Name: Dissectie van Zebravis craniofaciale weefsels bij kleuring met Alcian Blue (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-09-12T13:50:00.000+00:00
Duration: 5 min 57 s
Description: Leer een eenvoudige methode voor het kleuren en dissectie van craniofaciale kraakbeenderen in vijf dagen oude zebravislarven met Alcian Blue. Dit protocol maakt gedetailleerde karakterisering van verhemeltevorm mogelijk.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Simões-Costa, M., Bronner, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishing+neural+crest+identity%3A+a+gene+regulatory+recipe%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Establishing neural crest identity: a gene regulatory recipe.</a> Development. 142 (2), 242-257 (2015).</li>
<li>Rocha, M., Singh, N., Ahsan, K., Beiriger, A., Prince, V. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+crest+development%3A+insights+from+the+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Dyn%22%5BJournal%5D)">Neural crest development: insights from the zebrafish.</a> Dev Dyn. 249 (1), 88-111 (2020).</li>
<li>Hammond, N. L., Dixon, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Revisiting+the+embryogenesis+of+lip+and+palate+development%5BTitle%5D)+AND+%22Oral+Dis%22%5BJournal%5D)">Revisiting the embryogenesis of lip and palate development.</a> Oral Dis. 28 (5), 1306-1326 (2022).</li>
<li>Mork, L., Crump, G. Zebrafish craniofacial development: a window into early patterning. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMork%2C+L+%22Craniofacial+development%22">Craniofacial development</a>. Yang, C. , Academic Press. 235-269 (2015).</li>
<li>Swartz, M. E., SheehanRooney, K., Dixon, M. J., Eberhart, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Examination+of+a+palatogenic+gene+program+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Dyn%22%5BJournal%5D)">Examination of a palatogenic gene program in zebrafish.</a> Dev Dyn. 240 (9), 2204-2220 (2011).</li>
<li>Selleri, L., Rijli, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shaping+faces%3A+genetic+and+epigenetic+control+of+craniofacial+morphogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Genet%22%5BJournal%5D)">Shaping faces: genetic and epigenetic control of craniofacial morphogenesis.</a> Nat Rev Genet. 24 (9), 610-626 (2023).</li>
<li>Beaty, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+for+geneenvironment+interaction+in+a+genome+wide+study+of+nonsyndromic+cleft+palate%5BTitle%5D)+AND+%22Genet+Epidemiol%22%5BJournal%5D)">Evidence for geneenvironment interaction in a genome wide study of nonsyndromic cleft palate.</a> Genet Epidemiol. 35 (6), 469-478 (2011).</li>
<li>Dixon, M. J., Marazita, M. L., Beaty, T. H., Murray, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cleft+lip+and+palate%3A+understanding+genetic+and+environmental+influences%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Genet%22%5BJournal%5D)">Cleft lip and palate: understanding genetic and environmental influences.</a> Nat Rev Genet. 12 (3), 167-178 (2011).</li>
<li>Reynolds, K., Kumari, P., Sepulveda Rincon, L., Gu, R., Ji, Y., Kumar, S., Zhou, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wnt+signaling+in+orofacial+clefts%3A+crosstalk%2C+pathogenesis+and+models%5BTitle%5D)+AND+%22Dis+Model+Mech%22%5BJournal%5D)">Wnt signaling in orofacial clefts: crosstalk, pathogenesis and models.</a> Dis Model Mech. 12 (2), dmm037051(2019).</li>
<li>Raterman, S. T., Metz, J. R., Wagener, F. A. D. T. G., Von den Hoff, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+models+of+craniofacial+malformations%3A+interactions+of+environmental+factors%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Zebrafish models of craniofacial malformations: interactions of environmental factors.</a> Front Cell Dev Biol. 8, 600926(2020).</li>
<li>Walker, M., Kimmel, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+twocolor+acidfree+cartilage+and+bone+stain+for+zebrafish+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnic+Histochemistry%22%5BJournal%5D)">A twocolor acidfree cartilage and bone stain for zebrafish larvae.</a> Biotechnic Histochemistry. 82 (1), 23-28 (2007).</li>
<li>Eberhart, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MicroRNA+Mirn140+modulates+Pdgf+signaling+during+palatogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Genet%22%5BJournal%5D)">MicroRNA Mirn140 modulates Pdgf signaling during palatogenesis.</a> Nat Genet. 40 (3), 290-298 (2008).</li>
