Name: In vitro Intraluminale gelinfusie: een geavanceerde benadering voor microscopische analyse van menselijke weerstandsslagaders (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-19T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 20 s
Description: Leer een geavanceerde methode voor het behouden van menselijke weerstandsslagaders via intraluminale gelinfusie. Dit protocol behoudt structurele en moleculaire integriteit voor cardiovasculair onderzoek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Intengan, H. D., Schiffrin, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+remodeling+in+hypertension%3A+Roles+of+apoptosis%2C+inflammation%2C+and+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Vascular remodeling in hypertension: Roles of apoptosis, inflammation, and fibrosis.</a> Hypertension. 38 (3 Pt 2), 581-587 (2001).</li>
<li>Mulvany, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+artery+remodelling+in+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Basic+Clin+Pharmacol+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Small artery remodelling in hypertension.</a> Basic Clin Pharmacol Toxicol. 110 (1), 49-55 (2012).</li>
<li>Petrie, J. R., Guzik, T. J., Touyz, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diabetes%2C+hypertension%2C+and+cardiovascular+disease%3A+Clinical+insights+and+vascular+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Can+J+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Diabetes, hypertension, and cardiovascular disease: Clinical insights and vascular mechanisms.</a> Can J Cardiol. 34 (5), 575-584 (2018).</li>
<li>Schiffrin, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+remodeling+in+hypertension%3A+Mechanisms+and+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Vascular remodeling in hypertension: Mechanisms and treatment.</a> Hypertension. 59 (2), 367-374 (2012).</li>
<li>Zieman, S. J., Melenovsky, V., Kass, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms%2C+pathophysiology%2C+and+therapy+of+arterial+stiffness%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Mechanisms, pathophysiology, and therapy of arterial stiffness.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 25 (5), 932-943 (2005).</li>
<li>Bell, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microstructure+and+mechanics+of+human+resistance+arteries%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Microstructure and mechanics of human resistance arteries.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 311 (6), H1560-H1568 (2016).</li>
<li>Intengan, H. D., Schiffrin, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+and+mechanical+properties+of+resistance+arteries+in+hypertension%3A+Role+of+adhesion+molecules+and+extracellular+matrix+determinants%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Structure and mechanical properties of resistance arteries in hypertension: Role of adhesion molecules and extracellular matrix determinants.</a> Hypertension. 36 (3), 312-318 (2000).</li>
<li>Rajendran, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+vascular+endothelium+and+human+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Biol+Sci%22%5BJournal%5D)">The vascular endothelium and human diseases.</a> Int J Biol Sci. 9 (10), 1057-1069 (2013).</li>
<li>Chistiakov, D. A., Orekhov, A. N., Bobryshev, Y. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+barrier+and+its+abnormalities+in+cardiovascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Physiol%22%5BJournal%5D)">Endothelial barrier and its abnormalities in cardiovascular disease.</a> Front Physiol. 6, 365(2015).</li>
<li>Gurina, T. S., Simms, L. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGurina%2C+TS+%22Histology%2C+Staining%22">Histology, Staining</a>. , Statpearls Publishing. Treasure Island, FL. (2025).</li>
<li>Hillman, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Limitations+of+clinical+and+biological+histology%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Hypotheses%22%5BJournal%5D)">Limitations of clinical and biological histology.</a> Med Hypotheses. 54 (4), 553-564 (2000).</li>
<li>Taylor, A. M., Bordoni, B. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aTaylor%2C+AM+%22Histology%2C+Blood+Vascular+System%22">Histology, Blood Vascular System</a>. , Statpearls Publishing. Treasure Island, FL. (2025).</li>
