Name: Modellering van hypoxie/reoxygenatieschade in proximale tubulära epitheelcellen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-11-21T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 23 s
Description: Ontdek een in vitro model voor hypoxie/reoxygenatieschade in proximale tubulaire epitheelcellen. Deze methode meet nierbeschadigingsmarkers en mitochondriale ademhaling om therapeutische strategieën te identificeren.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td>384-well qPCR plate</td><td>Applied Biosystems</td><td>4309849</td><td></td></tr><tr><td>Centrifuge</td><td>Ortoalresa</td><td>Biocen22R</td><td></td></tr><tr><td>Chloroform</td><td>VWR</td><td>0757-500ML</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F12</td><td>Gibco</td><td>21331020</td><td></td></tr><tr><td>Epidermal Growth Factor</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E9644</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>PanReac AppliChem</td><td>141086.1214</td><td></td></tr><tr><td>FCS</td><td>Biowest</td><td>S181B-500</td><td></td></tr><tr><td>Heating block</td><td>Eppendorf</td><td>ThermoMixer C</td><td></td></tr><tr><td>Hydrocortisone</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H0135</td><td></td></tr><tr><td>Hypoxia Incubator</td><td>Memmert</td><td>ICO 50med</td><td></td></tr><tr><td>IFN-&gamma;</td><td>ProspecBIo</td><td>CYT-358</td><td></td></tr><tr><td>Incubator</td><td>Memmert</td><td>ICO 105</td><td></td></tr><tr><td>Isopropanol</td><td>VWR</td><td>0918-1L</td><td></td></tr><tr><td>ITSe</td><td>Gibco</td><td>41400045</td><td></td></tr><tr><td>L-glutamine</td><td>Gibco</td><td>25030081</td><td></td></tr><tr><td>Multichannel pipette</td><td>Eppendorf</td><td>3125000052</td><td></td></tr><tr><td>Non-CO2 incubator</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>PCR Primers</td><td>Eurofins Genomics</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Penicillin - Streptomycin</td><td>Gibco</td><td>15140-122</td><td></td></tr><tr><td>qPCR Master Mix</td><td>NZYTech</td><td>MB22303</td><td></td></tr><tr><td>Real-Time qPCR System</td><td>Applied Biosystems</td><td>QuantStudio 5</td><td></td></tr><tr><td>Reverse transcription Master Mix</td><td>NZYTech</td><td>MB12502</td><td>Bevat Enzyme Mix</td></tr><tr><td>RNAse-free water</td><td>HyClone</td><td>SH3053802</td><td></td></tr><tr><td>Seahorse XF Cell Mito Stress Test Kit</td><td>Agilent</td><td>103015-100</td><td>Bevat Oligomycin, FCCP, Antimycin A en Rotenone</td></tr><tr><td>Seahorse XF DMEM medium</td><td>Agilent</td><td>103575-100</td><td></td></tr><tr><td>Seahorse XF Glucose</td><td>Agilent</td><td>03577-100</td><td></td></tr><tr><td>Seahorse XF Glutamine</td><td>Agilent</td><td>103579-100</td><td></td></tr><tr><td>Seahorse XF Pyruvate</td><td>Agilent</td><td>103578-100</td><td></td></tr><tr><td>Seahorse XFe96 Analyzer</td><td>Agilent</td><td>S7800BR</td><td></td></tr><tr><td>Seahorse XFe96 FluxPak</td><td>Agilent</td><td>103792-100</td><td>Bevat XFe96 Cell Culture Microplate en XFe96 Sensor Cartridge</td></tr><tr><td>Thermal cycler</td><td>BIO-RAD</td><td>T100 Thermal Cycler</td><td></td></tr><tr><td>Triiodothyronine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T5516</td><td></td></tr><tr><td>Trizol</td><td>Invitrogen</td><td>15596026</td><td></td></tr><tr><td>UV-Vis spectrophotometer</td><td>DeNovix</td><td>DS-11</td><td></td></tr></tbody></table>

modellering van hypoxie/reoxygenatieschade in proximale tubulära epitheelcellen

Modeling Hypoxia/Reoxygenation Injury in Proximal Tubular Epithelial Cells

Modellering van hypoxie/reoxygenatieschade in proximale tubulära epitheelcellen

Kidney transplantation accounts for approximately 60%-65% of all transplanted solid organs. Most donor kidneys are obtained from deceased individuals, ...

modeling-hypoxiareoxygenation-injury-proximal-tubular-epithelial

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

De effecten van activering van eiwit kinase C (PKC) isozymen op mitochondriële functies geassocieerd met ademhaling en oxidatieve fosforylering en cellevensvatbaarheid beschreven. De aanpak past adenovirale techniek om selectief PKC overexpressie isozymen in primaire celkweek en verschillende assays voor mitochondriële functies en energie status van de cel te bepalen.

