Opisujemy nową metodę chirurgiczną kaniulacji „pętli jelitowych” w jelicie krętym owiec. Po powrocie zwierząt do zdrowia po operacji oraz całkowitym usunięciu z organizmu antybiotyków i leków przeciwbólowych, za pomocą kaniul można wprowadzać wiele dawek terapeutycznych bezpośrednio do pętli.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Kaniulacja pętli jelitowych u przeżuwaczy
W tym artykule
Podsumowanie
Streszczenie
Jelitami jest złożona struktura, która uczestniczy nie tylko w wchłanianiu składników odżywczych, ale pełni również rolę bariery między organizmem a światem zewnętrznym. W związku z tym jelita odgrywają kluczową rolę w nadzorze immunologicznym i ochronie przed patogenami jelitowymi. W badaniach nad fizjologią i immunologią jelit powszechnie stosuje się „pętle jelitowe” jako model eksperymentalny. Większość tych modeli pętlowych opiera się na procedurach chirurgicznych bez rekonwalescencji, służących do badania krótkotrwałych (<24 h) zmian w jelitach (1-3). Wcześniej opracowaliśmy model pętli jelitowej z rekonwalescencją, aby specyficznie mierzyć długoterminowe (<6 mies.) zmiany immunologiczne w jelitach owiec po ekspozycji na szczepionki, adiuwanty i wirusy (4). Procedura ta pozwoliła na zlokalizowanie zabiegów w konkretnej „pętli”, co umożliwiło pobranie próbek z tego obszaru jelit. Znaczącą wadą tej metody jest jednorazowa możliwość podania preparatów (tj. w czasie operacji). Ponadto próbki zarówno śluzówki jelita, jak i zawartości światła jelita można pobrać jedynie po zakończeniu projektu. Innymi istotnymi ograniczeniami powyższego modelu są manipulacje chirurgiczne oraz niezbędne środki pooperacyjne (np. podawanie antybiotyków i leków przeciwbólowych), które mogą bezpośrednio wpływać na sam zabieg i/lub zmieniać funkcje immunologiczne, co prowadzi do zafałszowania wyników. W związku z tym zmodyfikowaliśmy nasz model pętli jelitowej poprzez wprowadzenie do pętli cewników długoterminowych. Owce w pełni regenerują się po zabiegu i nie wykazują reakcji na zewnętrznie wyprowadzone cewniki. Co istotne, zastosowanie cewników w pętlach pozwala na wprowadzanie wielu preparatów w dłuższych odstępach czasu, po rekonwalescencji pooperacyjnej oraz po wyeliminowaniu leków podanych podczas operacji i w okresie pooperacyjnym.
Protokół
Procedura eksperymentalna:
- Wszystkie instrumenty są autoklawowane; materiały niepodlegające autoklawowaniu są sterylizowane w roztworze do sterylizacji na zimno Germex przez minimum 10 min.
- Owce otrzymują premedykację z acepromazyny (0,05 mg/kg), glikopirrolanu (0,005 mg/kg) i tartrę butorfanolu (0,2 mg/kg) w wtrysku domięśniowym (IM), po czym pozostawia się je na 15-20 min.
- Szyję ogala się i poddaje chirurgicznemu oczyszczaniu skóry. Po uwidocznieniu żyły szyjnej w miejsce naczynia wstrzykuje się podskórnie (SC) 0,1 ml lidokainy, następnie wprowadza się cewnik do żyły i mocuje go do skóry za pomocą cementu do tagów identyfikacyjnych zwierząt hodowlanych oraz 2-calowej taśmy szpitalnej. W trakcie operacji zwierzęta otrzymują 148 ml/kg/godz Plasmalyte 148 (podawany grawitacyjnie).
- Diazepam (0,2 mg/kg) podaje się dożylnie (IV), a znieczulenie wprowadza za pomocą tiopentalu sodu (10 mg/kg). Na fałdy głosowe nakłada się spray endotrachealny z lidokainą, owcę intubuje i utrzymuje w znieczuleniu izofluranem (1,5-2,5% w 100% O2 przy przepływie 4 L/min) przez cały czas trwania operacji.
