Chromatografia kolumnowa to technika, która wykorzystuje wypełnioną kolumnę do oddzielania związków na podstawie ich interakcji z fazą stacjonarną, która zwykle ma postać mikroskopijnych kulek. Przestrzenie między kulkami są wypełnione rozpuszczalnikiem. Otwarcie kolumny umożliwia przepływ rozpuszczalnika przez fazę stacjonarną. Kiedy mieszanina jest nakładana na górną część wypełnionej kolumny, a następnie większa ilość rozpuszczalnika, mieszanina przechodzi do fazy ruchomej i przepływa przez fazę stacjonarną.
Każdy składnik mieszaniny oddziałuje z fazą stacjonarną w inny sposób. Niektóre składniki mają słabe oddziaływania z fazą stacjonarną, a więc szybko poruszają się w kolumnie, podczas gdy inne mają silne oddziaływania z fazą stacjonarną, a zatem poruszają się wolniej. To rozdziela różne związki na pasma, które są zbierane w małych frakcjach. Umożliwia to oczyszczenie każdego związku.
Jakie właściwości można zatem wykorzystać do rozdzielania mieszanin? Jedną z najczęściej stosowanych właściwości jest polaryzacja. W tym celu jako fazę stacjonarną często stosuje się żel krzemionkowy, który jest formą dwutlenku krzemu. Żel krzemionkowy oddziałuje ze związkami poprzez oddziaływani
At the end of this lab, students should know...
Jakie są dwie fazy w chromatografii kolumnowej?
Chromatografia kolumnowa obejmuje fazę ruchomą i fazę stacjonarną.
Jak rozdzielane są mieszaniny w chromatografii kolumnowej?
Związki rozdzielają się na podstawie ich interakcji z fazą stacjonarną.
Jakie związki eluują się najpierw?
Związki słabo oddziałujące z fazą stacjonarną eluują się ...