Name: Een eenvoudige microaspiratietechniek om somatische cellen te isoleren uit gecryopreserveerd paardenzaad als nucleaire donoren voor klonen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-12-19T13:05:00.000+00:00
Duration: 4 min 36 s
Description: Leer een microaspiratietechniek om somatische cellen te isoleren uit gecryopreserveerd paardenzaad. Deze methode vermijdt lange kweektijden en spermacontaminatie voor direct gebruik in klonen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Pandey, A., Gupta, S. C., Gupta, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+potential+of+cultured+skin+fibroblast%2C+cumulus%2C+and+granulosa+cell+to+produce+somatic+cell+nuclear+transfer+%28SCNT%29+preimplantation+embryos+in+buffaloes+%28Bubalus+bubalis%29+in+relation+to+gene+expressions%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Reprogram%22%5BJournal%5D)">Comparative potential of cultured skin fibroblast, cumulus, and granulosa cell to produce somatic cell nuclear transfer (SCNT) preimplantation embryos in buffaloes (Bubalus bubalis) in relation to gene expressions.</a> Cell Reprogram. 12 (3), 357-368 (2010).</li>
<li>Galli, C., Duchi, R., Moor, R. M., Lazzari, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mammalian+leukocytes+contain+all+the+genetic+information+necessary+for+the+development+of+a+new+individual%5BTitle%5D)+AND+%22Cloning%22%5BJournal%5D)">Mammalian leukocytes contain all the genetic information necessary for the development of a new individual.</a> Cloning. 1 (3), 161-170 (1999).</li>
<li>Olsson, P. O., Yeonwoo, J., Park, K., Yoo, Y. M., Hwang, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+births+from+urine+derived+cells%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Live births from urine derived cells.</a> PLoS One. 18 (1), e0278607(2023).</li>
<li>Vignon, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+potential+of+bovine+embryos+reconstructed+from+enucleated+matured+oocytes+fused+with+cultured+somatic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22C+R+Acad+Sci+III%22%5BJournal%5D)">Developmental potential of bovine embryos reconstructed from enucleated matured oocytes fused with cultured somatic cells.</a> C R Acad Sci III. 321 (9), 735-745 (1998).</li>
<li>Nel-Themaat, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation%2C+culture+and+characterisation+of+somatic+cells+derived+from+semen+and+milk+of+endangered+sheep+and+eland+antelope%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Fertil+Dev%22%5BJournal%5D)">Isolation, culture and characterisation of somatic cells derived from semen and milk of endangered sheep and eland antelope.</a> Reprod Fertil Dev. 19 (4), 576-584 (2007).</li>
<li>Kjelland, M. E., Liu, J., Hyatt, D., Kraemer, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collection%2C+isolation%2C+and+culture+of+somatic+cells+from+avian+semen%5BTitle%5D)+AND+%22Avian+Biol+Res%22%5BJournal%5D)">Collection, isolation, and culture of somatic cells from avian semen.</a> Avian Biol Res. 6 (4), 255-260 (2013).</li>
<li>Nel-Themaat, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cloned+embryos+from+semen.+Part+1%3A+in+vitro+proliferation+of+epithelial+cells+on+embryonic+fibroblasts+after+isolation+from+semen+by+gradient+centrifugation%5BTitle%5D)+AND+%22Cloning+Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Cloned embryos from semen. Part 1: in vitro proliferation of epithelial cells on embryonic fibroblasts after isolation from semen by gradient centrifugation.</a> Cloning Stem Cells. 10 (1), 143-160 (2008).</li>
<li>Liu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+culture+systems+for+attachment+and+proliferation+of+epithelial+cells+cultured+from+ovine+semen%5BTitle%5D)+AND+%22Anim+Reprod+Sci%22%5BJournal%5D)">Evaluation of culture systems for attachment and proliferation of epithelial cells cultured from ovine semen.</a> Anim Reprod Sci. 115 (1-4), 49-57 (2009).</li>
