Name: RNA-isolatie van oculair lensepitheel van muizen en bulkmassas van vezelcellen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-10-10T12:45:00.000+00:00
Duration: 6 min 7 s
Description: Leer RNA-isolatie van muizenlensepitheel en vezelcellen voor transcriptoomanalyse. Deze methode onthult verschillen in genexpressie tussen celtypen en helpt bij het begrijpen van leeftijdsgerelateerde lenspathologieën.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Lovicu, F. J., Robinson, M. L. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aLovicu%2C+FJ+%22Development+of+the+Ocular+Lens%22">Development of the Ocular Lens</a>. , Cambridge University Press. (2004).</li>
<li>Bassnett, S., Winzenburger, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphometric+analysis+of+fibre+cell+growth+in+the+developing+chicken+lens%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Morphometric analysis of fibre cell growth in the developing chicken lens.</a> Exp Eye Res. 76 (3), 291-302 (2003).</li>
<li>Kuszak, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+ultrastructure+of+epithelial+and+fiber+cells+in+the+crystalline+lens%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Rev+Cytol%22%5BJournal%5D)">The ultrastructure of epithelial and fiber cells in the crystalline lens.</a> Int Rev Cytol. 163, 305-350 (1995).</li>
<li>Yamamoto, N., Majima, K., Marunouchi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+study+of+the+proliferating+activity+in+lens+epithelium+and+the+identification+of+tissue-type+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Mol+Morphol%22%5BJournal%5D)">A study of the proliferating activity in lens epithelium and the identification of tissue-type stem cells.</a> Med Mol Morphol. 41 (2), 83-91 (2008).</li>
<li>Bassnett, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+mechanism+of+organelle+degradation+in+the+vertebrate+lens%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">On the mechanism of organelle degradation in the vertebrate lens.</a> Exp Eye Res. 88 (2), 133-139 (2009).</li>
<li>Bassnett, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+fate+of+the+Golgi+apparatus+and+the+endoplasmic+reticulum+during+lens+fiber+cell+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">The fate of the Golgi apparatus and the endoplasmic reticulum during lens fiber cell differentiation.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 36 (9), 1793-1803 (1995).</li>
<li>Bassnett, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lens+organelle+degradation%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Lens organelle degradation.</a> Exp Eye Res. 74 (1), 1-6 (2002).</li>
<li>Bassnett, S., Beebe, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coincident+loss+of+mitochondria+and+nuclei+during+lens+fiber+cell+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Dyn%22%5BJournal%5D)">Coincident loss of mitochondria and nuclei during lens fiber cell differentiation.</a> Dev Dyn. 194 (2), 85-93 (1992).</li>
<li>Bassnett, S., Shi, Y., Vrensen, G. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+glass%3A+Structural+determinants+of+eye+lens+transparency%5BTitle%5D)+AND+%22Philos+Trans+R+Soc+Lond+B+Biol+Sci%22%5BJournal%5D)">Biological glass: Structural determinants of eye lens transparency.</a> Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 366 (1568), 1250-1264 (2011).</li>
<li>Vrensen, G. F., Graw, J., De Wolf, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nuclear+breakdown+during+terminal+differentiation+of+primary+lens+fibres+in+mice%3A+A+transmission+electron+microscopic+study%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Nuclear breakdown during terminal differentiation of primary lens fibres in mice: A transmission electron microscopic study.</a> Exp Eye Res. 52 (6), 647-659 (1991).</li>
<li>Counis, M. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+nuclear+degradation+during+lens+cell+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Differ%22%5BJournal%5D)">Analysis of nuclear degradation during lens cell differentiation.</a> Cell Death Differ. 5 (4), 251-261 (1998).</li>
<li>Piatigorsky, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lens+differentiation+in+vertebrates.+A+review+of+cellular+and+molecular+features%5BTitle%5D)+AND+%22Differentiation%22%5BJournal%5D)">Lens differentiation in vertebrates. A review of cellular and molecular features.</a> Differentiation. 19 (3), 134-153 (1981).</li>
