14 oktober 2025
Het doel van dit protocol is om vliegoefeningen te bieden voor de fruitvlieg Drosophila. Representatieve resultaten tonen aan dat vliegtraining resulteert in een verhoogde aerobe capaciteit en weerstand tegen een vetrijk dieet.
Ons onderzoek richt zich op transgenerationele vatbaarheid voor neurologische en metabole aandoeningen. We onderzoeken moleculaire mechanismen, specifiek bio-energetische veranderingen die vatbaarheid over generaties kunnen overdragen. Omics-technieken zoals transcriptomics, proteomics en metabolomics kunnen helpen de mechanismen en oorzaken van neurodegeneratieve aandoeningen te identificeren.
Om te beginnen houd je de Drosophila-vliegen in een broedmachine of kamer die op 24 graden Celsius wordt gehouden, met 60% luchtvochtigheid en een licht-donkercyclus van 12 uur. Verzamel leeftijdsgematchte vliegen binnen drie tot vier dagen na de eclosie. Wijs de vliegen willekeurig toe aan bewegings- en zittende groepen.
Geef beide groepen zeven milliliter voer en gebruik tape om de flesjes in de kommen vast te zetten. Als de luchtvochtigheid niet onder controle is, zorg dan voor watertoegang door flesjes natte katoen in de kommen te plaatsen en deze aan de wanden van de kom te plakken. Vliegen worden één dag voor het begin van het trainingsschema in de kommen overgebracht.
Bedek de openingen van de kommen met gaas en maak het vast met elastiekjes. Voer de training uit in een ruimte die op 24 graden Celsius wordt gehouden met 60% luchtvochtigheid. Bevestig de kommen aan het oefenplatform met bungee-koorden.
Gebruik twee timers om de motor te bedienen. Stel de eerste timer in om de machine om 8:00 uur te starten en stop hem om 15:00 uur elke dag.
Programmeer de tweede timer om elke vijf minuten een reeks van drie motoromwentelingen te activeren. Elke omwenteling moet het platform omhoog en omlaag laten zakken, waardoor de vliegen vliegen vliegen. Aan het einde van het FLEX-regime plaats je de bowls vijf minuten in een koelruimte om de vliegen te immobiliseren.
Vervolgens worden de vliegen overgebracht in nieuwe voedselflesjes voor fenotypische analyse of in microcentrifugebuizen voor moleculaire of biochemische tests. Het vijfdaagse vliegtrainingsregime verminderde de sterfte bij vliegen op een westerse dieet aanzienlijk. Vliegoefeningen verbeterden ook het klimvermogen bij westerse vliegen die met voeding gevoed waren.
Het maximale zuurstofverbruik tijdens complex-één-ondersteunde ademhaling werd met 42% verminderd in de vliegspieren van westerse vliegen met dieet vergeleken met controles, maar werd hersteld bij vliegen uit de westerse dieet- plus bewegingsgroep. Nakomelingen van vaders die met westers gevoed waren, vertoonden aanzienlijk meer voedende likken dan andere groepen, terwijl vaderlijke beweging deze toename tenietdeed. We ontdekten dat het westerse dieet van het vaderlijke dieet het fenotype van het nageslacht herprogrammeert, inclusief veranderingen in activiteit, leren en geheugen, en voedingsgedrag.
Veel protocollen zijn afhankelijk van gedwongen klimgedrag. Vliegoefening is fysiologischer en leidt niet tot blessures. Dit protocol zal meer fysiologische oefeningen gebruiken die aanzienlijke bio-energetische behoeften genereren en blessures minimaliseren.
Bekijk het volledige transcript en krijg toegang tot duizenden wetenschappelijke video's
Dit protocol beschrijft vliefoefeningen voor de fruitvlieg Drosophila, met als doel de aerobe capaciteit en de resistentie tegen vetrijke diëten te verhogen. De studie onderzoekt de moleculaire mechanismen die ten grond liggen aan de transgenerationele vatbaarheid voor neurologische en metabole aandoeningen.
Het vestigen van fysiologisch relevante exercise-modellen in Drosophila maakt een robuuste analyse van metabole en neurologische ziektemechanismen mogelijk, wat het voorspellende vertrouwen bij de validatie van targets in een vroeg stadium ondersteunt. Het vermogen van het FLEX-protocol om natuurlijk vliegonderzoek op te wekken zonder letsel vergroot het translationele nut van Drosophila voor het bestuderen van interacties tussen genen, dieet en beweging, alsof the transgenerationele metabole risico's. Deze schaalbare aanpak verbetert de besluitvorming over het portfolio door reproduceerbare, kwantitatieve fenotypes te leveren voor mechanistische risicoreductie en vergelijking tussen verschillende studies.
Het FLEX-protocol integreert in het continuüm van ontdekking naar preklinisch onderzoek door hypothese-gestuurde toetsing van interacties tussen genen, dieet en lichaamsbeweging mogelijk te maken en ondersteuning te bieden voor downstream omics-analyses.