Name: Lipoproteïne-specifieke fosfolipide-effluxtest met hoge dichtheid (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-09-30T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 8 s
Description: Leer een HDL-gemedieerde fosfolipide-effluxtest voor cardiovasculair risico met menselijk plasma. Deze methode meet lipidenverwijdering en voorspelt hartziekte voor klinisch en wetenschappelijk onderzoek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Grundy, S. M., et al. 2018 AHA/ACC/AACVPR/AAPA/ABC/ACPM/ADA/AGS/APHA/ASPC/NLA/PCNA guideline on the management of blood cholesterol: A report of the american college of cardiology/american heart association task force on clinical practice guidelines. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGrundy%2C+SM+%22Circulation%22">Circulation</a>. 139 (25), e1082-e1143 (2019).</li>
<li>Zhong, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+coronary+heart+disease+in+Japanese-American+men+with+mutation+in+the+cholesteryl+ester+transfer+protein+gene+despite+increased+HDL+levels%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Increased coronary heart disease in Japanese-American men with mutation in the cholesteryl ester transfer protein gene despite increased HDL levels.</a> J Clin Invest. 97 (12), 2917-2923 (1996).</li>
<li>Madsen, C. M., Varbo, A., Nordestgaard, B. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extreme+high+high-density+lipoprotein+cholesterol+is+paradoxically+associated+with+high+mortality+in+men+and+women%3A+Two+prospective+cohort+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Heart+J%22%5BJournal%5D)">Extreme high high-density lipoprotein cholesterol is paradoxically associated with high mortality in men and women: Two prospective cohort studies.</a> Eur Heart J. 38 (32), 2478-2486 (2017).</li>
<li>Ko, D. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-density+lipoprotein+cholesterol+and+cause-specific+mortality+in+individuals+without+previous+cardiovascular+conditions%3A+The+CANHEART+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">High-density lipoprotein cholesterol and cause-specific mortality in individuals without previous cardiovascular conditions: The CANHEART study.</a> J Am Coll Cardiol. 68 (19), 2073-2083 (2016).</li>
<li>Liu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cholesterol+efflux+capacity+is+an+independent+predictor+of+all-cause+and+cardiovascular+mortality+in+patients+with+coronary+artery+disease%3A+A+prospective+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">Cholesterol efflux capacity is an independent predictor of all-cause and cardiovascular mortality in patients with coronary artery disease: A prospective cohort study.</a> Atherosclerosis. 249, 116-124 (2016).</li>
<li>Rosenson, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dysfunctional+HDL+and+atherosclerotic+cardiovascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Dysfunctional HDL and atherosclerotic cardiovascular disease.</a> Nat Rev Cardiol. 13 (1), 48-60 (2016).</li>
<li>Khera, A. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cholesterol+efflux+capacity%2C+high-density+lipoprotein+function%2C+and+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Cholesterol efflux capacity, high-density lipoprotein function, and atherosclerosis.</a> N Engl J Med. 364 (2), 127-135 (2011).</li>
<li>Rohatgi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HDL+cholesterol+efflux+capacity+and+incident+cardiovascular+events%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">HDL cholesterol efflux capacity and incident cardiovascular events.</a> N Engl J Med. 371 (25), 2383-2393 (2014).</li>
<li>Sankaranarayanan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+sensitive+assay+for+ABCA1-mediated+cholesterol+efflux+using+bodipy-cholesterol%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Lipid+Research%22%5BJournal%5D)">A sensitive assay for ABCA1-mediated cholesterol efflux using bodipy-cholesterol.</a> Journal of Lipid Research. 52 (12), 2332-2340 (2011).</li>
<li>Schachtl-Riess, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lysis+reagents%2C+cell+numbers%2C+and+calculation+method+influence+high-throughput+measurement+of+HDL-mediated+cholesterol+efflux+capacity%5BTitle%5D)+AND+%22J+Lipid+Res%22%5BJournal%5D)">Lysis reagents, cell numbers, and calculation method influence high-throughput measurement of HDL-mediated cholesterol efflux capacity.</a> J Lipid Res. 62, 100125(2021).</li>
