Name: Een geoptimaliseerde methode om vrouwelijke muizenurethrale epitheel te isoleren voor eencellige en immunofluorescentieanalyse (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-06-12T14:30:00.000+00:00
Duration: 11 min 2 s
Description: Leer een geoptimaliseerde methode om vrouwelijke muizenurethrale epitheel te isoleren voor eencellige en immunofluorescentieanalyse. Deze techniek ondersteunt onderzoek naar afweermechanismen in de lagere urinewegen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td>#5 fine forceps</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>10% neutraal gebufferd formaline</td><td>Sigma Aldrich</td><td>HT501128</td><td></td></tr><tr><td>10X HBSS</td><td>Sigma Aldrich</td><td>H4641</td><td></td></tr><tr><td>12-well plate</td><td>Corning</td><td>3513</td><td></td></tr><tr><td>30-micron pre-scheidingsfilter&nbsp;</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-041-407</td><td></td></tr><tr><td>A83-01</td><td>Sigma Aldrich</td><td>SML0788</td><td></td></tr><tr><td>Accutase</td><td>Sigma Aldrich</td><td>SCR005</td><td></td></tr><tr><td>Adobe Illustrator</td><td>Adobe</td><td></td><td>Voor het maken van figuurpanelen</td></tr><tr><td>Adobe Photoshop</td><td>Adobe</td><td></td><td>Voor het maken van figuurpanelen</td></tr><tr><td>Advanced DMEM/F12</td><td>Gibco</td><td>12634010</td><td></td></tr><tr><td>Antibioticum/antimycoticum</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A5955</td><td></td></tr><tr><td>Anti-CD326 (EpCAM)</td><td>Invitrogen</td><td>17-5791-82</td><td>1:20 verdunning, voor Flow cytometry</td></tr><tr><td>Anti-CD45</td><td>Tonbo</td><td>35-0451-U100</td><td>1:20 verdunning, voor Flow cytometry</td></tr><tr><td>Anti-CDH1 (Konijn)</td><td>Cell Signalling Technology</td><td>3195S</td><td>1:200 verdunning</td></tr><tr><td>Anti-F4/80</td><td>Tonbo</td><td>50-4801-U100</td><td>1:20 verdunning, voor Flow cytometry</td></tr><tr><td>Anti-F4/80 (Rat)</td><td>Invitrogen</td><td>14-4801-82</td><td>1:200 verdunning</td></tr><tr><td>Anti-Keratin 13 (Konijn)</td><td>Abcam</td><td>ab92551</td><td>1:200 verdunning</td></tr><tr><td>Anti-Keratin 4 (Muis)</td><td>Abcam</td><td>ab9004</td><td>1:200 verdunning</td></tr><tr><td>Anti-Keratin 5 (Kip)</td><td>Biolegend</td><td>905904</td><td>1:800 verdunning</td></tr><tr><td>Anti-Keratin 5 (Konijn)</td><td>Cell Signaling Technology</td><td>71536</td><td>1:200 verdunning</td></tr><tr><td>Anti-p63 (Muis)</td><td>Biocare medical</td><td>CM163A</td><td>1:200 verdunning</td></tr><tr><td>Axioobserver 7</td><td>Zeiss</td><td>431007-9904-000</td><td></td></tr><tr><td>B27 supplement</td><td>Invitrogen</td><td>12587010</td><td></td></tr><tr><td>Bovine serum albumine (BSA), fractie V</td><td>Genetix</td><td>PG-2330</td><td></td></tr><tr><td>CD-1 Muizen</td><td>Charles River, USA</td><td>Crl:CD1(ICR)</td><td></td></tr><tr><td>Cultrex BME</td><td>R&amp;D systems</td><td>3445-005-01</td><td></td></tr><tr><td>DAPI-oplossing&nbsp;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D5942</td><td></td></tr><tr><td>D-Glucose</td><td>Qualigens</td><td>Q15405</td><td></td></tr><tr><td>Dimethyl sulfaat (DMSO)</td><td>Himedia</td><td>MB058</td><td></td></tr><tr><td>di-Natrium waterstof ortofosfaat (Na2HPO4)</td><td>Qualigens</td><td>Q15825</td><td></td></tr><tr><td>DNase I</td><td>Sigma Aldrich</td><td>10104159001</td><td></td></tr><tr><td>Ezel anti-Kip IgG (H+L) (AF488)</td><td>Jackson Immunoresearch&nbsp;</td><td>703-545-155</td><td>1:500 verdunning</td></tr><tr><td>Ezel anti-Muis IgG (H+L) (AF488)</td><td>Jackson Immunoresearch&nbsp;</td><td>715-545-151</td><td>1:500 verdunning</td></tr><tr><td>Ezel anti-Muis IgG (H+L) (AF594)</td><td>Jackson Immunoresearch</td><td>715-585-151</td><td>1:500 verdunning</td></tr><tr><td>Ezel anti-Konijn IgG (H+L) (AF594)</td><td>Jackson Immunoresearch</td><td>711-585-152</td><td>1:500 verdunning</td></tr><tr><td>Ezel anti-Konijn IgG (H+L) (AF647)</td><td>Jackson Immunoresearch&nbsp;</td><td>711-605-152</td><td>1:500 verdunning</td></tr><tr><td>Ezel anti-Rat IgG (H+L) (AF647)</td><td>Jackson Immunoresearch&nbsp;</td><td>712-605-153</td><td>1:500 verdunning</td></tr><tr><td>Ezel anti-Rat IgG (H+L) (AF594)</td><td>Jackson Immunoresearch&nbsp;</td><td>712-585-153</td><td>1:500 verdunning</td></tr><tr><td>EGF</td><td>PeproTech</td><td>AF-315-09</td><td></td></tr><tr><td>Eosine</td><td>Himedia</td><td>GRM938</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>Supelco</td><td>1.00983</td><td></td></tr><tr><td>Eukitt montagemedia&nbsp;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>3989</td><td></td></tr><tr><td>FGF10</td><td>PeproTech</td><td>450-61</td><td></td></tr><tr><td>Filtercap sorteerbuisjes</td><td>&nbsp;Falcon/Corning</td><td>352235</td><td></td></tr><tr><td>Ghost Dye&trade; Violet 450</td><td>Tonbo biosciences</td><td>13-0863-T100</td><td></td></tr><tr><td>Glutamax</td><td>Invitrogen</td><td>35050061</td><td></td></tr><tr><td>Glycerol anhydrisch</td><td>Merck</td><td>DA1P692899</td><td></td></tr><tr><td>Hemotoxyline</td><td>Polysciences</td><td>24243</td><td></td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Gibco</td><td>15630080</td><td></td></tr><tr><td>Paarden serum</td><td>Gibco</td><td>26050088</td><td></td></tr><tr><td>Kaluza Analysis</td><td>Beckman Coulter</td><td>Kaluza Analysis 2.4</td><td>Analyse van flow cytometry gegevens</td></tr><tr><td>Magnesiumchloride (MgCl2)</td><td>Qualigens</td><td>Q15535</td><td></td></tr><tr><td>Mouse TruStain FcX (anti-muis CD16/32 )</td><td>Biolegend</td><td>101320</td><td></td></tr><tr><td>N-acetyl cysteïne</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A9165</td><td></td></tr><tr><td>Nicotinamide&nbsp;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>N0636</td><td></td></tr><tr><td>Noggin&nbsp;</td><td>PeproTech</td><td>AF-250-38</td><td></td></tr><tr><td>n-Propylgallaat</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P3130</td><td></td></tr><tr><td>Paraffinewas&nbsp;</td><td>Qualigens</td><td>Q19215</td><td></td></tr><tr><td>Kaliumchloride (KCl)</td><td>Qualigens</td><td>Q13305</td><td></td></tr><tr><td>Kaliumdiwaterstoffosfaat (KH2PO4)</td><td>Qualigens</td><td>19465</td><td></td></tr><tr><td>Primocin</td><td>Invivogen</td><td>ant-pm-05</td><td></td></tr><tr><td>RBC Lysis Buffer (10X)</td><td>Tonbo biosciences</td><td>TNB-4300-L100</td><td></td></tr><tr><td>Retinoic zuur</td><td>Sigma Aldrich</td><td>R2625</td><td></td></tr><tr><td>Rocki&nbsp; (Y-27632)</td><td>Cell Signalling Technology</td><td>1

