Name: Het induceren van circadiane faseverschuivingen overdag met behulp van chemogenetische en spectrale benaderingen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-06-12T14:10:00.000+00:00
Duration: 7 min 29 s
Description: Leer chemogenetische en spectrale methoden om circadiane faseverschuivingen overdag bij muizen te induceren. Deze technieken activeren ipRGC's voor precieze manipulatie van de biologische klok en onderzoek naar circadiane plasticiteit.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

<ol>
	<li>Hattar S, Liao HW, Takao M, Berson DM, Yau KW. Melanopsin-containing retinal ganglion cells: architecture, projections, and intrinsic photosensitivity. Science. 2002;295(5557):1065&#8211;70.</li>
	<li>Jones JR, Simon T, Lones L, Herzog ED. SCN VIP neurons are essential for normal light-mediated resetting of the circadian system. J Neurosci. 2018;38(37):7986&#8211;95.</li>
	<li>Coursey PJ. Daily light sensitivity rhythm in a rodent. Science. 1960;131:33&#8211;35.</li>
	<li>Kornhauser JM, Ginty DD, Greenberg ME, Mayo KE, Takahashi JS. Light entrainment and activation of signal transduction pathways in the SCN. Prog Brain Res. 1996;111:133&#8211;46.</li>
	<li>Ding JM, Weber ET, Faiman LE, Rea MA, Gillette MU. Resetting the biological clock: mediation of nocturnal circadian shifts by glutamate and NO. Science. 1994;266(5191):1713.</li>
	<li>Mintz EM, Gillespie CF, Price KM, Albers HE. Activation of NMDA receptors in the suprachiasmatic nucleus produces light-like phase shifts of the circadian clock in vivo. J Neurosci. 1999;19(12):5124&#8211;30.</li>
	<li>Shirakawa T, Moore RY. Glutamate shifts the phase of the circadian neuronal firing rhythm in the rat suprachiasmatic nucleus in vitro. Neurosci Lett. 1994;178(1):47&#8211;50.</li>
	<li>Shibata S, Watanabe A, Hamada T, Ono M, Watanabe S. N-methyl-D-aspartate induces phase shifts in circadian rhythm of neuronal activity of rat SCN in vitro. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 1994;267(2):R360&#8211;R364.</li>
	<li>Asai M, Yamaguchi S, Isejima H, Jonouchi M, Moriya T, et al. Visualization of mPer1 transcription in vitro: NMDA induces a rapid phase shift of mPer1 gene in cultured SCN. Curr Biol. 2001;11(19):1524&#8211;27.</li>
	<li>Sladek M, Sumova A. Modulation of NMDA-mediated clock resetting in the suprachiasmatic nuclei of mPer2 (Luc) mouse by endocannabinoids. Front Physiol. 2019;10:361.</li>
	<li>Shibata S, Moore RY. Neuropeptide Y and optic chiasm stimulation affect suprachiasmatic nucleus circadian function in vitro. Brain Res. 1993;615(1):95&#8211;100.</li>
	<li>Jones JR, Tackenberg MC, McMahon DG. Manipulating circadian clock neuron firing rate resets molecular circadian rhythms and behavior. Nat Neurosci. 2015;18(3):373&#8211;75.</li>
	<li>Kim S, McMahon DG. Light sets the brain&#8217;s daily clock by regional quickening and slowing of the molecular clockworks at dawn and dusk. Elife. 2021;10:e70137.</li>
	<li>de Vries MJ, Treep JA, de Pauw ES, Meijer JH. The effects of electrical stimulation of the optic nerves and anterior optic chiasm on the circadian activity rhythm of the Syrian hamster: involvement of excitatory amino acids. Brain Res. 1994;642(1-2):206&#8211;12.</li>
	<li>Rusak B, Groos G. Suprachiasmatic stimulation phase shifts rodent circadian rhythms. Science. 1982;215(4538):1407&#8211;09.</li>
	<li>Duy PQ, Komal R, Richardson ME, Hahm KS, Fernandez DC, et al. Light has diverse spatiotemporal molecular changes in the mouse suprachiasmatic nucleus. J Biol Rhythms. 2020;35(6):576&#8211;87.</li>
