Name: In vitro Resident geheugen CD8 T-celdifferentiatie met behulp van het epitheliale organoïde-T-cel co-cultuursysteem (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-02-03T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 48 s
Description: Leer CD8-residente geheugen T-celdifferentiatie bestuderen met een epitheliale organoïde-T-cel co-cultuursysteem. Deze methode maakt schaalbaar in vitro onderzoek naar immuniteit in het vrouwelijke reproductieve systeem mogelijk.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Rosato, P. C., Beura, L. K., Masopust, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+resident+memory+T+cells+and+viral+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Virol%22%5BJournal%5D)">Tissue resident memory T cells and viral immunity.</a> Curr Opin Virol. 22, 44-50 (2017).</li>
<li>Park, C. O., Kupper, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+emerging+role+of+resident+memory+T+cells+in+protective+immunity+and+inflammatory+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">The emerging role of resident memory T cells in protective immunity and inflammatory disease.</a> Nat Med. 21, 688-697 (2015).</li>
<li>Schenkel, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resident+memory+CD8+T+cells+trigger+protective+innate+and+adaptive+immune+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Resident memory CD8 T cells trigger protective innate and adaptive immune responses.</a> Science. 346 (6205), 98-101 (2014).</li>
<li>Ariotti, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skin-resident+memory+CD8+%2B+T+cells+trigger+a+state+of+tissue-wide+pathogen+alert%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Skin-resident memory CD8 + T cells trigger a state of tissue-wide pathogen alert.</a> Science. 346 (6205), 101-105 (2014).</li>
<li>Christo, S. N., Park, S. L., Mueller, S. N., Mackay, L. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Multifaceted+Role+of+Tissue-Resident+Memory+T+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">The Multifaceted Role of Tissue-Resident Memory T Cells.</a> Annu Rev Immunol. 42 (1), 317-345 (2024).</li>
<li>Gavil, N. V., Cheng, K., Masopust, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resident+memory+T+cells+and+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Resident memory T cells and cancer.</a> Immunity. 57 (8), 1734-1751 (2024).</li>
<li>Christo, S. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Discrete+tissue+microenvironments+instruct+diversity+in+resident+memory+T+cell+function+and+plasticity%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Immunol%22%5BJournal%5D)">Discrete tissue microenvironments instruct diversity in resident memory T cell function and plasticity.</a> Nat Immunol. 22 (9), 1140-1151 (2021).</li>
<li>Pan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Survival+of+tissue-resident+memory+T+cells+requires+exogenous+lipid+uptake+and+metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Survival of tissue-resident memory T cells requires exogenous lipid uptake and metabolism.</a> Nature. 543, 252-256 (2017).</li>
<li>Hasan, M. H., Beura, L. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+interactions+in+resident+memory+T+cell+establishment+and+function%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Immunol%22%5BJournal%5D)">Cellular interactions in resident memory T cell establishment and function.</a> Curr Opin Immunol. 74, 68-75 (2022).</li>
<li>Ulibarri, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epithelial+organoid+supports+resident+memory+CD8+T+cell+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Epithelial organoid supports resident memory CD8 T cell differentiation.</a> Cell Rep. 43 (8), 114621(2024).</li>
<li>Evrard, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+protein+expression+profiling+resolves+circulating+and+resident+memory+T+cell+diversity+across+tissues+and+infection+contexts%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Single-cell protein expression profiling resolves circulating and resident memory T cell diversity across tissues and infection contexts.</a> Immunity. 56 (7), 1664-1680.e9 (2023).</li>
<li>Borges da Silva, H., Wang, H., Qian, L. J., Hogquist, K. A., Jameson, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ARTC2.2%2FP2RX7+Signaling+during+Cell+Isolation+Distorts+Function+and+Quantification+of+Tissue-Resident+CD8%2B+T+Cell+and+Invariant+NKT+Subsets%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">ARTC2.2/P2RX7 Signaling during Cell Isolation Distorts Function and Quantification of Tissue-Resident CD8+ T Cell and Invariant NKT Subsets.</a> J Immunol. 202 (7), 2153-2163 (2019).</li>
<li>Künzli, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-lived+T+follicular+helper+cells+retain+plasticity+and+help+sustain+humoral+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Immunol%22%5BJournal%5D)">Long-lived T follicular helper cells retain plasticity and help sustain humoral immunity.</a> Sci Immunol. 5 (45), eaay5552(2020).</li>
<li>Kang, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+induced+alveolar+assembloids+with+functional+alveolar-like+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Generation of induced alveolar assembloids with functional alveolar-like macrophages.</a> Nat Commun. 16, 3346(2025).</li>