<li>Melvin, V. S., Feng, W., HernandezLagunas, L., Artinger, K. B., Williams, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+morpholinobased+screen+to+identify+novel+genes+involved+in+craniofacial+morphogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Dyn%22%5BJournal%5D)">A morpholinobased screen to identify novel genes involved in craniofacial morphogenesis.</a> Dev Dyn. 242 (7), 817-831 (2013).</li>
<li>Spoorendonk, K. M., Hammond, C. L., Huitema, L. F. A., Vanoevelen, J., SchulteMerker, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+as+a+unique+model+system+in+bone+research%3A+the+power+of+genetics+and+in+vivo+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Ichthyol%22%5BJournal%5D)">Zebrafish as a unique model system in bone research: the power of genetics and in vivo imaging.</a> J Appl Ichthyol. 26, 219-224 (2010).</li>
<li>Farmer, D. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comprehensive+series+of+Irx+cluster+mutants+reveals+diverse+roles+in+facial+cartilage+development%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">A comprehensive series of Irx cluster mutants reveals diverse roles in facial cartilage development.</a> Development. 148 (16), dev197244(2021).</li>
<li>Rochard, L., Monica, S. D., Ling, I. T. C., Kong, Y., Roberson, S., Harland, R., Halpern, M., Liao, E. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Roles+of+Wnt+pathway+genes+wls%2C+wnt9a%2C+wnt5b%2C+frzb+and+gpc4+in+regulating+convergentextension+during+palate+morphogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Roles of Wnt pathway genes wls, wnt9a, wnt5b, frzb and gpc4 in regulating convergentextension during palate morphogenesis.</a> Development. 143 (14), 2541-2547 (2016).</li>
<li>Liu, S., Narumi, R., Ikeda, N., Morita, O., Tasaki, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemicalinduced+craniofacial+anomalies+caused+by+disruption+of+neural+crest+cell+development+in+a+zebrafish+model%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Dyn%22%5BJournal%5D)">Chemicalinduced craniofacial anomalies caused by disruption of neural crest cell development in a zebrafish model.</a> Dev Dyn. 249 (7), 794-815 (2020).</li>
<li>Zinck, N., FranzOdendaal, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accurate+wholemount+bone+and+cartilage+staining+requires+acidfree+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Anat+Rec%22%5BJournal%5D)">Accurate wholemount bone and cartilage staining requires acidfree conditions.</a> Anat Rec. 304 (5), 958-960 (2021).</li>
<li>Stenzel, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+and+redundant+roles+for+zebrafish+her+genes+during+mineralization+and+craniofacial+patterning%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Distinct and redundant roles for zebrafish her genes during mineralization and craniofacial patterning.</a> Front Endocrinol. 13, 1033843(2022).</li>
<li>Tomasiewicz, H. G., Hesselbach, R., Carvan, M. J., Goldberg, B., Berg, C. A., Petering, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+as+a+model+system+for+environmental+health+studies+in+the+grad+classroom%5BTitle%5D)+AND+%22Zebrafish%22%5BJournal%5D)">Zebrafish as a model system for environmental health studies in the grad classroom.</a> Zebrafish. 11 (4), 384-395 (2014).</li>
<li>Cubbage, C. C., Mabee, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+the+cranium+and+paired+fins+in+the+zebrafish+Danio+rerio+%28Ostariophysi%2C+Cyprinidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Morphol%22%5BJournal%5D)">Development of the cranium and paired fins in the zebrafish Danio rerio (Ostariophysi, Cyprinidae).</a> J Morphol. 229 (2), 121-160 (1996).</li>
<li>Schindelin, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fiji%3A+an+opensource+platform+for+biologicalimage+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Fiji: an opensource platform for biologicalimage analysis.</a> Nat Methods. 9 (7), 676-682 (2012).</li>
<li>Tuckett, F., MorrissKay, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alcian+Blue+staining+of+glycosaminoglycans+in+embryonic+material%3A+effect+of+different+fixatives%5BTitle%5D)+AND+%22Histochem+J%22%5BJournal%5D)">Alcian Blue staining of glycosaminoglycans in embryonic material: effect of different fixatives.</a> Histochem J. 20 (3), 174-182 (1988).</li>