- Zwierzę ułożone jest na plecach na ogrzewanej macie, aby pomóc utrzymać temperaturę ciała podczas operacji. Do rumenu wprowadza się zgłębnik żołądkowy, aby zapobiec nadmiernemu wzdęciu.
- Brzuch w części brzusznej jest ogolony, a skórę przygotowuje się do operacji za pomocą trzech zabiegów oczyszczania chirurgicznego preparatem Prepodyne. Następnie brzuch zostaje obłożony sterylnymi obłożeniami, zapewniając odpowiednią ekspozycję pola operacyjnego (od pępka do tylnej części brzucha).
- Za pomocą elektroskalpela wykonuje się cięcie pośrodkowe o długości 15-20 cm, ku tyłowi od pępka, i lokalizuje się fałd krzyżowo-jelitowy w prawym dolnym kwadrancie brzucha. Następnie wyrowadzono końcowy odcinek jelita krętego i ślepkę. W trakcie procedury minimalizuje się manipulacje jelitem i dba o to, aby wyewoluowane jelito pozostawało wilgotne dzięki ciepłemu (37-39°C) sterylnemu roztworowi soli fizjologicznej z buforem fosforanowym (PBS; pH 7,2).
- Odmierza się odcinek jelita krętego o długości 85 cm (tzw. „odcinek jelitowy”), a następnie zaciska go kleszczykami Doyena (zaciski jelitowe) oraz dużymi kleszczykami Kelly'ego na obu końcach odcinka. W obrębie odcinka jelitowego zostaną utworzone „pętle” i „przestrzenie między pętlami”. Kleszczyki Doyena umieszcza się po stronie jelita krętego, która ma zostać połączona (anastomoza), a kleszczyki Kelly'ego po stronie odcinka jelitowego.
- Jelito kręte przecina się pomiędzy każdym kleszczykiem Doyena a Kellym, a odcinek jelitowy przeznaczony na pętle delikatnie płucze się dwukrotnie 60 ml ciepłego PBS w celu usunięcia treści pokarmowej.
- Koktajl antybiotyków o szerokim spektrum działania (200 mg enrofloksacyny i 250 mg metronidazolu w ciepłym PBS, całkowita objętość 60 ml) rozprowadza się w całym odcinku jelitowym i pozostawia na 30 min.
- Proksymalny i dystalny koniec przeciętego jelita krętego (z wyłączeniem odcinka jelitowego) łączy się, aby utworzyć ciągły i funkcjonalny trakt jelitowy. Najpierw jelito kręte ustawia się za pomocą dwóch szwów stabilizujących, umieszczonych odpowiednio na krawędziach krezkowej i przeciwkrezkowej jelita. Następnie wykonuje się prosty szew ciągły (2-0 Vicryl) po obu stronach jelita, aby je połączyć.
- W miejscu anastomozy wstrzykuje się ciepły PBS (3-5 ml), aby sprawdzić szczelność i trwałość szwów. Następnie końcówkę kleszczyków Kelly'ego dociska się do powierzchni surowiczej jelita, blisko miejsca anastomozy, i przesuwa do wewnątrz w miejscu anastomozy, aby upewnić się, że światło jelita jest szerokie i drożne.
- Koktajl antybiotykowy usuwa się z odcinka jelitowego. Każdy koniec odcinka zamyka się prostym szwem ciągłym (nici wchłanialne; 2-0 Vicryl), a następnie szwem wywijającym z użyciem nici 2-0 Vicryl.
