Name: Isolatie en kweek van primaire marginale cellen van de stria vascularis uit neonatale muizen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-03-20T13:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 27 s
Description: Leer de isolatie en kweek van primaire marginale cellen uit de stria vascularis van neonatale muizen. Dit protocol maakt onderzoek naar stria vascularis-disfunctie en gehoorverlies mogelijk.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Raphael, Y., Altschuler, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+and+innervation+of+the+cochlea%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res+Bull%22%5BJournal%5D)">Structure and innervation of the cochlea.</a> Brain Res Bull. 60 (5-6), 397-422 (2003).</li>
<li>Bovee, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+stria+vascularis%3A+Renewed+attention+on+a+key+player+in+age-related+hearing+loss%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">The stria vascularis: Renewed attention on a key player in age-related hearing loss.</a> Int J Mol Sci. 25 (10), 5391(2024).</li>
<li>Schulte, B. A., Schmiedt, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lateral+wall+Na%2CK-ATPase+and+endocochlear+potentials+decline+with+age+in+quiet-reared+gerbils%5BTitle%5D)+AND+%22Hear+Res%22%5BJournal%5D)">Lateral wall Na,K-ATPase and endocochlear potentials decline with age in quiet-reared gerbils.</a> Hear Res. 61 (1-2), 35-46 (1992).</li>
<li>Hibino, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+is+the+highly+positive+endocochlear+potential+formed%3F+The+specific+architecture+of+the+stria+vascularis+and+the+roles+of+the+ion-transport+apparatus%5BTitle%5D)+AND+%22Pflugers+Arch%22%5BJournal%5D)">How is the highly positive endocochlear potential formed? The specific architecture of the stria vascularis and the roles of the ion-transport apparatus.</a> Pflugers Arch. 459 (4), 521-533 (2010).</li>
<li>Johns, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+the+stria+vascularis+in+neglected+otologic+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Hear+Res%22%5BJournal%5D)">The role of the stria vascularis in neglected otologic disease.</a> Hear Res. 428, 108682(2023).</li>
<li>Yu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+the+stria+vascularis+in+the+pathogenesis+of+sensorineural+hearing+loss%3A+A+narrative+review%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Role of the stria vascularis in the pathogenesis of sensorineural hearing loss: A narrative review.</a> Front Neurosci. 15, 774585(2021).</li>
<li>Ohlemiller, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+correlates+of+age-related+endocochlear+potential+reduction+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Hear+Res%22%5BJournal%5D)">Cellular correlates of age-related endocochlear potential reduction in a mouse model.</a> Hear Res. 220 (1-2), 10-26 (2006).</li>
<li>Mahendrasingam, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relative+time+course+of+degeneration+of+different+cochlear+structures+in+the+CD%2F1+mouse+model+of+accelerated+aging%5BTitle%5D)+AND+%22J+Assoc+Res+Otolaryngol%22%5BJournal%5D)">Relative time course of degeneration of different cochlear structures in the CD/1 mouse model of accelerated aging.</a> J Assoc Res Otolaryngol. 12 (4), 437-453 (2011).</li>
<li>Lee, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+apoptosis+induced+by+cisplatin+in+marginal+cells+in+mouse+stria+vascularis%5BTitle%5D)+AND+%22ORL+J+Otorhinolaryngol+Relat+Spec%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of apoptosis induced by cisplatin in marginal cells in mouse stria vascularis.</a> ORL J Otorhinolaryngol Relat Spec. 66 (3), 111-118 (2004).</li>
<li>Ohlemiller, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+endocochlear+potential+as+an+indicator+of+reticular+lamina+integrity+after+noise+exposure+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hear+Res%22%5BJournal%5D)">The endocochlear potential as an indicator of reticular lamina integrity after noise exposure in mice.</a> Hear Res. 361, 138-151 (2018).</li>