<li>Liu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Embryo+production+and+possible+species+preservation+by+nuclear+transfer+of+somatic+cells+isolated+from+bovine+semen%5BTitle%5D)+AND+%22Theriogenology%22%5BJournal%5D)">Embryo production and possible species preservation by nuclear transfer of somatic cells isolated from bovine semen.</a> Theriogenology. 74 (9), 1629-1635 (2010).</li>
<li>Saini, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+culture+of+epithelial+cells+from+stored+buffalo+semen+and+their+use+for+the+production+of+cloned+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Fertil+Dev%22%5BJournal%5D)">Isolation and culture of epithelial cells from stored buffalo semen and their use for the production of cloned embryos.</a> Reprod Fertil Dev. 31 (10), 1581-1588 (2019).</li>
<li>Brom-de-Luna, J. G., Canesin, H. S., Wright, G., Hinrichs, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Culture+of+somatic+cells+isolated+from+frozen-thawed+equine+semen+using+fluorescence-assisted+cell+sorting%5BTitle%5D)+AND+%22Anim+Reprod+Sci%22%5BJournal%5D)">Culture of somatic cells isolated from frozen-thawed equine semen using fluorescence-assisted cell sorting.</a> Anim Reprod Sci. 190, 10-17 (2018).</li>
<li>Ramos, B., Rodríguez, A. A., Rosales, A. M., Montiel, A. J., Hernández, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+somatic+cell+populations+in+cryopreserved+equine+semen+as+a+source+of+donor+nuclei+for+somatic+cloning%3A+preliminary+results%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Fertil+Dev%22%5BJournal%5D)">Identification of somatic cell populations in cryopreserved equine semen as a source of donor nuclei for somatic cloning: preliminary results.</a> Reprod Fertil Dev. 37 (1), (2025).</li>
<li>Moulavi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interspecies+somatic+cell+nuclear+transfer+in+Asiatic+cheetah+using+nuclei+derived+from+post-mortem+frozen+tissue+in+absence+of+cryo-protectant+and+in+vitro+matured+domestic+cat+oocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Theriogenology%22%5BJournal%5D)">Interspecies somatic cell nuclear transfer in Asiatic cheetah using nuclei derived from post-mortem frozen tissue in absence of cryo-protectant and in vitro matured domestic cat oocytes.</a> Theriogenology. 90, 197-203 (2017).</li>
<li>Wakayama, S., Ito, D., Ooga, M., Wakayama, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production+of+mouse+offspring+from+zygotes+fertilized+with+freeze-dried+spermatids%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Production of mouse offspring from zygotes fertilized with freeze-dried spermatids.</a> Sci Rep. 12 (1), 18430(2022).</li>
<li>Wakayama, S., Ito, D., Hayashi, E., Ishiuchi, T., Wakayama, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Healthy+cloned+offspring+derived+from+freeze-dried+somatic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Healthy cloned offspring derived from freeze-dried somatic cells.</a> Nat Commun. 13 (1), 3666(2022).</li>
<li>Loi, P., Fulka, J., Hildebrand, T., Ptak, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome+of+non-living+cells%3A+Trash+or+recycle%5BTitle%5D)+AND+%22Reproduction%22%5BJournal%5D)">Genome of non-living cells: Trash or recycle.</a> Reproduction. 142 (4), 497-503 (2011).</li>
<li>Wakayama, S., Wakayama, T., Wells, D. N. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWakayama%2C+S+%22Encyclopedia+of+Life+Sciences%22">Encyclopedia of Life Sciences</a>. , 1-10 (2023).</li>
<li>Lanza, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extension+of+cell+life-span+and+telomere+length+in+animals+cloned+from+senescent+somatic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Extension of cell life-span and telomere length in animals cloned from senescent somatic cells.</a> Science. 288, 665-669 (2000).</li>
