Nieludzkie naczelne są istotnym gatunkiem translacyjnym dla naszego zrozumienia prawidłowych procesów zachodzących w mózgu. Organizacja anatomiczna mózgu naczelnych może dostarczyć ważnych informacji na temat stanów prawidłowych i patologicznych u ludzi.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Disekcja mózgu naczelnych zwierząt niebędących ludźmi w przestrzeni stereotaksycznej
W tym artykule
Podsumowanie
Streszczenie
Wykorzystanie naczelnych innych niż człowiek zapewnia doskonały model translacyjny dla naszego zrozumienia procesów rozwojowych i starzenia się u ludzi1-6Ponadto zastosowanie naczelnych niebędących ludźmi umożliwiło ostatnio naturalne modelowanie złożonych zaburzeń psychiatrycznych, takich jak nadużywanie alkoholu7W niniejszym opracowaniu opisujemy technikę blokowania mózgu w płaszczyźnie wieńcowej u małpy werwetki (Chlorocebus aethiops sabeus) w nienaruszonej czaszce w przestrzeni stereotaksycznej. Metoda opisana w niniejszym opracowaniu zapewnia standardową płaszczyznę cięcia pomiędzy blokami i osobnikami oraz minimalizuje liczbę przekrojów częściowych między blokami. Cięcie bloku tkanki w płaszczyźnie czołowej ułatwia również wyznaczenie obszaru zainteresowania. Metoda ta pozwala na uzyskanie bloków o rozmiarach umożliwiających pracę, ponieważ jedna półkula małpy z gatunku vervet daje ponad 1200 przekrojów przy cięciu o grubości 50μm. Ponadto podział mózgu na bloki o wielkości 1cm ułatwia penetrację sacharozy w celu krioprotekcji i pozwala na krojenie bloku na standardowym kriostacie.
Protokół
Część 1: Obróbka wstępna tkanki
- Tkanka powinna zostać dobrze przepłukana paraformaldehydem, glutaraldehydem lub formaliną. Można to osiągnąć poprzez standardową perfuzję transkardialną, zazwyczaj stosowaną podczas pobierania innych organów. W niniejszym badaniu obiekt został głęboko uśpiony za pomocą chlorowodorku ketaminy (10 mg/kg, i.m.), uśmiercony przedawkowaniem pentobarbitalu sodu (25 mg/kg, i.v.) i poddany perfuzji transkardialnej 0.1 M PBS aż do całkowitego upuszczenia krwi. Następnie przez 5 min zastosowano 4% roztwór paraformaldehydu w PBS (~1 liter).
Część 2: Blokowanie stereotaktyczne
- Przed umieszcze....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dyskusja
Małpka z St. Kitts (Chlorocebus aethiops sabeus) jest naczelnym z Nowego Świata, u którego wzorce i tempo rozwoju kory oraz struktur podkorowych mózgu są podobne do ludzkich. Gatunek ten był wykorzystywany do modelowania złożonych zaburzeń behawioralnych występujących u ludzi, takich jak zachowania lękowe, nadciśnienie8, hemisferektomia9, choroba Parkinsona10, choroba Alzheimera11 oraz nadużywanie alkoholu12. W ostatnim czasie gatunek ten posłużył do badania.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Oświadczenia
Autorzy nie mają nic do ujawnienia.
Podziękowania
Autorzy chcieliby podziękować Ikiel Ptito za stałe wsparcie techniczne. Grant NSERC dla MP.
....Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Skalpel | Fine Science Tools | 10003-12 | |
| Ostrza do skalpela | Fine Science Tools | 10011-00 | |
| Nożyczki | Fine Science Tools | 14090-11 | Wystarczą dowolne nożyczki chirurgiczne |
| Kleszczyki kostne | Fine Science Tools | 16121-14 | |
| Pinceta | Fine Science Tools | 11027-12 | |
| Papier filtrujący | Fisher Scientific | 09-924-150 | |
| Aparat stereotaktyczny | Kopf Instruments | ||
| Ostrze do krojenia tkanek | Thomas Scientific |
Bibliografia
- Gallagher, M., Rapp, P. R. The use of animal models to study the effects of aging on cognition. Annu Rev Psychol 48. , 339-370 (1997).
- Clancy, B., Darlington, R., Finlay, B. Translating developmental time across mammalian species. Neuroscience. 105, 7-17 (2001).
- Nowakowski....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Przedruki i uprawnienia
