Name: Evaluatie van het effect van SASP-factoren op de proliferatie van kankercellen met behulp van een vergelijkende analyse van drie verschillende methodologieën (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-09-19T14:20:00.000+00:00
Duration: 8 min 57 s
Description: Ontdek hoe SASP-factoren de proliferatie van HeLa-kankercellen beïnvloeden met drie in vitro-modellen en real-time monitoring. Deze methode onthult dynamische paracriene effecten.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Su, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell-cell+communication%3A+new+insights+and+clinical+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Signal+Transduct+Target+Ther%22%5BJournal%5D)">Cell-cell communication: new insights and clinical implications.</a> Signal Transduct Target Ther. 9 (1), 196(2024).</li>
<li>Hayflick, L., Moorhead, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+serial+cultivation+of+human+diploid+cell+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Cell+Res%22%5BJournal%5D)">The serial cultivation of human diploid cell strains.</a> Exp Cell Res. 25, 585-621 (1961).</li>
<li>Ewald, J. A., Desotelle, J. A., Wilding, G., Jarrard, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapy-induced+senescence+in+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22J+Natl+Cancer+Inst%22%5BJournal%5D)">Therapy-induced senescence in cancer.</a> J Natl Cancer Inst. 102 (20), 1536-1546 (2010).</li>
<li>Wang, B., Kohli, J., Demaria, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Senescent+Cells+in+Cancer+Therapy%3A+Friends+or+Foes%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Cancer%22%5BJournal%5D)">Senescent Cells in Cancer Therapy: Friends or Foes.</a> Trends Cancer. 6 (10), 838-857 (2020).</li>
<li>Wang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Common+Hallmarks+and+Interconnected+Pathways+of+Aging%2C+Circadian+Rhythms%2C+and+Cancer%3A+Implications+for+Therapeutic+Strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Research+%28Wash+D+C%29%22%5BJournal%5D)">The Common Hallmarks and Interconnected Pathways of Aging, Circadian Rhythms, and Cancer: Implications for Therapeutic Strategies.</a> Research (Wash D C). 8, 0612(2025).</li>
<li>Simay, Y. D., Ozdemir, A., Ibisoglu, B., Ark, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+connection+between+the+cardiac+glycoside-induced+senescent+cell+morphology+and+Rho%2FRho+kinase+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Cytoskeleton+%28Hoboken%29%22%5BJournal%5D)">The connection between the cardiac glycoside-induced senescent cell morphology and Rho/Rho kinase pathway.</a> Cytoskeleton (Hoboken). 75 (11), 461-471 (2018).</li>
<li>Ozdemir, A., Simay Demir, Y. D., Yesilyurt, Z. E., Ark, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Senescent+cells+and+SASP+in+cancer+microenvironment%3A+New+approaches+in+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Protein+Chem+Struct+Biol%22%5BJournal%5D)">Senescent cells and SASP in cancer microenvironment: New approaches in cancer therapy.</a> Adv Protein Chem Struct Biol. 133, 115-158 (2023).</li>
<li>Narita, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rb-mediated+heterochromatin+formation+and+silencing+of+E2F+target+genes+during+cellular+senescence%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Rb-mediated heterochromatin formation and silencing of E2F target genes during cellular senescence.</a> Cell. 113 (6), 703-716 (2003).</li>
<li>Heckenbach, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nuclear+morphology+is+a+deep+learning+biomarker+of+cellular+senescence%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Aging%22%5BJournal%5D)">Nuclear morphology is a deep learning biomarker of cellular senescence.</a> Nat Aging. 2 (8), 742-755 (2022).</li>
<li>Coppe, J. P., Desprez, P. Y., Krtolica, A., Campisi, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+senescence-associated+secretory+phenotype%3A+the+dark+side+of+tumor+suppression%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Pathol%22%5BJournal%5D)">The senescence-associated secretory phenotype: the dark side of tumor suppression.</a> Annu Rev Pathol. 5, 99-118 (2010).</li>
<li>Kuilman, T., Peeper, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Senescence-messaging+secretome%3A+SMS-ing+cellular+stress%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">Senescence-messaging secretome: SMS-ing cellular stress.</a> Nat Rev Cancer. 9 (2), 81-94 (2009).</li>
<li>Simay Demir, Y. D., Ozdemir, A., Sucularli, C., Benhur, E., Ark, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+implication+of+ROCK+2+as+a+potential+senotherapeutic+target+via+the+suppression+of+the+harmful+effects+of+the+SASP%3A+Do+senescent+cancer+cells+really+engulf+the+other+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Signal%22%5BJournal%5D)">The implication of ROCK 2 as a potential senotherapeutic target via the suppression of the harmful effects of the SASP: Do senescent cancer cells really engulf the other cells.</a> Cell Signal. 84, 110007(2021).</li>