- 85-centymetrowy odcinek jelitowy dzieli się na trzy 15-centymetrowe „pętle”, dwie 15-centymetrowe „przestrzenie między pętlami” oraz dwa 5-centymetrowe przedziały z tępym końcem na końcach odcinka jelitowego (Rysunek 1). Pętle tworzy się poprzez nałożenie ligatury wokół jelita przy użyciu jedwabiu 2-0. Należy zauważyć, że podczas tej procedury nie podwiązuje się głównych naczyń krezkowych, ponieważ są one niezbędne do ukrwienia jelita i utrzymania jego żywotności. Ligatury pozostawia się długie, ponieważ będą one służyć do mocowania cewników.
- Cewniki (tj. rurki silastykowe) identyfikuje się pojedynczo za pomocą niezmywalnego markera. Silikonową kulkę (o średnicy 5 mm) otaczającą cewnik umieszcza się 4-5 cm od końca cewnika, aby zapobiec jego wysunięciu się z jelita (Rysunek 1). Po sterylizacji w autoklawie do końca cewnika (3-5 mm) aseptycznie wprowadza się maść nieantybiotykową (Orbeseal); zapewnia to drożność cewnika (tj. zapobiega zapchaniu go przez złuszczoną śluzówkę wewnątrz pętli).
- W górnej części każdej z trzech pętli wykonuje się niewielkie nacięcie. Każdy otwór powiększa się wprowadzaczem do cewnika (tj. „dylatatorem naczyń”), a następnie wprowadza 6-8 centymetrowy odcinek cewnika w kierunku ogonowym do pętli, aż silikonowa kulka znajdzie się w świetle jelita (Rysunek 1).
- Ścianę jelita mocuje się wokół cewnika szwem typu „workowy” (2-0 Vicryl). Cewnik dodatkowo przymocowuje się do jelita, wiążąc go jedwabną ligaturą, która wyznaczała górny koniec pętli.
- Do każdej pętli i przestrzeni wstrzykuje się ampicylinę (5 ml; 100 mg/ml w ciepłym PBS), a następnie jelito umieszcza się z powrotem w jamie brzusznej. Do jamy otrzewnowej, przez nacięcie brzuszne, wstrzykuje się cefazolinę (8 ml; 100 mg/ml w ciepłym PBS).
- W ścianie brzusznej, obok nacięcia pośrodkowego, wykonuje się pojedyncze małe nacięcie punktowe, przez które wyrowadza się cewniki.
- Położenie i napięcie cewników w jamie otrzewnowej zostaje skorygowane. Mięśnie brzucha zszywa się prostym szwem przerywanym (nici wchłanialne; Catgut #3), a skórę szwem materacowym poziomym przerywanym (nici niewchłanialne; Supramid #1).
- Zakrzywioną, pustą rurkę ze stali nierdzewnej (średnica wewnętrzna 7 mm; średnica zewnętrzna 10 mm; długość 65 cm) wprowadza się pod skórę w pobliżu nacięcia brzusznego, prowadząc ją podskórnym tunelem do miejsca wyjścia znajdującego się tuż za szyją, między łopatkami. Cewniki wprowadza się do rurki i przesuwa do przodu na co najmniej 50% jej długości. Następnie rurkę z cewnikami wyciąga się ze skóry w miejscu wyjścia, eksponując cewniki.
- Napięcie cewników koryguje się w miejscu nacięcia punktowego, a skórę zamyka nicią Supramid #1.
- Pojedyncze cewniki są identyfikowane i umieszczane w bandażowej „kieszeni”, która jest przyszyta do skóry nicią Supramid #1. Kieszeń chroni cewniki przed późniejszymi uszkodzeniami.