<li>González-Bermúdez, B., Guinea, G. V., Plaza, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+micropipette+aspiration%3A+applications+in+cell+biomechanics%2C+models%2C+and+extended+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">Advances in micropipette aspiration: applications in cell biomechanics, models, and extended studies.</a> Biophys J. 116 (4), 587-594 (2019).</li>
<li>Hochmuth, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micropipette+aspiration+of+living+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomech%22%5BJournal%5D)">Micropipette aspiration of living cells.</a> J Biomech. 33 (1), 15-22 (2000).</li>
<li>Vajta, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production+of+a+healthy+calf+by+somatic+cell+nuclear+transfer+without+micromanipulators+and+carbon+dioxide+incubators+using+the+handmade+cloning+%28HMC%29+and+the+submarine+incubation+system+%28SIS%29%5BTitle%5D)+AND+%22Theriogenology%22%5BJournal%5D)">Production of a healthy calf by somatic cell nuclear transfer without micromanipulators and carbon dioxide incubators using the handmade cloning (HMC) and the submarine incubation system (SIS).</a> Theriogenology. 62 (8), 1465-1472 (2004).</li>
<li>Alteri, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Revisiting+embryo+assisted+hatching+approaches%3A+A+systematic+review+of+the+current+protocols%5BTitle%5D)+AND+%22J+Assist+Reprod+Genet%22%5BJournal%5D)">Revisiting embryo assisted hatching approaches: A systematic review of the current protocols.</a> J Assist Reprod Genet. 35 (3), 367-391 (2018).</li>
<li>Briski, O., Salamone, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Past%2C+present+and+future+of+ICSI+in+livestock+species%5BTitle%5D)+AND+%22Anim+Reprod+Sci%22%5BJournal%5D)">Past, present and future of ICSI in livestock species.</a> Anim Reprod Sci. 246, 106925(2022).</li>
<li>Wall, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pronuclear+microinjection%5BTitle%5D)+AND+%22Cloning+Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Pronuclear microinjection.</a> Cloning Stem Cells. 3 (4), 209-220 (2001).</li>
<li>Selokar, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hope+for+restoration+of+dead+valuable+bulls+through+cloning+using+donor+somatic+cells+isolated+from+cryopreserved+semen%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Hope for restoration of dead valuable bulls through cloning using donor somatic cells isolated from cryopreserved semen.</a> PLoS One. 9 (3), e90755(2014).</li>
<li>Selokar, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Buffalo+%28Bubalus+bubalis%29+SCNT+embryos+produced+from+somatic+cells+isolated+from+frozen-thawed+semen%3A+Effect+of+trichostatin+A+on+the+in+vitro+and+in+vivo+developmental+potential%2C+quality+and+epigenetic+status%5BTitle%5D)+AND+%22Zygote%22%5BJournal%5D)">Buffalo (Bubalus bubalis) SCNT embryos produced from somatic cells isolated from frozen-thawed semen: Effect of trichostatin A on the in vitro and in vivo developmental potential, quality and epigenetic status.</a> Zygote. 24 (4), 549-553 (2016).</li>
<li>Guevorkian, K., Maître, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micropipette+aspiration%3A+A+unique+tool+for+exploring+cell+and+tissue+mechanics+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Micropipette aspiration: A unique tool for exploring cell and tissue mechanics in vivo.</a> Methods Cell Biol. 139, 187-201 (2017).</li>
<li>Duah, E. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production+of+hand-made+cloned+buffalo+%28Bubalus+bubalis%29+embryos+from+nonviable+somatic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22In+Vitro+Cell+Dev+Biol+Anim%22%5BJournal%5D)">Production of hand-made cloned buffalo (Bubalus bubalis) embryos from nonviable somatic cells.</a> In Vitro Cell Dev Biol Anim. 52 (10), 983-988 (2016).</li>
<li>Loi, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nuclei+of+nonviable+ovine+somatic+cells+develop+into+lambs+after+nuclear+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Reprod%22%5BJournal%5D)">Nuclei of nonviable ovine somatic cells develop into lambs after nuclear transplantation.</a> Biol Reprod. 67 (1), 126-132 (2002).</li>
