Name: Senescentiedetectie met behulp van gereflecteerd licht in de vetachtige stromale vaatfractie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-06-05T13:15:00.000+00:00
Duration: 10 min 8 s
Description: Leer een geoptimaliseerde gereflecteerde licht confocale microscopiemethode voor kwantitatieve detectie van senescentie-gerelateerde β-galactosidase in menselijke stromale vaatfractiecellen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Wang, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Senescent+human+fibroblasts+resist+programmed+cell+death%2C+and+failure+to+suppress+bcl2+is+involved%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Senescent human fibroblasts resist programmed cell death, and failure to suppress bcl2 is involved.</a> Cancer Res. 55 (10), 2284-2292 (1995).</li>
<li>Yosef, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Directed+elimination+of+senescent+cells+by+inhibition+of+BCL-W+and+BCL-XL%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Directed elimination of senescent cells by inhibition of BCL-W and BCL-XL.</a> Nat Commun. 7 (1), 11190(2016).</li>
<li>Jun, J. -I., Lau, L. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+matricellular+protein+CCN1+induces+fibroblast+senescence+and+restricts+fibrosis+in+cutaneous+wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">The matricellular protein CCN1 induces fibroblast senescence and restricts fibrosis in cutaneous wound healing.</a> Nat Cell Biol. 12 (7), 676-685 (2010).</li>
<li>Krizhanovsky, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Senescence+of+activated+stellate+cells+limits+liver+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Senescence of activated stellate cells limits liver fibrosis.</a> Cell. 134 (4), 657-667 (2008).</li>
<li>Storer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Senescence+is+a+developmental+mechanism+that+contributes+to+embryonic+growth+and+patterning%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Senescence is a developmental mechanism that contributes to embryonic growth and patterning.</a> Cell. 155 (5), 1119-1130 (2013).</li>
<li>Muñoz-Espín, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Programmed+cell+senescence+during+mammalian+embryonic+development%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Programmed cell senescence during mammalian embryonic development.</a> Cell. 155 (5), 1104-1118 (2013).</li>
<li>Eggert, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+functions+of+senescence-associated+immune+responses+in+liver+tumor+surveillance+and+tumor+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Distinct functions of senescence-associated immune responses in liver tumor surveillance and tumor progression.</a> Cancer Cell. 30 (4), 533-547 (2016).</li>
<li>Feldser, D. M., Greider, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short+telomeres+limit+tumor+progression+in+vivo+by+inducing+senescence%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Short telomeres limit tumor progression in vivo by inducing senescence.</a> Cancer Cell. 11 (5), 461-469 (2007).</li>
<li>Xue, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Senescence+and+tumour+clearance+is+triggered+by+p53+restoration+in+murine+liver+carcinomas%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Senescence and tumour clearance is triggered by p53 restoration in murine liver carcinomas.</a> Nature. 445 (7128), 656-660 (2007).</li>
<li>Acosta, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+complex+secretory+program+orchestrated+by+the+inflammasome+controls+paracrine+senescence%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">A complex secretory program orchestrated by the inflammasome controls paracrine senescence.</a> Nat Cell Biol. 15 (8), 978-990 (2013).</li>
<li>Coppé, J. -P., Desprez, P. -Y., Krtolica, A., Campisi, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+senescence-associated+secretory+phenotype%3A+the+dark+side+of+tumor+suppression%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Pathol+Mech+Dis%22%5BJournal%5D)">The senescence-associated secretory phenotype: the dark side of tumor suppression.</a> Annu Rev Pathol Mech Dis. 5 (1), 99-118 (2010).</li>
<li>Xu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+senescent+cells+enhances+adipogenesis+and+metabolic+function+in+old+age%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Targeting senescent cells enhances adipogenesis and metabolic function in old age.</a> eLife. 4 (1), e12997(2015).</li>
<li>Xu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Senolytics+improve+physical+function+and+increase+lifespan+in+old+age%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Senolytics improve physical function and increase lifespan in old age.</a> Nat Med. 24 (8), 1246-1256 (2018).</li>
<li>Li, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FBP1+loss+disrupts+liver+metabolism+and+promotes+tumorigenesis+through+a+hepatic+stellate+cell+senescence+secretome%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">FBP1 loss disrupts liver metabolism and promotes tumorigenesis through a hepatic stellate cell senescence secretome.</a> Nat Cell Biol. 22 (6), 728-739 (2020).</li>
