Selectieve en permanente occlusie van de middenarterie cerebrale arterie bij ratten: een experimentele benadering voor het bestuderen van motorische en ruimtelijke geheugentekorten

Er is een ratmodel van selectieve permanente MCA-occlusie ontwikkeld om motorische en ruimtelijke geheugendeficiënties te bestuderen. Veel berotemodellen zijn minder selectief, waardoor dit protocol directe visualisatie van het bloedvat en een precieze distale MCA-occlusie mogelijk maakt. Begin met het klaarleggen van de schone, steriele chirurgische instrumenten rond het microscopiestage dat is bedekt met een steriel doek.

Leg de linker laterale zijde van de geanestheseerde Worcester-rat vrij, die in 180 graden zijligging op de gewatteerde microscooptafel is geplaatst met het hoofd ondersteund door een zachte rol. Fixeer het hoofd met plakband. Breng glijmiddel-oogdruppels aan.

Plak de oogleden dicht. Controleer de rectale temperatuur opnieuw om er zeker van te zijn dat deze binnen het ideale bereik van ongeveer 37 °C blijft. Pas de warmtebron aan indien nodig.

Voer trichotomie uit over een gebied van 1,6 bij 0,5 centimeter tussen de laterale canthus en de tragus met behulp van een mini-trichotomiseerder of een scheermesje. Desinfecteer het geschoren gebied met 2% chlorhexidine scrub, gevolgd door 0,2% aqueous chlorhexidine. Gebruik een steriel scalpelmesje om een incisie van één centimeter door de huid en het subcutane weefsel te maken, waarbij een marge van 0,3 centimeter posterior van de laterale canthus en anterior van de tragus wordt aangehouden.

Gebruik hemostatische klemmen om de huid en de subcutane laag te retraheren. Nadat de middelste temporale tak van de oppervlakkige temporale vaten is geïdentificeerd, wordt het vat gecoaguleerd met elektro-cauterisatie. Palpeer de jukbeugelkant met een Freer-elevator.

Maak een longitudinale incisie in de fascia van de musculus temporalis. Disseceer de musculus temporalis craniaal en caudaal om de os temporale, het os frontale en een deel van de musculus masseter bloot te leggen. Isoleer de arcus zygomaticus longitudinaal.

Verwijder een segment van ongeveer 0,5 centimeter van de jukbeenboog. Neem de juiste voorzorgsmaatregelen tijdens het uitvoeren van de procedure. Gebruik een ronde, met diamant gecoate frees om het laterale slaapbeen direct posterieur van de verwijderingsplaats van de jukbeenboog aan te boren, met periodieke irrigatie met 0,9% zoutoplossing.

Laat tijdens het boren een dunne resterende botlaag aan de dura mater zitten. Gebruik Halsted-forceps om de overgebleven aanhechtingsfragmenten voorzichtig te verwijderen. Gebruik een ultrafijne naald om de dura mater te openen.

Identificeer de vena cerebralis inferior, de arteria cerebri media, of MCA, en de basale en dikste MCA-tak in het centrum. Gebruik een fijne naaldhouder om een niet-absorbeerbare 8.0 polypropyleen hechtdraad rond de MCA te plaatsen en occludeer het vat door drie knopen eromheen te leggen. Controleer na bevestiging van de afwezigheid van stroomafwaartse bloedstroom met de ultrafijne naald of er aanvullende MCA-takken zijn die geligreerd moeten worden indien aanwezig.

Spoel de holte uit met fysiologische zoutoplossing. Voer hemostase uit met elektrocoagulatie of voorzichtig compresseren. Na occlusie van de MCA en sluiting van de dura mater, brengt u de diepe spierlaag weer bij elkaar en hecht u de fascia van de musculus temporalis met resorbeerbare 4-O hechtdraad.

Gebruik resorbeerbare 4-0 polyglactine 910-hechtingen om de subcutane laag en de huidlaag in een doorlopend patroon te hechten. Voer de postoperatieve evaluatie uit op specifieke dagen. De scores voor de motoriek bij de houdingstest op de zevende postoperatieve dag waren significant hoger bij dieren met MCA-occlusie vergeleken met sham-dieren.

Dieren met een MCA-occlusie vertoonden een verminderde exploratie van het verplaatste object op de achtste postoperatieve dag vergeleken met de sham-dieren. Dit protocol helpt onderzoekers om selectieve corticale ischemie en de effecten daarvan op de motorische functie en het ruimtelijke geheugen te bestuderen. De belangrijkste uitdaging is het veilig uitvoeren van de craniectomie en het correct identificeren van de arteria cerebri media.

Toekomstige studies kunnen dit model gebruiken om behandelingen te testen en langetermijnfunctionele en histologische uitkomsten te bestuderen.