- Po operacji owcom wstrzykuje się domięśniowo (IM) fluniksyn (raz na dobę, s.i.d.) w dawce początkowej 2,2 mg/kg, a następnie w dawce podtrzymującej 1,1 mg/kg s.i.d. przez 3 dni. Owce otrzymują również wstrzyknięcia IM Hemostamu (3 ml) oraz enrofloksacyny (2,5 mg/kg) s.i.d. odpowiednio przez 3 i 5 dni. Zwierzęta otrzymują dożylnie Plasmalyte 148 z 5% roztworem dekstrozy, podawanym w sposób ciągły za pomocą pompy perystaltycznej, aby zapewnić stały przepływ (145 ml/godz) niezależnie od pozycji ciała. Pozwala się im pić ad libitum, jednak podawanie paszy jest ograniczone do czasu przywrócenia normalnych funkcji rumenu i jelit. Ściśle monitoruje się (dwukrotnie na dobę, b.i.d.) pobieranie pokarmu, spożycie wody, temperaturę ciała, oddawanie kału i moczu, odgłosy jelitowe, dyskomfort brzuszny, zachowanie oraz stężenie glukozy we krwi; w razie potrzeby koryguje się stężenie glukozy w płynach dożylnych, aby utrzymać poziom glukozy we krwi w normie. Przed operacją, bezpośrednio po niej oraz co drugi dzień w dalszym czasie monitoruje się biochemię krwi i hematologię (tj. albuminy, fosfatazę alkaliczną, aminotransferazę alaninową, amylazę, wapń, cholesterol, kreatyninę, glukozę, fosfor nieorganiczny, bilirubinę całkowitą, białko całkowite, mocznik, globuliny, sód, potas, chlor, ciśnienie parcjalne tlenu, pH, ciśnienie parcjalne dwutlenku węgla, wodorowęglany i całkowitą zawartość dwutlenku węgla, liczbę krwinek czerwonych i białych, hematokryt, hemoglobinę, różnicowe liczenie białych krwinek oraz liczbę płytek krwi). Po przywróceniu normalnych funkcji jelit kończy się dożylną terapię płynową i przenosi zwierzęta na wybiegi (tj. 5-7 dni po operacji). Zwierzęta utrzymuje się w indywidualnych boksach (w zasięgu wzroku innych zwierząt), co redukuje stres i zmniejsza ryzyko uszkodzenia kieszonek z cewnikami (np. przez pogryzienie przez współlokatora).
- W celu wstrzyknięcia leków do poszczególnych pętli, 5 ml preparatu wstrzykuje się do cewnika za pomocą sterylnej strzykawki z igłą tępą o rozmiarze 18G. Aby zapewnić wprowadzenie całego preparatu do pętli, do cewnika wstrzykuje się następnie 3 ml PBS.
Kluczowe punkty:
Procedury o kluczowym znaczeniu dla sukcesu tego zabiegu chirurgicznego obejmują: (1) zweryfikowanie, czy jelito nie jest skręcone przed wykonaniem anastomozy; (2) zapewnienie szczelności i drożności anastomozy; (3) odpowiednie przymocowanie cewnika do ściany pętli za pomocą ligatury wyznaczającej koniec kranialny pętli, przy jednoczesnym upewnieniu się, że mocowanie nie wpływa na drożność cewnika; (4) zminimalizowanie manipulacji jelitami oraz zapewnienie utrzymania wilgotności wyewagowanych fragmentów jelita; (5) zapewnienie odpowiedniego naciągu cewnika; (6) upewnienie się, że integralność cewnika nie zostanie naruszona podczas szycia mięśni i skóry; (7) zapobieganie przeżeraniu się owiec po operacji (tj. w okresie pooperacyjnego porażenia jelit), co może spowodować ubicie treści w wymieniu i upośledzenie funkcji żwacza; oraz (8) zapewnienie zwierzętom wystarczającej dożylnej płynoterapii przez pierwsze 3-5 dni po zabiegu, uważne monitorowanie stężenia glukozy we krwi oraz dostosowanie stężenia glukozy w płynach dożylnych w razie potrzeby, aby zapobiec hipoglikemii.