<li>Al-Khudari, S., Donohue, S. T., Al-Ghoul, W. M., Al-Ghoul, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-related+compaction+of+lens+fibers+affects+the+structure+and+optical+properties+of+rabbit+lenses%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Age-related compaction of lens fibers affects the structure and optical properties of rabbit lenses.</a> BMC Ophthalmol. 7, 19(2007).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22World+Report+on+Vision%22">World Report on Vision</a>. , World Health Organization. Geneva. (2019).</li>
<li>Hashemi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+and+regional+prevalence+of+age-related+cataract%3A+A+comprehensive+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Eye+%28Lond%29%22%5BJournal%5D)">Global and regional prevalence of age-related cataract: A comprehensive systematic review and meta-analysis.</a> Eye (Lond). 34 (8), 1357-1370 (2020).</li>
<li>Cheng, C., Gong, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diverse+roles+of+eph%2Fephrin+signaling+in+the+mouse+lens%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Diverse roles of eph/ephrin signaling in the mouse lens.</a> PLoS One. 6 (11), e28147(2011).</li>
<li>Ibaraki, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+brighter+future+for+cataract+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">A brighter future for cataract surgery.</a> Nat Med. 3 (9), 958-960 (1997).</li>
<li>Scullica, L., Grimes, P., Mcelvain, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Further+autoradiographic+studies+of+the+lens+epithelium.+Normal+and+x-irradiated+rat+eyes%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Further autoradiographic studies of the lens epithelium. Normal and x-irradiated rat eyes.</a> Arch Ophthalmol. 70, 659-665 (1963).</li>
<li>Caraguel, C. G., Stryhn, H., Gagne, N., Dohoo, I. R., Hammell, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selection+of+a+cutoff+value+for+real-time+polymerase+chain+reaction+results+to+fit+a+diagnostic+purpose%3A+Analytical+and+epidemiologic+approaches%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vet+Diagn+Invest%22%5BJournal%5D)">Selection of a cutoff value for real-time polymerase chain reaction results to fit a diagnostic purpose: Analytical and epidemiologic approaches.</a> J Vet Diagn Invest. 23 (1), 2-15 (2011).</li>
<li>60/280 and 260/230 ratios. , Thermo Scientific. 
 <a target="_blank" href="https://assets.thermofisher.com/TFS-Assets/CAD/Product-Bulletins/T123-NanoDrop-Lite-Interpretation-of-Nucleic-Acid-260-280-Ratios.pdf">https://assets.thermofisher.com/TFS-Assets/CAD/Product-Bulletins/T123-NanoDrop-Lite-Interpretation-of-Nucleic-Acid-260-280-Ratios.pdf</a> (2009).</li>
<li>Beyer, E. C., Kistler, J., Paul, D. L., Goodenough, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antisera+directed+against+connexin43+peptides+react+with+a+43-kd+protein+localized+to+gap+junctions+in+myocardium+and+other+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Antisera directed against connexin43 peptides react with a 43-kd protein localized to gap junctions in myocardium and other tissues.</a> J Cell Biol. 108 (2), 595-605 (1989).</li>
<li>Gong, X., Cheng, C., Xia, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Connexins+in+lens+development+and+cataractogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Membr+Biol%22%5BJournal%5D)">Connexins in lens development and cataractogenesis.</a> J Membr Biol. 218 (1-3), 9-12 (2007).</li>
<li>Leonard, M., Zhang, L., Bleaken, B. M., Menko, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+roles+for+n-cadherin+linked+c-src+and+fyn+kinases+in+lens+development%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Dyn%22%5BJournal%5D)">Distinct roles for n-cadherin linked c-src and fyn kinases in lens development.</a> Dev Dyn. 242 (5), 469-484 (2013).</li>
<li>Leonard, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulation+of+n-cadherin+junctions+and+their+role+as+epicenters+of+differentiation-specific+actin+regulation+in+the+developing+lens%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Modulation of n-cadherin junctions and their role as epicenters of differentiation-specific actin regulation in the developing lens.</a> Dev Biol. 349 (2), 363-377 (2011).</li>
<li>Logan, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((N-cadherin+regulates+signaling+mechanisms+required+for+lens+fiber+cell+elongation+and+lens+morphogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">N-cadherin regulates signaling mechanisms required for lens fiber cell elongation and lens morphogenesis.</a> Dev Biol. 428 (1), 118-134 (2017).</li>
<li>Maddala, R., Nagendran, T., Lang, R. A., Morozov, A., Rao, P. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rap1+gtpase+is+required+for+mouse+lens+epithelial+maintenance+and+morphogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Rap1 gtpase is required for mouse lens epithelial maintenance and morphogenesis.</a> Dev Biol. 406 (1), 74-91 (2015).</li>