<li>Yoshimoto, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Obesity-induced+gut+microbial+metabolite+promotes+liver+cancer+through+senescence+secretome%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Obesity-induced gut microbial metabolite promotes liver cancer through senescence secretome.</a> Nature. 499 (7456), 97-101 (2013).</li>
<li>Aravinthan, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hepatocyte+senescence+predicts+progression+in+non-alcohol-related+fatty+liver+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Hepatocyte senescence predicts progression in non-alcohol-related fatty liver disease.</a> J Hepatol. 58 (3), 549-556 (2013).</li>
<li>Baboota, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((BMP4+and+Gremlin+1+regulate+hepatic+cell+senescence+during+clinical+progression+of+NAFLD%2FNASH%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Metab%22%5BJournal%5D)">BMP4 and Gremlin 1 regulate hepatic cell senescence during clinical progression of NAFLD/NASH.</a> Nat Metab. 4 (8), 1007-1021 (2022).</li>
<li>Chen, Y. -W., Harris, R. A., Hatahet, Z., Chou, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ablation+of+XP-V+gene+causes+adipose+tissue+senescence+and+metabolic+abnormalities%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Ablation of XP-V gene causes adipose tissue senescence and metabolic abnormalities.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 112 (45), E4556-E4564 (2015).</li>
<li>Gustafson, B., Nerstedt, A., Spinelli, R., Beguinot, F., Smith, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Type+2+diabetes%2C+independent+of+obesity+and+age%2C+is+characterized+by+senescent+and+dysfunctional+mature+human+adipose+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Type 2 diabetes, independent of obesity and age, is characterized by senescent and dysfunctional mature human adipose cells.</a> Diabetes. 71 (11), 2372-2383 (2022).</li>
<li>Li, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Obesity+and+hyperinsulinemia+drive+adipocytes+to+activate+a+cell+cycle+program+and+senesce%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Obesity and hyperinsulinemia drive adipocytes to activate a cell cycle program and senesce.</a> Nat Med. 27 (11), 1941-1953 (2021).</li>
<li>Minamino, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+crucial+role+for+adipose+tissue+p53+in+the+regulation+of+insulin+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">A crucial role for adipose tissue p53 in the regulation of insulin resistance.</a> Nat Med. 15 (9), 1082-1087 (2009).</li>
<li>Shi, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photoactivatable+senolysis+with+single-cell+resolution+delays+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Aging%22%5BJournal%5D)">Photoactivatable senolysis with single-cell resolution delays aging.</a> Nat Aging. 3 (3), 297-312 (2023).</li>
<li>Dimri, G. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+biomarker+that+identifies+senescent+human+cells+in+culture+and+in+aging+skin+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">A biomarker that identifies senescent human cells in culture and in aging skin in vivo.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 92 (20), 9363-9367 (1995).</li>
<li>Horwitz, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Substrates+for+cytochemical+demonstration+of+enzyme+activity%3AI.+some+substituted+3-indolyl-%CE%B2-D-glycopyranosides1a%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Chem%22%5BJournal%5D)">Substrates for cytochemical demonstration of enzyme activity:I. some substituted 3-indolyl-β-D-glycopyranosides1a.</a> J Med Chem. 7 (5), 574-575 (1964).</li>
<li>Lv, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+engineering+development+of+%CE%B2-galactosidase-activatable+fluorogenic+probes+for+precise+senescence+tracking+in+cells%2C+tissues+and+a+mouse+model+of+psoriasis%5BTitle%5D)+AND+%22Sens+Actuators+B+Chem%22%5BJournal%5D)">Molecular engineering development of β-galactosidase-activatable fluorogenic probes for precise senescence tracking in cells, tissues and a mouse model of psoriasis.</a> Sens Actuators B Chem. 444 (1), 138406(2025).</li>
<li>Dedic, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Senescence+detection+using+reflected+light%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+Cell%22%5BJournal%5D)">Senescence detection using reflected light.</a> Aging Cell. 23 (1), e14295(2024).</li>
<li>Alcorta, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Involvement+of+the+cyclin-dependent+kinase+inhibitor+p16+%28INK4a%29+in+replicative+senescence+of+normal+human+fibroblasts%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Involvement of the cyclin-dependent kinase inhibitor p16 (INK4a) in replicative senescence of normal human fibroblasts.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 93 (24), 13742-13747 (1996).</li>
<li>Hara, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+p16CDKN2+expression+and+its+implications+for+cell+immortalization+and+senescence%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Regulation of p16CDKN2 expression and its implications for cell immortalization and senescence.</a> Mol Cell Biol. 16 (3), 859-867 (1996).</li>
