Name: Voorbereiding van meiotische chromosoomspreads van eicellen van muizen voor beoordeling van synapsis en recombinatie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-18T15:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 24 s
Description: Leer hoe u meiotische chromosoomspreads van muizeicellen voorbereidt voor analyse van synapsis en recombinatie. Deze methode ondersteunt onderzoek naar meiosedynamiek en genoomstabiliteit.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td>0.45 &mu;m Syringe Filter</td><td>Millipore Sigma</td><td>SLHAR33SB</td><td>voor het maken van mondeling bediende pipetten</td></tr><tr><td>0.5 M EDTA, pH 8.0</td><td>Corning</td><td>46-034-CI&nbsp;</td><td>voor HEB</td></tr><tr><td>1 mL steriele spuit met 25-gauge, 16 mm naald</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-817-125&nbsp;</td><td>voor het scheuren van eierstokken</td></tr><tr><td>100 x 15 mm petrischaal</td><td>VWR</td><td>25384-302&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>14,6 cm wegwerpbare borosilicaat glas Pasteur pipetten</td><td>Fisher Scientific</td><td>13-678-20B&nbsp;</td><td>voor het maken van mondeling bediende pipetten</td></tr><tr><td>35 x 10 mm petrischaal</td><td>Corning</td><td>351008</td><td></td></tr><tr><td>40 mm x 0.45 mm #3 roestvrijstalen pennen voor entomologie</td><td>Amazon</td><td>B0CSSPW5S7</td><td>voor het vastpinnen van foetale muizen voor dissectie</td></tr><tr><td>Azijnzuur, glazuur</td><td>Fisher Scientific</td><td>A38-212</td><td>voor Carnoy's fixatief</td></tr><tr><td>Aspiratorbuisassemblages voor gecalibreerde microcapillaire pipetten</td><td>Millipore Sigma</td><td>A5177-5EA</td><td>voor het maken van mondeling bediende pipetten</td></tr><tr><td>B.P.I. kijkglas</td><td>NDS Technologies&nbsp;</td><td>1580-00</td><td>Gebruik alternatief een embryo-schaal met een diameter van 30 mm x 12 mm diep (Electron Microscopy Sciences SKU: 70543-30)</td></tr><tr><td>Boorzuur</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP168-1</td><td>voor het aanpassen van de pH van HEB, PFA</td></tr><tr><td>Rundserumalbumine</td><td>Millipore Sigma</td><td>A7906-100G</td><td>voor ADB</td></tr><tr><td>CO2 Tank</td><td></td><td></td><td>voor incubator</td></tr><tr><td>Corning Microscoopglazen</td><td>Millipore Sigma</td><td>CLS294875X25</td><td>L x B 75 mm x 25 mm, aan één kant gefrost</td></tr><tr><td>Corning microscoopglazen, aan één kant gefrost, één uiteinde</td><td>VWR</td><td>294875X25</td><td></td></tr><tr><td>Dekglas rechthoekig. 60 x 24 mm, #1.5</td><td>VWR</td><td>48393-251</td><td></td></tr><tr><td>Dissectiebak</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>70540</td><td></td></tr><tr><td>Dissectiemicroscoop</td><td></td><td></td><td>Elk standaardmodel</td></tr><tr><td>Dissectiescharen, scherpe punt, 4,5"</td><td>VWR</td><td>82027-578</td><td></td></tr><tr><td>Extra fijne, scherpe punt tang</td><td>VWR</td><td>76548-836</td><td></td></tr><tr><td>Giemsa Stain</td><td>Millipore Sigma</td><td>GS500-500</td><td>voor het kleuren van chiasmata-verspreidingen</td></tr><tr><td>ImmEdge Hydrofobe Barrière PAP Pen</td><td>Vector Laboratories</td><td>H-4000</td><td></td></tr><tr><td>Incubator</td><td></td><td></td><td>Elk standaardmodel met CO2 en watermanteltechnologie</td></tr><tr><td>IVF Workstation</td><td>K-Systems</td><td></td><td>Elk model met een verwarmde werkblad</td></tr><tr><td>Kodak Photo-Flo 200 