<li>Demaria, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+Senescence+Promotes+Adverse+Effects+of+Chemotherapy+and+Cancer+Relapse%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discov%22%5BJournal%5D)">Cellular Senescence Promotes Adverse Effects of Chemotherapy and Cancer Relapse.</a> Cancer Discov. 7 (2), 165-176 (2017).</li>
<li>Bogdanowicz, D. R., Lu, H. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multifunction+co-culture+model+for+evaluating+cell-cell+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Multifunction co-culture model for evaluating cell-cell interactions.</a> Methods Mol Biol. 1202, 29-36 (2014).</li>
<li>Ozdemir, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+glycoside-induced+cell+death+and+Rho%2FRho+kinase+pathway%3A+Implication+of+different+regulation+in+cancer+cell+lines%5BTitle%5D)+AND+%22Steroids%22%5BJournal%5D)">Cardiac glycoside-induced cell death and Rho/Rho kinase pathway: Implication of different regulation in cancer cell lines.</a> Steroids. 109, 29-43 (2016).</li>
<li>zdemir, A., Ibisoglu, B., Simay, Y. D., Polat, B., Ark, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ouabain+induces+Rho-dependent+rock+activation+and+membrane+blebbing+in+cultured+endothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Ouabain induces Rho-dependent rock activation and membrane blebbing in cultured endothelial cells.</a> Mol Biol. 49 (1), 138-143 (2015).</li>
<li>Lee, B. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Senescence-associated+beta-galactosidase+is+lysosomal+beta-galactosidase%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+Cell%22%5BJournal%5D)">Senescence-associated beta-galactosidase is lysosomal beta-galactosidase.</a> Aging Cell. 5 (2), 187-195 (2006).</li>
<li>Simay Demir, Y. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antimigratory+effect+of+pyrazole+derivatives+through+the+induction+of+STAT1+phosphorylation+in+A549+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharm+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Antimigratory effect of pyrazole derivatives through the induction of STAT1 phosphorylation in A549 cancer cells.</a> J Pharm Pharmacol. 73 (6), 808-815 (2021).</li>
<li>Ariffin, N. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+CellProfiler+pipeline+analysis+of+cell+migration%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Histochem%22%5BJournal%5D)">The CellProfiler pipeline analysis of cell migration.</a> Acta Histochem. 125 (7), 152074(2023).</li>
<li>Li, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decoding+the+crossroads+of+aging+and+cancer+through+single-cell+analysis%3A+Implications+for+precision+oncology%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Cancer%22%5BJournal%5D)">Decoding the crossroads of aging and cancer through single-cell analysis: Implications for precision oncology.</a> Int J Cancer. 157 (5), 807-818 (2025).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>&micro;-Slide 8 Well hoog</td><td><img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/68883/68883eq1.jpg" style="margin: auto;"/>bidi</td><td>80806</td><td></td></tr><tr><td>0,05 % Trypsin-EDTA (1X)</td><td>Gibco</td><td>25300-054</td><td></td></tr><tr><td>Amicon Ultra centrifugal filter units (Ultracel-3K)</td><td>Millipore</td><td>UFC200324</td><td></td></tr><tr><td>CO2 incubator (37&deg;C, 5% CO2)</td><td>Sanyo</td><td></td><td></td></tr><tr><td>CO2-Controller 2000&nbsp;</td><td>Pecon&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Gibco</td><td>41966-029</td><td></td></tr><tr><td>Doxorubicin</td><td>Tocris</td><td>2252</td><td></td></tr><tr><td>E-plate INSERT 16&nbsp;</td><td>ACEA Biosciences/Agilent</td><td>6 465 382 001</td><td></td></tr><tr><td>E-plate VIEW 16&nbsp;</td><td>ACEA Biosciences/Agilent</td><td>300 601 140</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>Gibco</td><td>A5256701</td><td></td></tr><tr><td>HeLa Cells</td><td><img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/68883/68883eq2.jpg" style="margin: auto;"/>AP Institute, Ankara, Turkije</td><td>H&Uuml;K&Uuml;K No: 90061901&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Leica DMi8 invertede fluorescentiemicroscoop&nbsp;</td><td>Leica</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fosfaat-gebufferde zoutoplossing (PBS)</td><td>Gibco</td><td>70011-044</td><td></td></tr><tr><td>Senescentie-geassocieerde &beta;-galactosidase (SA-&beta;-gal) kleuringskit&nbsp;</td><td>Cell Signalling</td><td>9860S</td><td></td></tr><tr><td>Stage-top incubatiesysteem</td><td>Pecon&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Temp-controller 2002-2&nbsp;</td><td>Pecon&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Trypan Blauw Kleurmiddel</td><td>Sigma</td><td>T8154</td><td></td></tr><tr><td>xCELLigence RTCA DP systeem&nbsp;</td><td>ACEA Biosciences/Agilent</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