<li>Lin, A. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Premature+senescence+involving+p53+and+p16+is+activated+in+response+to+constitutive+MEK%2FMAPK+mitogenic+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Dev%22%5BJournal%5D)">Premature senescence involving p53 and p16 is activated in response to constitutive MEK/MAPK mitogenic signaling.</a> Genes Dev. 12 (19), 3008-3019 (1998).</li>
<li>Okamoto, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mutations+and+altered+expression+of+p16INK4+in+human+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Mutations and altered expression of p16INK4 in human cancer.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 91 (23), 11045-11049 (1994).</li>
<li>Serrano, M., Hannon, G. J., Beach, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+regulatory+motif+in+cell-cycle+control+causing+specific+inhibition+of+cyclin+D%2FCDK4%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A new regulatory motif in cell-cycle control causing specific inhibition of cyclin D/CDK4.</a> Nature. 366 (6456), 704-707 (1993).</li>
<li>Serrano, M., Lin, A. W., McCurrach, M. E., Beach, D., Lowe, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oncogenic+ras+provokes+premature+cell+senescence+associated+with+accumulation+of+p53+and+p16INK4a%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Oncogenic ras provokes premature cell senescence associated with accumulation of p53 and p16INK4a.</a> Cell. 88 (5), 593-602 (1997).</li>
<li>Wong, H., Riabowol, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+CDK-inhibitor+gene+expression+in+aging+human+diploid+fibroblasts%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Gerontol%22%5BJournal%5D)">Differential CDK-inhibitor gene expression in aging human diploid fibroblasts.</a> Exp Gerontol. 31 (3), 311-325 (1996).</li>
<li>Gustafson, B., Nerstedt, A., Smith, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduced+subcutaneous+adipogenesis+in+human+hypertrophic+obesity+is+linked+to+senescent+precursor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Reduced subcutaneous adipogenesis in human hypertrophic obesity is linked to senescent precursor cells.</a> Nat Commun. 10 (1), 2757(2019).</li>
<li>Barinda, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+progeria+induces+adipose+tissue+senescence+and+impairs+insulin+sensitivity+through+senescence+associated+secretory+phenotype%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Endothelial progeria induces adipose tissue senescence and impairs insulin sensitivity through senescence associated secretory phenotype.</a> Nat Commun. 11 (1), 481(2020).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1.5 mL tubes</td><td>BioSphere</td><td>72.706.200</td><td>Biosphere safeseal tube 1.5 mL, 250 PC</td></tr><tr><td>5 mL tubes</td><td>Eppendorf</td><td>30119401</td><td>Eppendorf&nbsp;tubes&nbsp;5.0&nbsp;mL microtube</td></tr><tr><td>96-well plate</td><td>Corning</td><td>4680</td><td>Corning 96-well high content ccreening microplates with film bottom</td></tr><tr><td>CD31 primary antibody</td><td>Abcam</td><td>Ab9498</td><td>Anti-CD31 antibody clone JC/70A</td></tr><tr><td>Confocal microscope with reflected light capabilities</td><td>Evident</td><td>FV-4000</td><td></td></tr><tr><td>Coverslips</td><td>Epredia</td><td>BB02400500A113MNZO</td><td>Coverslips 24 mm x 50 mm, #1.5 thickness (0.13-0.16 mm)&nbsp;</td></tr><tr><td>DPBS</td><td>Gibco</td><td>14190-136</td><td>DPBS, no calcium, no magnesium</td></tr><tr><td>Fixation buffer</td><td>Sigma Aldrich</td><td>1.00496.5000</td><td>Formaldehyde solution 4%, buffered, pH 6.9&nbsp;</td></tr><tr><td>HCl</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>320331-500mL</td><td>Hydrochloric acid (37%)</td></tr><tr><td>Incubator</td><td>Stuart</td><td>S130H</td><td>Hybridization oven/shaker</td></tr><tr><td>Microscopy slides</td><td>Avantor VWR</td><td>631-1560</td><td>Single-frosted slides, coloured ends</td></tr><tr><td>Mounting media</td><td>Invitrogen</td><td>P36984</td><td>ProLong glass antifade mountant excitation/emission max 361/497 nm</td></tr><tr><td>Mouse IgG1&nbsp;isotype control</td><td>R&amp;D Systems</td><td>MAB002</td><td></td></tr><tr><td>NaOH</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S8045-500G</td><td>Sodium hydroxide &ge; 98%</td></tr><tr><td>Normal donkey serum</td><td>Jackson ImmunoResearch Labs</td><td>017-000-121</td><td></td></tr><tr><td>pH meter</td><td>MeterLab</td><td>R21M002&nbsp;</td><td>PHM210 standard pH meter&nbsp;</td></tr><tr><td>Pipette tips (1000 &micro;L)</td><td>Biosphere</td><td>70.1186.210</td><td>1250&micro;L filtered pipette tips</td></tr><tr><td>Pipette tips (200 &micro;L)</td><td>Corning</td><td>4823</td><td>200&micro;L filtered pipette tips</td></tr><tr><td>SABG Kit</td><td>Cell signaling</td><td>9860S</td><td>Senescence beta-galactosidase staining kit</td></tr><tr><td>Secondary antibody, Alexa Fluor 555</td><td>Invitrogen</td><td>A31570</td><td>Donkey anti-mouse IgG (H+L) highly cross-adsorbed excitation/emission max 553/568 nm</td></tr><tr><td>Tween-20</td><td>Fisher Scientific</td><td>10419000</td><td>Pure, Fisher chemical</td></tr><tr><td>Water bath</td><td>Rowe Scientific</td><td>SWB20D</td><td>Standard water bath</td></tr><tr><td>WGA</td><td>Invitrogen</td><td>W11261</td><td>Wheat Germ Agglutinin (WGA) Alexa Fluor 488 conjugate: Excitation/emission max 495/519 nm</td></tr></tbody></table>