<li>Parreno, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methodologies+to+unlock+the+molecular+expression+and+cellular+structure+of+ocular+lens+epithelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Methodologies to unlock the molecular expression and cellular structure of ocular lens epithelial cells.</a> Front Cell Dev Biol. 10, 983178(2022).</li>
<li>Paul, D. L., Ebihara, L., Takemoto, L. J., Swenson, K. I., Goodenough, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Connexin46%2C+a+novel+lens+gap+junction+protein%2C+induces+voltage-gated+currents+in+nonjunctional+plasma+membrane+of+xenopus+oocytes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Connexin46, a novel lens gap junction protein, induces voltage-gated currents in nonjunctional plasma membrane of xenopus oocytes.</a> J Cell Biol. 115 (4), 1077-1089 (1991).</li>
<li>Rong, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disruption+of+gja8+%28alpha8+connexin%29+in+mice+leads+to+microphthalmia+associated+with+retardation+of+lens+growth+and+lens+fiber+maturation%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Disruption of gja8 (alpha8 connexin) in mice leads to microphthalmia associated with retardation of lens growth and lens fiber maturation.</a> Development. 129 (1), 167-174 (2002).</li>
<li>Terrell, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+characterization+of+mouse+lens+epithelial+cell+lines+and+their+suitability+to+study+RNA+granules+and+cataract+associated+genes%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Molecular characterization of mouse lens epithelial cell lines and their suitability to study RNA granules and cataract associated genes.</a> Exp Eye Res. 131, 42-55 (2015).</li>
<li>White, T. W., Bruzzone, R., Goodenough, D. A., Paul, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+cx50%2C+a+functional+member+of+the+connexin+family+of+gap+junction+proteins%2C+is+the+lens+fiber+protein+mp70%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Biology+of+the+Cell%22%5BJournal%5D)">Mouse cx50, a functional member of the connexin family of gap junction proteins, is the lens fiber protein mp70.</a> Molecular Biology of the Cell. 3 (7), 711-720 (1992).</li>
<li>Xia, C. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Altered+cell+clusters+and+upregulated+Aqp1+in+connexin+50+knockout+lens+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Altered cell clusters and upregulated Aqp1 in connexin 50 knockout lens epithelium.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 65 (11), 27(2024).</li>
<li>Beyer, E. C., Paul, D. L., Goodenough, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Connexin43%3A+A+protein+from+rat+heart+homologous+to+a+gap+junction+protein+from+liver%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Connexin43: A protein from rat heart homologous to a gap junction protein from liver.</a> J Cell Biol. 105 (6 Pt 1), 2621-2629 (1987).</li>
<li>Gong, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disruption+of+Alpha3+connexin+gene+leads+to+proteolysis+and+cataractogenesis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Disruption of Alpha3 connexin gene leads to proteolysis and cataractogenesis in mice.</a> Cell. 91 (6), 833-843 (1997).</li>
<li>Xu, L., Overbeek, P. A., Reneker, L. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systematic+analysis+of+E-%2C+N-+and+P-cadherin+expression+in+mouse+eye+development%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Systematic analysis of E-, N- and P-cadherin expression in mouse eye development.</a> Exp Eye Res. 74 (6), 753-760 (2002).</li>
<li>Nishina, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pax6+expression+in+the+developing+human+eye%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Pax6 expression in the developing human eye.</a> Br J Ophthalmol. 83 (6), 723-727 (1999).</li>
<li>Wistow, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gamman-crystallin+and+the+evolution+of+the+betagamma-crystallin+superfamily+in+vertebrates%5BTitle%5D)+AND+%22FEBS+J%22%5BJournal%5D)">Gamman-crystallin and the evolution of the betagamma-crystallin superfamily in vertebrates.</a> FEBS J. 272 (9), 2276-2291 (2005).</li>
<li>Cheng, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue%2C+cellular%2C+and+molecular+level+determinants+for+eye+lens+stiffness+and+elasticity%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Ophthalmol+%28Lausanne%29%22%5BJournal%5D)">Tissue, cellular, and molecular level determinants for eye lens stiffness and elasticity.</a> Front Ophthalmol (Lausanne). 4, 1456474(2024).</li>