Beoordeling van Mitochondriale functies en levensvatbaarheid van de cellen in de nier overexpressie Proteïne kinase C-isozymen

Source: Alluri, H., et.al. Oxygen-Glucose Deprivation and Reoxygenation as an In Vitro Ischemia-Reperfusion Injury Model for Studying Blood-Brain Barrier Dysfunction. J. Vis. Exp. (2015).The video demonstrates the impact of oxygen-glucose deprivation and subsequent reoxygenation on rat brain microvascular endothelial cells (RBMECs) by simulating hypoxic and nutrient-deprived conditions. These conditions result in ATP depletion, increased intracellular calcium, and the generation of reactive...

Impact of Oxygen-Glucose Deprivation and Reoxygenation on Cell-Cell Interactions

Ischemische-reperfusie (IR) schade is geassocieerd met een hoge mate van morbiditeit en mortaliteit. Het doel van het in vitro model van zuurstof-glucose deprivatie en reoxygenatie (OGD-R) dat hier wordt beschreven, is om de effecten van ischemie reperfusie schade op een verscheidenheid aan cellen te beoordelen, met name op endotheelcellen van de bloed-hersenbarrière (BBB).

Zuurstof-Glucose beroving en reoxygenatie als een<em&gt; In Vitro</em&gt; Ischemie-reperfusie letsel model voor de studie bloed-hersenbarrière Dysfunction

Dit protocol biedt een rendabele aanpak om te isoleren en karakteriseren van muis primaire renale tubulaire cellen die vervolgens sub kunnen worden gekweekt om te beoordelen renale biologische functies- ex vivo, met inbegrip van de mitochondriale Bioenergetica.

Isolatie, karakterisering en High Throughput extracellulaire Flux-analyse van muis primaire renale tubulaire epitheliale cellen

Dit protocol beschrijft een apicale necrotiserende enterocolitis (NEC)-in-een-schotelmodel met behulp van enteroïden in de dunne darm met omgekeerde polariteit, waardoor toegang tot het apicale oppervlak mogelijk is. We bieden een immunofluorescentiekleuringsprotocol om NEC-gerelateerde epitheliale verstoring te detecteren en een methode om de levensvatbaarheid te bepalen van apicale enteroïden die zijn onderworpen aan het NEC-in-a-dish-protocol.

In vitro Apiical-Out Enteroid Model van Necrotiserende Enterocolitis

Hier beschrijven we de protocollen voor het verkrijgen van primaire culturen van menselijke renale tubulaire epitheelcellen (HRTEC) uit de nierschors om monolagen en driedimensionale culturen te ontwikkelen op een extracellulaire matrix (3D-HRTEC).

Ontwikkeling van primaire culturen van menselijke niertubulaire epitheelcellen in monolagen en driedimensionale omstandigheden

We presenteren een geoptimaliseerd protocol voor het verwerken van hele menselijke nieren om primaire renale proximale tubulule-epitheelcellen te isoleren en te kweken en de toepassing van deze cellen in een driedimensionaal, microfluïdisch, microfysiologisch platform om de proximale niertubulus te recapituleren.

Isolatie van primaire menselijke proximale tubule-epitheelcellen en hun gebruik bij het maken van een microfysiologisch model van de proximale niertubuli

Zelfassemblage menselijke cardiale organoïden (hCO's) zijn een opkomend systeem voor het modelleren van menselijke hartontwikkeling en ziekte. Hier wordt een methodologie gegeven voor het genereren en beschadigen van hCO's met hypoxie-reoxygenatie en details van verwachte histologische en functionele uitkomsten na een verwonding.

Een hypoxie-reoxygenatie-schademodel bij zelf-assemblerende menselijke cardioïden

Hier beschrijven we een gedetailleerde methode voor het kweken van primaire menselijke bronchiale epitheelcellen van explantaten van menselijke bronchiale luchtwegen weefsel inclusief gedifferentieerde groei van een lucht-water grensvlak. Deze methode biedt een overvloedige bron van primaire cellen voor onderzoek naar de rol van de luchtweg epitheel in de menselijke longen gezondheid en ziekte.

Primaire menselijke bronchiale epitheelcellen gegroeid van Explantaten

Chirp is een nieuwe en snelle techniek om genomische bindingsplaatsen van niet-coderende RNA's lang (lncRNAs) in kaart te brengen. De methode maakt gebruik van de specificiteit van anti-sense oligonucleotiden tegels aan de lijst van lncRNA-gebonden genomische locaties mogelijk te maken.

Chromatine Isolatie door RNA-zuivering (Chirp)

Ontdek een in vitro model voor hypoxie/reoxygenatieschade in proximale tubulaire epitheelcellen. Deze methode meet nierbeschadigingsmarkers en mitochondriale ademhaling om therapeutische strategieën te identificeren.

Modellering van hypoxie/reoxygenatieschade in proximale tubulära epitheelcellen

Meer video's verkennen