<li>Lin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+gastrointestinal+assembloids+to+study+the+interplay+between+epithelial+crypts+and+their+mesenchymal+niche%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Establishment of gastrointestinal assembloids to study the interplay between epithelial crypts and their mesenchymal niche.</a> Nat Commun. 14, 3025(2023).</li>
<li>Park, S. E., Georgescu, A., Huh, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoids-on-a-chip%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Organoids-on-a-chip.</a> Science. 364 (6444), 960-965 (2019).</li>
<li>Quintard, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+microfluidic+platform+integrating+functional+vascularized+organoids-on-chip%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">A microfluidic platform integrating functional vascularized organoids-on-chip.</a> Nat Commun. 15, 1452(2024).</li>
<li>Vincenti, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue-resident+memory+CD8%2B+T+cells+cooperate+with+CD4%2B+T+cells+to+drive+compartmentalized+immunopathology+in+the+CNS%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">Tissue-resident memory CD8+ T cells cooperate with CD4+ T cells to drive compartmentalized immunopathology in the CNS.</a> Sci Transl Med. 14 (640), eabl6058(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>16% Paraformaldehyde Aqueous Solution</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>15710-S</td><td></td></tr><tr><td>24-Well Polystyrene Non-Treated Multiple Well Tissuce Culture Plates</td><td>VWR International</td><td>10861-558</td><td></td></tr><tr><td>2-Mercaptoethanol</td><td>Gibco</td><td>21985023</td><td></td></tr><tr><td>3 mL Sterile Syringes</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-955-457</td><td></td></tr><tr><td>5 mL,&nbsp;Snap Cap,&nbsp;Sterile, Round-Bottom Polystyrene Test Tubes</td><td>Falcon</td><td>352058</td><td></td></tr><tr><td>60 mm Petri Dishes</td><td>Fisher Scientific</td><td>FB0875713A&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>70 &mu;m Sterile Cell Strainers</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-363-548</td><td></td></tr><tr><td>96-well Non-treated Polystyrene Round Bottom Microplates</td><td>Greiner Bio-One</td><td>650101</td><td></td></tr><tr><td>96-Well Polystyrene Non-Treated Multiple Well Tissue Culture Plates</td><td>VWR International</td><td>10861-562</td><td></td></tr><tr><td>Albumin bovine/fraction V</td><td>Thermo Scientific Chemicals</td><td>J6465518</td><td></td></tr><tr><td>Ammonium Chloride</td><td>Fisher Scientific</td><td>A661-500</td><td></td></tr><tr><td>Amphotericin B&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A9528-100MG</td><td></td></tr><tr><td>B-27 Supplement</td><td>Gibco</td><td>17504044</td><td></td></tr><tr><td>ioTek Cytation 5 Cell Imaging Multimode Reader</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F12 1:1 Medium</td><td>Cytiva</td><td>SH30271.FS</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco's Phosphate-Buffered Salt Solution 1x</td><td>Corning</td><td>21031CV</td><td></td></tr><tr><td>Ethylenediaminetetraacetic Acid (0.5 M Solution/pH 8.0)</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP2482-500</td><td></td></tr><tr><td>Extra Fine Micro Dissecting Scissors</td><td>Roboz Surgical Instrument Co.</td><td>RS-5882</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Bovine Serum - Charcoal/Dextran Treated</td><td>R&amp;D Systems</td><td>S11650</td><td></td></tr><tr><td>Flowjo v10 software</td><td>Becton, Dickinson and Company</td><td>FlowJo (RRID:SCR_008520)</td><td></td></tr><tr><td>Graefe Forceps</td><td>Roboz Surgical Instrument Co.</td><td>RS-5135</td><td></td></tr><tr><td>HEPES Solution</td><td>Cytiva</td><td>SH30237.01</td><td></td></tr><tr><td>L-Glutamine (200 mM)</td><td>Gibco</td><td>A2916801</td><td></td></tr><tr><td>Magnet 5mL</td><td>Biolegend</td><td>480019</td><td></td></tr><tr><td>Mouse CD8 Na&iuml;ve T Cell Isolation Kit</td><td>Biolegend</td><td>480044</td><td></td></tr><tr><td>Mouse EGF Recombinant Protein</td><td>Gibco</td><td>315091MG</td><td></td></tr><tr><td>Non-Essential Amino Acids Solution (100x)</td><td>Gibco</td><td>11140050</td><td></td></tr><tr><td>Penicillin-Streptomycin solution</td><td>Cytiva</td><td>SV30010</td><td></td></tr><tr><td>Potassium Bicarbonate</td><td>MP Biomedicals</td><td>0215255780</td><td></td></tr><tr><td>Purified anti-mouse CD3&epsilon; Antibody</td><td>Biolegend</td><td>100360</td><td></td></tr><tr><td>Recombinant Mouse B7.1 (CD80)-Fc Chimera (carrier-free)</td><td>Biolegend</td><td>555406</td><td></td></tr><tr><td>Recombinant Mouse IL-12 (p70) (carrier-free)</td><td>Biolegend</td><td>577004</td><td></td></tr><tr><td>Recombinant Mouse IL-2 (carrier-free)</td><td>Biolegend</td><td>575406</td><td></td></tr><tr><td>Reduced Growth Factor Basement Membrane Extract</td><td>R&amp;D Systems</td><td>BME001-10</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640 Media</td><td>Cytiva</td><td>SH30027.LS</td><td></td></tr><tr><td>Sodium Azide</td><td>Fisher Scientific</td><td>S227I-25</td><td></td></tr><tr><td>Sodium Pyruvate (100 mM)</td><td>Gibco</td><td>11360070</td><td></td></tr><tr><td>Trypsin 0.25% protease with porcine trypsin</td><td>Cytiva</td><td>SH30042.02</td><td></td></tr><tr><td>Viability Dye (Red 780)</td><td>Cytek Biosciences</td><td>13-0865-T100</td><td></td></tr></tbody></table>