<li>Harada, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cholesterol+uptake+capacity%3A+A+new+measure+of+HDL+functionality+for+coronary+risk+assessment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Lab+Med%22%5BJournal%5D)">Cholesterol uptake capacity: A new measure of HDL functionality for coronary risk assessment.</a> J Appl Lab Med. 2 (2), 186-200 (2017).</li>
<li>Horiuchi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+and+application+of+a+novel+cholesterol+efflux+assay+using+immobilized+liposomes+as+a+substitute+for+cultured+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biosci+Rep%22%5BJournal%5D)">Validation and application of a novel cholesterol efflux assay using immobilized liposomes as a substitute for cultured cells.</a> Biosci Rep. 38 (2), BSR20180144(2018).</li>
<li>Lorkowski, S. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+cell-free+fluorescent+assay+for+HDL+function%3A+Low+apolipoprotein+a1+exchange+rate+associated+with+increased+incident+cardiovascular+events%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Lab+Med%22%5BJournal%5D)">A novel cell-free fluorescent assay for HDL function: Low apolipoprotein a1 exchange rate associated with increased incident cardiovascular events.</a> J Appl Lab Med. 5 (3), 544-557 (2020).</li>
<li>Denimal, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rethinking+%27good+cholesterol%27+for+cardiovascular+risk+stratification%5BTitle%5D)+AND+%22QJM%3A+An+Int+J+Med%22%5BJournal%5D)">Rethinking 'good cholesterol' for cardiovascular risk stratification.</a> QJM: An Int J Med. 117 (4), 243-245 (2023).</li>
<li>Borja, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HDL-apolipoprotein+A-I+exchange+is+independently+associated+with+cholesterol+efflux+capacity%5BTitle%5D)+AND+%22J+Lipid+Res%22%5BJournal%5D)">HDL-apolipoprotein A-I exchange is independently associated with cholesterol efflux capacity.</a> J Lipid Res. 56 (10), 2002-2009 (2015).</li>
<li>Borja, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HDL-apoa-I+exchange%3A+Rapid+detection+and+association+with+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">HDL-apoa-I exchange: Rapid detection and association with atherosclerosis.</a> PLoS One. 8 (8), e71541(2013).</li>
<li>Remaley, A. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Apolipoprotein+specificity+for+lipid+efflux+by+the+human+ABCAI+transporter%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Biophys+Res+Commun%22%5BJournal%5D)">Apolipoprotein specificity for lipid efflux by the human ABCAI transporter.</a> Biochem Biophys Res Commun. 280 (3), 818-823 (2001).</li>
<li>Sato, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell-free%2C+high-density+lipoprotein-specific+phospholipid+efflux+assay+predicts+incident+cardiovascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Cell-free, high-density lipoprotein-specific phospholipid efflux assay predicts incident cardiovascular disease.</a> J Clin Invest. 133 (18), e165370(2023).</li>
<li>Neufeld, E. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ApoA-I-mediated+lipoprotein+remodeling+monitored+with+a+fluorescent+phospholipid%5BTitle%5D)+AND+%22Biology+%28Basel%29%22%5BJournal%5D)">ApoA-I-mediated lipoprotein remodeling monitored with a fluorescent phospholipid.</a> Biology (Basel). 8 (3), 53(2019).</li>
<li>Davidson, W. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+apolipoprotein+B+depletion+on+HDL+subspecies+composition+and+function%5BTitle%5D)+AND+%22J+Lipid+Res%22%5BJournal%5D)">The effects of apolipoprotein B depletion on HDL subspecies composition and function.</a> J Lipid Res. 57 (4), 674-686 (2016).</li>
<li>Phillips, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+mechanisms+of+cellular+cholesterol+efflux%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Molecular mechanisms of cellular cholesterol efflux.</a> J Biol Chem. 289 (35), 24020-24029 (2014).</li>
<li>Oram, J. F., Yokoyama, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Apolipoprotein-mediated+removal+of+cellular+cholesterol+and+phospholipids%5BTitle%5D)+AND+%22J+Lipid+Res%22%5BJournal%5D)">Apolipoprotein-mediated removal of cellular cholesterol and phospholipids.</a> J Lipid Res. 37 (12), 2473-2491 (1996).</li>