<li>Fahrudin, M., Otoi, T., Suzuki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+competence+of+bovine+embryos+reconstructed+by+the+transfer+of+somatic+cells+derived+from+frozen+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vet+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Developmental competence of bovine embryos reconstructed by the transfer of somatic cells derived from frozen tissues.</a> J Vet Med Sci. 63 (10), 1151-1154 (2001).</li>
<li>Podico, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-layer+colloid+centrifugation+as+a+method+to+process+urine-contaminated+stallion+semen+after+freezing-thawing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Equine+Vet+Sci%22%5BJournal%5D)">Single-layer colloid centrifugation as a method to process urine-contaminated stallion semen after freezing-thawing.</a> J Equine Vet Sci. 87, 102910(2020).</li>
<li>Zhang, Y. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+porcine+urine-derived+cells+as+nuclei+donor+for+somatic+cell+nuclear+transfer%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vet+Sci%22%5BJournal%5D)">Evaluation of porcine urine-derived cells as nuclei donor for somatic cell nuclear transfer.</a> J Vet Sci. 23 (2), e40(2022).</li>
<li>Mizutani, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+cloned+mice+and+nuclear+transfer+embryonic+stem+cell+lines+from+urine-derived+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Generation of cloned mice and nuclear transfer embryonic stem cell lines from urine-derived cells.</a> Sci Rep. 6, 23808(2016).</li>
<li>Long, S., Kenworthy, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Round+cells+in+diagnostic+semen+analysis%3A+a+guide+for+laboratories+and+clinicians%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Biomed+Sci%22%5BJournal%5D)">Round cells in diagnostic semen analysis: a guide for laboratories and clinicians.</a> Br J Biomed Sci. 79, 10129(2022).</li>
<li>Johanisson, E., Campana, A., Luthi, R., de Agostini, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+%27round+cells%27+in+semen+analysis%3A+a+comparative+study%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Reprod+Update%22%5BJournal%5D)">Evaluation of 'round cells' in semen analysis: a comparative study.</a> Hum Reprod Update. 6 (4), 404-412 (2000).</li>
<li>Graber, M., Lane, B., Lamia, R., Pastoriza-Munoz, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bubble+cells%3A+Renal+tubular+cells+in+the+urinary+sediment+with+characteristics+of+viability%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Soc+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Bubble cells: Renal tubular cells in the urinary sediment with characteristics of viability.</a> J Am Soc Nephrol. 1 (7), 999-1004 (1991).</li>
<li>Rahmanian, N., Bozorgmehr, M., Torabi, M., Akbari, A., Zarnani, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+separation%3A+Potentials+and+pitfalls%5BTitle%5D)+AND+%22Prep+Biochem+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Cell separation: Potentials and pitfalls.</a> Prep Biochem Biotechnol. 47 (1), 38-51 (2017).</li>
<li>Håård, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+frozen+stallion+semen+in+Europe%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Vet+Scand+Suppl%22%5BJournal%5D)">Use of frozen stallion semen in Europe.</a> Acta Vet Scand Suppl. 88, 123-127 (1992).</li>
<li>Klug, E., Treu, H., Hillmann, H., Heinze, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Results+of+insemination+of+mares+with+fresh+and+frozen+stallion+semen%5BTitle%5D)+AND+%22J+Reprod+Fertil+Suppl%22%5BJournal%5D)">Results of insemination of mares with fresh and frozen stallion semen.</a> J Reprod Fertil Suppl. 23, 107-110 (1975).</li>
