Name: Orale Gavage bij neonatale muispups en functionele beoordeling van de integriteit van darmbarrières met behulp van Ussing-kamers (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-01-09T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 18 s
Description: Leer orale gavage bij neonatale muispups en beoordeel darmbarrière-integriteit met Ussing-kamers. Deze methode onderzoekt hoe microRNA's de darmpermeabiliteit beïnvloeden.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Di Vincenzo, F., Del Gaudio, A., Petito, V., Lopetuso, L. R., Scaldaferri, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gut+microbiota%2C+intestinal+permeability%2C+and+systemic+inflammation%3A+A+narrative+review%5BTitle%5D)+AND+%22Intern+Emerg+Med%22%5BJournal%5D)">Gut microbiota, intestinal permeability, and systemic inflammation: A narrative review.</a> Intern Emerg Med. 19 (2), 275-293 (2024).</li>
<li>Mu, Q., Kirby, J., Reilly, C. M., Luo, X. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leaky+gut+as+a+danger+signal+for+autoimmune+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Leaky gut as a danger signal for autoimmune diseases.</a> Front Immunol. 8, 598(2017).</li>
<li>Sorini, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+gut+barrier+integrity+triggers+activation+of+islet-reactive+T+cells+and+autoimmune+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Loss of gut barrier integrity triggers activation of islet-reactive T cells and autoimmune diabetes.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 116 (30), 15140-15149 (2019).</li>
<li>An, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+intestinal+mucosal+barrier+in+autoimmune+disease%3A+a+potential+target%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">The role of intestinal mucosal barrier in autoimmune disease: a potential target.</a> Front Immunol. 13, 871713(2022).</li>
<li>Picco, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+gut+permeability+in+juvenile+chronic+arthritides%3A+a+multivariate+analysis+of+the+diagnostic+parameters%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Exp+Rheumatol%22%5BJournal%5D)">Increased gut permeability in juvenile chronic arthritides: a multivariate analysis of the diagnostic parameters.</a> Clin Exp Rheumatol. 18 (6), 773-778 (2000).</li>
<li>Dunleavy, K. A., Raffals, L. E., Camilleri, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+barrier+dysfunction+in+inflammatory+bowel+disease%3A+underpinning+pathogenesis+and+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Dig+Dis+Sci%22%5BJournal%5D)">Intestinal barrier dysfunction in inflammatory bowel disease: underpinning pathogenesis and therapeutics.</a> Dig Dis Sci. 68 (12), 4306-4320 (2023).</li>
<li>Borrego-Ruiz, A., Borrego, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early-life+gut+microbiome+development+and+its+potential+long-term+impact+on+health+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiome+Res+Rep%22%5BJournal%5D)">Early-life gut microbiome development and its potential long-term impact on health outcomes.</a> Microbiome Res Rep. 4 (2), 20(2025).</li>
<li>Di Costanzo, M., De Paulis, N., Biasucci, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Butyrate%3A+A+link+between+early+life+nutrition+and+gut+microbiome+in+the+development+of+food+allergy%5BTitle%5D)+AND+%22Life+%28Basel%29%22%5BJournal%5D)">Butyrate: A link between early life nutrition and gut microbiome in the development of food allergy.</a> Life (Basel). 11 (5), 384(2021).</li>
<li>Kindgren, E., Ahrens, A. P., Triplett, E. W., Ludvigsson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Infant+gut+microbiota+and+environment+associate+with+juvenile+idiopathic+arthritis+many+years+prior+to+disease+onset%2C+especially+in+genetically+vulnerable+children%5BTitle%5D)+AND+%22eBioMedicine%22%5BJournal%5D)">Infant gut microbiota and environment associate with juvenile idiopathic arthritis many years prior to disease onset, especially in genetically vulnerable children.</a> eBioMedicine. 93, 104654(2023).</li>
<li>Borowitz, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+epidemiology+of+inflammatory+bowel+disease%3A+clues+to+pathogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Pediatr%22%5BJournal%5D)">The epidemiology of inflammatory bowel disease: clues to pathogenesis.</a> Front Pediatr. 10, 1103713(2023).</li>
<li>Leete, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+age+on+the+progression+and+severity+of+type+1+diabetes%3A+potential+effects+on+disease+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Diab+Rep%22%5BJournal%5D)">The effect of age on the progression and severity of type 1 diabetes: potential effects on disease mechanisms.</a> Curr Diab Rep. 18 (11), 115(2018).</li>
<li>Francis, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Probiotic+studies+in+neonatal+mice+using+gavage%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Probiotic studies in neonatal mice using gavage.</a> J Vis Exp. (143), e59074(2019).</li>
<li>McClain, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neonatal+mouse+model%3A+review+of+methods+and+results%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+Pathol%22%5BJournal%5D)">Neonatal mouse model: review of methods and results.</a> Toxicol Pathol. 29 (Suppl), 128-137 (2001).</li>
<li>Thomson, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Ussing+chamber+system+for+measuring+intestinal+permeability+in+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">The Ussing chamber system for measuring intestinal permeability in health and disease.</a> BMC Gastroenterol. 19, 98(2019).</li>