<li>Huynh, P. N., Cheng, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial-temporal+comparison+of+eph%2Fephrin+gene+expression+in+ocular+lenses+from+aging+and+knockout+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Ophthalmol+%28Lausanne%29%22%5BJournal%5D)">Spatial-temporal comparison of eph/ephrin gene expression in ocular lenses from aging and knockout mice.</a> Front Ophthalmol (Lausanne). 4, 1410860(2024).</li>
<li>Zelenka, P. S., Gao, C. Y., Saravanamuthu, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+and+culture+of+rat+lens+epithelial+explants+for+studying+terminal+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Preparation and culture of rat lens epithelial explants for studying terminal differentiation.</a> J Vis Exp. (31), e1519(2009).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Centrifuge en Rotor</td><td>Fisher Scientific</td><td>14285554PM</td><td></td></tr><tr><td>Chloroform, HPLC-kwaliteit</td><td>Alfa Aesar</td><td>22920</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol (190-proof)</td><td>Decon Labs</td><td>2801</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol (200-proof)</td><td>Fisher BioReagents</td><td>BP2818</td><td></td></tr><tr><td>Fisherbrand Pellet Pestle</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-141-363</td><td></td></tr><tr><td>Forceps, Gebogen; Student Tweezers #7</td><td>World Precision Instruments</td><td>501981</td><td></td></tr><tr><td>Forceps, Recht; Dumont #5</td><td>Fine Science Tools</td><td>11252-40</td><td></td></tr><tr><td>Forceps, Recht; Student Tweezers #4</td><td>World Precision Instruments</td><td>501978</td><td></td></tr><tr><td>Kimwipes, klein</td><td>Kimberly-Clark</td><td>34155</td><td>Gevoelige taakveger</td></tr><tr><td>MicroAmp Adhesive Film Applicator</td><td>Applied Biosystems</td><td>4333183</td><td></td></tr><tr><td>MicroAmp EnduraPlate Optical 96-Well Fast Clear Reactieplaat met Barcode</td><td>Applied Biosystems</td><td>4483485</td><td></td></tr><tr><td>Micropipetten</td><td>Eppendorf</td><td>&nbsp;01-671-120</td><td></td></tr><tr><td>Microscoop, Dissectie</td><td>Carl Zeiss</td><td>SteREO Discovery.V8</td><td></td></tr><tr><td>MiniAmp Optical Adhesive Cover</td><td>Applied Biosystems</td><td>4360954</td><td></td></tr><tr><td>MiniAmp Thermal Cycler</td><td>Applied Biosystems</td><td>A37834</td><td></td></tr><tr><td>MixMate Plate Vortex Mixer</td><td>Eppendorf</td><td>5353000529</td><td></td></tr><tr><td>Moleculair Gegradueerde Water</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP28191</td><td></td></tr><tr><td>Nanodrop One Microvolume UV-Vis Spectrofotometer</td><td>Thermo Scientific</td><td>ND-ONE-W</td><td></td></tr><tr><td>Nunc MicroWell MiniTrays</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-565-154</td><td>Dissectiebakje</td></tr><tr><td>PCR Tubes</td><td>VWR</td><td>201007-012</td><td></td></tr><tr><td>Petrischaal, 60 mm x 15 mm</td><td>Fisher Scientific</td><td>FB0875713A</td><td></td></tr><tr><td>Fosfaatbufferoplossing, 1x Dulbecco's</td><td>Gibco</td><td>14190-136</td><td></td></tr><tr><td>Pipetpunten, 10 &micro;L Gegradueerd</td><td>USA Scientific</td><td>1161-3700</td><td></td></tr><tr><td>Pipetpunten, 1250 &micro;L XL Gegradueerd</td><td>USA Scientific</td><td>1161-1720</td><td></td></tr><tr><td>Pipetpunten, 200 &micro;L Profiel Gegradueerd</td><td>USA Scientific</td><td>1163-1700</td><td></td></tr><tr><td>QuantStudio 3 Real-Time PCR Systeem</td><td>Applied Biosystems</td><td>A28567</td><td></td></tr><tr><td>Reverse Transcriptase, SuperScript IV VILO&nbsp;</td><td>Invitrogen</td><td>11756050</td><td>Hoge processieve en thermostabiele reverse transcriptase</td></tr><tr><td>RNA Clean and Concentrator 5 Kit</td><td>Zymo</td><td>ZR1013</td><td></td></tr><tr><td>RNase-Vrij Water</td><td>Fisher BioReagents</td><td>BP2819</td><td></td></tr><tr><td>RNaseZap</td><td>Sigma</td><td>R2020</td><td>RNase decontaminatieoplossing</td></tr><tr><td>SealRite Microcentrifuge 1,5 mL Buisjes</td><td>USA Scientific</td><td>1615-5500</td><td></td></tr><tr><td>SuperFine Vannas 8 cm</td><td>World Precision Instruments</td><td>501778</td><td>Schaar</td></tr><tr><td>TaqMan FAST Advanced Master Mix voor qPCR</td><td>Applied Biosystems</td><td>4444557</td><td></td></tr><tr><td>TaqMan Gene Expression Assay (FAM) Sonde (MTO)</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>4448892</td><td></td></tr><tr><td>TRIzol</td><td>Invitrogen</td><td>15596026</td><td>Zuur-guanidinium-fenol oplossing</td></tr><tr><td>Vortex Mixer</td><td>Thermo Scientific</td><td>88880017</td><td></td></tr></tbody></table>