<li>Pukazhenthi, B., Comizzoli, P., Travis, A. J., Wildt, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+emerging+technologies+to+the+study+and+conservation+of+threatened+and+endangered+species%5BTitle%5D)+AND+%22Reprod+Fertil+Dev%22%5BJournal%5D)">Applications of emerging technologies to the study and conservation of threatened and endangered species.</a> Reprod Fertil Dev. 18 (1-2), 77-90 (2006).</li>
<li>Swanson, W. F., Magarey, G. M., Herrick, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sperm+cryopreservation+in+endangered+felids%3A+developing+linkage+of+in+situ-ex+situ+populations%5BTitle%5D)+AND+%22Soc+Reprod+Fertil+Suppl%22%5BJournal%5D)">Sperm cryopreservation in endangered felids: developing linkage of in situ-ex situ populations.</a> Soc Reprod Fertil Suppl. 65, 417-432 (2007).</li>
<li>Lagutina, I., Fulka, H., Lazzari, G., Galli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interspecies+somatic+cell+nuclear+transfer%3A+Advancements+and+problems%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Reprogram%22%5BJournal%5D)">Interspecies somatic cell nuclear transfer: Advancements and problems.</a> Cell Reprogram. 15 (5), 374-384 (2013).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>2 beta Mercaptoethanol</td><td>SIGMA</td><td>M7522</td><td>Somatisch celcultuur</td></tr><tr><td>1x DPBS</td><td>GIBCO</td><td>REF-21600010</td><td>Somatisch cel manipulatie</td></tr><tr><td>Absolute ethanol</td><td>HYCEL</td><td>EL CRISOL 50181-1L73</td><td>Voor het vervaardigen van pipetten</td></tr><tr><td>Antibioticum-antimycoticum 100x</td><td>INVITRO SA. M&eacute;xico</td><td></td><td>Somatisch celcultuur</td></tr><tr><td>Borosilicaat haarvaten (1,0 mm O.D. &times; 0,78 mm I.D. &times; 100 mm Lengte)</td><td>HARVARD APPARATUS, USA</td><td>EC1-30-0035</td><td>Voor het vervaardigen van pipetten</td></tr><tr><td>BSA</td><td>SIGMA</td><td>A3311</td><td>Somatisch celcultuur</td></tr><tr><td>DMEM/F12 medium</td><td>GIBCO</td><td>REF-12500-062</td><td>Somatisch celcultuur</td></tr><tr><td>Cryo-bewaarde paarden sperma monster</td><td></td><td></td><td>De cryo-bewaarde sperma monsters werden verkregen van een commerciële distributeur en waren al meer dan 19 jaar in vloeibare stikstof bewaard. Alle bevroren paarden sperma monsters werden verkregen van commerciële distributeurs die geautoriseerd waren door de relevante veterinaire autoriteiten in Mexico, in overeenstemming met de Mexicaanse officiële norm NOM-027-ZOO-1995, Zoösanitaire Proces van Sperma van Huisdieren.</td></tr><tr><td>Oogstuk</td><td></td><td>Hulpmiddel voor het vervaardigen van pipetten</td><td>Vereist materiaal</td></tr><tr><td>Fetaal runder serum</td><td>GIBCO</td><td>REF-26140-079</td><td>Somatisch celcultuur</td></tr><tr><td>Fluorwaterstofzuur</td><td>SIGMA-ALDRICH</td><td>339261</td><td>Voor het vervaardigen van pipetten</td></tr><tr><td>Inverteerbare optische microscoop</td><td>Eclipse, TE 200</td><td>NIKON</td><td>Micromanipulatie van somatische cellen</td></tr><tr><td>Laboratorium droger</td><td></td><td>Hulpmiddel voor het vervaardigen van pipetten</td><td>Vereist materiaal</td></tr><tr><td>Microsoldeertoestel</td><td></td><td>Hulpmiddel voor het vervaardigen van pipetten</td><td>Vereist materiaal</td></tr><tr><td>Micromanipulatorset voor Inverteerbare Microscoop</td><td></td><td>Micromanipulatie van cellen</td><td>Vereist materiaal</td></tr><tr><td>Micropipet aftrekker</td><td>P-97, SUTTER INSTRUMENT</td><td>Hulpmiddel voor het vervaardigen van pipetten</td><td>Gebruik de volgende instellingen&mdash;Verwarming: 720; Trek: 30; Snelheid: 50; Tijd: 220; Druk</td></tr><tr><td>Mineraal olie</td><td>SIGMA</td><td>M8410</td><td>Somatisch cel manipulatie</td></tr><tr><td>Nunclon cel cultuur schaaltjes, diam. &times; H 35 mm &times; 10 mm</td><td>NUNCLON</td><td>Nunc 153066</td><td></td></tr><tr><td>PVA</td><td>SIGMA</td><td>P8136</td><td>Somatisch celcultuur</td></tr><tr><td>PVP</td><td>SIGMA</td><td>P5288</td><td>Somatisch celcultuur</td></tr><tr><td>Trypan blauw oplossing 0,4%</td><td>GIBCO</td><td>REF- 15250061</td><td>Cel kleurstof</td></tr></tbody></table>