<li>Clarke, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+guide+to+Ussing+chamber+studies+of+mouse+intestine%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Gastrointest+Liver+Physiol%22%5BJournal%5D)">A guide to Ussing chamber studies of mouse intestine.</a> Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 296 (6), G1151-G1166 (2009).</li>
<li>Westerhout, J., Wortelboer, H., Verhoeckx, K. Ussing chamber. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWesterhout%2C+J+%22The+Impact+of+Food+Bioactives+on+Health%3A+in+vitro+and+ex+vivo+models%22">The Impact of Food Bioactives on Health: in vitro and ex vivo models</a>. , (2015).</li>
<li>Hempstock, W., Ishizuka, N., Hayashi, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+assessment+of+intestinal+tight+junction+barrier+and+ion+permeability+in+native+tissue+by+Ussing+chamber+technique%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Functional assessment of intestinal tight junction barrier and ion permeability in native tissue by Ussing chamber technique.</a> J Vis Exp. (171), e62468(2021).</li>
<li>Sjögren, E., Eriksson, J., Vedin, C., Breitholtz, K., Hilgendorf, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Excised+segments+of+rat+small+intestine+in+Ussing+chamber+studies%3A+A+comparison+of+native+and+stripped+tissue+viability+and+permeability+to+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Pharm%22%5BJournal%5D)">Excised segments of rat small intestine in Ussing chamber studies: A comparison of native and stripped tissue viability and permeability to drugs.</a> Int J Pharm. 505 (1), 361-368 (2016).</li>
<li>Moussaoui, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+intestinal+glucocorticoid+sensitivity+in+early+life+shape+the+risk+of+epithelial+barrier+defect+in+maternal-deprived+rats%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Changes in intestinal glucocorticoid sensitivity in early life shape the risk of epithelial barrier defect in maternal-deprived rats.</a> PLoS One. 9 (2), e88382(2014).</li>
<li>Gleeson, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+enhanced+intestinal+permeability+of+infant+mice+enables+oral+protein+and+macromolecular+absorption+without+delivery+technology%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Pharm%22%5BJournal%5D)">The enhanced intestinal permeability of infant mice enables oral protein and macromolecular absorption without delivery technology.</a> Int J Pharm. 593, 120120(2021).</li>
<li>Birchenough, G. M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postnatal+development+of+the+small+intestinal+mucosa+drives+age-dependent%2C+regio-selective+susceptibility+to+Escherichia+coli+K1+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Postnatal development of the small intestinal mucosa drives age-dependent, regio-selective susceptibility to Escherichia coli K1 infection.</a> Sci Rep. 7 (1), 83(2017).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>10x DPBS W/O Ca &amp; Mg</td><td>Dulbeccos</td><td>14200091</td><td></td></tr><tr><td>Anti-HRP antibody</td><td>Nordic Biosite</td><td>GTX10183</td><td>Monoclonal Mouse Horseradish Peroxidase IgG [2H11]</td></tr><tr><td>Binocular loep</td><td>Olympus&nbsp;</td><td>SZ61</td><td>Geen specificatie vereist.</td></tr><tr><td>Zwarte 96-well plaat met platte bodem</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>137101</td><td>Platen moeten zwart zijn en aangepast zijn aan fluorescentiemetingen. De deksel moet tijdens het lezen worden verwijderd.</td></tr><tr><td>BSA</td><td>Merck</td><td>A4503</td><td></td></tr><tr><td>C57BL/6J muizen</td><td>Charles River</td><td>632C57BL/6J&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>CaCl2</td><td>Merck</td><td>2382</td><td></td></tr><tr><td>Duidelijke 96-well plaat met platte bodem, hoge binding</td><td>Corning</td><td>9018</td><td></td></tr><tr><td>D-(+)-Glucose</td><td>Merck</td><td>G8270&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Gedestilleerd H2O</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>D-Mannitol</td><td>Merck</td><td>M4125</td><td></td></tr><tr><td>Fijne pincet</td><td>FST</td><td>11445-12</td><td></td></tr><tr><td>Fijne schaar</td><td>FST</td><td>14058-09</td><td></td></tr><tr><td>FITC-Dextran 4Kd</td><td>FD4</td><td>TdB Labs</td><td>Gevoelig voor fotodegradatie.</td></tr><tr><td>Verwarmingskussen</td><td>Minerve</td><td>20 031 01</td><td></td></tr><tr><td>HRP</td><td>Merck</td><td>P8375</td><td></td></tr><tr><td>MgCl2, 6H2O</td><td>Merck</td><td>M2670&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Milli-Q H2O</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>P2300 EasyMount Ussing Systeem &amp; Kamers</td><td>Physiological Instruments</td><td>EM6-C-CE</td><td>Systemen, kamers en schuifregelaars moeten allemaal compatibel zijn.</td></tr><tr><td>P2306 Ussing Chamber Slider</td><td>Physiological Instruments</td><td>PI-P2306</td><td>Er zijn verschillende modellen schuifregelaars beschikbaar voor verschillende maten en vormen van weefsels.</td></tr><tr><td>QuantaBlu Fluorogenic Peroxidase Substraatkit</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>15169</td><td></td></tr><tr><td>Herbruikbare voedingsnaalden met ronde punt</td><td>FST</td><td>18061-24</td><td>24 Gauge, 1,25mm puntdiameter, ronde punt. Moeten worden gewassen met steriel water, ethanol 70% en worden geautoclaveerd voor gebruik.</td></tr><tr><td>Natriumbicarbonaat</td><td>Merck</td><td>S6297</td><td></td></tr><tr><td>Natriumcarbonaat</td><td>Merck</td><td>S7795</td><td></td></tr><tr><td>Spectrofotometer</td><td>TECAN&nbsp;</td><td>Spark 10M</td><td>Een platenlezer met top-acquisitie is vereist als de 137101 zwarte platen worden gebruikt.</td></tr><tr><td>Tween-20</td><td>Merck</td><td>P7949</td><td></td></tr></tbody></table>