in vitro resident geheugen cd8 t-celdifferentiatie met behulp van het epitheliale organoïde-t-cel co-cultuursysteem

In Vitro Resident Memory CD8 T Cell Differentiation Using Epithelial Organoid-T Cell Co-culture System

In vitro Resident geheugen CD8 T-celdifferentiatie met behulp van het epitheliale organoïde-T-cel co-cultuursysteem

Barrier mucosal tissues play an important role in the differentiation and function of resident T cells. Among the diverse cell populations within these ...

in-vitro-resident-memory-cd8-t-cell-differentiation-using-epithelial

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie en Infectie

Dit protocol legt de primaire Lgr5-positve organoïde cultuur en de daaropvolgende prestaties van retrovirale transductie. Dit maakt Cre-induceerbare overexpressie of knock-down van de geleverde transgen en maakt de functionele studies die in de roman worden uitgevoerd in vitro organotypisch   modelsysteem.

Een video Protocol van retrovirale infectie in het jeugdwerk Intestinale organoïde Cultuur

Muis embryonale stamcellen kunnen in vitro worden gedifferentieerd tot T-cellen met behulp van het OP9-DL1 co-cultuursysteem. Succes bij deze procedure vereist zorgvuldige aandacht voor reagens/celonderhoud en belangrijke techniekgevoelige stappen. Hier bespreken we deze kritieke parameters en bieden we een gedetailleerd protocol om de adoptie van deze technologie te stimuleren.

Afleiding van T cellen In Vitro Van muis embryonale stamcellen

We beschrijven een methode om humane enteroïden te kweken uit kleine darmcrypten en colonoïden uit coloncrypten die zijn verzameld uit zowel chirurgisch weefsel als biopsieën. In dit methodologische artikel presenteren we de kweekmodaliteiten die essentieel zijn voor het succesvolle groeien en onderhouden van humane enteroïden en colonoïden.