Rycina 1. Schematyczne przedstawienie kaniulowanych pętli jelita krętego. Zwróć uwagę na trzy kaniulowane „pętle” o długości 15 cm, dwie niekaniulowane „przestrzenie” o długości 15 cm utworzone między pętlami oraz dwa końcowe segmenty o długości 5 cm, wszystkie utworzone w obrębie „segmentu jelitowego” jelita krętego owcy o długości 85 cm.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dyskusja
W niniejszej procedurze udało nam się pomyślnie wprowadzić cewniki do pętli jelitowych utworzonych w jelicie krętym owiec. Dzięki rygorystycznej opiece pooperacyjnej zwierzęta szybko powróciły do zdrowia i wznowiły normalną aktywność 5-7 dni po zabiegu. Ustaliliśmy, że wprowadzenie cewników do pętli nie wpływa na funkcję błony śluzowej ani funkcję immunologiczną jelit (dane nie pokazane), a zwierzęta mogą żyć przez co najmniej 8 wk po operacji. Procedura ta pozwala nam na wprowadzanie wielu substancji leczniczych do oddz...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Oświadczenia
Wszystkie procedury przeprowadzone na zwierzętach doświadczalnych zostały zatwierdzone przez Instytucjonalny Komitet Opieki nad Zwierzętami (Protokół wykorzystania zwierząt nr 0609) i były zgodne z wytycznymi określonymi przez Kanadyjską Radę Opieki nad Zwierzętami.
Nie mamy nic do ujawnienia.
Podziękowania
Badania nie mogłyby zostać ukończone bez oddania i wysiłków wielu osób z Agriculture and Agri-Food Canada Research Centre w Lethbridge, Alberta, Kanada. W związku z tym dziękujemy: Tarze Shelton za opiekę przed- i pooperacyjną nad zwierzętami, przygotowanie chirurgiczne, anestezjologię, analizę próbek oraz pomoc w obrazowaniu wideo; Randy'emu Wilde'owi i Esteli Costy za opiekę przed- i pooperacyjną; Jenny Gusse za analizę próbek; Byronowi Lee za obraz trokara; oraz Brianowi Eglandowi za hodowlę owiec. Dziękujemy również Brentowi Selingerowi (Department of Biological Sciences, University of Lethbridge) za udostępnienie sprzętu wideo i udzielenie porad, a także za inną pomoc (tj. produkcję wykonawczą), oraz Curriculum Re-Development Centre, University of Lethbridge za wiedzę z zakresu wideografii. Badanie to było częściowo finansowane z grantów przyznanych przez Advanced Foods and Materials Network (G.D.I.), Canada-Alberta Beef Industry Development Fund (G.D.I.) oraz Agriculture and Agri-Food Canada (G.D.I. i J.P.K.).
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Rękawiczki chirurgiczne | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 103091 | |
| Maseczka chirurgiczna | Western Drug Distribution Center, Ltd. | MAX53013 | |
| Fartuch chirurgiczny | The Veterinary Medication Distribution Center Inc., St. Hyacinthe, QE | 3365 | |
| fartuch położniczy | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 900062 | |
| Czepek chirurgiczny | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 903271 | |
| szczoteczka do szorowania EZ Scrub | Western Drug Distribution Center, Ltd. | BDC377479 | |
| Aparat do znieczulenia | Boyle | - | |
| Sodasorb | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 108638 | |
| Laryngoskop | Western Drug Distribution Center, Ltd. | - | |
| Widełko laryngoskopowe (widełko Millera nr 4) | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 902667 | |
| Rurka endotrachealna (7,0–8,5 mm) | Western Drug Distribution Center, Ltd. | - | |
| Spray endotrachealny z lidokainą | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 103364 | |
| Acepromazyna | Western Drug Distribution Center, Ltd. | AUS01020 | |
| Glikopirrolan | Western Drug Distribution Center, Ltd. | SAB2880 | |
| Kwas winianowy butorfanolu | Western Drug Distribution Center, Ltd. | AYE304541 | |
| Diazepam | Western Drug Distribution Center, Ltd. | sab790 | |
| Tiopental sodowy | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 103508 | |