<li>Liberman, M. C., Kujawa, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cochlear+synaptopathy+in+acquired+sensorineural+hearing+loss%3A+Manifestations+and+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Hear+Res%22%5BJournal%5D)">Cochlear synaptopathy in acquired sensorineural hearing loss: Manifestations and mechanisms.</a> Hear Res. 349, 138-147 (2017).</li>
<li>Levano, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole+neonatal+cochlear+explants+as+an+in+vitro+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Whole neonatal cochlear explants as an in vitro model.</a> J Vis Exp. (197), e65160(2023).</li>
<li>Wu, K. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+culture+of+primary+cochlear+hair+cells+from+neonatal+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Isolation and culture of primary cochlear hair cells from neonatal mice.</a> J Vis Exp. (199), e65687(2023).</li>
<li>Schmiedt, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+furosemide+applied+chronically+to+the+round+window%3A+A+model+of+metabolic+presbyacusis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Effects of furosemide applied chronically to the round window: A model of metabolic presbyacusis.</a> J Neurosci. 22 (21), 9643-9650 (2002).</li>
<li>Kurata, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histopathologic+evaluation+of+vascular+findings+in+the+cochlea+in+patients+with+presbycusis%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA+Otolaryngol+Head+Neck+Surg%22%5BJournal%5D)">Histopathologic evaluation of vascular findings in the cochlea in patients with presbycusis.</a> JAMA Otolaryngol Head Neck Surg. 142 (2), 173-178 (2016).</li>
<li>Wangemann, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+KCNJ10+protein+expression+abolishes+endocochlear+potential+and+causes+deafness+in+Pendred+syndrome+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Med%22%5BJournal%5D)">Loss of KCNJ10 protein expression abolishes endocochlear potential and causes deafness in Pendred syndrome mouse model.</a> BMC Med. 2, 30(2004).</li>
<li>Ding, L., Wang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((miR-106a+facilitates+the+sensorineural+hearing+loss+induced+by+oxidative+stress+by+targeting+connexin-43%5BTitle%5D)+AND+%22Bioengineered%22%5BJournal%5D)">miR-106a facilitates the sensorineural hearing loss induced by oxidative stress by targeting connexin-43.</a> Bioengineered. 13 (6), 14080-14093 (2022).</li>
<li>Wan, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PARP1+inhibition+prevents+oxidative+stress+in+age-related+hearing+loss+via+PAR-Ca%282%2B%29-AIF+axis+in+cochlear+strial+marginal+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Free+Radic+Biol+Med%22%5BJournal%5D)">PARP1 inhibition prevents oxidative stress in age-related hearing loss via PAR-Ca(2+)-AIF axis in cochlear strial marginal cells.</a> Free Radic Biol Med. 220, 222-235 (2024).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decreased+poly%28ADP-ribose%29+polymerase+1+expression+attenuates+glucose+oxidase-induced+damage+in+rat+cochlear+marginal+strial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Decreased poly(ADP-ribose) polymerase 1 expression attenuates glucose oxidase-induced damage in rat cochlear marginal strial cells.</a> Mol Neurobiol. 53 (9), 5971-5984 (2016).</li>
<li>Fetoni, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogenesis+of+presbycusis+in+animal+models%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Gerontol%22%5BJournal%5D)">Pathogenesis of presbycusis in animal models: A review.</a> Exp Gerontol. 46 (6), 413-425 (2011).</li>
<li>Marie, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Senescence-accelerated+mouse+prone+8+%28SAMP8%29+as+a+model+of+age-related+hearing+loss%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Lett%22%5BJournal%5D)">Senescence-accelerated mouse prone 8 (SAMP8) as a model of age-related hearing loss.</a> Neurosci Lett. 656, 138-143 (2017).</li>
<li>Li, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+models+in+sensorineural+hearing+loss+research%3A+A+comprehensive+review%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Rodent models in sensorineural hearing loss research: A comprehensive review.</a> Life Sci. 358, 123156(2024).</li>