orale gavage bij neonatale muispups en functionele beoordeling van de integriteit van darmbarrières met behulp van ussing-kamers

Oral Gavage in Neonatal Mouse Pups and Functional Assessment of Gut Barrier Integrity Using Ussing Chambers

Orale Gavage bij neonatale muispups en functionele beoordeling van de integriteit van darmbarrières met behulp van Ussing-kamers

Growing evidence underscores the importance of the first 1,000 days of life in shaping the gut-microbiome axis. This early-life window is critical in the ...

oral-gavage-neonatal-mouse-pups-functional-assessment-gut-barrier

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

Postoperatieve ileus (POI) is een complicatie van abdominale chirurgie leidt tot verhoogde morbiditeit en een langdurig verblijf in het ziekenhuis. Omdat profylactische of therapeutische strategieën ontbreken geïntensiveerd onderzoek is noodzakelijk. Daarom hebben we een gestandaardiseerde en haalbaar muismodel naar de pathofysiologie van POI te onderzoeken en mogelijke therapeutische opties te bestuderen.

Functionele Evaluatie van darmmotiliteit en de darmwand ontsteking in Knaagdieren: Analyses in een gestandaardiseerd model van Intestinal Manipulatie

Dit protocol beschrijft het gebruik van uitgesneden darmweefselpreparaten of 'darmzakken' als een ex vivo model van de darmwandfunctie. Dit model kan worden gebruikt om de integriteit van zowel de epitheliale barrière als de slijmvlieglaag op specifieke darmlocaties in diermodellen van spijsverteringsziekten te beoordelen.

Ex Vivo Intestinale Sacs mucosale permeabiliteit beoordelen Modellen van gastro-intestinale aandoeningen

Deze studie een overzicht van het proces van de precieze bedragen gavaging van probiotica met neonatale muizen. De experimentele opstelling is geoptimaliseerd om te omvatten maar is niet beperkt tot probiotische doseren, methoden voor beheer, en kwantificering van bacteriën in de darmen.