| Chlorowodorek epinefryny | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 103856 | |
| Doksapram | Apteka Strathcona | - | |
| Izofluran | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 100339 | |
| Hemostam | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 103857 | |
| Fluniksyn | Western Drug Distribution Center, Ltd. | Poniżej znajduje się tłumaczenie tekstu źródłowego: **Metoda izolacji i oczyszczania białka z kultur komórkowych** **Abstrakt** Izolacja i oczyszczanie białek z kultur komórkowych są kluczowymi etapami w badaniach nad biologią molekularną, biochemią i farmakologią, umożliwiając szczegółową analizę struktury, funkcji oraz oddziaływań białek. Proces ten obejmuje szereg etapów, począwszy od lizy komórek w celu uwolnienia białek wewnątrzkomórkowych, poprzez usuwanie zanieczyszczeń, aż po zastosowanie specyficznych metod chromatograficznych w celu uzyskania białka o wysokiej czystości. W niniejszym protokole przedstawiono systematyczne podejście do izolacji białka, kładąc nacisk na optymalizację warunków lizy, zastosowanie inhibitorów proteaz w celu zapobiegania degradacji oraz wykorzystanie chromatografii powinowactwa do precyzyjnego oczyszczania docelowego białka. Szczegółowy opis obejmuje przygotowanie buforów, procedurę homogenizacji, centryfugację oraz etapy elucji i weryfikacji czystości białka za pomocą elektroforezy SDS-PAGE. **Słowa kluczowe** izolacja białka, oczyszczanie białek, kultury komórkowe, liza komórek, chromatografia powinowactwa, SDS-PAGE, bufory lityczne, inhibitor proteaz | |
| Enrofloksacyna | Western Drug Distribution Center, Ltd. | hll0049 | |
| Metronidazol | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 101653 | |
| Ampicylina | Western Drug Distribution Center, Ltd. | NOV67185-6 | |
| Cefazolina | Western Drug Distribution Center, Ltd. | Ponieważ nie dostarczono tekstu źródłowego do przetłumaczenia, proszę o przesłanie treści, którą należy przełożyć na język polski zgodnie z wytycznymi. | |
| Elektroskalpel | Macan | MV8 | |
| Mata grzewcza | Kane | PHMD-48 | |
| Zonka żołądkowa (rurka Nalgene 5/16)" Identyfikator) | Fisher Scientific | - | |
| Igłotrzymacz | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 108338 | |
| kleszczyki Addisona-Browna | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 911075 | |
| Kleszcze do usuwania zębów szczura | The Veterinary Medication Distribution Center Inc., St. Hyacinthe, QE | 5275 | |
| kleszczyki Kelly'ego | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 901133 | |
| Kleszczyki hemostatyczne typu mosquito | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 108471 | |
| pinceta Carmalta | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 901225 | |
| Rękojeść skalpela | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 900285 | |
| Głowica skalpela nr 22 | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 900511 | |
| nożyczki Metzenbauma | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 901166 | |
| Nożyczki bardzo ostre | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 108264 | |
| Kleszczyki do ręczników | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 901213 | |
| Kleszczyki Allisa do tkanek | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 901201 | |
| Doyen’pinceta | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 904226 | |
| Miska ze stali nierdzewnej | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 903601 | |
| Trokar ze stali nierdzewnej (zakrzywiony) | Lokalny dostawca | - | |
| wprowadzak cewnika | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 11440 | |
| Ręcznik chirurgiczny | The Veterinary Medication Distribution Center Inc., St. Hyacinthe, QE | 7972 | |