senescentiedetectie met behulp van gereflecteerd licht in de vetachtige stromale vaatfractie

Senescence Detection Using Reflected Light in Adipose Stromal Vascular Fraction

Senescentiedetectie met behulp van gereflecteerd licht in de vetachtige stromale vaatfractie

Cellular senescence is a stress-induced state characterized by permanent cell-cycle arrest and the development of a distinctive secretory profile that ...

senescence-detection-using-reflected-light-adipose-stromal-vascular

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

Traditionele methoden voor de beoordeling van de differentiatie van de adipogenic zijn goedkoop en makkelijk te gebruiken, maar zijn niet specifiek voor wijzigingen in genexpressie. Hebben we een test om te kwantificeren mesenchymale celdifferentiatie in volwassen adipocytes met behulp van een specifieke marker van afkomst. Deze bepaling heeft diverse toepassingen in basisonderzoek en klinische geneeskunde.

Visualisatie en kwantificering van mesenchymale cel Adipogenic differentiatie mogelijkheden met een Lineage specifieke Marker

Als gevolg van het hoge vetgehalte, heeft adipeus weefsel is uitdagend om te visualiseren met behulp van traditionele histologische methoden. Adipo-Clear is een weefsel clearing techniek waarmee robuuste labeling en hoge resolutie volumetrische fluorescerende beeldvorming van vetweefsel. Hier beschrijven we de methoden voor de bereiding van de monsters, voorbehandeling, kleuring, clearing en montage voor imaging.