rna-isolatie van oculair lensepitheel van muizen en bulkmassa's van vezelcellen

RNA Isolation from Mouse Ocular Lens Epithelium and Fiber Cell Bulk Masses

RNA-isolatie van oculair lensepitheel van muizen en bulkmassa's van vezelcellen

The lens is a specialized, transparent tissue in the anterior chamber of the eye that is comprised of two major cell types, epithelial cells and fiber ...

rna-isolation-from-mouse-ocular-lens-epithelium-fiber-cell-bulk

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

Hier beschrijven we een protocol voor een reproduceerbare laser vangt microdissection (LCM) voor het isoleren van trabecular gevlochten (TM) voor downstream RNA analyse. De mogelijkheid om het analyseren van wijzigingen in genexpressie in het Vertaalgeheugen zal helpen bij het begrijpen van de moleculaire mechanismen van TM-gerelateerde oogbeschadigingen en/of ziekten.

Laser vangt Microdissection voor zeer zuivere Trabecular Zitschalen van muis ogen gen expressie p.a.

De traanklier (LG) heeft twee soorten cellen uitdrukken α-Smooth spier actine (αSMA): Myo cellen (MECs) en pericyten. MECs zijn van ectodermale oorsprong, gevonden in vele klier weefsels, terwijl pericyten zijn vasculaire gladde spiercellen van endodermal oorsprong. Dit protocol isoleert MECs en pericyten van muizen LGs.

Isolatie van Myo cellen van volwassen muizen traan en submandibulaire klieren

Dit protocol beschrijft methoden om perifere, volwassen en nucleaire ooglensvezelcellen voor te bereiden op immunofluorescentiekleuring om complexe cel-tot-cel-interdigitaties en de membraanarchitectuur te bestuderen.