| Jednorazowa obłożenie chirurgiczne | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 900035 | |
| Obłożenie sterylne | The Veterinary Medication Distribution Center Inc., St. Hyacinthe, QE | 2323 | |
| Pole operacyjne (40 x 40 cm) | The Veterinary Medication Distribution Center Inc., St. Hyacinthe, QE | 8358 | |
| Pole operacyjne (7" x 11 ¼" otwarcie | The Veterinary Medication Distribution Center Inc., St. Hyacinthe, QE | 2694 | |
| Vicryl (2-0) | Western Drug Distribution Center, Ltd. | JJMJ333H | |
| Jedwab 2-0 | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 105248 | |
| Katgut nr 3 | Western Drug Distribution Center, Ltd. | CSL547-2070 | |
| Supramid #1 | Western Drug Distribution Center, Ltd. | CSL547-3040 | |
| Igły (tnące i nietnące) | Western Drug Distribution Center, Ltd. | - | |
| przewód Silastic (0,040" ID, 0,085" OD) | Fisher Scientific | 11-189-15D | |
| maść Orbeseal | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 106344 | |
| Przezroczysty silikon (uniwersalny uszczelniacz 732) | Lokalny dostawca | - | |
| Igła z tępym zakończeniem | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 905035 | |
| Marker (trwały przemysłowy) | Lokalny dostawca | - | |
| Woreczek do cewnika (wykonany z Elastoplast 7,5 cm) | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 104094 | |
| Taśma szpitalna (2") | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 103842 | |
| Taśma szpitalna (1") | Western Drug Distribution Center, Ltd. | VLMRENF20 | |
| Gaza chirurgiczna 4x4 | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 107551 | |
| Przywieranie gazy | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 107633 | |
| Elastoplast 7,5 cm | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 104094 | |
| bandaż odrywany Elastoplast | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 104093 | |
| Strzykawka (60 ml) | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 104004 | |
| Strzykawka (10 ml) | Western Drug Distribution Center, Ltd. | Niniejsza procedura opisuje metodę analizy mowy i języka u osób z zaburzeniami neurologicznymi, ze szczególnym uwzględnieniem oceny płynności mowy, nazywania obrazków oraz rozumienia składni. Celem badania jest identyfikacja deficytów językowych, które mogą wskazywać na konkretne uszkodzenia obszarów kory mózgowej odpowiedzialnych za funkcje komunikacyjne. ### Materiały i odczynniki **Sprzęt i oprogramowanie:** * Komputer z oprogramowaniem do rejestracji dźwięku (np. Audacity) * Mikrofon wysokiej jakości * Zestaw znormalizowanych obrazków do zadań nazywania (np. z zestawu Boston Naming Test) * Stopery lub program do pomiaru czasu reakcji * Arkusze ocen i protokoły zapisywania odpowiedzi ### Procedura **Przygotowanie pacjenta** 1. Umieść pacjenta w cichym pomieszczeniu, aby zminimalizować zakłócenia zewnętrzne. 2. Wyjaśnij cel badania i instrukcje do każdego z zadań, upewniając się, że pacjent rozumie wymagania. 3. Poinformuj pacjenta o rejestracji audio w celu późniejszej analizy. **Ocena płynności mowy** 1. Poproś pacjenta o wymienienie jak największej liczby słów z określonej kategorii semantycznej (np. „nazwij wszystkie zwierzęta, jakie przyjdą Ci do głowy”) w ciągu 60 sekund. 2. Następnie przeprowadź test płynności fonematycznej, prosząc pacjenta o wymienienie słów zaczynających się na konkretną literę (np. literę „S”) w tym samym przedziale czasowym. 3. Zanotuj całkowitą liczbę poprawnych odpowiedzi, pomijając powtórzenia i słowa niepasujące do kategorii. **Zadanie nazywania obrazków** 1. Prezentuj pacjentowi pojedyncze obrazki przedstawiające przedmioty codziennego użytku lub pojęcia o różnym stopniu trudności. 2. Poproś pacjenta o podanie nazwy każdego przedstawionego obiektu. 