<li>Phillips, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Is+ABCA1+a+lipid+transfer+protein%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Lipid+Research%22%5BJournal%5D)">Is ABCA1 a lipid transfer protein.</a> Journal of Lipid Research. 59 (5), 749-763 (2018).</li>
<li>Smith, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abca1+mediates+concurrent+cholesterol+and+phospholipid+efflux+to+apolipoprotein+A-I%5BTitle%5D)+AND+%22J+Lipid+Res%22%5BJournal%5D)">Abca1 mediates concurrent cholesterol and phospholipid efflux to apolipoprotein A-I.</a> J Lipid Res. 45 (4), 635-644 (2004).</li>
<li>Ossoli, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipoprotein+X+causes+renal+disease+in+LCAT+deficiency%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Lipoprotein X causes renal disease in LCAT deficiency.</a> PLoS One. 11 (2), e0150083(2016).</li>
<li>Martínez-Beamonte, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+extra+virgin+olive+oil+high+in+bioactive+compounds+on+atherosclerosis+in+apoe-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Nutr+Food+Res%22%5BJournal%5D)">Effect of extra virgin olive oil high in bioactive compounds on atherosclerosis in apoe-deficient mice.</a> Mol Nutr Food Res. , (2025).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphocholine</td><td>Avanti Research</td><td>850345</td><td>14:0 PC (DMPC) Chloorform Soluiton</td></tr><tr><td>1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-(lissamine rhodamine B sulfonyl) (ammoniumzout)</td><td>Avanti Research</td><td>810150-C</td><td>Chloorform Oplossing LRh-PE</td></tr><tr><td>Zelfklevende film</td><td>Applied Biosystems&nbsp;</td><td>4306311</td><td>MicroAmp Clear Zelfklevende Film&nbsp;</td></tr><tr><td>Bay Corporation Hoge Dichtheid Teflon Tape 1/2 inch x 520</td><td>Medical Testing Solutions</td><td>86732</td><td></td></tr><tr><td>Boorsilicaat glazen buizen 20 mm &acute; 150 mm</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-961-33</td><td></td></tr><tr><td>Centrifuge</td><td>Thermo Scientific</td><td>Sorvall X Pro Series</td><td></td></tr><tr><td>Chloorform</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>366927</td><td>geschikt voor HPLC, &ge;99,8%</td></tr><tr><td>Cholesterol Poeder</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C8667</td><td>3&beta;-Hydroxy-5-cholesteen, 5-Cholesteen-3&beta;-ol</td></tr><tr><td>Glassine weegpapier</td><td>Cole-Palmer</td><td>&nbsp;UX-01338-02</td><td>Voor het hanteren van LC-CSH</td></tr><tr><td>Incubatieplaat</td><td>USA Scientific&nbsp;</td><td>1402-9700</td><td>TempPlate 96 Well Semi Skirt 0,2mL PCR Platen&nbsp;</td></tr><tr><td>Lipid Verwijderingsmiddel (LRA)</td><td>Supelco</td><td>13358-U</td><td>LC-CSH</td></tr><tr><td>Meetplaat</td><td>Greiner bio-one&nbsp;</td><td>655076</td><td>Microplaat, PS, 96-well, F-BOTTOM(CHIMNEY WELL), ZWART; FLUOTRAC, MED BINDING</td></tr><tr><td>Microsoft Excel</td><td>Microsoft 365 MSO&nbsp;</td><td>Versie 2507</td><td></td></tr><tr><td>MultiFlex Pipettips</td><td>Fisher Scientific</td><td>50-550-206</td><td>Voor het afzuiging van supernatant tijdens LC-CSH wasbeurten</td></tr><tr><td>Multilabel plaatlezer</td><td>Perkin Elmer&nbsp;</td><td>1420-050</td><td>Victor3 Wallac1420 Multilabel Counter</td></tr><tr><td>Normale zoutoplossing</td><td>Quality Biological&nbsp;</td><td>114-055-101</td><td>Voor meerdere gebruiken&nbsp;</td></tr><tr><td>Parafilm</td><td>Cole-Palmer</td><td>HS23452</td><td>Om de bovenkant van het glazen buisje te bedekken tijdens het vortexen</td></tr><tr><td>Polycabonate Erlenmeyer kolven</td><td>Fisher Scientific</td><td>10-041-8</td><td>Voor 10% Triton-X oplossing</td></tr><tr><td>Gepoold menselijk plasma (bloed afgeleid) Li Heparine)</td><td>Innovative Research Inc</td><td>IPLAWBLIH</td><td>Referentieplasma, positieve controle (PC)&nbsp;</td></tr><tr><td>Surfact-Amps X 100&nbsp;</td><td>Thermo Scientific</td><td>28314</td><td>10% Triton X-100, verdund 10x met gedestilleerd water</td></tr><tr><td>Thermomixer</td><td>Eppendorf</td><td>5382000023</td><td>Thermomixer C met 96-well thermoblok</td></tr><tr><td>Thermomixer Smartblock</td><td>Eppendorf</td><td>5306000006</td><td>96-well SmartBlock</td></tr><tr><td>Transfer pipetten (3 mL, Falcon)</td><td>Fisher Scientific</td><td>13-711-9CM</td><td>Voor het verwijderen van bellen vanaf de bovenkant van de put</td></tr><tr><td>Vortex mixer</td><td>Daigger</td><td>3030A</td><td>Bevestigingshouders voor glazen buisje bovenaan</td></tr></tbody></table>