Solution</td><td>BH Photo &amp; Video</td><td>1464510</td><td>voor diawassingen</td></tr><tr><td>Methanol</td><td>Fisher Scientific</td><td>A412-4</td><td>voor Carnoy's fixatief</td></tr><tr><td>MP Biomedicals Coplin Kleurvat</td><td>Fisher Scientific</td><td>ICN17006201</td><td></td></tr><tr><td>Normaal Geitenserum</td><td>Gibco</td><td>16210-072</td><td>voor ADB</td></tr><tr><td>Paraformaldehyde, EM Grade, Gezuiverde Prill</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>19200</td><td></td></tr><tr><td>Permount</td><td>Fisher Scientific</td><td>SP15-100</td><td>voor het monteren van dia's voor chiasmata-verspreidingen</td></tr><tr><td>ProLong Glass Antifade Mountant met NucBlue Stain</td><td>Thermo Scientific</td><td>P36985</td><td>voor het monteren van geïmmunokleuring dia's</td></tr><tr><td>Silicoonbuis, binnendiameter: 0,125", buitendiameter: 0,25"</td><td>VWR</td><td>89068-474</td><td>voor het maken van mondeling bediende pipetten</td></tr><tr><td>Natriumcitraatdihydraat</td><td>Fisher Scientific</td><td>S279-500</td><td>voor HEB, hypotone oplossing</td></tr><tr><td>StainTray Slide Staining System</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>71396-B</td><td>Te gebruiken als een bevochtigde kamer. Gebruik de zwarte deksel voor immunofluorescentiekleuring. U kunt alternatief de bodem van een ondoorzichtige diadoos of tupperware bekleden met vochtige papieren handdoeken voor gebruik als een bevochtigde kamer&nbsp;</td></tr><tr><td>Stripper Tips - 100</td><td>Cooper Surgical</td><td>MXL3-100</td><td>voor mondeling bediende pipetten</td></tr><tr><td>Stripper Tips - 150</td><td>Cooper Surgical</td><td>MXL3-150</td><td>voor mondeling bediende pipetten</td></tr><tr><td>Sucrose</td><td>Millipore Sigma</td><td>S-8501</td><td>voor HEB, sucrose hypotone oplossing</td></tr><tr><td>Tris Base</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP152-5</td><td>voor HEB</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP151-100&nbsp;</td><td>voor PFA, ADB en Triton-PBS</td></tr><tr><td>United Scientific Coplin Kleurvat</td><td>Fisher Scientific</td><td>S17495A</td><td>opaak wit plastic voor wassen en blokkeren van dia's na toevoeging van fotogevoelige secundaire antilichamen</td></tr><tr><td>United Scientific Glazen Concaviteitsschuiven</td><td>Fisher Scientific</td><td>S139533</td><td>1,3 mm dik, 2 wel tellen</td></tr><tr><td>Vannas Microdissectie Scheren 5 mm recht</td><td>VWR</td><td>76457-358</td><td></td></tr><tr><td>Zeiss Axio Imager.Z2, Colibri 7</td><td>Carl Zeiss</td><td>000000-2624-307</td><td></td></tr><tr><td>Zen Blue 3.11 Software</td><td>Carl Zeiss</td><td></td><td>Beeldverzameling en analyse software</td></tr><tr><td>Antilichamen</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 AffiniPure F(ab')? Fragment Goat Anti-Mouse IgG, Fc fragment specifiek</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc.</td><td>115-546-071</td><td>gebruikt 1:1.000 verdunning</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 AffiniPure F(ab')? Fragment Goat Anti-Rabbit IgG, Fc fragment specifiek</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc.</td><td>111-546-046</td><td>gebruikt 1:1.000 verdunning</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 647 AffiniPure F(ab')? Fragment Goat Anti-Human IgG, Fc&gamma; fragment specifiek</td><td>Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc.</td><td>109-606-170</td><td>

