Name: Voorbereiding en Fractionering van Xenopus laevis Egg Extracten (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-08-27T12:38:00.000+00:00
Duration: 7 min 45 s
Description: Leer de bereiding en fractie van Xenopus laevis-ei-extracten voor celbiologisch onderzoek. Deze methode scheidt cytoplasmatische en lichte membraanfracties voor biochemische analyse van kernassemblage en DNA-replicatie.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

De volledige tekst protocol voor deze experimentele aanpak is beschikbaar in <a href="http://www.mrw.interscience.wiley.com/emrw/9780471143031/cp/cpcb/article/cb1110/current/abstract ]">Current Protocols in Cell Biology</a> .

De auteurs hebben niets te melden.

voorbereiding en fractionering van xenopus laevis egg extracten

Preparation and Fractionation of Xenopus laevis Egg Extracts

Ruwe en gefractioneerde Xenopus ei-extracten kan worden gebruikt om ingrediënten voor reconstructie van cellulaire processen voor morfologische en biochemische analyses. Ei lysis en differentiële centrifugatie worden gebruikt om het ruwe extract die op hun beurt gebruikt worden om in gefractioneerde extracten en licht membraan voorbereidingen voor te bereiden voor te bereiden.

Voorbereiding en Fractionering van Xenopus laevis Egg Extracten

Ruwe en gefractioneerde eiextracten van Xenopus kunnen worden gebruikt om ingrediënten te leveren voor het reconstitueren van cellulaire processen voor morfologische en biochemische ...

In een vorige video hebben we gedemonstreerd hoe eieren van volwassen XUS labis kunnen worden verkregen en ontdaan van hun gelei. Ruwe extracten van vrouwelijke cellen uit deze eieren vormen een nuttige bron van cytoplasmatisch en organelmateriaal voor de in vitro reconstitutie van cellulaire processen, zoals nucleaire assemblage, nucleaire proteïnimport en DNA-replicatie. Hallo, mijn naam is Marie Cross en ik ben een promovendus in het laboratorium van Dr. Maureen Power in de afdeling Celbiologie aan de Emory University in Atlanta, Georgia.Vandaag laten we u zien hoe u ei-extract kunt fractioneren in oplosbare cytoplasmatische en lichte membraanfracties. Deze procedure omvat de volgende stappen: het lyseren van de eieren, het verzamelen van de ruwe extracten, het fractioneren van de ruwe ei-extracten, en het verzamelen van het cytoplasmatische extract en de lichte membraanfractie van het ei-extract. Laten we beginnen.Laten we beginnen met het lyseren van de eieren en het verzamelen van ruwe extracten vóór de lysering van de eieren. Een transferpipet moet worden gemaakt door een Pasteurpipet te breken en vervolgens het gebroken uiteinde voorzichtig in een pipetbol te plaatsen. Bren

preparation-and-fractionation-of-xenopus-laevis-egg-extracts

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

De eieren van de Xenopus laevis intact, gelyseerd en / of gefractioneerde nuttig zijn voor een breed scala aan experimenten. Dit protocol laat zien hoe eieren leggen induceren, te verzamelen en dejelly de eieren, en sorteren van de eieren op een beschadigde eieren te verwijderen.

Het verkrijgen van Eieren van Xenopus laevis Teven

Kernmembraan assemblage is een essentiële stap in de celdeling-cyclus, dit proces kan worden gerepliceerd in de proefbuis door het combineren van Xenopus sperma chromatine, cytosol, en licht membraan fracties. Compleet kernen worden gevormd, met inbegrip van nucleaire membranen met poriën complexen, en deze gereconstitueerde kernen zijn in staat van normale nucleaire processen.

In Vitro Nuclear Assembly Met behulp van Gefractioneerde Xenopus Egg Extracten

Xenopus embryonale epitheel is een ideaal modelsysteem om cel gedrag, zoals polariteit ontwikkeling en vorm veranderen tijdens epitheliale morfogenese bestuderen. Traditionele histologie van vaste monsters wordt in toenemende mate aangevuld door live-cell imaging confocale. Hier laten we zien methoden om de kikker weefsel te isoleren en te visualiseren live-epitheliale cellen en hun cytoskelet met behulp van live-cell confocale microscopie.

Live-cell imaging en kwantitatieve analyse van de embryonale epitheelcellen in Xenopus laevis</em

Deze video toont een protocol methode voor het genereren van...

De productie van transgene Xenopus laevis Door restrictie-enzym Mediated Integratie en nucleaire transplantatie

Xenopus ei extract is een nuttig modelsysteem om de DNA schade checkpoint onderzoeken. Dit protocol is voor de bereiding van Xenopus ei extracten en DNA schade checkpoint inducerende reagentia. Deze technieken kunnen worden aangepast aan een verscheidenheid van DNA beschadigende benaderingen in de studie van de DNA schade checkpoint signaling.

Studie van de DNA-schade Checkpoint met behulp van<em&gt; Xenopus</em&gt; Egg Extracten

Productie van<em&gt; Xenopus tropicalis</em&gt; Egg Extracten aan microtubuli-geassocieerde RNA&#39;s identificeren

Een werkwijze wordt beschreven voor het analyseren eiwitafbraak met radioactief gemerkt en luciferase-fusie-eiwitten in Xenopus ei extract en de aanpassing voor high-throughput screening kleinmoleculige modulatoren van eiwitafbraak.

Reconstitutie van β-catenine afbraak in<em&gt; Xenopus</em&gt; Egg Extract

De moleculaire mechanismen van de decondensatie van sterk gecompacteerde mitotische chromatine zijn slecht gedefinieerd. We presenteren een celvrije test op basis van mitotische chromatineclusters geïsoleerd uit HeLa-cellen en Xenopus laevis eierextract die het decondensatieproces in vitro getrouw reconstrueert.

Een Cell Gratis Assay om te studeren Chromatine decondensatie aan het eind van Mitosis

Mechanismen van cellulaire en intracellulaire schaalverdeling blijven ongrijpbaar. Het gebruik van Xenopus embryo-extracten is steeds gebruikelijker geworden om mechanismen van orgaangrootte-regulatie te verduidelijken. Deze methode beschrijft de bereiding van embryo-extract en een nieuwe nucleaire schaalverdelingstest waardoor mechanismen van nucleaire grootte-regulatie kunnen worden geïdentificeerd.

Een celvrij Assay met behulp van<em&gt; Xenopus laevis</em&gt; Embryo Extracten om te studeren mechanismen van Nuclear Size Verordening

Door encapsulating ei extracten van Xenopus laevis in water-in-olie micro presenteren we een methode voor het genereren van in vitro zichzelf onderhoudende mitotische oscillaties op het niveau van eencellige.

Reconstructie van de celcyclus oscillaties in Micro van cel-vrije Xenopus ei extracten

We beschrijven een methode voor de bereiding en live beeldvorming van onverdunde cytoplasmatische extracten van Xenopus laevis-eieren .

Xenopus laevis | Voorbereiding van ei-extract en live beeldvormingsmethoden voor het visualiseren van dynamische cytoplasmatische organisatie

Leer de bereiding en fractie van Xenopus laevis-ei-extracten voor celbiologisch onderzoek. Deze methode scheidt cytoplasmatische en lichte membraanfracties voor biochemische analyse van kernassemblage en DNA-replicatie.

Voorbereiding en Fractionering van Xenopus laevis Egg Extracten

Meer video's verkennen