<li>Dougherty, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+requirements+for+wnt9a+and+irf6+in+extension+and+integration+mechanisms+during+zebrafish+palate+morphogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Distinct requirements for wnt9a and irf6 in extension and integration mechanisms during zebrafish palate morphogenesis.</a> Development. 140 (1), 76-81 (2013).</li>
<li>Goodwin, A. F., et al. From bench to bedside and back: improving diagnosis and treatment of craniofacial malformations utilizing animal models. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGoodwin%2C+AF+%22Craniofacial+development%22">Craniofacial development</a>. Yang, C. , Academic Press. 459-492 (2015).</li>
<li>Avdesh, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regular+care+and+maintenance+of+a+zebrafish+%28Danio+rerio%29+laboratory%3A+an+introduction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Regular care and maintenance of a zebrafish (Danio rerio) laboratory: an introduction.</a> J Vis Exp. (69), e4196(2012).</li>
<li>Ding, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+alizarin+Red+staining+to+detect+chemically+induced+bone+loss+in+zebrafish+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Using alizarin Red staining to detect chemically induced bone loss in zebrafish larvae.</a> J Vis Exp. (178), e63251(2021).</li>
<li>Klingenberg, C. P., Barluenga, M., Meyer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shape+analysis+of+symmetric+structures%3A+quantifying+variation+among+individuals+and+asymmetry%5BTitle%5D)+AND+%22Evolution%22%5BJournal%5D)">Shape analysis of symmetric structures: quantifying variation among individuals and asymmetry.</a> Evolution. 56 (10), 1909-1920 (2002).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Agarose</td><td>Lonza bioscience</td><td>50004</td><td>Voor het coaten van petrischalen</td></tr><tr><td>Alcian blue 8G&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A3157</td><td>Voor het kleuren van kraakbeen</td></tr><tr><td>Calcium Chloride dihydrate</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>12022</td><td>Voor het maken van buffers</td></tr><tr><td>Camera</td><td>Olympus</td><td>DP28</td><td>Voor het verwerven van beelden</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Roche Life Sciences</td><td>10236276001</td><td>Voor het labelen van kernen</td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>Honeywell</td><td>32221</td><td>Oplosmiddel voor alcian blue kleurstof</td></tr><tr><td>FIJI</td><td></td><td></td><td>Versie: ImageJ 1.54f</td></tr><tr><td>Forceps</td><td>Dumont</td><td>Dumont</td><td>Voor het uitvoeren van dissecties</td></tr><tr><td>Glycerol</td><td>MP biomedicals</td><td>193996</td><td>Voor het maken van wasbeurten en het monteren van monsters&nbsp;</td></tr><tr><td>Hydrogen peroxide</td><td>MP biomedicals</td><td>194057</td><td>Voor het maken van bleekoplossing</td></tr><tr><td>Magnesium chloride hexahydrate</td><td>SARD Biosciences</td><td>SBRC0217</td><td>Voor het maken van buffers</td></tr><tr><td>Magnesium sulfate heptahydrate</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M2773</td><td>Voor het maken van buffers</td></tr><tr><td>MS-222 (Tricaine)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A5040</td><td>Voor het verdoven van larven</td></tr><tr><td>Potassium Chloride</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P9541</td><td>Voor het maken van buffers</td></tr><tr><td>Potassium hydroxide</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>484016</td><td>Voor het maken van buffers</td></tr><tr><td>Potassium phosphate monobasic</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P0662</td><td>Voor het maken van buffers</td></tr><tr><td>Sodium Chloride</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S3014</td><td>Voor het maken van buffers</td></tr><tr><td>Sodium phosphate dibasic</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>71640</td><td>Voor het maken van buffers</td></tr><tr><td>Stereoscope</td><td>Olympus</td><td>SZX61</td><td>Voor het uitvoeren van dissecties</td></tr><tr><td>Tween-20</td><td>HIMEDIA</td><td>TC287</td><td>Detergens, gebruikt voor het doorlaatbaar maken van cellen</td></tr></tbody></table>