voorbereiding van meiotische chromosoomspreads van eicellen van muizen voor beoordeling van synapsis en recombinatie

Preparation of Meiotic Chromosome Spreads from Mouse Oocytes for Assessment of Synapsis and Recombination

Voorbereiding van meiotische chromosoomspreads van eicellen van muizen voor beoordeling van synapsis en recombinatie

Three critical and interdependent processes define meiotic prophase I: homologous chromosomes must pair together, a proteinaceous structure called the ...

preparation-meiotic-chromosome-spreads-from-mouse-oocytes-for

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Ontwikkelingsbiologie

Eicellen zijn gevoelig voor te wijten aan fouten in chromosoom segregatie aneuploïdie tijdens de meiotische rijping. Aneuploïde eieren kan leiden tot onvruchtbaarheid, miskramen of ontwikkelingsstoornissen, zoals het syndroom van Down. Hier beschrijven we methoden om materialen van keuze te introduceren in eicellen en methoden om meiotische rijping onderzoeken en te beoordelen ploïdie.

Eicel muis micro-injectie, rijping en ploïdie Assessment

Hier presenteren we een protocol specifieke siRNA-gemedieerde mRNA afbraak gevolgd door immunofluorescentie analyse meiotische spileenheid en organisatie evalueren muizen oöcyten. Dit protocol is geschikt voor in vitro depletie van transcripties en functionele beoordeling van verschillende spil en / of MTOC geassocieerde factoren in oöcyten.

Meiotische Spil Assessment in Muis Eicellen door siRNA-gemedieerde silencing

Meiose is het ontwikkelings proces waaraan gameten worden gevormd door een ronde van DNA-replicatie en twee opeenvolgende ronden van chromosoom segregatie. Zoogdieren meiose kan worden onderzocht met behulp van een techniek ter voorbereiding Meiotische chromosoom spreads. Hier tonen we een methode voor te bereiden oppervlak-spread kernen van muis spermatocyten.

Voorbereiding van Meiotische chromosoom verspreidt van muis spermatocyten

Oögenese bij zoogdieren is bekend dat zij vergissing-geneigd, met name als gevolg van chromosoom missegregation. Dit manuscript chromatine verspreid voorbereiding worden methoden beschreven voor muis profase, metafase I en II-geënsceneerde eicellen. Deze fundamentele technieken toestaan voor de studie van chromatine-gebonden eiwitten en chromosoom morfologie in zoogdieren oögenese.

Chromatine verspreid preparaten voor de analyse van muis oöcyt progressie van profase naar metafase II

Als de genetische varianten die zijn gekoppeld aan ziekten bij de mens begint te worden blootgelegd, wordt het steeds belangrijker systemen waarmee snel evalueren de biologische betekenis van deze geïdentificeerde varianten te ontwikkelen. Dit protocol wordt beschreven methoden voor de evaluatie van menselijke genfunctie tijdens vrouwelijke meiose ik met behulp van de muis eicellen.

Met behulp van de muis eicellen te beoordelen van menselijke genfunctie tijdens de meiose I

Nucleaire oppervlaktespreads zijn een onmisbaar hulpmiddel voor het bestuderen van chromosoomgebeurtenissen tijdens meiose. Hier demonstreren we een methode om meiotische chromosomen voor te bereiden en te visualiseren tijdens profase I van zebravissen spermatocyten.

Bereiding van Meiotic Chromosome Spreads van Zebrafish Spermatocyten

Fout in chromosoomsegregatie is een veel voorkomend kenmerk in eicellen. Daarom geeft het bestuderen van het controlepunt voor de spindelassemblage belangrijke aanwijzingen over de mechanismen die nodig zijn om gezonde eieren te produceren. Het huidige protocol beschrijft drie complementaire testen om de integriteit van het controlepunt van de spindelassemblage in muizenoöcyten te evalueren.

Evaluatie van de integriteit van het spindelassemblagecontrolepunt in muizenoöcyten

Dit protocol beschrijft een techniek om veranderingen in de maternale vaatstructuur tijdens zwangerschap bij muizen te beoordelen. Met behulp van stereologische methoden wordt de verandering van de deciduale spiraalvormige slagaders kwantitatief beoordeeld en worden de resultaten kwalitatief bevestigd door middel van immunohistochemie.

Beoordeling van de moeder Vasculaire Verbouwing tijdens de zwangerschap in de muis Baarmoeder

Hier presenteren we een protocol voor de karakterisering van muis antral eicellen gebaseerd op nucleolair organisatie.

Isolatie en karakterisering van de Muis Antral Eicellen Gebaseerd op Hergroepering van nucleoli chromatine Organization

Dit manuscript beschrijft een experimentele aanpak om paardocyten morfologisch en biochemisch te karakteriseren. Specifiek illustreert het onderhavige werk hoe u onrijpe en volwassen paardocyten verzamelt door middel van ultrageluidgeleide ovumopname (OPU) en hoe u chromosoom-segregatie, spindemorfologie, globale histonacetylering en mRNA-expressie kunt onderzoeken.

Analyse van Chromosoom Segregatie, Histon Acetylatie, En Spindel Morfologie In Paard Oocyten

Leer hoe u meiotische chromosoomspreads van muizeicellen voorbereidt voor analyse van synapsis en recombinatie. Deze methode ondersteunt onderzoek naar meiosedynamiek en genoomstabiliteit.

Voorbereiding van meiotische chromosoomspreads van eicellen van muizen voor beoordeling van synapsis en recombinatie

Meer video's verkennen