Oprichting van Human Epithelial Enteroids en Colonoids van Whole Tissue en Biopsie

Het bestuderen van medullaire thymische epitheelcellen in vitro is grotendeels onsuccesvol geweest, omdat huidige 2D-kweeksystemen het in vivo scenario niet nabootsen. Het 3D-kweeksysteem dat hierin wordt beschreven - een gemodificeerd organotypisch model voor huidcultuur - heeft zich superieur getoond in het nadoen van mTEC-proliferatie, differentiatie en het behoud van promiscue genregulatie.

3D Organotypische Co-cultuur Model Supporting Medullary Thymic epitheelcelproliferatie, Differentiatie en Promiscuous Gene Expression

Dit artikel beschrijft een nieuwe methode voor het genereren van tumor antigeen-specifieke geïnduceerde pluripotente stamcel afkomstige Thymus emigants (iTE) door een driedimensionaal (3D) Thymus cultuur systeem. iET zijn een homogene deelverzameling van T-cellen die nauw verwant zijn aan naïeve T-cellen met de capaciteit voor proliferatie, Geheugenvorming en tumor onderdrukking.

Een driedimensionaal Thymic cultuur systeem voor het genereren van Murine geïnduceerde pluripotente stamcel afkomstige tumor antigen-specifieke Thymic emigranten

Met behulp van scriptingregel cultuur systemen, wij brengen verslag een in vitro B-cel plasma cel differentiatie model.

In Vitro differentiatie Model van menselijke normale B geheugencellen te langlevende plasmacellen

Hier beschrijven we de voorbereiding van van menselijke organoïden afgeleide intestinale epitheliale monolagen voor het bestuderen van de darmbarrièrefunctie, permeabiliteit en transport. Omdat organoïden de oorspronkelijke reactie van epitheelweefsel op externe stimuli vertegenwoordigen, combineren deze modellen de voordelen van uitbreidbaarheid van cellijnen en de relevantie en complexiteit van primair weefsel.

Organoïde-afgeleide epitheliale monolaag: een klinisch relevant in vitro model voor de darmbarrièrefunctie

Dit protocol biedt gedetailleerde instructies voor het vaststellen van muriene dunne darm organoïden, het isoleren van type-1 aangeboren lymfoïde cellen uit de muriene dunne darm lamina propria, en het vaststellen van 3-dimensionale (3D) co-culturen tussen beide celtypen om bi-directionele interacties tussen intestinale epitheelcellen en type-1 aangeboren lymfoïde cellen te bestuderen.

Co-cultuur van murine dunne darm epitheliale organoïden met aangeboren lymfoïde cellen

Het protocol beschrijft een methode voor het creëren van een van patiënten afgeleid organoïdemodel voor colorectale kanker (CRC), gekweekt in co-cultuur met tumor-infiltrerende lymfocyten (TIL's) om hun interacties en therapeutisch potentieel te bestuderen. Dit model biedt een preklinisch platform om immuunresponsen in de micro-omgeving van de tumor te onderzoeken en om de werkzaamheid van op TIL gebaseerde therapie voor gepersonaliseerde CRC-behandeling te voorspellen.

Oprichting van een co-cultuursysteem van patiënt-afgeleide colorectale tumororganoïden en tumor-infiltrerende lymfocyten (TIL's)

Dit protocol biedt een in vitro co-kweekstrategie om de effecten van regulerende T-cellen op de proliferatie en differentiatie van effector T-cellen te onderzoeken.

In vitro Functionele analyse van regulerende T-cellen: Focus op proliferatie en differentiatie

Leer CD8-residente geheugen T-celdifferentiatie bestuderen met een epitheliale organoïde-T-cel co-cultuursysteem. Deze methode maakt schaalbaar in vitro onderzoek naar immuniteit in het vrouwelijke reproductieve systeem mogelijk.

In vitro Resident geheugen CD8 T-celdifferentiatie met behulp van het epitheliale organoïde-T-cel co-cultuursysteem

Meer video's verkennen