lipoproteïne-specifieke fosfolipide-effluxtest met hoge dichtheid

High-Density Lipoprotein-Specific Phospholipid Efflux Assay

Lipoproteïne-specifieke fosfolipide-effluxtest met hoge dichtheid

Plasma levels of high-density lipoprotein (HDL)-cholesterol (HDL-C) is currently a key metric for the clinical assessment of cardiovascular disease (CVD) ...

high-density-lipoprotein-specific-phospholipid-efflux-assay

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Biochemie

De cholesterol test is ontworpen om de snelheid van cholesterol efflux uit gekweekte cellen en de capaciteit van plasma acceptoren cholesterol afgegeven door de cellen te accepteren kwantificeren. De test bestaat uit het etiketteren van cellen met cholesterol, evenwicht van cholesterol tussen de intracellulaire zwembaden en het vrijgeven van cholesterol aan een extracellulaire acceptor.

Cholesterol efflux Assay

Proteoliposomen worden gebruikt om gezuiverde kanalen en transporteurs te bestuderen die gereconstitueerd zijn in een goed gedefinieerde biochemische omgeving. Er wordt een experimentele procedure geïllustreerd om efflux gemedieerde door deze eiwitten te meten. De stappen om proteoliposomen voor te bereiden, de opnames uit te voeren en gegevens te analyseren om de functionele eigenschappen van het gereconstitueerde eiwit kwantitatief te bepalen worden beschreven.

Een proteoliposome-Based Efflux Assay om Enkelmolecuul Eigenschappen van Cl Bepaal<sup&gt; -</sup&gt; Kanalen en Transporters

Dit protocol beschrijft de isolatie en kwantificering van kleine RNA's met hoge dichtheidslipoproteïnen.

Isolatie van lipoproteïnen met hoge dichtheid voor niet-coderende RNA kwantificering Klein

Veel voorspelde (fosfo)lipasen zijn slecht gekarakteriseerd met betrekking tot hun substraatspecificiteit en fysiologische functies. Hier bieden we een protocol om enzymactiviteiten te optimaliseren, naar natuurlijke substraten te zoeken en fysiologische functies voor deze enzymen voor te stellen.

