>BC702R</td><td>Chirurgische instrumenten</td></tr><tr><td>Fijne microdissectiepincet </td><td>AESCULAP</td><td>FM001R</td><td>Chirurgische instrumenten</td></tr><tr><td>Glazen microscoopglaasjes</td><td>Engelbrecht</td><td>11102</td><td>Cryosectomie</td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>NIH</td><td>1.54g</td><td>Beeldverwerking</td></tr><tr><td>Isofluraan</td><td>Piramal</td><td>14150097146754</td><td>Chemische stoffen</td></tr><tr><td>Isopropanol</td><td>Roth</td><td>&nbsp;0733.1</td><td>Chemische stoffen</td></tr><tr><td>Lichtmicroscoop</td><td>Olympus</td><td>BX61</td><td>Beeldvorming</td></tr><tr><td>Microdissectiepincet </td><td>F.S.T</td><td>11152-10</td><td>Chirurgische instrumenten</td></tr><tr><td>OCT-compound</td><td>Sakura</td><td>4583</td><td>Chemische stoffen</td></tr><tr><td>Petrischaal</td><td>Therno Scientific</td><td>172931</td><td>Retro-perfusie</td></tr><tr><td>Fosfaat gebufferde zoutoplossing</td><td>Roth</td><td>9143.1</td><td>Chemische stoffen</td></tr><tr><td>Rstudio</td><td>Posit Software</td><td>2024.09.0</td><td>Beeldverwerking</td></tr><tr><td>Zijdesnaad</td><td>F.S.T</td><td>18020-60</td><td>Retro-perfusie</td></tr><tr><td>Software</td><td>Olympus</td><td>CellSens V3.2</td><td>Beeldvorming</td></tr><tr><td>Roestvrijstalen dissectieschaart</td><td>AESCULAP</td><td>BC257R</td><td>Chirurgische instrumenten</td></tr><tr><td>Zamboni-oplossing</td><td>Morphisto</td><td>12773.0050</td><td>Chemische stoffen</td></tr></tbody></table>

een microscopische 2,3,5-triphenyltetrazoliumchloride-assay voor nauwkeurige en betrouwbare analyse van myocardschade

A Microscopic 2,3,5-Triphenyltetrazolium Chloride Assay for Accurate and Reliable Analysis of Myocardial Injury

Een microscopische 2,3,5-triphenyltetrazoliumchloride-assay voor nauwkeurige en betrouwbare analyse van myocardschade

In this protocol, we present a refined 2,3,5-Triphenyltetrazolium Chloride (TTC)-based method for the accurate and reliable analysis of myocardial ...

a-microscopic-235-triphenyltetrazolium-chloride-assay-for-accurate

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Het meten van biomarkers in complexe biologische monsters wordt in toenemende mate leidend klinische besluitvorming. We beschrijven een zeer gevoelige methode voor het gelijktijdig meten cardiale myosine bindend eiwit C, creatine kinase MB, troponine I en in serummonsters van patiënten met myocardiaal infarct en gezonde controlepersonen.

Een gevoelige en specifieke kwantificering Methode voor het bepalen van Serum cardiale myosine bindend eiwit C door elektrochemiluminescentie-Immunoassay

Een zeer reproduceerbaar model voor myocardinfarct bij muizen met minimale invasieve manipulaties wordt beschreven. Het model kan eenvoudig worden uitgevoerd, wat resulteert in een hoge reproduceerbaarheid en overlevingsgraad. Daarom zal het beschreven model het aantal benodigde dieren verminderen zoals gevraagd door het 3R-principe (Vervanging, Verfijning en Vermindering).

Minimaal invasieve chirurgische procedure voor het induceren van Myocardinfarct in Muizen

Deze methode beschrijft het gebruik van Quantum Micro-Computed Tomography (MicroCT) om de hartmorfologie, functie, perfusie, metabolisme en levensvatbaarheid te beoordelen met behulp van een gejodeerd contrastmiddel bij muizen met experimenteel geïnduceerde myocardischemie. De techniek kan worden toegepast voor niet-destructieve, longitudinale in vivo beeldvorming met hoge doorvoer van verschillende diermodellen van menselijke hartaandoeningen.