<li>Nolte, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+correlation+of+2D+hard-tissue+histology+with+3D+microCT+scans+through+3C+printed+phantoms%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Spatial correlation of 2D hard-tissue histology with 3D microCT scans through 3C printed phantoms.</a> Sci Rep. 13 (1), 18479(2023).</li>
<li>Taqi, S. A., Sami, S. A., Sami, L. B., Zaki, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+artifacts+in+histopathology%5BTitle%5D)+AND+%22J+Oral+Maxillofac+Pathol%22%5BJournal%5D)">A review of artifacts in histopathology.</a> J Oral Maxillofac Pathol. 22 (2), 279(2018).</li>
<li>Torii, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histopathologic+characterization+of+peripheral+arteries+in+subjects+with+abundant+risk+factors%3A+Correlating+imaging+with+pathology%5BTitle%5D)+AND+%22JACC+Cardiovasc+Imaging%22%5BJournal%5D)">Histopathologic characterization of peripheral arteries in subjects with abundant risk factors: Correlating imaging with pathology.</a> JACC Cardiovasc Imaging. 12 (8 Pt 1), 1501-1513 (2019).</li>
<li>Brooks, S. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sickle+trait+and+alpha+thalassemia+increase+nos-dependent+vasodilation+of+human+arteries+through+disruption+of+endothelial+hemoglobin-enos+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Sickle trait and alpha thalassemia increase nos-dependent vasodilation of human arteries through disruption of endothelial hemoglobin-enos interactions.</a> Circulation. 151 (1), 8-30 (2025).</li>
<li>Chatzizisis, Y. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+endothelial+shear+stress+in+the+natural+history+of+coronary+atherosclerosis+and+vascular+remodeling%3A+Molecular%2C+cellular%2C+and+vascular+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Role of endothelial shear stress in the natural history of coronary atherosclerosis and vascular remodeling: Molecular, cellular, and vascular behavior.</a> J Am Coll Cardiol. 49 (25), 2379-2393 (2007).</li>
<li>Li, S., Liu, S., Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+of+3D+printing+in+vascularized+organ+construction%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Bioprint%22%5BJournal%5D)">Advances of 3D printing in vascularized organ construction.</a> Int J Bioprint. 8 (3), 588(2022).</li>
<li>Rengier, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3D+printing+based+on+imaging+data%3A+Review+of+medical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Comput+Assist+Radiol+Surg%22%5BJournal%5D)">3D printing based on imaging data: Review of medical applications.</a> Int J Comput Assist Radiol Surg. 5 (4), 335-341 (2010).</li>
<li>Solanki, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+importance+of+three+dimensional+coronary+artery+reconstruction+accuracy+when+computing+virtual+fractional+flow+reserve+from+invasive+angiography%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">The importance of three dimensional coronary artery reconstruction accuracy when computing virtual fractional flow reserve from invasive angiography.</a> Sci Rep. 11 (1), 19694(2021).</li>
<li>Tucker, W. D., Arora, Y., Mahajan, K. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aTucker%2C+WD+%22Anatomy%2C+Blood+Vessels%22">Anatomy, Blood Vessels</a>. , Statpearls Publishing. Treasure Island, FL. (2025).</li>
<li>Choi, J., Lee, E. J., Jang, W. B., Kwon, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+biocompatible+3D-printed+artificial+blood+vessels+through+multidimensional+approaches%5BTitle%5D)+AND+%22J+Funct+Biomater%22%5BJournal%5D)">Development of biocompatible 3D-printed artificial blood vessels through multidimensional approaches.</a> J Funct Biomater. 14 (10), 497(2023).</li>
<li>De Graaf, M. N. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiplexed+fluidic+circuit+board+for+controlled+perfusion+of+3D+blood+vessels-on-a-chip%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Chip%22%5BJournal%5D)">Multiplexed fluidic circuit board for controlled perfusion of 3D blood vessels-on-a-chip.</a> Lab Chip. 23 (1), 168-181 (2022).</li>
<li>Lapierre-Landry, M., Liu, Y., Bayat, M., Wilson, D. L., Jenkins, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Digital+labeling+for+3D+histology%3A+Segmenting+blood+vessels+without+a+vascular+contrast+agent+using+deep+learning%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Opt+Express%22%5BJournal%5D)">Digital labeling for 3D histology: Segmenting blood vessels without a vascular contrast agent using deep learning.</a> Biomed Opt Express. 14 (6), 2416-2431 (2023).</li>