een geoptimaliseerde methode om vrouwelijke muizenurethrale epitheel te isoleren voor eencellige en immunofluorescentieanalyse

An Optimized Method To Isolate Female Mouse Urethral Epithelium For Single-Cell And Immunofluorescence Analysis

Een geoptimaliseerde methode om vrouwelijke muizenurethrale epitheel te isoleren voor eencellige en immunofluorescentieanalyse

The urethra, lined by epithelial cells, serves as the conduit for urine outflow from the body. The epithelial lining of the urethra comprises distinct ...

an-optimized-method-to-isolate-female-mouse-urethral-epithelium-for

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

Deze video zal aantonen methoden om transurethrally veroorzaken muis infecties van de urinewegen en kwantificeren van de omvang van de resulterende infecties.

Transurethrale Inductie van Mouse urineweginfectie

We beschrijven hier een efficiënte high...

Een High Throughput In situ Hybridisatie Methode om mRNA expressie patronen karakteriseren in de Fetal Mouse lagere urogenitale tractus

Een efficiënte manier om lymfocyten uit muizen genitaal isoleren beschreven. Deze methode maakt gebruik van enzymdigestie en Percoll gradiëntscheiding om efficiënte isolatie. Deze techniek is ook aangepast aan gebruik in andere...

Isolatie van Lymfocyten van Mouse geslachtsorganen Mucosa

Source: Yang, E., et al. Isolation of Single Intracellular Bacterial Communities Generated from a Murine Model of Urinary Tract Infection for Downstream Single-cell Analysis. J. Vis. Exp. (2019)This video demonstrates the manual isolation of single epithelial cells containing intracellular bacterial communities from infected mouse bladder using mouth micropipetting, enabling downstream single-cell analysis of viable host-associated E. coli populations in urinary tract infection...

Isolation of Mouse Bladder Epithelial Cells Containing Intracellular Bacterial Communities

In this video, we describe the procedure for the dissection of the urogenital system or UGS from a male mouse model. This UGS is further dissected ex vivo to isolate the prostate gland and study its role in prostate cancer development.

Extracting Prostate from Mouse Urogenital System: A Technique to Separate Prostate Gland from Other Urinary and Genital System Organs in Male Mouse

De gevestigde model van transuretrale catheterisatie van muizen kan de studie blaas aandoeningen, met inbegrip van infectie van de urinewegen, maar kan alleen worden uitgevoerd bij vrouwtjes. Een nieuw model van mannelijke transuretrale instillation, gepresenteerde, kan onderzoek op een gebied dat gekenmerkt door sterke klinische en epizoötiologische verschillen tussen de geslachten.

Urineweginfectie in een kleine diermodel: transuretrale catheterisatie van mannelijke en vrouwelijke muizen

Dit protocol beschrijft een eenvoudige methode om één, besmet-blaas epitheliale cellen van een lymfkliertest model van urineweginfectie te isoleren.

Isolatie van één intracellulaire bacteriële gemeenschappen gegenereerd op basis van een lymfkliertest Model van urine landstreekbesmetting Downstream eencellige p.a.

Dit protocol beschrijft transillumination-ondersteunde microdissectie van segmenten van volwassen muis seminifereuze tubuli die specifieke stadia van seminifereuze epitheelcyclus vertegenwoordigen, en celtypen daarin, en daaropvolgende immunostaining van squashpreparaten en intacte tubulussegmenten.

Transillumination-Assisted Dissectie van specifieke stadia van de muis seminifereuze epitheelcyclus voor downstream immunostaininganalyses

Een methode voor microdissectie van de eileider van de muis die het mogelijk maakt om de afzonderlijke segmenten te verzamelen met behoud van RNA-integriteit wordt gepresenteerd. Bovendien wordt een niet-enzymatische ovductale celdissociatieprocedure beschreven. De methoden zijn geschikt voor latere gen- en eiwitanalyse van de functioneel verschillende eileidersegmenten en gedissocieerde eileidercellen.

Microdissectie en dissociatie van de murine-eileider: individuele segmentidentificatie en eencellige isolatie

Dit protocol beschrijft methodologieën om endometriumepitheelorganoïden van muizen vast te stellen voor genexpressie en histologische analyses.

Het vaststellen van 3D-endometriumorganoïden uit de baarmoeder van de muis

Dit protocol beschrijft een eendaagse methode voor de isolatie van menselijke eileiderepitheelcellen. Geïsoleerde epitheelcellen kunnen worden geplateerd in 2-dimensionale (2D) cultuur of worden gedissocieerd in eencellige suspensies en worden gebruikt in stroomafwaartse experimenten, waaronder flowcytometrie en eencellige RNA-sequencing.

Een efficiënte methode voor het extraheren van epitelie van de menselijke eileider voor analyses van één cel

Leer een geoptimaliseerde methode om vrouwelijke muizenurethrale epitheel te isoleren voor eencellige en immunofluorescentieanalyse. Deze techniek ondersteunt onderzoek naar afweermechanismen in de lagere urinewegen.

Een geoptimaliseerde methode om vrouwelijke muizenurethrale epitheel te isoleren voor eencellige en immunofluorescentieanalyse

Meer video's verkennen