een eenvoudige microaspiratietechniek om somatische cellen te isoleren uit gecryopreserveerd paardenzaad als nucleaire donoren voor klonen

A Simple Microaspiration Technique for Isolating Somatic Cells from Cryopreserved Equine Semen as Nuclear Donors for Cloning

Tabel 1 toont aan dat de microaspiratietechniek somatische cellen efficiënt terugwint uit cryopreserved equine sperma, met vangstsnelheden variërend van 317,7 ± 9,60 tot 424,7 ± 33,65 cellen per uur over drie hengsten. Hengst #03 had de hoogste opbrengst, wat de effectiviteit van de methode aantoonde, zelfs met langdurig opgeslagen monsters. De gegevens geven aan dat de techniek consequent en effectief somatische cellen van sperma isoleert, en de gemiddelde vangstsnelhede...

Een eenvoudige microaspiratietechniek om somatische cellen te isoleren uit gecryopreserveerd paardenzaad als nucleaire donoren voor klonen

Semen is a complex fluid that, in addition to spermatozoa, contains other cell populations, including immune cells, immature male germ cells, epithelial ...

a-simple-microaspiration-technique-for-isolating-somatic-cells-from

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

Deze film en het protocol zijn bedoeld om te leren nucleaire transfer.

Nuclear Transfer naar Mouse Eicellen

Cardiale kernen worden geïsoleerd via dichtheid sedimentatie en immunolabeled met antilichamen tegen pericentriolar materiaal 1 (PCM-1) te identificeren en cardiomyocyten kernen sorteren op flowcytometrie.

Isolatie van cardiomyocyten Kernen van Post-mortem weefsel

Een nieuw protocol voor de mechanische voorbehandeling van testiculaire celsuspensies van knaagdieren materiaal vermijden enzymen en wasmiddelen wordt beschreven. De methode is eenvoudig, snel, reproduceerbaar en maakt goede kwaliteit celsuspensies, die geschikt zijn voor flow sorteren en RNA-extractie zijn.

Eenvoudige en doeltreffende techniek voor de bereiding van testikels Cell Schorsingen

MicroSecure Vitrification werd ontwikkeld als een niet-commercieel, aseptisch gesloten vitrificatieapparaatsysteem dat voldoet aan de FDA-normen voor goede fabricage- en weefselverwerkingspraktijken. Vanwege de terugtrekking van hydrofobe embryo-strohalmen met pluggen uit de industrie, werd de vitrificatieprocedure aangepast om een binnenste afdichting op te nemen vóór de standaard interne katoenen plug.