3. Zarejestruj odpowiedzi, klasyfikując je jako poprawne, błędne (np. parafazje semantyczne lub fonematyczne) lub brak odpowiedzi. 4. W przypadku trudności z nazywaniem, zastosuj podpowiedzi (np. fonematyczną – podanie pierwszej litery słowa) i odnotuj ich skuteczność. **Ocena rozumienia składni** 1. Przedstaw pacjentowi pary zdań: jedno jednoznaczne i jedno niejednoznaczne składniowo (np. zdania z dopełnieniami). 2. Poproś pacjenta o wskazanie na obrazku czynności opisanej w zdaniu. 3. Analizuj poprawność wyboru, zwracając uwagę na to, czy pacjent prawidłowo interpretuje zależności gramatyczne w zdaniach bardziej złożonych. ### Analiza danych 1. Oblicz wskaźniki płynności mowy, porównując wyniki pacjenta z normami dla grupy wiekowej i poziomu wykształcenia. 2. Przeanalizuj błędy w nazywaniu, aby odróżnić afazję nominalną od ogólnych zaburzeń poznawczych. 3. Oceń stopień deficytów w rozumieniu składni, korelując wyniki z obrazem neurologicznym pacjenta. 4. Zintegruj wszystkie dane w celu sformułowania diagnozy funkcjonalnej dotyczącej profilu językowego pacjenta. | |
| Igła 25G | Western Drug Distribution Center, Ltd. | BDC305122 | |
| Igła 20G | Western Drug Distribution Center, Ltd. | BDC305175 | |
| igła 18G | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 903353 | |
| Kaniula do żyły obwodowej Intracath (16G 8") | Western Drug Distribution Center, Ltd. | Nie podano tekstu źródłowego do tłumaczenia. Proszę o dostarczenie treści, którą należy przetłumaczyć na język polski. | |
| zestaw do infuzji dożylnej (10 kropli/ml) | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 101797 | |
| 0,9% roztwór NaCl | Western Drug Distribution Center, Ltd. | BAXJB1322P | |
| roztwór Plasmalyte 148 | Western Drug Distribution Center, Ltd. | BAXJB2534 | |
| Dekstroza | Western Drug Distribution Center, Ltd. | MCT60190 | |
| Pompa perystaltyczna | Cole-Parmer | 7524-10 | |
| Cement do znaczników identyfikacyjnych dla zwierząt hodowlanych | Lokalny dostawca | - | |
| roztwór Germex | Western Drug Distribution Center, Ltd. | mtc60270 | |
| Alkohol izopropylowy | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 104590 | |
| środek oczyszczający Stanhexidine | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 109248 | |
| Roztwór Prepodyne | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 105710 | |
| Mycie preparatem Prepodyne | Western Drug Distribution Center, Ltd. | 105711 |
Bibliografia
- Vidal, J. E., McClane, B. A., Saputo, J., Parker, J., Uzal, F. A. Effects of Clostridium perfringens beta-toxin on the rabbit small intestine and colon. Infect. Immun. 76, 4396-4404 (2008).
- Santos, R. L., Zhang, S., Tsolis, R. M., Baumler, A. J., Adams, L. G. Morphologic and molecular characterization of Salmonella typhimurium infection in neonatal calves. Vet. Pathol. 39, 200-215 (2002).
- Uzzau, S., Leori, G. S., Petruzzi, V., Watson, P. R., Schianchi, G., Bacciu, D., Mazzarello, V., Wallis, T. S., Rubino, S. Salmonella enterica serovar-host specificity does not correlate with the magnitude of intestinal invasion in sheep. Infect. Immun. 69, 3092-3099 (2001).
- Gerdts, V., Uwiera, R. R. E., Mutwiri, G. K., Wilson, D. J., Bowersock, T., Kindane, A., Babiuk, L. A., Griebel, P. J. Multiple intestinal 'loops' provide an in vivo model to analyse multiple mucosal immune responses. J. Immunol. Methods. 256, 19-33 (2001).
- Greibel, P. J., Davis, W. C., Reynolds, J. D. An analysis of the growth and differentiation of b cells isolated from follicles from ileal Peyer's patch of sheep. Immunology. 75, 601-607 (1992).
- Motyka, G., Greibel, P. J., Reynolds, J. D. Agents that activate protein kinase C resue sheep ileal Peyer's patch B cells from apoptosis. Eur. J. Immunol. 23, 1314-1321 (1993).
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Przedruki i uprawnienia