Het definiëren van de ondergrond hebben voor lipase en fosfolipase Kandidaten

We beschrijven een op fluorescentie gebaseerde assay om fosfolipide-scrambling in grote unilamellaire liposomen gereconstitueerd met opsine te meten.

Een fluorescentie-gebaseerde test fosfolipide scramblase Activity

Hier beschrijven we een fluorimetrische cel-vrije biochemische bepaling voor bepaling van de HDL-lipide peroxidatie. Deze snelle en reproduceerbare kwantitatieve analyse kan worden gebruikt om te bepalen van HDL functie in grootschalige studies en kan bijdragen aan ons begrip van HDL functie in ziekten bij de mens.

Cel-vrije biochemische fluorimetrische enzymatische Assay voor High-throughput meting van lipide peroxidatie in High Density lipoproteïne

Dit protocol biedt een efficiënte aanpak voor het meten van LDL cholesterol opname met real-time toestroom tarieven met behulp van een levende cel imaging systeem in verschillende celtypen. Deze techniek biedt een platform voor het scherm van de farmacologische activiteit van verbindingen op het gebied van LDL toestroom terwijl monitoring voor cel morfologie en vandaar potentiële cytotoxiciteit.

LDL Cholesterol opname Assay met behulp van levende cellen Imaging analyse met mobiele gezondheidsmonitoring

Meting van in vitro cholesterol efflux capaciteit serum of plasma in macrofaag cel modellen is een veelbelovend instrument als een biomarker voor atherosclerose. In de huidige studie, optimaliseren wij en een fluorescerende NBD-cholesterol efflux methode standaardiseren en ontwikkelen van een hoge-doorvoer-analyse met behulp van 96-wells-platen.

High-throughput Nitrobenzoxadiazole-geëtiketteerden Cholesterol Efflux Assay

Hier beschrijven we protocollen met behulp van fluorescerende lipidesensoren en liposomen om te bepalen of een eiwit fosfatidylserine of fosfatidylinositol 4-fosfaat in vitroextraheert en transporteert .

Fluorescentie-gebaseerde metingen van fosfatidylserine / fosfatidylinositol 4-fosfaatuitwisseling tussen membranen

Hierin demonstreren we een geoptimaliseerd BODIPY 493/503 fluorescentie-gebaseerd protocol voor lipidedruppelkarakterisering in leverweefsel. Door het gebruik van orthogonale projecties en 3D-reconstructies maakt de fluorofoor een succesvolle discriminatie tussen microvesiculaire en macrovesiculaire steatose mogelijk en kan het een complementaire benadering zijn van de klassieke histologische protocollen voor de beoordeling van leversteatose.

Analyse van fluorescerend gekleurde lipidedruppels met 3D-reconstructie voor hepatische steatosebeoordeling

We presenteren een kosteneffectieve methode voor het beoordelen van liposomale membraanpermeabiliteit met een superieure gevoeligheid en resolutie ten opzichte van conventionele technieken. Met behulp van een nieuwe ingekapselde ligandsubstitutiereactie detecteert deze techniek fosfolipase A 2-geïnduceerde veranderingen in modelmembranen. Deze toegankelijke benadering kan eenvoudig worden geïntegreerd met standaardanalyses en verbetert de resolutie voor het bestuderen van membraanbiofysica en...

Een liposoommembraanpermeabiliteitstest voor het onderzoeken van de effecten van fosfatidylinositolfosfaatgroepen op de membraneutrope werking van gif PLA2

Leer een HDL-gemedieerde fosfolipide-effluxtest voor cardiovasculair risico met menselijk plasma. Deze methode meet lipidenverwijdering en voorspelt hartziekte voor klinisch en wetenschappelijk onderzoek.

Lipoproteïne-specifieke fosfolipide-effluxtest met hoge dichtheid

Meer video's verkennen