Gewijzigd MicroSecure Vitrificatie: Een veilige, eenvoudige en zeer effectieve cryopreservatie Procedure for Human Blastocysten

Dit protocol beschrijft cloaca massage, een niet-invasieve handmatige techniek voor het verzamelen van sperma van vogels, en DNA-extractie van aviaire-sperma met behulp van een commerciële winning kit met wijzigingen.

Aviaire-sperma door cloaca Massage en isolatie van DNA van sperma

We beschrijven een dramatisch verbeterde methode voor het klonen van de muis met trichostatin A, vitamine C en gedeïoniseerd bovien serumalbumine. Laten we een vereenvoudigde, reproduceerbare protocol dat efficiënte ontwikkeling van gekloonde embryo's wordt ondersteund. Vandaar, zou deze methode worden een gestandaardiseerde procedure voor het klonen van de muis.

Combinatorische behandelingvan Trichostatin A en vitamine C verbetert de Efficiency van het klonen van muizen door overdracht van de somatische cel

Dit artikel is bedoeld om het gebruik van parthenogenetische haploïde embryonale stamcellen aan te tonen als vervanging voor sperma voor de bouw van semi-gekloonde embryo's.

Toepassing van muis parthenogenetische haploïde embryonale stamcellen als een substituut van sperma

Hier presenteren we een protocol dat de voorbereiding van celkernen beschrijft. Na microdissectie en enzymatische dissociatie van hartweefsel in afzonderlijke cellen, werden de voorlopercellen bevroren, gevolgd door isolatie van zuivere levensvatbare cellen, die werden gebruikt voor single-nucleus RNA-sequencing en de single-nucleus assay voor transposase-toegankelijk chromatine met high-throughput sequencing-analyses.

Kernisolatie van hartvoorlopercellen van muizen voor epigenoom- en genexpressieprofilering met eencellige resolutie

De studie beschrijft een eenvoudig, snel en gedeeltelijk geautomatiseerd protocol om kernen van hoge kwaliteit te isoleren uit bevroren zoogdierweefsels voor stroomafwaartse RNA-sequencing met één kern.

Een eenvoudig, snel en gedeeltelijk geautomatiseerd protocol voor de isolatie van afzonderlijke kernen uit ingevroren zoogdierweefsels voor sequencing van één kern

We beschrijven een protocol voor het extraheren van hoogwaardige kernen uit gecryopreserveerde geïnduceerde pluripotente stamcel-afgeleide stromale/endotheel- en bloedceltypen ter ondersteuning van single-nucleus next-generation sequencing-analyses. Het produceren van hoogwaardige, intacte kernen is noodzakelijk voor multiomics-experimenten, maar kan voor sommige laboratoria een barrière zijn voor toegang tot het veld.

Nucleaire isolatie van gecryopreserveerde in vitro afgeleide bloedcellen

Weefselmonsters van de coronaire endarterectomie werden verwerkt om enkele kernen te isoleren met behulp van een geoptimaliseerd dissociatieprotocol. De integriteit van de geïsoleerde kernen werd gevalideerd via drie complementaire benaderingen: trypan blue exclusion kleuring om membraanintegriteit te beoordelen, DAPI-gebaseerde confocale microscopie om de kernmorfologie te bevestigen, en flowcytometrie om kernopbrengst en zuiverheid te kwantificeren.

Isolatie van enkele kernen uit het coronaire endarterectomieweefsel van coronaire bypass-transplantatiepatiënten

Leer een microaspiratietechniek om somatische cellen te isoleren uit gecryopreserveerd paardenzaad. Deze methode vermijdt lange kweektijden en spermacontaminatie voor direct gebruik in klonen.

Een eenvoudige microaspiratietechniek om somatische cellen te isoleren uit gecryopreserveerd paardenzaad als nucleaire donoren voor klonen (Video) | JoVE Journal

Een eenvoudige microaspiratietechniek om somatische cellen te isoleren uit gecryopreserveerd paardenzaad als nucleaire donoren voor klonen

Meer video's verkennen