Probiotische Studies in neonatale muizen met behulp van de maagsonde

Gebruikmakend van intravitale microscopie, maakt de hier gepresenteerde methode real-time visualisatie van darmeppitheelcelvergieten bij levende dieren mogelijk. Daarom is geigreerd darmslijmvlies (acriflavine en rhodamineB-dextran) van verdoofde muizen afgebeeld tot eencellige resolutie met behulp van confocale microscopie.

Een intravitale microscopie-gebaseerde benadering om darmdoorlatendheid en epitheelcelvergieten prestaties te beoordelen

Ontregelde intestinale epitheliale barrièrefunctie en immuunresponsen zijn kenmerken van inflammatoire darmziekten die slecht worden onderzocht vanwege een gebrek aan fysiologische modellen. Hier beschrijven we een muis intestinale lus model dat een goed gevasculariseerd en exteriorized darmsegment gebruikt om mucosale permeabiliteit en leukocyten rekrutering in vivo te bestuderen.

Functionele beoordeling van intestinale permeabiliteit en neutrofiele transepitheliale migratie bij muizen met behulp van een gestandaardiseerd intestinale lusmodel

Darmepitheel verleent niet alleen opname van voedingsstoffen, maar ook bescherming tegen schadelijke stoffen. De apicale meest epitheliale intercellulaire junctie, d.w.z. de tight junction, reguleert paracellulaire opgeloste stof en ionenpermeabiliteit. Hier wordt een protocol beschreven voor de bereiding van mucosale vellen en beoordeling van de ionenselectiviteit van tight junctions met behulp van Ussing-kamertechniek.

Functionele beoordeling van intestinale tight junction barrier en ionendoorlaatbaarheid in inheems weefsel door Ussing Chamber Technique

Necrotiserende enterocolitis (NEC) is de ernstigste gastro-intestinale (GI) ziekte die vaak voorkomt bij premature baby's, vooral baby's met een zeer laag geboortegewicht, met een hoge mortaliteit en onduidelijke pathogenese. De oorzaak van NEC kan verband houden met inflammatoire immuunregulerende systeemafwijkingen. Een NEC-diermodel is een onmisbaar hulpmiddel voor nec-ziekte-immuunonderzoek. NEC-diermodellen gebruiken meestal C57BL / 6J neonatale muizen; BALB/c neonatale muizen worden...

Een neonatale BALB / c muismodel van necrotiserende enterocolitis

Om te bestuderen hoe de dunne darm omgaat met deeltjes van verschillende groottes, hebben we een gevestigde in vivo methode aangepast om de doorvoer van de dunne darm te bepalen.

Het bestuderen van Murine Small Bowel Mechanosensing van luminale deeltjes

In deze studie wordt fluoresceïne-isothiocyanaat-gelabeld (FITC) dextran toegediend aan muizen via orale maagsonde om de intestinale permeabiliteit zowel in vivo als in plasma- en fecale monsters te evalueren. Omdat de darmbarrièrefunctie in veel ziekteprocessen wordt beïnvloed, kan deze directe en kwantitatieve test in verschillende onderzoeksgebieden worden gebruikt.

Beoordeling van de integriteit van de darmbarrière bij muizen met fluoresceïne-isothiocyanaat-gelabeld dextran

Dit protocol schetst een neonataal muismodel van necrotiserende enterocolitis (NEC) en daaropvolgende isolatie van lamina propria-immuuncellen uit de neonatale muizendunne darm.

Een neonataal muismodel van necrotiserende enterocolitis en lamina propria-isolatie voor profilering van immuuncellen

Het doel van dit protocol is een gestandaardiseerde benadering te bieden voor het kwantitatief beoordelen van de integriteit van de muisachtige gingivale epitheliale barrière door topisch fluorescentie-gelabelde dextrans van verschillende molecuulgroottes op het gingivale oppervlak in vivo toe te passen, gevolgd door ex vivo beeldvorming met een enkelfotonmicroscopiesysteem.

Functionele beoordeling van de muis-gingivale epitheliale barrière met behulp van fluorescerende tracers

Leer orale gavage bij neonatale muispups en beoordeel darmbarrière-integriteit met Ussing-kamers. Deze methode onderzoekt hoe microRNA's de darmpermeabiliteit beïnvloeden.

Orale Gavage bij neonatale muispups en functionele beoordeling van de integriteit van darmbarrières met behulp van Ussing-kamers (Video) | JoVE Journal

Orale Gavage bij neonatale muispups en functionele beoordeling van de integriteit van darmbarrières met behulp van Ussing-kamers

Meer video's verkennen