Adipo-Clear: Een weefsel Clearing methode voor driedimensionale beeldvorming van vetweefsel

De focus van de huidige studie is om aan te tonen van de gehele-mount immunokleuring en visualisatie techniek als een ideale methode voor 3D beeldvorming van vetweefsel architectuur en cellulaire component.

Visualisatie van 3D witte adipeus weefsel structuur met behulp van geheel-mount kleuring

Nieuw bloed vaartuig vorming en sympathieke innervatie arm spelen cruciale rol in het adipeus weefsel remodeling. Er blijven echter technische problemen in het visualiseren en kwantitatief meten van vetweefsel. Hier presenteren we een protocol om met succes een label en de dichtheden van bloedvaten en zenuwvezels in verschillende vetweefsel kwantitatief te vergelijken.

Co kleuring bloedvaten en zenuwvezels in adipeus weefsel

Dit protocol biedt een efficiënte collagenase-verteringsmethode voor isolatie van levensvatbare adipocyten en stromale vasculaire fractie-SVF-cellen uit menselijk visceraal vet in één enkel proces, inclusief methodologie om hoogwaardig RNA uit adipocyten te verkrijgen en fenotypificatie van SVF-macrofagen door kleuring van meerdere membraangebonden markers voor analyse door middel van flowcytometrie.

Isolatie van levensvatbare vetcellen en stromale vasculaire fractie uit menselijk visceraal vetweefsel geschikt voor RNA-analyse en macrofaagfenotypering

Preadipocyten worden geïsoleerd uit de stromale vasculaire fractie van interscapulier bruin vetweefsel van pasgeboren muizen en gedifferentieerd tot cellen die lipidedruppeltjes accumuleren, moleculaire markers tot expressie brengen en de mitochondriale morfologie van volwassen bruine vetcellen vertonen. Deze cellen worden verder geanalyseerd door middel van immunofluorescentie en transmissie-elektronenmicroscopie.

Differentiatie en beeldvorming van bruine vetcellen uit de stromale vasculaire fractie van interscapulier vetweefsel van pasgeboren muizen

Dit protocol beschrijft een methodologie voor het isoleren en identificeren van van vetweefsel afgeleide mesenchymale stamcellen (MSC's) van Sprague Dawley-ratten.

Isolatie en identificatie van mesenchymale stamcellen afgeleid van vetweefsel van Sprague Dawley-ratten

Dit protocol beschrijft de semi-geautomatiseerde isolatie van de stromale vasculaire fractie (SVF) uit muizenvetweefsel om preadipocyten te verkrijgen en adipocytendifferentiatie in vitro te bereiken. Het gebruik van een weefseldissociator voor collagenasevertering vermindert experimentele variatie en verhoogt de reproduceerbaarheid.

Semi-geautomatiseerde isolatie van de stromale vasculaire fractie uit muizenwit vetweefsel met behulp van een weefseldissociator

Hier beschrijven we een protocol voor het isoleren, kweken en fenotyperen van microvasculaire endotheelcellen uit menselijk onderhuids vetweefsel (hSATMVEC's). Daarnaast beschrijven we een experimenteel model van hSATMVEC-adipocyte overspraak.

Bestudering van overspraak van vet-endotheelcellen en adipocyten in menselijk onderhuids vetweefsel

Hier presenteren we een standaardmethode om effectief stamcellen en adipocyten van vetweefsel te isoleren, gekenmerkt door &gt;90% vermindering van verwerkingstijd, hoge cellevensvatbaarheid en brede compatibiliteit.

Efficiënte isolatie van vetweefselstamcellen en adipocyten uit varkensvet vetweefsel

Leer een geoptimaliseerde gereflecteerde licht confocale microscopiemethode voor kwantitatieve detectie van senescentie-gerelateerde β-galactosidase in menselijke stromale vaatfractiecellen.

Senescentiedetectie met behulp van gereflecteerd licht in de vetachtige stromale vaatfractie

Meer video's verkennen