<li>Bommakanti, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cochlear+histopathology+in+human+genetic+hearing+loss%3A+State+of+the+science+and+future+prospects%5BTitle%5D)+AND+%22Hear+Res%22%5BJournal%5D)">Cochlear histopathology in human genetic hearing loss: State of the science and future prospects.</a> Hear Res. 382, 107785(2019).</li>
<li>Nicolson, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Navigating+hereditary+hearing+loss%3A+Pathology+of+the+inner+ear%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Navigating hereditary hearing loss: Pathology of the inner ear.</a> Front Cell Neurosci. 15, 660812(2021).</li>
<li>Liu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+and+challenges+of+CRISPR-Cas+gene-editing+to+disease+treatment+in+clinics%5BTitle%5D)+AND+%22Precis+Clin+Med%22%5BJournal%5D)">Applications and challenges of CRISPR-Cas gene-editing to disease treatment in clinics.</a> Precis Clin Med. 4 (3), 179-191 (2021).</li>
<li>Guo, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+methods+and+research+progress+of+livestock+and+poultry+immortalized+cell+lines%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Vet+Sci%22%5BJournal%5D)">Establishment methods and research progress of livestock and poultry immortalized cell lines: A review.</a> Front Vet Sci. 9, 956357(2022).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>15 mL Centrifuge Tube</td><td>Servicebio</td><td>EP-1501-J</td><td>gebruik voor cultuur</td></tr><tr><td>35 mm Cell Culture Dish</td><td>NEST</td><td>706001</td><td>gebruik voor dissectie</td></tr><tr><td>4% Paraformaldehyde</td><td>Servicebio</td><td>G1101</td><td>immunoflurescente kleuring</td></tr><tr><td>6-well Plate</td><td>Servicebio</td><td>CCP-6H</td><td>gebruik voor cultuur</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488-Conjugated Goat Anti-Rabbit Antibody</td><td>Proteintech</td><td>SA00013-2</td><td>immunoflurescente kleuring</td></tr><tr><td>Antifade Mounting Medium met DAPI</td><td>Absin</td><td>abs9235</td><td>immunoflurescente kleuring</td></tr><tr><td>Cell Counting Kit-8</td><td>Beyotime</td><td>C0037</td><td>gebruik voor celtelling</td></tr><tr><td>Collagenase Type II</td><td>Biosharp</td><td>BS164</td><td>gebruik voor cultuur</td></tr><tr><td>Confocal Laser Scanning Systeem</td><td>Olympus&nbsp;</td><td>FV1200</td><td>immunoflurescente kleuring</td></tr><tr><td>DCFH-DA</td><td>Invitrogen</td><td>C2938</td><td>ROS kleuring</td></tr><tr><td>D-gal</td><td>Solarbio</td><td>D8310</td><td>gebruik voor celmodellering</td></tr><tr><td>EpiCM-a Medium</td><td>Sciencell</td><td>4131</td><td>gebruik voor cultuur</td></tr><tr><td>Fine forceps</td><td>RWD</td><td>F11020-11</td><td>gebruik voor dissectie</td></tr><tr><td>Goat Serum</td><td>Beyotime</td><td>C0265</td><td>immunoflurescente kleuring</td></tr><tr><td>H2O2</td><td>Mkbio</td><td>MM0707</td><td>gebruik voor celmodellering</td></tr><tr><td>Hank's Balanced Salt Solution (HBSS)</td><td>Biosharp</td><td>BL561A</td><td>gebruik voor cultuur</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>RWD</td><td>R510-22-10</td><td>gebruik voor dissectie</td></tr><tr><td>KCNQ1 Antibody (G-8)</td><td>Santa cruz</td><td>sc-365186</td><td>immunoflurescente kleuring</td></tr><tr><td>Microscope</td><td>Olympus&nbsp;</td><td>SZX7-1063</td><td>gebruik voor dissectie</td></tr><tr><td>Microscope</td><td>Olympus&nbsp;</td><td>IX71</td><td>Gebruikt voor het observeren van de resultaten van immunofluorescence kleuring</td></tr><tr><td>MitoTracker Red CMXRos</td><td>Invitrogen</td><td>M7512</td><td>ROS kleuring</td></tr><tr><td>Neonatal Mouse Pups (P0-P3)</td><td></td><td></td><td>geleverd door BIONT</td></tr><tr><td>PBS</td><td>Servicebio</td><td>G4202</td><td>immunoflurescente kleuring</td></tr><tr><td>Rabbit Anti-Mouse CK18 Monoclonal Antibody</td><td>Proteintech</td><td>10830-1-AP</td><td>immunoflurescente kleuring</td></tr><tr><td>Senescence &beta;-Galactosidase Kleuring Kit</td><td>Beyotime</td><td>C0602</td><td>veroudering kleuring</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>X100</td><td>immunoflurescente kleuring</td></tr></tbody></table>