Voorbereiding en immunofluorescentiekleuring van bundels en enkelvoudige vezelcellen uit de cortex en de kern van de ooglens

Dit manuscript schetst een gedetailleerd videoprotocol voor het kweken van primaire lensepitheelcellen (LEC's), met als doel de reproduceerbaarheid te verbeteren en onderzoek naar cataract en posterieure capsule-opacificatie (PCO) te ondersteunen. Het biedt stapsgewijze instructies over lensdissectie, LEC-isolatie en validatie en dient als een waardevolle gids, vooral voor nieuwkomers in het veld.

Optimalisatie van de epitheelcelcultuur van de primaire lens van muizen: een uitgebreide gids voor trypsinisatie

De huidige protocollen beschrijven nieuwe beeldvorming van de hele montering voor de visualisatie van perifere structuren in de oculaire lens met methoden voor beeldkwantificering. Deze protocollen kunnen in onderzoeken worden gebruikt om de relatie tussen lensstructuren op microschaal en de ontwikkeling/functie van lenzen beter te begrijpen.

Beeldvorming van de hele montage om de perifere lensstructuur, celmorfologie en organisatie te visualiseren en te kwantificeren

Dit manuscript beschrijft een gedetailleerd protocol voor het isoleren van retinale gliacellen Müller uit muizenogen. Het protocol begint met enucleatie en dissectie van muizenogen, gevolgd door isolatie, zaaien en kweken van Müller-cellen.

Isolatie van primaire müllercellen van de retinale glia van muizen

Retinaal pigmentepitheel (RPE) fungeert als een cruciale barrière tussen het vaatvlies en het netvlies en bevordert de gezondheid en functie van retinale celtypen, zoals fotoreceptoren. Hierin beschrijven we een eenvoudig en effectief protocol voor het isoleren en kweken van RPE van volwassen muizen.

Een vereenvoudigde methode voor isolatie en kweek van retinale pigmentepitheelcellen van volwassen muizen

We hebben onlangs retinale capillaire verstijving geïdentificeerd als een nieuw paradigma voor retinale disfunctie geassocieerd met diabetes. Dit protocol werkt de stappen uit voor de isolatie van de retinale capillairen van muizen en de subendotheelmatrix uit retinale endotheelculturen, gevolgd door een beschrijving van de stijfheidsmeettechniek met behulp van atoomkrachtmicroscopie.

Isolatie van de retinale capillairen en subendotheliale matrix van muizen voor stijfheidsmeting met behulp van atoomkrachtmicroscopie

Het netvlies vertoont een complexe ruimtelijke organisatie over zijn laminaire structuur. Moderne ruimtelijke transcriptomics en sequencingtechnieken vereisen weefselcoupes &lt; 20 μm dik, waardoor hun toepasbaarheid voor retinaal onderzoek wordt beperkt. Deze vers ingevroren cryosectiemethode produceert dunne delen van het netvlies van de muis met behoud van vlakke ruimtelijke relaties, waardoor uitgebreide moleculaire kartering over laminae mogelijk is.

En gezicht Cryosectie van het netvlies van de muis voor hoogdimensionale ruimtelijke moleculaire analyse

Hier presenteren we een protocol om hoogwaardige single-cell suspensies uit hele muishoornvliezen te verkrijgen via sequentiële vertering met collagenase A en trypsine. Deze methode levert levensvatbare individuele cellen met hoge RNA-integriteit op, waardoor ze compatibel zijn met downstream-toepassingen zoals single-cell RNA-sequencing en flowcytometriey.

Een protocol voor het oogsten van single-cel suspensie uit muizenhoornvliezen

Leer RNA-isolatie van muizenlensepitheel en vezelcellen voor transcriptoomanalyse. Deze methode onthult verschillen in genexpressie tussen celtypen en helpt bij het begrijpen van leeftijdsgerelateerde lenspathologieën.

RNA-isolatie van oculair lensepitheel van muizen en bulkmassa's van vezelcellen

Meer video's verkennen