Sekcja mózgu danio pręgowanego: technika neurobiologii ryb

Streszczenie

Źródło: Lopez-Ramirez M. A. et al., Izolacja i hodowla neurosfer mózgowych dorosłych danio pręgowanego. J. Vis. Exp. (2016).

Ten film opisuje technikę mikrodysekcji mózgu dorosłego danio pręgowanego. Metoda ta pomaga w uzyskaniu neuorosfer pochodzących z całego mózgu, które można dalej badać.

Protokół

1. Sekcja mózgu dorosłego danio pręgowanego

1. Przygotować łoże preparacyjne, wypełniając szalkę Petriego o wymiarach 100 mm x 15 mm żelowymi okładami z lodu. Następnie przykryć pokrywką szalkę Petriego i inkubować w temperaturze -20 °C, aż żel zamarznie. Na pokrywie umieść kwadrat czystej bibuły filtracyjnej i owiń zarówno bibułę filtracyjną, jak i szalkę Petriego folią z tworzywa sztucznego.
2. Przed każdym użyciem wyczyść i wysterylizuj wszystkie narzędzia do mikrodysekcji za pomocą 70% etanolu lub ciepła. Umieść wszystkie wysterylizowane narzędzia preparacyjne w pobliżu mikroskopu preparacyjnego i tuż przed eutanazją umieść łóżko sekcyjne pod mikro....

Wyniki

Rycina 1: Różnicowanie neurosfer pochodzących z mózgu danio pręgowanego.(A-C, E) Obrazy z kontrastem fazowym całych neurosfer pochodzących z mózgu hodowanych w pożywce różnicowania Z przez 1 (A, DiVd1), 3 (B, DiVd3) i 4 (C i D, DiVd4) dni. (E) Widok grzbietowy całego mózgu 12-miesięczne.......

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
DMEM/F12 1x	Technologie życiowe	Numer katalogowy: 11330-032
Penicylina-streptomycyna	Technologie życiowe	Rozdział 15140-122
Trikaina MS-222	Sigma	Ciągnik hamulcowy A5040	roztwór podstawowy 4 mg/ml