evaluatie van het effect van sasp-factoren op de proliferatie van kankercellen met behulp van een vergelijkende analyse van drie verschillende methodologieën

Evaluating the Effect of SASP Factors on the Proliferation of Cancer Cells Using a Comparative Analysis of Three Distinct Methodologies

Evaluatie van het effect van SASP-factoren op de proliferatie van kankercellen met behulp van een vergelijkende analyse van drie verschillende methodologieën

Chemotherapy-induced senescent cancer cells also secrete various factors, called senescence-associated secretory phenotype, to regulate their ...

evaluating-effect-sasp-factors-on-proliferation-cancer-cells-using

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Kankeronderzoek

Hier wordt real-time monitoring van het metabolisme van tumorcellen, gecombineerd met een in vivo kippenembryo chorio-allantoïsche membraan (CAM) model van metastase, gebruikt om nieuwe anti-kanker doelen/middelen te evalueren op hun vermogen om tumorcellen te sensitiviseren voor DNA-beschadigende chemotherapeutica.

Het evalueren van de effectiviteit van Cancer Drug Overgevoeligheid<em&gt; In Vitro</em&gt; En<em&gt; In Vivo</em

Invasie van omliggende normale weefsels is een typerend kenmerk van kwaadaardige tumoren. We bieden hier een eenvoudige, semi-geautomatiseerde microplaattest van invasie in een natuurlijke 3D biomatrix die met een aantal modellen van gevorderde menselijke kankers is geëxemplifeerd.

Driedimensionale (3D) Tumor Spheroid Invasion Assay

Deze methode evalueert de invasie van kankercellen uit sferoïden in een omringende 3D-matrix.  Sferoïden worden gegenereerd via de hanging drop-kweekmethode en vervolgens ingebed in een matrix bestaande uit basement membraanmaterialen en type I collageen.  Invasie uit de sferoïden wordt vervolgens gemonitord.

Een Cancer Cell Sferoïde Assay om Invasion beoordelen in een 3D-instelling

Dit protocol beschrijft het gebruik van drie verschillende methoden voor het analyseren van celproliferatie in borstkankercellijnen. Dit omvat het gebruik van conventionele celtelling, op luminescentie gebaseerde celviabiliteit en celtelling door het gebruik van een celimager. Elk biedt voordelen voor de reproduceerbare meting van celproliferatie.