<li>Abdul Sisak, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+near-infrared+organic+fluorescent+probe+for+broad+applications+for+blood+vessel+imaging+by+high-throughput+screening+via+3D-blood+vessel+models%5BTitle%5D)+AND+%22Small+Methods%22%5BJournal%5D)">A near-infrared organic fluorescent probe for broad applications for blood vessel imaging by high-throughput screening via 3D-blood vessel models.</a> Small Methods. 5 (8), e2100338(2021).</li>
<li>Yu, T., Yang, Q., Peng, B., Gu, Z., Zhu, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascularized+organoid-on-a-chip%3A+Design%2C+imaging%2C+and+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Angiogenesis%22%5BJournal%5D)">Vascularized organoid-on-a-chip: Design, imaging, and analysis.</a> Angiogenesis. 27 (2), 147-172 (2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1% Focus Acid Alcohol</td><td>StatLab</td><td>&nbsp;SL89-1</td><td></td></tr><tr><td>10% NBS</td><td>Leica Biosystems</td><td>3800598</td><td></td></tr><tr><td>4K Microscopy HDMI Camera</td><td>Hitech Instruments, Inc.</td><td>HT-XP4K8MA</td><td></td></tr><tr><td>Antibody Diluent- Background Reducing</td><td>Dako</td><td>S3022</td><td></td></tr><tr><td>Automated Tissue Processor&nbsp;</td><td>Leica Biosystems</td><td>HistoCore PEGASUS/Cat# 14048858005</td><td></td></tr><tr><td>Bond Dewax Solution</td><td>Leica Biosystems</td><td>AR9222</td><td></td></tr><tr><td>Bond Epitope Retrieval Solution 1</td><td>Leica Biosystems</td><td>AR9961</td><td></td></tr><tr><td>Bond Epitope Retrieval Solution 2</td><td>Leica Biosystems</td><td>AR9640</td><td></td></tr><tr><td>Bond Polymer Refine Detection</td><td>Leica Biosystems</td><td>DS9800</td><td></td></tr><tr><td>Bond Polymer Refine Red Detection</td><td>Leica Biosystems</td><td>DS9390</td><td></td></tr><tr><td>Bond Wash Solution (10x)</td><td>Leica Biosystems</td><td>AR9590</td><td></td></tr><tr><td>Cannula Pack (glass), 80&ndash;100 &mu;m</td><td>DMT</td><td>Product Code: 300407</td><td></td></tr><tr><td>CD31</td><td>Abcam</td><td>ab28364</td><td></td></tr><tr><td>Dissection Dishes, Large (pyrex glass), 93 mm</td><td>Living Systems Instrumentation</td><td>SKU: DD-90</td><td></td></tr><tr><td>Dissection Dishes, Small</td><td>Living Systems Instrumentation</td><td>SKU: DD-50</td><td></td></tr><tr><td>Dissection Microscope</td><td>Hitech Instruments, Inc.</td><td>ZEISS SteREO Discovery.V8&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5 Forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>Item No. 11295-10</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5SF Forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>Item No. 11252-00</td><td></td></tr><tr><td>EcoMount</td><td>BioCare Medical</td><td>EM897L</td><td></td></tr><tr><td>Eosin</td><td>IHC World</td><td>IW-3100B</td><td></td></tr><tr><td>Hematoxylin</td><td>BioCare Medical</td><td>Cathe-MM</td><td></td></tr><tr><td>Iamging camera</td><td>Olyumpus</td><td>DP28</td><td></td></tr><tr><td>Imaging Microscope</td><td>Olyumpus</td><td>BX51</td><td></td></tr><tr><td>Krebs Henseleit Buffer (with 2 mM Calcium Chloride)</td><td>Boston BioProducts, Inc.</td><td>SKU: C-10625N-200mL</td><td></td></tr><tr><td>Krebs-Henseleit Buffer (without Calcium)</td><td>Boston BioProducts, Inc.</td><td>SKU: C-9906W-200mL</td><td></td></tr><tr><td>Mounting Media</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>4111</td><td></td></tr><tr><td>Myograph chamber and Unit</td><td>DMT</td><td>202/204CM</td><td></td></tr><tr><td>PBS (phosphate buffered saline)</td><td>Thermofisher Scientific</td><td>10010023</td><td></td></tr><tr><td>PPIB</td><td>&nbsp;ACDBio</td><td>313908</td><td></td></tr><tr><td>RNAscope 2.5 LS Reagent Kit-RED</td><td>ACDBio</td><td>322150</td><td></td></tr><tr><td>Stainer</td><td>Leica</td><td>Leica Bond RX automated system</td><td></td></tr><tr><td>Stainless steel dissection pins</td><td>Living Systems Instrumentation</td><td>SKU: PIN-0.1MM | PIN-0.2MM | PIN-#3 | PIN-VP-1</td><td></td></tr><tr><td>Surgipath Paraplast</td><td>Leica Biosystems</td><td>39601006</td><td></td></tr><tr><td>Tissue Guard Gel</td><td>StatLab</td><td>&nbsp;TissueGuard/SKU: TG12</td><td></td></tr><tr><td>Vannas Spring Scissors - 2 mm Cutting Edge</td><td>Fine Science Tools</td><td>Item No. 15000-03</td><td></td></tr><tr><td>Vannas Spring Scissors - 2.5 mm Cutting Edge</td><td>Fine Science Tools</td><td>Item No. 15000-08</td><td></td></tr><tr><td>Vannas Spring Scissors - 3 mm Cutting Edge</td><td>Fine Science Tools</td><td>Item No. 15000-00</td><td></td></tr><tr><td>&alpha;-SMA</td><td>Abcam</td><td>ab5694</td><td></td></tr></tbody></table>