dissectie van zebravis craniofaciale weefsels bij kleuring met alcian blue

Dissection of Zebrafish Craniofacial Tissues Upon Staining with Alcian Blue

Dissectie van Zebravis craniofaciale weefsels bij kleuring met Alcian Blue

Zebrafish, given its optical transparency, is an excellent vertebrate model to study the mechanisms by which craniofacial cartilages form in the embryo. ...

dissection-zebrafish-craniofacial-tissues-upon-staining-with-alcian

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Ontwikkelingsbiologie

Dit protocol beschrijft een procedure voor het identificeren en ontleden van organen van de volwassen zebravissen.

Dissectie van organen van de Adult zebravis

Deze video beschrijft de techniek van microdissection van de hersenen van een volwassen zebravis. Deze methode helpt bij het verkrijgen van hele hersenen afgeleide neuorospheres die verder kunnen worden bestudeerd.

Zebrafish Brain Disissection: Een techniek van vis neurobiologie

Beeldvorming van cerebrovasculaire ontwikkeling in larvale zebravis wordt beschreven. Technieken om 3D-beeldvorming te vergemakkelijken en het gebruik van chemische behandelingen cerebrovasculaire ontwikkeling passen zijn ook aanwezig.

Imaging en 3D Reconstructie van cerebrovasculair Structuren in embryonale zebravis

Visualisatie van experimentele gegevens is uitgegroeid tot een belangrijk element in de presentatie van de resultaten aan de wetenschappelijke gemeenschap. Generatie van de live time-lapse opname van groeiende embryo draagt ​​bij aan een betere presentatie en begrip van complexe ontwikkelingsprocessen. Dit protocol is een stap-voor-stap handleiding voor cel etikettering via photoconversion van kaede eiwit in de zebravis.

Visualisatie van craniofaciale ontwikkeling in de SOX10: kaede transgene zebravis Line Met behulp van Time-lapse confocale microscopie

Time-lapse confocale beeldvorming is een techniek nuttig voor het karakteriseren van embryonale ontwikkeling. Hier beschrijven we de methode karakteriseren craniofaciale morfogenese in wildtype en PDGFRA, Smad5 en SMO mutant embryo's.

Het analyseren Craniofacial Morphogenesis in zebravis behulp 4D confocale microscopie

Hier beschrijven we 3 volwassen zebrafish letsel modellen en hun gecombineerd gebruik met immunosuppressieve medicamenteuze behandeling. Wij bieden begeleiding over de beeldvorming van het herstel van de weefsels en bot mineralisatie daarin opsporen.

Volwassen Zebrafish letsel modellen te bestuderen van de effecten van prednisolon in het herstel van botweefsel

Hier presenteren we een gestandaardiseerde reeks protocollen bij het observeren van de superieure oogbeschadigingen en/of Sulcus (hersenanatomie), een onlangs geïdentificeerd, evolutionair geconserveerd structuur in de gewervelde ogen. Met behulp van zebravis larven, aantonen we technieken die nodig zijn ter specificatie van de factoren die aan de vorming en de sluiting van de superieure oogbeschadigingen en/of Sulcus (hersenanatomie bijdragen).

Visualisatie van de Superior oogbeschadigingen en/of Sulcus (hersenanatomie) tijdens Danio rerio embryogenese

Dit protocol toont sequentiële immunofluorescentie en immunohistochemie op cryosecties van in het beginstadium zebravis-embryo's die precieze colokalisatie analyses in specifieke celpopulaties mogelijk maken.

Sequentiële immunofluorescentie en immunohistochemie op Gecryode zebravis-embryo's

Hier hebben we alizarine rode kleuring gebruikt om aan te tonen dat blootstelling aan loodacetaat een botmassaverandering veroorzaakt bij zebravislarven. Deze kleuringsmethode kan worden aangepast aan het onderzoek naar botverlies bij verlies van zebravislarven veroorzaakt door andere gevaarlijke toxische stoffen.

Alizarine rode kleuring gebruiken om chemisch geïnduceerd botverlies bij zebravislarven te detecteren

Hier presenteren we een methode voor het uitlijnen en cryosectieren van meerdere zebravislarvenmonsters (Danio rerio) en het verzamelen ervan op een enkel glaasje voor ruimtelijke transcriptomische analyse.

Ruimtelijk compacte opstelling van larvale zebravissecties voor ruimtelijke transcriptomische analyse

Dit werk beschrijft een protocol voor het kwantificeren van de vorm van craniofaciaal kraakbeen met behulp van vrije software (tpsDigs2, MorphoJ en PAST) om veranderingen in gezichtsstructuur bij zebravislarven te meten.

Morfometrische analyses van vorm: De analysesoftware-toolbox voor craniofaciale vormkwantificatie bij zebravissen

Leer een eenvoudige methode voor het kleuren en dissectie van craniofaciale kraakbeenderen in vijf dagen oude zebravislarven met Alcian Blue. Dit protocol maakt gedetailleerde karakterisering van verhemeltevorm mogelijk.

Dissectie van Zebravis craniofaciale weefsels bij kleuring met Alcian Blue

Meer video's verkennen