Vergelijking van de drie verschillende methoden voor het bepalen van de cel proliferatie in borstkanker cellijnen

Het identificeren van nieuwe geneesmiddeldoelen die overgaan van preklinisch onderzoek naar menselijke proeven is een wetenschappelijke prioriteit. Daartoe beschrijven we hier een functionele genoombenadering voor het onderzoeken van de impact van gendepletie op kankerstamlijnsferoïden, die menselijke kankers beter modelleren in vivo.

Gebruik makend van Functional Genomics Screening om potentieel nieuwe drug targets in Cancer Cell Sferoïde Cultures Identificeer

Hier, wordt een methode beschreven voor de bereiding van 3-dimensionale (3D) sferoïde co cultuur van pancreatic kankercellen en fibroblasten, gevolgd door meting van metabolische functies met behulp van een extracellulaire flux-analyzer.

Voorbereiding en metabole kwantitatieve analyse van 3-dimensionale sferoïde co culturen van Pancreatic kankercellen en fibroblasten

We beschrijven de evolutie van een sferoïde gebaseerde, driedimensionale in vitro model waarmee we kunnen testen van de huidige standaard voor experimentele therapie regimes voor hoofd en nek plaveiselcelcarcinoom op cellijnen, die gericht zijn op het evalueren van therapie gevoeligheid en weerstand op primaire cellen van menselijke specimens in de toekomst.

Therapie testen in een sferoïde gebaseerde 3D cel cultuur Model voor hoofd en nek plaveiselcelcarcinoom

Over een breed scala van indicaties van de ziekte, meer fysiologisch relevante modellen worden ontwikkeld en uitgevoerd in drug discovery-programma's. Het nieuwe modelsysteem hier beschreven demonstreert hoe driedimensionale tumor spheroïden kunnen worden gekweekt en vertoond in een high-throughput 1536-well plaat-gebaseerd systeem om te zoeken naar nieuwe oncologie drugs.

Generatie van High-Throughput driedimensionale Tumor spheroïden voor Drug Screening

Hier presenteren we een aantal eenvoudige methoden voor de evaluatie van de levensvatbaarheid en de dood in 3D kanker cel sferoïden, die de fysisch-chemische gradiënten van in vivo tumoren veel beter dan de 2D-cultuur na te bootsen. Het sferoïde model maakt het dus mogelijk om de effectiviteit van kanker medicijnen te evalueren met een verbeterde vertaling naar in vivo omstandigheden.

Beoordeling van de levensvatbaarheid van cellen en de dood in 3D sferoïde culturen van kankercellen

Dit protocol presenteert een nieuw, robuust en reproduceerbaar kweeksysteem om driedimensionale sferoïden uit Caco2 colon adenocarcinoomcellen te genereren en te laten groeien. De resultaten vormen de eerste proof-of-concept voor de geschiktheid van deze aanpak om kankerstamcelbiologie te bestuderen, inclusief de respons op chemotherapie.

Een driedimensionaal model van sferoïden om stamcellen van darmkanker te bestuderen

Het huidige protocol beschrijft het genereren van 3D-tumorcultuurmodellen van primaire kankercellen en het evalueren van hun gevoeligheid voor geneesmiddelen met behulp van cel-levensvatbaarheidstests en microscopische onderzoeken.

Het vaststellen van 3-dimensionale sferoïden uit van de patiënt afgeleide tumormonsters en het evalueren van hun gevoeligheid voor geneesmiddelen

Ontdek hoe SASP-factoren de proliferatie van HeLa-kankercellen beïnvloeden met drie in vitro-modellen en real-time monitoring. Deze methode onthult dynamische paracriene effecten.

Evaluatie van het effect van SASP-factoren op de proliferatie van kankercellen met behulp van een vergelijkende analyse van drie verschillende methodologieën (Video) | JoVE Journal

Evaluatie van het effect van SASP-factoren op de proliferatie van kankercellen met behulp van een vergelijkende analyse van drie verschillende methodologieën

Meer video's verkennen