in vitro intraluminale gelinfusie: een geavanceerde benadering voor microscopische analyse van menselijke weerstandsslagaders

In Vitro Intraluminal Gel Infusion: An Advanced Approach for Microscopic Analysis of Human Resistance Arteries

In vitro Intraluminale gelinfusie: een geavanceerde benadering voor microscopische analyse van menselijke weerstandsslagaders

Resistance arteries, which include small arteries and arterioles, play essential roles in regulating blood pressure and tissue perfusion. Dysfunction in ...

in-vitro-intraluminal-gel-infusion-an-advanced-approach-for

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

De Ex vivo Geïsoleerd Skeletal microvaatjes Voorbereiding Voor het onderzoek van vasculaire reactiviteit

We presenteren een voorbereiding voor het visualiseren en manipuleren van calcium signalering in de moedertaal, intact microvasculaire endotheel. Endotheliale buizen vers geïsoleerd uit muis weerstand slagaders die skeletspieren behouden in vivo morfologie en dynamische signalisatie binnen en tussen naburige cellen. Endotheliale buizen kunnen worden bereid uit microvaten van andere weefsels en organen.

Isolatie van microvasculaire endotheelcellen Buizen van Mouse Resistance Arteries

Hypoxische pulmonale vasoconstrictie (HPV) is een belangrijk fysiologisch fenomeen waarbij bij alveolaire hypoxie longperfusie wordt afgestemd op beademing. Het belangrijkste vasculaire segment dat bijdraagt aan HPV is de intra-acinaire slagader. Hier beschrijven we ons protocol voor de analyse van HPV van muriene longvaten met diameters van 20-100 μm.

Videomorfometrische analyse van hypoxische pulmonale vasoconstrictie van intrapulmonale slagaders met behulp van murineprecisie gesneden longschijfjes

We presenteren een protocol voor humane endotheliale pericyte-interacties in muizen te bestuderen onder toepassing van een variatie van de matrix gel plug angiogenese assay.