In vivo kwantitatieve beoordeling van myocard structuur, functie, perfusie en levensvatbaarheid Met behulp van Cardiac Micro-computertomografie

Een rattenmodel van abdominale aortaconstrictie dat cardiale hypertrofie en remodellering induceert, wordt beschreven. Een efficiënte, zeer reproduceerbare en minimaal invasieve methode wordt gebruikt om een eenvoudige maar nuttige platform te bieden voor onderzoek naar myocardiale hypertrofie en disfunctie.

Een model van remodellering Door vernauwing van de abdominale aorta bij ratten

De post-mortem beoordeling van myocardinfarct (MI) bij knaagdieren is gebaseerd op kwantificering van het infarct op gekleurde hartsecties. We beschrijven een nauwkeurige methode om de infarctgrootte te kwantificeren door systematische bemonstering van geoogste rattenharten van basis tot apex en beeldanalyse van trichrome-gekleurde histologische secties.

Histologische kwantificering van chronische hartinfarct bij ratten

Dit protocol beschrijft een nieuwe werkwijze voor de vergelijking van 3D gehele hart hartspierweefsel met MRI. Dit is bedoeld voor nauwkeurige vaststelling van intramyocardiale injecties in het infarct grensgebied van een chronische varkensmodel van myocardiaal infarct.

3D Whole-hart myocard Tissue Analyse

Hier tonen we een protocol om te standaardiseren bemonsteringsprocedures van een gevestigde varkens model van acuut myocardinfarct teneinde haar translationeel waarde in de kennis van de pathofysiologie van myocardiale ischemie/reperfusie letsel en het testen van nieuwe drugkandidaten.

Verbetering van een gesloten borst varkens myocardiaal infarct Model door standaardisatie van weefsel en bloed bemonsteringsprocedures

Hier presenteren we een protocol dat gebruikmaakt van JC-1 kleurstof te beoordelen van de Mitochondriale membraanpotentiaal van cellen na wordt blootgesteld aan hypoxie/heroxygenatie met of zonder een beschermende agent.

Een stroom Cytometry gebaseerde Assay voor het meten van de Mitochondriale membraanpotentiaal in cardiale Myocytes na Hypoxia/heroxygenatie

Onder adequate anesthesie werd het muizenhart geëxternaliseerd door de intercostale ruimte en werd een myocardinfarct met succes geïnduceerd door de linker voorste dalende slagader (LAD) af te binden met behulp van materialen die in de meeste laboratoria gemakkelijk verkrijgbaar zijn.

Een aangepaste eenvoudige methode voor het opwekken van een hartinfarct bij muizen

Deze studie onderzoekt de cardioprotectieve effecten van Munziq, een traditioneel Oeigoers kruidenpreparaat, op myocardiale ischemie-reperfusieschade (MIRI) bij ratten met abnormale lichaamsvloeistof. Door middel van uitgebreide experimentele methoden tonen we het potentieel van Munziq aan om MIRI te verminderen door de NF-KB-signaleringsroute te onderdrukken.

Kruidenmunziq verbetert myocardiale ischemie-reperfusieschade door ontstekingen te remmen

Driedimensionale (3D) reconstructie van hartschade bij gerefused acuut myocardinfarct (repAMI) maakt getrouwe kwantificering en co-lokalisatie van geassocieerde ziekte-beïnvloedende patronen mogelijk. Hier wordt een automatiseerbare lichtbladgeleide beeldvormingsbenadering geboden voor gelijktijdige meting van hartschade, risicogebied en immuuncelrespons.

Gelijktijdige 3D-analyse van hartbeschadiging en immuunrespons bij recidorsus acuut myocardinfarct met behulp van fluorescentiemicroscopie

Leer een verfijnde TTC-kleuringstechniek voor nauwkeurige analyse van myocardschade. Deze methode verbetert beeldkwaliteit en betrouwbaarheid bij het beoordelen van infarctgrootte en cardiomyocytviabiliteit.

Een microscopische 2,3,5-triphenyltetrazoliumchloride-assay voor nauwkeurige en betrouwbare analyse van myocardschade

Meer video's verkennen