Method Article

Tworzenie mysich eksperymentalnych tętniaków aorty brzusznej za pomocą elastazy

DOI:

10.3791/1280

July 23rd, 2009

In This Article

Summary

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ten film pokazuje, jak wywołać tętniaki aorty brzusznej (AAA) u myszy poprzez przejściową infuzję śródświateł elastazy trzustkowej świni do segmentu podnerkowego aorty brzusznej. Model ma możliwość dodania szerokiego wglądu w patobiologię AAA ze względu na pojawienie się licznych myszy transgenicznych i z nokautem genowym.

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Przejściowy infuzja śródświateł elastazy trzustki wieprzowej do podnerkowego odcinka aorty brzusznej jest najczęściej stosowanym zwierzęcym modelem tętniaka aorty brzusznej (AAA) od czasu, gdy został po raz pierwszy opisany u szczurów przez Anidjara i współpracowników. 1 Uzasadnienie jego rozwoju opierało się na zaburzonym charakterze elastyny obserwowanym w AAA. Ten model szczura został zmodyfikowany w celu wytworzenia AAA w okolicy podnerkowej aorty myszy. 2 Model ma możliwość dodania szerokiego wglądu w patobiologię AAA ze względu na pojawienie się licznych myszy transgenicznych i myszy z nokautem genowym. Co więcej, jest to realna platforma do testowania potencjalnych środków terapeutycznych dla AAA. W tym filmie pokazujemy procedurę infuzji elastazy AAA stosowaną w naszym laboratorium.

Myszy są znieczulane przy użyciu 2,5% izofluranu, a laparotomia jest wykonywana w sterylnych warunkach. Aorta brzuszna jest izolowana za pomocą operacyjnego mikroskopu stereoskopowego (Leica). Po umieszczeniu tymczasowych ligatur wokół bliższej i dalszej aorty, w rozwidleniu tworzy się aortomię z końcówką igły o rozmiarze 30. Zwężający się na gorąco odcinek rurki polietylenowej PE-10 jest wprowadzany przez aortotomię i zabezpieczany. Światło aorty jest następnie perfundowane przez 5-15 minut przy 100 mm Hg solą fizjologiczną zawierającą elastazę trzustkową świń typu I (4,5 U/ml; Sigma Chemical Co.). Po usunięciu cewnika perfuzyjnego aortomia jest naprawiana bez zwężenia światła.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Myszy są znieczulane wziewnym izofluranem 2,0-3,0 ml / l.
  2. Brzuch jest golony i szorowany alkoholem i betadyną.
  3. Mysz kładzie się na wznak na polu operacyjnym.
  4. Sterylne rękawiczki są noszone przez chirurga, a używane narzędzia zostały wysterylizowane gorącym sterylizatorem kulkowym.
  5. Wykonuje się długie nacięcie brzucha w linii środkowej. Zawartość brzuszna jest wysuwana na zewnątrz jamy brzusznej za pomocą sterylnej gazy w celu odsłonięcia aorty brzusznej.
  6. Aorta brzuszna jest izolowana od poziomu lewej żyły nerkowej do rozwidlenia.
  7. Gałęzie aorty brzusznej są odsłonięte i podwiązane szwami 10-0. Wszystkie gałęzie aorty w promieniu 1....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wcześniejsze badania wykazały znaczne różnice w rozwoju AAA między partiami z różnych komercyjnych preparatów elastazy3. W związku z tym tak ważne jest monitorowanie partii produkcyjnych, a także posiadanie odpowiednich grup kontrolnych w celu udokumentowania zdolności preparatu do indukowania AAA.

Co ciekawe, podatność na rozwój AAA w tym modelu jest zależna od użytego szczepu myszy3. Mysz używana w bieżącym filmie należy do szczepu C57Bl/6, który konsekwentnie rozwija .......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Acknowledgements

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ta praca była wspierana przez grant SCCOR "AAA Disease: Mechanisms, Stratification, and Treatment" (P50 HL083800-03) z National Institutes of Health

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Odczynnik do elastazy trzustkowej świńskiej typu ISigma-AldrichE1250
rurka polietylenowa (PE-10)BD Biosciences427400
CHANGE-A-TIPBovie Medical Corporation18010-00 (FST)do kauteryzacji
LEICA MZ6Leica Microsystems
stereoskop LEICA Kamera USBLeica Microsystems
Image Pro Express w wersji 6.0Media Cybernetics Inc.oprogramowanie
nóż DFC290HD

References

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Anidjar, S., Salzmann, J. L., Gentric, D. Elastase-induced experimental aneurysms in rats. Circulation. 82 (3), 973-973 (1990).
  2. Pyo, R., Lee, J. K., Shipley, J. M. Targeted gene disruption of matrix metalloproteinase-9 (gelatinase ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Abdominal Aortic AneurysmElastase InfusionMouse ModelSurgical ProcedureAortic PerfusionPorcine Pancreatic ElastaseSterile TechniqueAortotomy RepairAneurysm FormationPostoperative Care

Related Articles