In vivo studie van humane endotheliale-pericyte Interaction Met behulp van de Matrix Gel Plug Assay in Mouse

Protocollen voor het bestuderen van de embryonale en perinatale lymfkliertest aorta met behulp van in vivo klonale analyse en lot toewijzing, aorta explantaten en geïsoleerde gladde spier cellen zijn gedetailleerd hier. Deze uiteenlopende benaderingen vergemakkelijken het onderzoek van de morfogenese van de embryonale en perinatale aorta in normale ontwikkeling en de pathogenese in ziekte.

Met behulp van In Vivo en weefsel en cel Explant benaderingen te bestuderen van de voedselproductie en de pathogenese van de embryonale en perinatale Aorta

Dit manuscript wordt beschreven in vitro videomicroscopie protocollen voor de beoordeling van de vasculaire functie in rat weerstand van de cerebrale bloedvaten. Het manuscript wordt ook beschreven technieken voor het evalueren van microvessel dichtheid met fluorescently geëtiketteerde lectine en weefsel perfusie met behulp van Laser Doppler flowmetrie.

Evaluatie van vasculaire controlemechanismen met behulp van videomicroscopie van geïsoleerde resistentie slagaders van ratten

Monocyten zijn belangrijke bemiddelaars/mediators van arteriogenesis in het kader van perifere arteriële ziekte. Met behulp van een kelder membraan-achtige matrix en intravital microscopie, onderzoekt dit protocol monocyt homing en tumor-gerelateerde angiogenese na monocyt injectie in de femorale slagader afbinding lymfkliertest model.

Intravital microscopie van monocyt Homing en Tumor-gerelateerde angiogenese in een lymfkliertest Model van perifere arteriële ziekte

We beschrijven gelijktijdige mechanische testen en 3D-imaging van de arteriële muur van geïsoleerd levende menselijke weerstand slagaders, en Fiji en Ilastik analyses van de afbeelding voor de kwantificering van elastine en collageen ruimtelijke organisatie en volume dichtheden. We bespreken het gebruik van deze gegevens in wiskundige modellen van arteriële muur mechanica.

Beoordeling van collageen en elastine druk-afhankelijke Microarchitectures in Live, menselijke weerstand slagaders door Label-vrije fluorescentie microscopie

Hier wordt een protocol gepresenteerd om de coronaire microcirculatie in levend murinehartweefsel te bestuderen door ex vivo monitoring van de arteriële perfusiedruk en -stroom die de druk handhaaft, evenals vasculaire boomcomponenten, waaronder de capillaire bedden en pericyten, omdat de septale slagader wordt ingeblikt en onder druk staat.

Dynamische meting en beeldvorming van haarvaten, slagaders en pericyten in muishart

Intensieve voorbereiding van intacte cerebrale endotheelbuizen van muizen uit cerebrale parenchymale arteriolen wordt geïllustreerd voor het bestuderen van cerebrale bloedstroomregulatie. Verder demonstreren we de experimentele sterke punten van dit endotheelstudiemodel voor fluorescentiebeeldvorming en elektrofysiologische meting van belangrijke cellulaire signaalroutes, inclusief veranderingen in intracellulaire [Ca2 +] en membraanpotentiaal.

Isolatie en functionele analyse van arteriolar endotheel van muishersenparenchym

In vivo cine intravasculaire echografiebeelden tonen de coronaire dwarsdoorsnedebeweging die overeenkomt met verschillende drukbelastingsomstandigheden. Op basis van een eindig-elementenmodel werd een iteratief schema gebruikt om de patiëntspecifieke mechanische eigenschappen van kransslagaders in vivo te bepalen door de kransslagader te matchen met het rekenmodel en medische beelden.

Intravasculaire echografie op beeldvorming gebaseerde eindige-elementenmodelleringsbenadering voor het kwantificeren van in vivo mechanische eigenschappen van menselijke kransslagader 

Leer een geavanceerde methode voor het behouden van menselijke weerstandsslagaders via intraluminale gelinfusie. Dit protocol behoudt structurele en moleculaire integriteit voor cardiovasculair onderzoek.

In vitro Intraluminale gelinfusie: een geavanceerde benadering voor microscopische analyse van menselijke weerstandsslagaders

Meer video's verkennen