	<li>Liu A, Milner ES, Peng YR, Blume HA, Brown MC, et al. Encoding of environmental illumination by primate melanopsin neurons. Science. 2023;379(6630):376&#8211;81.</li>
	<li>Milner ES, Do MTH. A population representation of absolute light intensity in the mammalian retina. Cell. 2017;171(4):865&#8211;876.e16.</li>
	<li>Komal R, Beier C, Nath A, et al. ipRGC properties prevent light from shifting the SCN clock during daytime. Nature. 2026;650(8103):942&#8211;50. .</li>
	<li>Jewett ME, Rimmer DW, Duffy JF, Klerman EB, Kronauer RE, et al. Human circadian pacemaker is sensitive to light throughout subjective day without evidence of transients. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 1997;273(5):R1800&#8211;R1809.</li>
	<li>Revell VL, Molina TA, Eastman CI. Human phase response curve to intermittent blue light using a commercially available device. J Physiol. 2012;590(19):4859&#8211;68.</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>AAV2-hSyn-DIO-hM3D(Gq)-mCherry</td><td>Addgene</td><td>44361</td><td>Cre-afhankelijke virale vector die codeert voor excitatoire DREADD (hM3Dq) gefuseerd met mCherry voor selectieve ipRGC-activatie</td></tr><tr><td>Anti-c-Fos antilichaam (konijn monoklonaal)</td><td>Cell Signaling Technology</td><td>2250S</td><td>Primair antilichaam gebruikt om c-Fos te detecteren als marker voor neuronale activatie</td></tr><tr><td>Anti-tdTomato antilichaam (geit)</td><td>LSBio</td><td>LS-C340696</td><td>Primair antilichaam gebruikt om de expressie van mCherry/tdTomato reporter aan te tonen</td></tr><tr><td>Blue LED driver</td><td>Thorlabs</td><td>LEDD1B</td><td>Voeding voor het regelen van de intensiteit en output van blauwe LED</td></tr><tr><td>Blue LED lichtbron</td><td>Thorlabs</td><td>M470L5</td><td>LED-bron die blauw licht uitzendt (&lambda;max &asymp; 470 nm) voor fotische stimulatie</td></tr><tr><td>ClockLab software</td><td>Actimetrics</td><td>Versie 6.0.53</td><td>Software voor het verzamelen en analyseren van data over circadiane locomotorische activiteit</td></tr><tr><td>Clozapine-N-oxide (CNO)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C0832-5MG</td><td>Ligand gebruikt om hM3Dq DREADD-receptoren in vivo te activeren</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Invitrogen</td><td>62248</td><td>Fluorescente nucleaire kleuring voor het labelen van celkernen</td></tr><tr><td>Donkey anti-goat Alexa Fluor 555</td><td>Invitrogen</td><td>A21432</td><td>Fluorescente secundair antilichaam voor detectie van geiten primaire antilichamen</td></tr><tr><td>Donkey anti-rabbit Alexa Fluor 488</td><td>Invitrogen</td><td>A21206</td><td>Fluorescente secundair antilichaam voor detectie van konijn primaire antilichamen</td></tr><tr><td>Fluoromount-G</td><td>Invitrogen</td><td>00-4958-02</td><td>Montagemedium gebruikt om fluorescentie in weefselsecties te behouden</td></tr><tr><td>ImageJ (Fiji) software</td><td>NIH</td><td>Versie 2.16.0/1.54g</td><td>Open-source software voor beeldverwerking en kwantitatieve analyse</td></tr><tr><td>Opn4cre Muizen</td><td>The Jackson Laboratry</td><td>RRID:IMSR_JAX:035925</td><td>Muizen gebruikt voor chemogenetische activatie</td></tr><tr><td>Violet LED driver</td><td>Mightex</td><td>SLA-1000-2</td><td>Voeding voor het regelen van violette LED-uitvoer</td></tr><tr><td>Violet LED lichtbron</td><td>Mightex</td><td>BLS-LCS-0385-04-22</td><td>LED-bron die violet licht uitzendt (&lambda;max &asymp; 385 nm) voor golflengte-specifieke stimulatie</td></tr><tr><td>Wild-type muizen</td><td>The Jackson Laboratry</td><td>Jackson stam #101043</td><td>Muizen gebruikt voor violet licht experiment</td></tr></tbody></table>