isolatie en kweek van primaire marginale cellen van de stria vascularis uit neonatale muizen

Isolation and Culture of Primary Marginal Cells of the Stria Vascularis from Neonatal Mice

Isolatie en kweek van primaire marginale cellen van de stria vascularis uit neonatale muizen

The stria vascularis is a key structure in the inner ear responsible for generating and maintaining the endocochlear potential (EP), and its dysfunction ...

isolation-culture-primary-marginal-cells-stria-vascularis-from

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowetenschap

We beschrijven hier een protocol voor het kweken van muizen pulmonale endotheelcellen. Deze methode bestaat uit mechanische en enzymatische longweefsel dissociatie evenals een 2-staps zuiveringsproces met behulp van anti-PECAM-1 en anti-ICAM-2 antilichamen geconjugeerd aan magnetische korrels, die een pure endotheelcellen bevolking van voornamelijk microvasculaire oorsprong produceert.

Isolatie en Cultuur van Pulmonary endotheelcellen van neonatale muizen

Primaire muis cardiomyocytkweken is een van de cruciale instrumenten voor het onderzoek myofibrillar inrichting en functie. Het volgende protocol beschrijft de isolatie en de cultuur van primaire cardiomyocyten van neonatale muis harten. De resulterende cardiomyocytkweken kunnen vervolgens worden gebruikt voor een verscheidenheid van biomechanische, biochemische en celbiologische assays.

Isolatie en cultuur van de Neonatale Mouse Cardiomyocytes

Een sleutel tot succesvolle onderzoek van microglia biologie is het behoud van microglia immunofunction ex vivo tijdens isolatie van CZS-weefsel. Isoleren microglia via roterende schudden resulteert in zeer zuivere en immunofunctional celculturen zoals beoordeeld door fluorescerende beeldvorming, immunocytochemie, en ELISA na microglia-activatie met de pro-inflammatoire stimuli lipopolysaccharide (LPS) en Pam 3 CSK 4 (Pam).

Isolatie van corticale Microglia met Conserven immunofenotype en functionaliteit van Muriene Pasgeborenen

Hersenmicrovasculaire endotheelcellen (BMEC) zijn onderling verbonden door specifieke junctionele eiwitten die een sterk gereguleerde barrière vormen die bloed en het centrale zenuwstelsel (CZS) scheiden, de zogenaamde bloed-hersenbarrière (BBB). De isolatie van primaire muis-hersenmicrovasculaire endotheelcellen, zoals besproken in dit protocol, maakt gedetailleerde in vitro studies van de BBB mogelijk.

Isolatie van Primary Muriene Brain microvasculaire endotheelcellen

Epidermale keratinocyten vormen een functionele huidbarrière en worden gepositioneerd in de voorste lijn van de gastheerverdediging tegen externe milieubeledigingen. Hier beschrijven we methoden voor isolatie en primaire cultuur van epidermale keratinocyten van neonatale en volwassen muishuid, en inductie van terminale differentiatie en UVB-geactiveerde ontstekingsrespons van keratinocyten.

Isolatie en Cultuur van Primaire Muis Keratinocyten Uit Neonatale en Volwassen Muis Huid

Primaire microgliaculturen worden vaak gebruikt om nieuwe ontstekingsremmende moleculen te evalueren. Het huidige protocol beschrijft een reproduceerbare en relevante methode om microglia magnetisch te isoleren van pasgeboren pups.

Magnetische isolatie van microgliale cellen van neonate muis voor primaire celculturen

In dit artikel werden primaire longendotheelcellen geïsoleerd en gekweekt uit neonatale muizen.

Isolatie van primaire longendotheelcellen van muizen

Müller glia primaire culturen verkregen uit het netvlies van muizen vormen een zeer robuust en betrouwbaar hulpmiddel om de gliale omzetting in retinale voorlopercellen na microRNA-behandeling te bestuderen. Afzonderlijke moleculen of combinaties kunnen worden getest voordat ze vervolgens in vivo worden toegepast.

Primaire celculturen om het regeneratiepotentieel van Murine Müller Glia na microRNA-behandeling te bestuderen

De stria vascularis is van vitaal belang voor het genereren van endocochleair potentieel. Hier presenteren we de dissectie van de volwassen muis stria vascularis voor single-nucleus sequencing of immunostaining.

Dissectie van volwassen muis Stria vascularis voor single-nucleus sequencing of immunostaining

Dit manuscript beschrijft een gedetailleerd protocol voor het isoleren van retinale gliacellen Müller uit muizenogen. Het protocol begint met enucleatie en dissectie van muizenogen, gevolgd door isolatie, zaaien en kweken van Müller-cellen.

Isolatie van primaire müllercellen van de retinale glia van muizen

Dit artikel presenteert een gedetailleerd protocol voor het isoleren van primaire retinale Müller-cellen van neonatale Sprague-Dawley (SD) ratten. De procedure omvat enucleatie van de oogbollen, dissectie van netvliesweefsel, extractie en identificatie van cellen en belangrijke overwegingen voor latere celkweek.

Isolatie en kweek van primaire retinale Müller-cellen van Sprague-Dawley (SD) ratten

Leer de isolatie en kweek van primaire marginale cellen uit de stria vascularis van neonatale muizen. Dit protocol maakt onderzoek naar stria vascularis-disfunctie en gehoorverlies mogelijk.

Isolatie en kweek van primaire marginale cellen van de stria vascularis uit neonatale muizen

Meer video's verkennen