het induceren van circadiane faseverschuivingen overdag met behulp van chemogenetische en spectrale benaderingen

Inducing Daytime Circadian Phase Shifts Using Chemogenetic and Spectral Approaches

Het induceren van circadiane faseverschuivingen overdag met behulp van chemogenetische en spectrale benaderingen

In mammals, circadian phase shifting during the daytime is limited by reduced photic responsiveness of the suprachiasmatic nucleus (SCN), restricting the ...

inducing-daytime-circadian-phase-shifts-using-chemogenetic-spectral

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowetenschap

Circadiane klokken functioneren binnen de individuele cellen, dat wil zeggen, ze zijn cel-autonoom. We beschrijven werkwijzen voor het genereren van cel-autonome klok modellen niet-invasieve, luciferase-gebaseerde real-time bioluminescentie technologie. Reporter cellen handelbaar, functionele modelsystemen voor het bestuderen van circadiane biologie.

Monitoring Cell-autonome circadiane klok Rhythms of genexpressie met behulp van Luciferase Bioluminescentie Reporters

Een in vitro bioluminescentie test om te bepalen van cellulaire circadiane ritme in de borstklier epitheliale cellen wordt gepresenteerd. Deze methode maakt gebruik van zoogdiercellen verslaggever plasmiden gedestabiliseerd luciferase onder de controle van de periode 2 gen promotor uitdrukken. Het kan worden aangepast aan andere celtypes te evalueren orgel-specifieke effecten op de circadiane ritme.

In Vitro Bioluminescentie Assay te karakteriseren Circadian Rhythm in borstklier epitheliale cellen

Genetisch gecodeerde luciferase is een populaire niet-invasieve verslaggever van genexpressie. Gebruik van een geautomatiseerde longitudinale luciferase imaging gas - en temperatuur-geoptimaliseerde recorder (ALLIGATOR) staat longitudinale opname van bioluminescente cellen onder een brede waaier van voorwaarden stelt. Hier laten we zien hoe ALLIGATOR kan worden gebruikt in het kader van circadiane ritmen onderzoek.

Flexibele meting van bioluminescente verslaggevers met behulp van een geautomatiseerde longitudinale Luciferase Imaging Gas - en temperatuur-geoptimaliseerde Recorder (ALLIGATOR)

Deze nieuw ontwikkelde fluorescentie gebaseerde technologie kan op lange termijn van de transcriptie van de circadiane klok genen in de suprachiasmatic kern (SCN) vrij bewegen muizen in real time en met een hoge temporele resolutie.

In Vivo Controle van de circadiane klok genexpressie in de muis Suprachiasmatic kern met behulp van fluorescentie verslaggevers

Slaap verlies en circadiane misuitlijning dragen bij aan tal van operationele ongevallen en incidenten. De effectiviteit van tegenmaatregelen en werkplanningontwerpen gericht op het verzachten van vermoeidheid kan een uitdaging zijn om te evalueren in operationele omgevingen. Dit manuscript vat een benadering samen voor het verzamelen van slaap-, circadiane-, Vermoeidheids-en prestatiegegevens in complexe operationele omgevingen.

Het verzamelen van slaap-, circadiane-, vermoeidheid-en prestatiegegevens in complexe operationele omgevingen

Hier presenteren we een methode om dagritmes in prestaties te onderzoeken na nauwkeurige categorisering van deelnemers in circadiane fenotypegroepen op basis van de München ChronoType Questionnaire, gouden standaard circadiane fase biomarkers en actigrafische metingen.

Human Circadian Phenotyping en Diurnal Performance Testing in de echte wereld

Hier beschrijven we hoe we Drosophila kunnen synchroniseren met een circadiane dag. Dit is de eerste en belangrijkste stap die nodig is voor het bestuderen van biologische ritmes en chronobiologie.

Circadiane Entrainment van Drosophila Melanogaster

We beschrijven de procedures voor de registratie van de dagelijkse bewegingsactiviteit ritmes...

Het testen van de locomotorische activiteit te circadiaanse ritmes Studie en parameters Sleep in Drosophila</em

RNA-expressieprofilering van specifieke hersenregio's bij muizen vereist een nauwkeurige en reproduceerbare strategie voor weefselverzameling. Hier wordt een protocol beschreven dat gebruikmaakt van zowel coronale hersensecties als microdissectie met behulp van een weefselpons. De opbrengst en kwaliteit van het totale RNA dat uit de resulterende monsters is verkregen, bevestigen het nut van de beschreven methode.

Niet-Laser Capture Microscopie Aanpak voor de Microdissection van Discrete Mouse Brain Regio&#39;s voor Totaal RNA isolatie en Downstream next-generation sequencing en Gene Expression Profiling

We zien hoe veranderingen in de intracellulaire vrije calciumconcentratie en synaptische werkzaamheid kan gelijktijdig monitoren in een ganglion bereiding...

Volgen van veranderingen in de intracellulaire calciumconcentratie en Synaptic werkzaamheid in de Mollusc<em&gt; Aplysia</em

Leer chemogenetische en spectrale methoden om circadiane faseverschuivingen overdag bij muizen te induceren. Deze technieken activeren ipRGC's voor precieze manipulatie van de biologische klok en onderzoek naar circadiane plasticiteit.

Het induceren van circadiane faseverschuivingen overdag met behulp van chemogenetische en spectrale benaderingen

Meer video's verkennen